第三章 滅菌與無菌制劑課件

第三章

滅菌制劑和無菌制劑19一月20251第三章滅菌與無菌制劑第一節(jié)概述第二節(jié)注射劑第三節(jié)注射劑的制備第四節(jié)輸液第五節(jié)注射用無菌粉末第六節(jié)眼用液體制劑第七節(jié)其他滅菌與無菌制劑第八節(jié)滅菌與無菌制劑新進(jìn)展19一月20252第三章滅菌與無菌制劑第一節(jié)概述基本概念滅菌（sterilization)：

Anoperationwhichrendersanorganismunabletoprocreate.

用物理或化學(xué)等方法殺滅或除去所有致病、非致病微生物繁殖體、芽孢的手段19一月20253第三章滅菌與無菌制劑滅菌法（techniqueofsterilization)

殺滅或除去所有致病、非致病微生物繁殖體、芽孢的方法或技術(shù)19一月20254第三章滅菌與無菌制劑無菌（asepsis，sterility)

在人一指定物體、介質(zhì)或環(huán)境中，不得存在任何活的微生物無菌操作法（aseptictechnique)：

Aseptictechniquereferstoaprocedurethatisperformedundersterileconditions

在整個(gè)操作過程中利用和控制一定條件，使產(chǎn)品避免被微生物污染的一種操作方法或技術(shù)19一月20255第三章滅菌與無菌制劑防腐（antisepsis)：用物理或化學(xué)方法抑制微生物的生長(zhǎng)與繁殖的手段（抑菌）抑菌劑（防腐劑）對(duì)微生物的生長(zhǎng)與繁殖具有抑制作用的物質(zhì)19一月20256第三章滅菌與無菌制劑消毒（disinfection)：用物理或化學(xué)方法殺滅或除去病原微生物的手段消毒劑對(duì)病原微生物具有殺滅或除去作用的物質(zhì)19一月20257第三章滅菌與無菌制劑一、滅菌制劑與無菌制劑藥物制劑規(guī)定無菌制劑

不得檢出活菌非規(guī)定無菌制劑（限菌制劑）

限定染菌的種類與數(shù)量19一月20258第三章滅菌與無菌制劑滅菌制劑

采用某一物理、化學(xué)方法殺滅或除去所有活的微生物繁殖體和芽孢的一類藥物制劑無菌制劑采用某一操作方法或技術(shù)制備的不含任何活的微生物繁殖體和芽孢的一類藥物制劑19一月20259第三章滅菌與無菌制劑無菌制劑注射用制劑眼用制劑植入型制劑創(chuàng)傷用制劑手術(shù)用制劑注射劑、輸液、注射粉針滴眼劑、眼用膜劑、軟膏劑、凝膠劑植入片潰瘍、燒傷及外傷用溶劑止血海棉、骨蠟19一月202510第三章滅菌與無菌制劑二、滅菌與無菌技術(shù)目的

提高藥物制劑的安全性保護(hù)制劑的穩(wěn)定性保證制劑的臨床療效19一月202511第三章滅菌與無菌制劑滅菌方法物理滅菌法化學(xué)滅菌法

無菌操作法過濾除菌法熱滅菌法射線滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法氣體滅菌法化學(xué)藥劑滅菌法19一月202512第三章滅菌與無菌制劑（一）物理滅菌技術(shù)

利用蛋白質(zhì)、核酸具有遇熱、射線不穩(wěn)定的特性，采用加熱、射線和過濾方法，殺滅或除去微生物的技術(shù)（物理滅菌技術(shù)）熱滅菌法射線滅菌法過濾滅菌法19一月202513第三章滅菌與無菌制劑1.熱滅菌法干熱滅菌法濕熱滅菌法1）干熱滅菌法

在干燥環(huán)境中進(jìn)行滅菌的技術(shù)火焰滅菌法干熱空氣滅菌法滅菌溫度、時(shí)間：

135-145℃，3-5h160-170℃，2-4h180-200℃，0.5-1h19一月202514第三章滅菌與無菌制劑（1）火焰滅菌法用火焰直接灼燒滅菌的方法適用：耐火焰材質(zhì)（金屬、玻璃及瓷器等）的物品、用具不適合：藥品19一月202515第三章滅菌與無菌制劑（2）干熱空氣滅菌法高溫干熱空氣滅菌的方法適用：耐高溫玻璃、金屬制品不允許濕氣穿透的油脂類

（油性軟膏基質(zhì)、注射用油等）耐高溫粉末化學(xué)藥品不適于：橡膠、塑料、大部分藥品19一月202516第三章滅菌與無菌制劑2）濕熱滅菌法

用飽和蒸汽、沸水或流通蒸汽進(jìn)行滅菌的方法熱壓滅菌法流通蒸氣滅菌法煮沸滅菌法低溫間歇滅菌法19一月202517第三章滅菌與無菌制劑Autoclaving：sterilizationofmaterialsbysteamunderpressure.Anautoclaveisadevicetosterilizeequipmentandsuppliesbysubjectingthemtohighpressuresteamat121°Cormore（inventedbyC.Chamberlandin1879.（1）熱壓滅菌法高壓飽和水蒸氣加熱殺滅微生物的方法（殺滅所有細(xì)菌繁殖體、芽孢）適用：耐高溫、高壓蒸汽藥物制劑、玻璃容器、金屬容器、瓷器、橡膠塞、濾膜過濾器等19一月202518第三章滅菌與無菌制劑滅菌溫度（蒸氣表壓）和時(shí)間115℃(67kPa)×30min121℃(97kPa)×20min126℃(139kPa)×15min19一月202519第三章滅菌與無菌制劑影響因素微生物的種類和數(shù)量耐熱、壓次序：

芽孢＞繁殖體＞衰老體微生物數(shù)量↓，滅菌時(shí)間↓19一月202520第三章滅菌與無菌制劑蒸氣性質(zhì)影響因素19一月202521第三章滅菌與無菌制劑

藥物性質(zhì)和滅菌時(shí)間滅菌溫度愈高，滅菌時(shí)間愈長(zhǎng)藥品被破壞可能性愈大原則：達(dá)到有效滅菌前提下，盡可能降低滅菌溫度、縮短滅菌時(shí)間.影響因素19一月202522第三章滅菌與無菌制劑

其他介質(zhì)pH值中性最耐熱堿性次之酸性最弱介質(zhì)的營(yíng)養(yǎng)成分抗熱性強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)高影響因素19一月202523第三章滅菌與無菌制劑（2）流通蒸氣滅菌法

常壓下，采用100℃流通蒸汽加熱殺滅微生物的方法滅菌時(shí)間：30－60min.適用：消毒、不耐高熱制劑滅菌不能保證殺滅所有芽孢，非可靠滅菌法19一月202524第三章滅菌與無菌制劑（3）煮沸滅菌法將待滅菌物品置沸水中加熱滅菌的方法時(shí)間：30－60min滅菌效果較差注射劑、注射針等器皿消毒必要時(shí)加入適量抑菌劑（三氯叔丁醇、甲酚、氯甲酚等）以提高滅菌效果19一月202525第三章滅菌與無菌制劑（4）低溫間歇滅菌法將待滅菌物置60－80℃水、流通蒸氣中加熱60min，殺滅微生物繁殖體，室溫24h，待滅菌物中芽孢發(fā)育成繁殖體，再次加熱滅菌、放置，反復(fù)多次，至殺滅所有芽孢適用：不耐高溫、熱敏感物料和制劑缺點(diǎn)：費(fèi)時(shí)、工效低、滅菌效果差適量抑菌劑可提高滅菌效率19一月202526第三章滅菌與無菌制劑2.射線滅菌法

采用輻射、微波和紫外線殺滅微生物和芽孢的方法輻射滅菌法微波滅菌法紫外線滅菌法19一月202527第三章滅菌與無菌制劑1）輻射滅菌法

采用放射線同位素（60Co、137Cs）放射的γ射線殺滅微生物、芽孢的方法適用：熱敏物料、制劑滅菌常用：維生素、抗生素、激素、生物制品...輻射滅菌劑量：25kGyGy(戈瑞)---射線劑量單位，即1kg被輻照物質(zhì)吸收1焦耳的能量為1戈瑞.19一月202528第三章滅菌與無菌制劑優(yōu)點(diǎn)：不升高產(chǎn)品溫度穿透力強(qiáng)滅菌效率高缺點(diǎn)：設(shè)備費(fèi)用較高操作人員潛在危險(xiǎn)對(duì)某些藥物（特別溶液型）可能產(chǎn)生藥效降低或產(chǎn)生毒性、發(fā)熱物質(zhì)等19一月202529第三章滅菌與無菌制劑2）微波滅菌法

采用微波（頻率300MHz-300kMHz)照射產(chǎn)生的熱能殺滅微生物、芽孢的方法適用：液體、固體物料對(duì)固體物料具干燥作用特點(diǎn)：微波穿透到介質(zhì)、物料內(nèi)部，介質(zhì)、物料表里一致加熱低溫、常壓、高效、快速、低能耗、無污染易操作、易維護(hù)、產(chǎn)品保質(zhì)期長(zhǎng)等特點(diǎn)19一月202530第三章滅菌與無菌制劑原理高頻電磁場(chǎng)作用，極性分子取向按交變電磁頻率不斷變化運(yùn)動(dòng)、相互摩擦產(chǎn)生熱量微波殺菌機(jī)理熱效應(yīng)—使微生物蛋白質(zhì)變性失活非熱效應(yīng)—干擾微生物正常新陳代謝，破壞微生物的生長(zhǎng)環(huán)境低溫（70-80℃）即可殺滅微生物，不影響藥物穩(wěn)定性19一月202531第三章滅菌與無菌制劑3）紫外線滅菌法

用紫外線（能量）照射殺滅微生物和芽孢的方法滅菌波長(zhǎng)：200-300nm（最強(qiáng)滅菌力波長(zhǎng)254nm）適用：照射物表面滅菌、無菌室空氣、蒸餾水不適合：藥液滅菌、固體物料深部滅菌19一月202532第三章滅菌與無菌制劑滅菌機(jī)理：紫外線導(dǎo)致核酸蛋白變性使空氣中氧氣產(chǎn)生微量臭氧

紫外線穿透能力弱，并能被普通玻璃吸收，裝于普通玻璃容器中的藥物不能用紫外線滅菌紫外線對(duì)人體有一定的傷害，照射過久易引起結(jié)膜炎、紅斑及皮膚燒灼19一月202533第三章滅菌與無菌制劑3.過濾滅菌法采用過濾法除去微生物的方法機(jī)械除菌方法——除菌過濾器適用：熱不穩(wěn)定藥液、氣體、水等物品滅菌對(duì)滅菌用過濾器要求較高常用過濾器：0.22μm微孔濾膜器、0.3μmG6垂熔玻璃濾器19一月202534第三章滅菌與無菌制劑（二）化學(xué)滅菌法用化學(xué)藥品直接作用于微生物而將其殺滅的方法殺菌劑：對(duì)微生物具有觸殺作用的化學(xué)藥品氣體、液體殺菌劑殺菌劑只對(duì)微生物繁殖體有效，不能殺滅芽孢殺菌效能決定于微生物種類與數(shù)量物體表面光潔度多孔性殺菌劑性質(zhì)19一月202535第三章滅菌與無菌制劑氣體滅菌法：環(huán)境消毒、不耐熱醫(yī)用器具、設(shè)備設(shè)施等消毒粉末注射劑消毒常用氣態(tài)殺菌劑環(huán)氧乙烷、甲醛、丙二醇、甘油、過氧乙酸藥液滅菌法

作為其他滅菌法的輔助措施適用：皮膚、無菌器具、設(shè)備消毒常用消毒液：75%乙醇、1%聚維酮碘溶液、0.1-0.2%新潔爾滅溶液、酚或煤酚皂溶液等19一月202536第三章滅菌與無菌制劑（三）無菌操作法

整個(gè)過程控制在無菌條件下進(jìn)行的一種操作方法適用：不耐熱藥物注射液、眼用制劑、皮試液、海綿劑、創(chuàng)傷制劑的制備無菌操作法：無菌操作室滅菌、無菌操作兩個(gè)環(huán)節(jié)19一月202537第三章滅菌與無菌制劑1.無菌操作室的滅菌

紫外線、液體、氣體滅菌法常用甲醛溶液加熱熏蒸法第三章滅菌與無菌制劑referstoaprocedurethatisperformedundersterileconditions2.無菌操作（aseptictechnique）

無菌操作的場(chǎng)所無菌操作室、層流潔凈工作臺(tái)、無菌操作柜

無菌操作的所用物品、器具、環(huán)境

操作人員第三章滅菌與無菌制劑D值：一定溫度下殺滅90%微生物（或殘存率為10%）所需的滅菌時(shí)間lgN0-lgNt=kt/2.303殺滅微生物復(fù)合一級(jí)動(dòng)力學(xué)過程t=2.303/k(lg100-lg10)=2.303/k=DdN/dt=-kN（四）滅菌參數(shù)（F值和F0值）D值：降低被滅菌物品中微生物數(shù)至原來1/10或降低一個(gè)對(duì)數(shù)單位（lg100降至lg10）所需的時(shí)間第三章滅菌與無菌制劑滅菌方法微生物溫度介質(zhì)或樣品D值（min）蒸氣滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1055％葡萄糖水溶液87.8蒸氣滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌1215％葡萄糖水溶液2.4蒸氣滅菌嗜熱脂肪芽孢桿菌121注射用水3.0蒸氣滅菌產(chǎn)芽胞梭狀芽孢桿菌1055％葡萄糖水溶液1.3干熱滅菌枯草芽胞桿菌135紙16.6紅外線滅菌枯草芽胞桿菌160玻璃板18秒不同滅菌法不同微生物不同制劑組分的D值第三章滅菌與無菌制劑降低一個(gè)lgD值所需升高的溫度,即滅菌時(shí)間減少到原來的1/10所需升高的溫度.Z值Z＝(T2－T1)／(logD2－logD1)第三章滅菌與無菌制劑F值

在一系列滅菌溫度（T）下給定Z值所產(chǎn)生的滅菌效力與在參比溫度（To）下給定的Z值所產(chǎn)生的滅菌效力相同時(shí)，To溫度下所相當(dāng)?shù)臏缇鷷r(shí)間.

常用于干熱滅菌，Z=20℃,單位：min第三章滅菌與無菌制劑物理F0值數(shù)學(xué)表達(dá)式：生物F0值數(shù)學(xué)表達(dá)式：F0=D121℃×(lgN0-lgNt)為滅菌后預(yù)計(jì)達(dá)到的微生物殘存數(shù)，即染菌度概率.F0值

在一定滅菌溫度（T）、Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果與121℃、Z值為10℃所產(chǎn)生的滅菌效果相同時(shí)所相當(dāng)?shù)臅r(shí)間第三章滅菌與無菌制劑F0值特點(diǎn)F0值僅限于熱壓滅菌，生物F0值相當(dāng)于121℃熱壓滅菌時(shí)，殺滅容器中全部微生物所需要的時(shí)間F0值體現(xiàn)了滅菌溫度與時(shí)間對(duì)滅菌效果的統(tǒng)一，數(shù)值更為精確、實(shí)用.為確保滅菌效果，適當(dāng)增加安全系數(shù)，一般增加理論值的50%第三章滅菌與無菌制劑影響F0值因素

容器大小、形狀，熱穿透性滅菌產(chǎn)品性質(zhì)，裝量容器在滅菌器內(nèi)位置及數(shù)量19一月202546第三章滅菌與無菌制劑滅菌驗(yàn)證生物指示劑—活微生物制品濕熱滅菌，嗜熱脂肪芽孢桿菌孢子；干熱滅菌，枯草芽孢桿菌孢子指數(shù)存活曲線

exponentialsurvivalcurve化學(xué)指示劑—利用某些熔點(diǎn)正好是滅菌所需溫度的化學(xué)藥品作指示劑：升華硫（115℃）、安替匹林（110－120℃）、碘仿（115℃）、氯基比林（107－109℃）、苯甲酸（121℃）等，并可加著色劑（亞甲藍(lán)、甲紫等）以便于觀察19一月202547第三章滅菌與無菌制劑（一）概述三、空氣凈化技術(shù)空氣凈化：創(chuàng)造潔凈空氣為目的的空氣調(diào)節(jié)措施.空氣凈化技術(shù)：為達(dá)到某種凈化要求所采用的凈化方法.工業(yè)凈化—除去懸浮塵埃粒子生物凈化—除去懸浮塵埃粒子、微生物第三章滅菌與無菌制劑（二）空氣凈化標(biāo)準(zhǔn)1.含塵濃度：?jiǎn)挝惑w積空氣中所含粉塵個(gè)數(shù)（計(jì)數(shù)濃度）或毫克量（重量濃度）第三章滅菌與無菌制劑潔凈度級(jí)別塵粒最大允許數(shù)/m3微生物最大允許數(shù)

≥0.5μm≥5μm浮游菌/m3沉降菌/皿1003,50005110000350,0002,00010031000003,500,00020,0005001030000010,500,00060,000—15潔凈級(jí)別：每立方英尺中≥0.5μm塵粒最大允許數(shù)沉降菌落數(shù)：直徑9厘米的雙碟露置于空氣中0.5h后落下的菌的個(gè)數(shù)潔凈室的凈化度標(biāo)準(zhǔn)第三章滅菌與無菌制劑（三）塵埃濃度測(cè)定方法、無菌檢查法1.塵埃濃度測(cè)定方法（1）光散射式粒子計(jì)數(shù)法（2）濾膜顯微鏡計(jì)數(shù)法（3）光電比色計(jì)數(shù)法2.無菌檢查法（1）直接接種法（2）薄膜過濾法第三章滅菌與無菌制劑（四）空氣凈化技術(shù)1.過濾方式（1）表面過濾（2）深層過濾19一月202552第三章滅菌與無菌制劑2.過濾機(jī)理與影響因素過濾機(jī)理：（1）攔截作用（2）吸附作用影響因素：粒徑、過濾風(fēng)速、介質(zhì)纖維直徑和密實(shí)性、浮塵19一月202553第三章滅菌與無菌制劑3.空氣過濾器及其特性（1）空氣過濾器

板式過濾器—初效過濾，預(yù)過濾器,d>5

m

契式過濾器—中效過濾,d>5

m

袋式過濾器—中效過濾,d>5

m

折疊式過濾器—高效過濾,d>5

m第三章滅菌與無菌制劑（2）空氣過濾器的特性1）過濾效率(

)單個(gè)過濾器=1-C2/C1

C1，C2過濾前、后空氣含塵量.多級(jí)串聯(lián)過濾器

=(C1-Cn)/C1=1-(1-

1)(1-

2)

(1-

n)2）穿透率(k)和凈化系數(shù)(kc)⑴穿透率：過濾后、過濾前空氣含塵濃度比k=C2/C1=1-

⑵凈化系數(shù)：過濾前、過濾后空氣含塵濃度比kc=1/k=C1/C219一月202555第三章滅菌與無菌制劑3）容塵量：過濾器允許積塵的最大量一般容塵量定為阻力增大到原來的兩倍或過濾效率降至初值的85%以下的積塵量19一月202556第三章滅菌與無菌制劑（五）潔凈室的設(shè)計(jì)生產(chǎn)區(qū)域潔凈度要求：一般生產(chǎn)區(qū)控制區(qū)(10萬級(jí))潔凈區(qū)(1萬級(jí))無菌區(qū)(100