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課堂互動探究案4動物細(xì)胞工程考點一動物細(xì)胞培育和細(xì)胞核移植任務(wù)1補充動物細(xì)胞培育過程示意圖,并填空(1)與植物細(xì)胞培育相比,動物細(xì)胞培育過程所用的培育基一般是__________培育基,并加入__________。(2)動物細(xì)胞培育過程中兩次用到胰蛋白酶,第一次的作用是將剪碎的組織分散成________;其次次是將貼壁生長的細(xì)胞從瓶壁上________下來,其目的是避開動物細(xì)胞的________現(xiàn)象。(3)動物細(xì)胞培育時加入CO2的主要作用是維持培育液的____;O2的作用是促進細(xì)胞________。任務(wù)2比較動物細(xì)胞培育與動物體細(xì)胞核移植的不同點動物細(xì)胞培育動物體細(xì)胞核移植原理________________________過程結(jié)果獲得________獲得________應(yīng)用①生產(chǎn)生物制品②用于基因工程③檢測有毒物質(zhì)①加速家畜遺傳改良進程,促進良種繁育②愛護瀕危物種③生產(chǎn)醫(yī)用蛋白④供應(yīng)克隆器官、組織等任務(wù)3細(xì)胞核移植技術(shù)(1)理清克隆動物培育流程(2)細(xì)胞核移植技術(shù)中的三個留意點①動物細(xì)胞核移植技術(shù),體現(xiàn)了動物細(xì)胞核的全能性而非細(xì)胞的全能性。②克隆屬于無性繁殖,產(chǎn)生新個體的性別、絕大多數(shù)性狀與供核親本一樣。③核移植技術(shù)獲得的動物與供核動物性狀不完全相同的緣由:a.克隆動物線粒體中的DNA來自去核卵母細(xì)胞;b.性狀受環(huán)境的影響;c.在個體發(fā)育過程中有可能發(fā)生基因突變。1.細(xì)胞工程的兩個總結(jié)(1)植物組織培育和動物細(xì)胞培育過程都存在細(xì)胞的培育過程,但植物細(xì)胞可以先分裂再分化,而動物細(xì)胞不分化只分裂。(2)克隆動物的起點是經(jīng)過核移植后形成的重組細(xì)胞,其遺傳物質(zhì)主要來自供體,因此形成的個體性狀主要同供體,但也有部分性狀同受體。2.動物細(xì)胞培育和核移植時留意的五個問題(1)在分散細(xì)胞時,需用胰蛋白酶分散細(xì)胞,不能用胃蛋白酶,因為胃蛋白酶作用的相宜pH約為1.8,胰蛋白酶作用的相宜pH為7.2~7.8,而多數(shù)動物細(xì)胞培育的相宜pH為7.2~7.4。(2)取供體動物的體細(xì)胞培育,一般選用10代以內(nèi)的細(xì)胞,因為10代以內(nèi)的細(xì)胞一般能保持正常的二倍體核型,保證了供體細(xì)胞正常的遺傳基礎(chǔ)。(3)克隆動物是由重組的細(xì)胞經(jīng)培育而來的,該重組細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)基因來源于受體細(xì)胞,細(xì)胞核基因來源于供應(yīng)細(xì)胞核的親本,其遺傳物質(zhì)來自兩個親本。(4)克隆動物絕大部分性狀與供體動物相同,少數(shù)性狀與供應(yīng)去核卵母細(xì)胞的動物相同,與代孕動物的性狀無遺傳關(guān)系。(5)從生殖方式的角度看,動物體細(xì)胞核移植技術(shù)(克隆)屬無性生殖,重組細(xì)胞相當(dāng)于受精卵,須要動物細(xì)胞培育和胚胎工程技術(shù)的支持??枷蛞粍游锛?xì)胞培育技術(shù)的考查1.試驗小鼠皮膚細(xì)胞培育(非克隆培育)的基本過程如圖所示。下列敘述錯誤的是()A.甲過程須要對試驗小鼠進行消毒B.乙過程對皮膚組織可用胰蛋白酶處理C.丙過程得到的細(xì)胞大多具有異倍體核型D.丁過程得到的細(xì)胞具有異質(zhì)性考向二體細(xì)胞克隆技術(shù)及應(yīng)用2.有關(guān)“治療性克隆”的說法不正確的是()A.可解決臨床上供體器官不足和器官移植后免疫排斥問題B.其核心技術(shù)是胚胎干細(xì)胞培育技術(shù)C.胚胎干細(xì)胞可以克隆出不同組織細(xì)胞的根本緣由是基因的選擇性表達D.中國政府既反對生殖性克隆人,也反對治療性克隆3.[經(jīng)典高考]下圖表示通過核移植等技術(shù)獲得某種克隆哺乳動物(二倍體)的流程?;卮鹣铝袉栴}:(1)圖中A表示正常細(xì)胞核,染色體數(shù)為2n,則其性染色體的組成可為______________。過程①表示去除細(xì)胞核,該過程一般要在卵母細(xì)胞培育至適當(dāng)時期再進行,去核時常采納________________的方法。②代表的過程是______________。(2)經(jīng)過多次傳代后,供體細(xì)胞中__________的穩(wěn)定性會降低。因此,選材時必需關(guān)注傳代次數(shù)。(3)若獲得的克隆動物與供體動物性狀不完全相同,從遺傳物質(zhì)的角度分析其緣由是________________________________________。(4)與克隆羊“多莉”培育勝利一樣,其他克隆動物的勝利獲得也證明白________________________________________________________________________。考點二動物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備任務(wù)1比較植物體細(xì)胞雜交與動物細(xì)胞融合的不同點植物體細(xì)胞雜交動物細(xì)胞融合原理細(xì)胞膜的流淌性、細(xì)胞的全能性____________過程相關(guān)酶____________胰蛋白酶或膠原蛋白酶融合方法物理法:電融合法、離心法等;化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)融合法、高Ca2+—高pH融合法等除物理法和化學(xué)法外,還可以用滅活病毒誘導(dǎo)法結(jié)果________________意義________________突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜交成為可能任務(wù)2據(jù)圖完成下列各題圖1中,a、b分別為骨髓瘤細(xì)胞和已免疫的B淋巴細(xì)胞,圖2為單克隆抗體制備的流程(依次已被打亂)。(1)由圖1分析:①誘導(dǎo)a、b兩種細(xì)胞融合的方法有聚乙二醇(PEG)融合法、________、電融合法等;②a、b兩種細(xì)胞可發(fā)生融合,融合的原理是______________________;③融合后形成圖中的d細(xì)胞,d細(xì)胞的特點是________________________;④由d細(xì)胞產(chǎn)生的抗體與一般血清抗體相比,具有__________________________等特點。(2)圖2B中小鼠注射的物質(zhì)是________,其目的是刺激機體發(fā)生免疫應(yīng)答,從而產(chǎn)生效應(yīng)B細(xì)胞(漿細(xì)胞)。(3)在獲得C細(xì)胞時,被篩選淘汰的細(xì)胞類型有________________________,只有融合的__________才能生長。(4)請用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的依次連接起來:________________________________________________________________________________________________________________________________________________1.單克隆抗體制備過程的關(guān)鍵分析(1)對動物免疫的緣由:B淋巴細(xì)胞要經(jīng)過免疫過程,即接觸抗原,增殖分化為有特異性免疫功能的B淋巴細(xì)胞。(2)雜交瘤細(xì)胞具備雙親的遺傳物質(zhì),不僅具有漿細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的實力,還具有骨髓瘤細(xì)胞在體外培育條件下大量增殖的實力,可以克服單純B淋巴細(xì)胞不能無限增殖的缺點,而大量生產(chǎn)單克隆抗體。2.比較制備單克隆抗體過程中的幾種細(xì)胞細(xì)胞特點漿細(xì)胞能產(chǎn)生單一抗體,但不能無限增殖骨髓瘤細(xì)胞能無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體雜交瘤細(xì)胞既能產(chǎn)生單一抗體,又能在體外培育條件下無限增殖3.培育雜交瘤細(xì)胞的兩次篩選考向一結(jié)合動物細(xì)胞融合學(xué)問,考查歸納與概括實力1.[2024·山東模擬]下列關(guān)于單克隆抗體制備的說法,正確的是()A.將特定抗原注射到小鼠體內(nèi),可以從小鼠血清中獲得單克隆抗體B.經(jīng)特定抗原免疫過的B淋巴細(xì)胞在體外培育時可分泌單克隆抗體C.誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后,發(fā)生融合的細(xì)胞均為雜交瘤細(xì)胞D.篩選岀雜交瘤細(xì)胞后,需利用特定抗原再次篩選分泌單克隆抗體的細(xì)胞2.如圖為雜交瘤細(xì)胞制備示意圖。骨髓瘤細(xì)胞由于缺乏次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-),在HAT篩選培育液中不能正常合成DNA,無法生長。下列敘述不正確的是()A.可用滅活的仙臺病毒誘導(dǎo)細(xì)胞融合B.兩兩融合的細(xì)胞都能在HAT培育液中生長C.雜交瘤細(xì)胞需進一步篩選才能用于生產(chǎn)D.細(xì)胞膜的流淌性是細(xì)胞融合的基礎(chǔ)考向二結(jié)合單克隆抗體的特點,考查科學(xué)思維實力3.[2024·天津模擬]細(xì)胞毒素可有效殺傷腫瘤細(xì)胞,但沒有特異性,在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時還會對健康細(xì)胞造成損害。如圖為特異性殺死腫瘤細(xì)胞的過程,圖中抗體是利用單克隆抗體技術(shù)制備的。下列敘述正確的是()A.單克隆抗體制備過程中須要運用TaqDNA聚合酶B.抗體與細(xì)胞毒素結(jié)合增加了細(xì)胞毒素的殺傷力C.細(xì)胞毒素具有與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的實力D.溶酶體裂開導(dǎo)致其中的水解酶釋放,加速了腫瘤細(xì)胞凋亡4.如圖是單克隆抗體制備流程的簡明示意圖。下列有關(guān)敘述,不正確的是()A.①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的細(xì)胞毒性T細(xì)胞B.②中運用聚乙二醇有利于雜交瘤細(xì)胞的形成C.③同時具有漿細(xì)胞和鼠骨髓瘤細(xì)胞的特性D.④是經(jīng)篩選培育獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群[網(wǎng)絡(luò)建構(gòu)提升][長句應(yīng)答必備]1.動物細(xì)胞融合須要誘導(dǎo)。2.動物細(xì)胞培育須要各種養(yǎng)分成分及血清。3.動物細(xì)胞融合可用于單克隆抗體的制備。4.產(chǎn)生單克隆抗體的細(xì)胞是雜交瘤細(xì)胞,它既能產(chǎn)生單克隆抗體,又能無限增殖。[等級選考研考向]1.[2024·江蘇卷]航天員葉光富和王亞平在天宮課堂上展示了培育的心肌細(xì)胞跳動的視頻。下列相關(guān)敘述正確的是()A.培育心肌細(xì)胞的器具和試劑都要先進行高壓蒸汽滅菌B.培育心肌細(xì)胞的時候既須要氧氣也須要二氧化碳C.心肌細(xì)胞在培育容器中通過有絲分裂不斷增殖D.心肌細(xì)胞在神經(jīng)細(xì)胞發(fā)出的神經(jīng)沖動的支配下跳動2.[2024·湖北卷]納米氧化亞銅是一種納米材料。為了探究納米氧化亞銅對貼壁生長細(xì)胞活性的影響,探討者在培育基中添加肯定量的納米氧化亞銅,8小時后視察到細(xì)胞萎縮、體積變小,細(xì)胞核變大、細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)出現(xiàn)納米氧化亞銅富集現(xiàn)象,培育瓶中大量貼壁細(xì)胞脫落,出現(xiàn)細(xì)胞懸浮。依據(jù)該試驗現(xiàn)象,能得出的正確結(jié)論是()A.納米氧化亞銅變更了細(xì)胞貼壁生長習(xí)性B.納米氧化亞銅對該細(xì)胞生長有抑制作用C.納米氧化亞銅能通過自由擴散進入細(xì)胞D.納米氧化亞銅不影響細(xì)胞的新陳代謝3.[2024·湖北卷]某愛好小組開展小鼠原代神經(jīng)元培育的探討,結(jié)果發(fā)覺其培育的原代神經(jīng)元生長緩慢,其緣由不行能的是()A.試驗材料取自小鼠胚胎的腦組織B.為了防止污染將培育瓶瓶口密封C.血清經(jīng)過高溫處理后加入培育基D.所運用的培育基呈弱酸性4.[2024·山東卷]如圖所示,將由2種不同的抗原分別制備的單克隆抗體分子,在體外解偶聯(lián)后重新偶聯(lián)可制雙特異性抗體,簡稱雙抗。下列說法錯誤的是()A.雙抗可同時與2種抗原結(jié)合B.利用雙抗可以將蛋白類藥物運輸至靶細(xì)胞C.篩選雙抗時需運用制備單克隆抗體時所運用的2種抗原D.同時注射2種抗原可刺激B細(xì)胞分化為產(chǎn)雙抗的漿細(xì)胞5.[2024·遼寧卷]某抗膜蛋白治療性抗體藥物研發(fā)過程中,須要表達N蛋白胞外段,制備相應(yīng)的單克隆抗體,增加其對N蛋白胞外段特異性結(jié)合的實力。Ⅰ.N蛋白胞外段抗原制備,流程如圖1(1)構(gòu)建重組慢病毒質(zhì)粒時,選用氨芐青霉素抗性基因作為標(biāo)記基因,目的是。用脂質(zhì)體將重組慢病毒質(zhì)粒與協(xié)助質(zhì)粒導(dǎo)入病毒包裝細(xì)胞,質(zhì)粒被包在脂質(zhì)體(填“雙分子層中”或“兩層磷脂分子之間”)。(2)質(zhì)粒在包裝細(xì)胞內(nèi)組裝出由組成的慢病毒,用慢病毒感染海拉細(xì)胞進而表達并分別、純化N蛋白胞外段。Ⅱ.N蛋白胞外段單克隆抗體制備,流程如圖2(3)用N蛋白胞外段作為抗原對小鼠進行免疫后,取小鼠脾組織用酶處理,制成細(xì)胞懸液,置于含有混合氣體的中培育,離心收集小鼠的B淋巴細(xì)胞,與骨髓瘤細(xì)胞進行融合。(4)用選擇性培育基對融合后的細(xì)胞進行篩選,獲得雜交瘤細(xì)胞,將其接種到96孔板,進行培育。用技術(shù)檢測每孔中的抗體,篩選既能產(chǎn)生N蛋白胞外段抗體,又能大量增殖的單克隆雜交瘤細(xì)胞株,經(jīng)體外擴大培育,收集,提取單克隆抗體。(5)利用N蛋白胞外段抗體與藥物結(jié)合,形成,實現(xiàn)特異性治療。[國考真題研規(guī)律]6.[2024·全國卷Ⅰ]為研制抗病毒A的單克隆抗體,某同學(xué)以小鼠甲為試驗材料設(shè)計了以下試驗流程。回答下列問題:(1)上述試驗前必需給小鼠甲注射病毒A,該處理的目的是________________________________________________________________________。(2)寫出以小鼠甲的脾臟為材料制備單細(xì)胞懸液的主要試驗步驟:________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)為了得到能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞,須要進行篩選。圖中篩選1所采納的培育基屬于,運用該培育基進行細(xì)胞培育的結(jié)果是。圖中篩選2含多次篩選,篩選所依據(jù)的基本原理是________________________________________________________________________。(4)若要使能產(chǎn)生抗病毒A的單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞大量增殖,可采納的方法有________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出2點即可)。課堂互動探究案4考點一【任務(wù)驅(qū)動】任務(wù)1胰蛋白酶胰蛋白酶(1)液體動物血清或血漿(2)單個細(xì)胞分別接觸抑制(3)pH有氧呼吸任務(wù)2細(xì)胞增殖動物細(xì)胞核的全能性原代胰蛋白酶傳代去核卵母細(xì)胞重組細(xì)胞早期胚胎細(xì)胞群克隆動物【過程評價】1.解析:動物細(xì)胞培育須要無毒無菌的環(huán)境,甲過程指從試驗小鼠身上取下皮膚組織,該過程須要對小鼠進行消毒處理,A正確;乙過程表示將得到的皮膚組織分散成單個細(xì)胞制備成細(xì)胞懸液,可用胰蛋白酶或膠原蛋白酶進行處理,B正確;丙過程表示原代培育,此時的細(xì)胞仍能保持正常的二倍體核型,C錯誤;丁過程表示傳代培育,此時得到的細(xì)胞會克服細(xì)胞壽命的自然極限,獲得不死性,這些細(xì)胞已經(jīng)發(fā)生突變,正在朝著等同于癌細(xì)胞的方向發(fā)展,D正確。答案:C2.解析:用患者自身的胚胎干細(xì)胞克隆器官,可以克服供體器官不足,器官移植后又不會發(fā)生免疫排斥反應(yīng);治療性克隆的核心是胚胎干細(xì)胞的培育;胚胎干細(xì)胞克隆出不同組織細(xì)胞屬于細(xì)胞分化,細(xì)胞分化是基因的選擇性表達;中國政府禁止生殖性克隆人,但不反對治療性克隆。答案:D3.答案:(1)XX或XY顯微操作胚胎移植(2)遺傳物質(zhì)(3)卵母細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中的遺傳物質(zhì)會對克隆動物的性狀產(chǎn)生影響(4)動物已分化體細(xì)胞的細(xì)胞核具有全能性考點二【任務(wù)驅(qū)動】任務(wù)1細(xì)胞膜的流淌性、細(xì)胞增殖纖維素酶和果膠酶雜種植株雜交細(xì)胞克服了遠(yuǎn)緣雜交的不親和性,獲得雜種植株任務(wù)2(1)滅活病毒誘導(dǎo)法細(xì)胞膜的流淌性既能無限增殖,又能產(chǎn)生特定的抗體特異性強、靈敏度高、并可大量制備(2)特定抗原(3)未融合細(xì)胞、同種細(xì)胞相互融合后的細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞(4)【過程評價】1.解析:單克隆抗體是指由單個B淋巴細(xì)胞進行無性繁殖形成的細(xì)胞系所產(chǎn)生的化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強的抗體,A錯誤;經(jīng)過特定抗原免疫過的B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞雜交融合后,接著利用選擇培育基篩選出雜交瘤細(xì)胞,再進行抗體檢測,篩選出能產(chǎn)生單一抗體的雜交瘤細(xì)胞,然后再進行體外培育或注入小鼠腹腔培育獲得單克隆抗體,B錯誤、D正確;誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后,發(fā)生融合的細(xì)胞除了雜交瘤細(xì)胞外,也可能是B淋巴細(xì)胞相互融合的細(xì)胞或骨髓瘤細(xì)胞相互融合的細(xì)胞,C錯誤。答案:D2.解析:滅活的仙臺病毒是誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合的方法之一,A正確;骨髓瘤細(xì)胞之間融合因為都缺少次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(HGPRT-)而不能生長,B錯誤;其次次篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,C正確;細(xì)胞融合體現(xiàn)了細(xì)胞膜的流淌性這一結(jié)構(gòu)特點,D正確。答案:B3.解析:單克隆抗體制備過程中不須要運用TaqDNA聚合酶,A錯誤;抗體與細(xì)胞毒素結(jié)合增加了細(xì)胞毒素的定向性,細(xì)胞毒素的殺傷力并未變更,B錯誤;細(xì)胞毒素殺傷腫瘤細(xì)胞沒有特異性,能與腫瘤細(xì)胞膜上的糖蛋白發(fā)生特異性結(jié)合的是抗體,C錯誤;溶酶體裂開使其中的多種水解酶釋放出來,破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu),加速腫瘤細(xì)胞凋亡,D正確。答案:D4.解析:①是從已免疫的小鼠脾臟中獲得的B淋巴細(xì)胞;②中運用聚乙二醇或滅活的病毒等,有利于雜交瘤細(xì)胞的形成;③同時具有漿細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的特性;④是經(jīng)篩選培育獲得的能分泌特異性抗體的細(xì)胞群。答案:A課堂總結(jié)網(wǎng)絡(luò)聚焦也許念①動物細(xì)胞融合②單克隆抗體的制備歷屆真題分類集訓(xùn)培素養(yǎng)1.解析:培育心肌細(xì)胞的器具要先進行高壓蒸汽滅菌,但是試劑并不都須要滅菌,如動物血清不能進行高壓蒸汽滅菌,否則會使其中的成分失活,A錯誤;培育心肌細(xì)胞的時候既須要氧氣(有助于進行有氧呼吸)也須要二氧化碳(有助于維持培
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