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DB32江蘇省地方標準DB32/T1599—2010油菜菌核病菌對苯并咪唑類殺菌劑抗藥性檢測技術規(guī)程TechnicalSpecificationforDetectingResistanceofSclerotiniasclerotiorumtoBenzimidazoleFungicide2010-06-23發(fā)布2010-08-23實施江蘇省質量技術監(jiān)督局發(fā)布1NY/T1667.1～1667.8-2008農藥登記所檢測菌株對苯并咪唑類殺菌劑的敏感性參數與其野生敏感菌株對同一殺有效中濃度MedianEffectiveConcen培養(yǎng)皿(Φ90mm），三角瓶，高壓滅菌鍋，超凈工作臺，高溫恒溫箱（50℃~300℃之間），恒溫培養(yǎng)箱（使溫度保持在15℃~35℃之間）、顯微鏡、高壓滅菌鍋、鋁鍋、量筒、試管、移液管、“L”24.2.1馬鈴薯蔗糖瓊脂培養(yǎng)基(PotatoSucroseAga15～20g，再煮沸至瓊脂完全溶解，再經過雙層紗布過濾后用清水定溶至1000m4.2.2水瓊脂培養(yǎng)基(Water50mg/L，先用滅菌水分別將氯霉素和鏈霉素溶解成5000mg/L溶液，將PSA培養(yǎng)基加熱溶解后，在100mL培養(yǎng)基中加入多菌靈母液后，待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時，加入氯霉素和鏈霉素母液各1mL，充分搖勻在油菜成熟期，按不同檢測目的，在用藥田塊隨機采集油菜病株上的菌核，每株油菜病株重采集1個菌核，病株間距30m以上，每塊田采30～40個菌核，每個地點采集10～20塊油菜田，每塊田集中器制取4mm直徑的菌絲塊，分別移至含多菌靈濃度藥劑抑菌率（%）=對照菌落直徑-藥劑處理菌落直徑）/對照菌落直用上面方程計算出各菌株菌絲生長抑制50%時的多菌靈濃度，朝上，每菌株重復3皿。在22℃下培養(yǎng)2d，觀察在各濃度平板上是否有新的菌絲體長出。計算藥抑制菌絲生長的最低抑制濃度（MIC值）。經過多年研究，多菌靈完全抑制油菜菌核病菌菌絲生長的最低抗菌株從田間

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