2025年人教B版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷

…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………內(nèi)…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………※※請※※不※※要※※在※※裝※※訂※※線※※內(nèi)※※答※※題※※…………○…………外…………○…………裝…………○…………訂…………○…………線…………○…………第=page22頁，總=sectionpages22頁第=page11頁，總=sectionpages11頁2025年人教B版選擇性必修3生物上冊階段測試試卷28考試試卷考試范圍：全部知識點(diǎn)；考試時間：120分鐘學(xué)校：______姓名：______班級：______考號：______總分欄題號一二三四五六總分得分評卷人得分一、選擇題(共9題，共18分)1、已知從脾臟中獲取的B淋巴細(xì)胞包括兩大類；一類是能產(chǎn)生抗體的漿細(xì)胞，另一類是不能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞。在單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，先用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活；增殖的細(xì)胞有（）

①B淋巴細(xì)胞②骨髓瘤細(xì)胞③B淋巴細(xì)胞自身融合④骨髓瘤細(xì)胞自身融合⑤骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合⑥骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞融合A.①②③④B.①②③④⑤C.①③D.①②④⑤2、下列關(guān)于生殖性克隆人的敘述，正確的是（）A.生殖性克隆人可以豐富人類基因的多樣性B.可以運(yùn)用重組DNA技術(shù)進(jìn)行生殖性克隆人研究C.雖然生殖性克隆人存在倫理問題，但克隆技術(shù)已經(jīng)成熟D.我國政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗3、對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域，關(guān)于其原因的描述，不正確的是（）A.微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單的優(yōu)點(diǎn)B.微生物具有生長繁殖快的優(yōu)點(diǎn)C.微生物具有適應(yīng)性強(qiáng)、對環(huán)境因素不敏感的優(yōu)點(diǎn)D.微生物具有容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作的優(yōu)點(diǎn)4、平板劃線法和稀釋涂布平板法是常用的兩種接種方法。下列相關(guān)敘述中錯誤的是（）A.平板劃線法要求要連續(xù)多次劃線，且除了第一次劃線外，每一次劃線的起點(diǎn)都是上一次劃線的終點(diǎn)B.除了第一次劃線需要將接種環(huán)灼燒滅菌外，以后的劃線可以不用滅菌C.如果菌液本來濃度不高，則可以適當(dāng)降低稀釋倍數(shù)D.充分稀釋和連續(xù)劃線的目的都是為了使形成的菌落是由單一的細(xì)菌細(xì)胞繁殖而成5、愛德華茲因體外受精技術(shù)獲得2010年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎，被譽(yù)為“試管嬰兒之父”。下列相關(guān)說法錯誤的是（）A.收集的精子需誘導(dǎo)獲能后才能用于體外受精B.采集來的初級卵母細(xì)胞可以直接用于體外受精C.早期胚胎植入子宮后需對母體進(jìn)行妊娠檢查D.試管嬰兒技術(shù)解決了某些不孕夫婦的生育問題6、下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（）A.基因工程所用的工具酶是限制酶和DNA聚合酶B.在重組質(zhì)粒構(gòu)建時只能用一種酶切割質(zhì)粒和目的基因C.選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞是因為細(xì)菌繁殖快D.只要目的基因進(jìn)入了受體細(xì)胞就能成功地實(shí)現(xiàn)表達(dá)7、兩種生物之間存在著天然的生殖隔離，用傳統(tǒng)的有性雜交的方法很難得到雜種后代。經(jīng)過長期的實(shí)驗，科學(xué)家采用體細(xì)胞雜交的方法得到了兩種植物的雜種植物，如圖是植物體細(xì)胞雜交方法的流程圖。下列有關(guān)說法錯誤的是（）

A.圖中由B細(xì)胞獲得B原生質(zhì)體需要使用纖維素酶和果膠酶去除植物細(xì)胞的細(xì)胞壁B.雜交過程的關(guān)鍵是原生質(zhì)體的融合，可以使用離心法、聚乙二醇融合法等方法來誘導(dǎo)C.若提供B細(xì)胞的植株都為二倍體，則圖中雜種植株也為二倍體且是可育的D.圖中培養(yǎng)愈傷組織發(fā)育為雜種植株的培養(yǎng)基中，需要加入蔗糖和一些植物激素等8、轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的培育，番茄－馬鈴薯的創(chuàng)造，單克隆抗體的制備，同卵雙胎依次所屬的生物工程技術(shù)為（）A.基因工程、胚胎工程、細(xì)胞工程、基因工程B.細(xì)胞工程、細(xì)胞工程、胚胎工程、細(xì)胞工程C.基因工程、細(xì)胞工程、細(xì)胞工程、胚胎工程D.細(xì)胞工程、基因工程、基因工程、胚胎工程9、將某病毒的外殼蛋白（L1）基因與綠色熒光蛋白（GFP）基因連接；構(gòu)建L1-GFP融合基因，再將融合基因與質(zhì)粒連接構(gòu)建下圖所示表達(dá)載體。圖中限制酶E1～E4處理產(chǎn)生的黏性末端均不相同。下列敘述錯誤的是（）

A.構(gòu)建L1-GFP融合基因需要用到限制酶有E1、E2、E4B.E1、E4雙酶切確保L1-GFP融合基因與載體的正確連接C.GFP可用于檢測受體細(xì)胞中目的基因是否表達(dá)D.培育乳汁中含L1的轉(zhuǎn)基因羊需將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入乳腺細(xì)胞評卷人得分二、多選題(共9題，共18分)10、我國研究人員創(chuàng)造出一種新型干細(xì)胞——異種雜合二倍體胚胎干細(xì)胞；具體研究過程如下圖所示，下列敘述正確的是（）

A.單倍體囊胚1最可能是由卵子發(fā)育預(yù)帶的，單倍體ES應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)B.培養(yǎng)液中除了需要加入血清等營養(yǎng)物質(zhì)，還需要加入抗生素等消滅病毒C.體外培養(yǎng)條件下ES細(xì)胞可以增殖而不發(fā)生分化D.ES細(xì)胞在形態(tài)上表現(xiàn)為體積大、細(xì)胞核小、核仁明顯11、從胰島素依賴型糖尿病患者的骨髓中分離骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC），誘導(dǎo)分化成胰島樣細(xì)胞，再導(dǎo)入該患者體內(nèi)。放射性免疫分析結(jié)果表明誘導(dǎo)的胰島樣細(xì)胞團(tuán)可以正常分泌胰島素，患者的血糖恢復(fù)正常。下列說法正確的是（）A.培養(yǎng)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)液通常需加入血清B.在體外連續(xù)培養(yǎng)時，利用胰蛋白酶將接觸抑制的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分開C.在功能上，骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞具有發(fā)育的全能性D.治療成功后，康復(fù)者的血型有可能發(fā)生改變12、根據(jù)某基因上游和下游的堿基序列；設(shè)計合成了用于該基因PCR的兩段引物（單鏈DNA）。引物與該基因變性DNA（單鏈DNA）結(jié)合為雙鏈DNA的過程稱為復(fù)性。下圖是兩引物的Tm（引物熔解溫度，即50%的引物與其互補(bǔ)序列形成雙鏈DNA分子時的溫度）測定結(jié)果，以下分析正確的是（）

A.兩引物分別與DNA的兩條互補(bǔ)單鏈結(jié)合，是子鏈延伸的起點(diǎn)B.PCR過程中，復(fù)性溫度應(yīng)低于引物的Tm值以提高PCR效率C.若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，推測引物2的（G＋C）含量較高D.適當(dāng)減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)，可使其Tm值接近引物113、將單克隆抗體與前體藥物的專一性活化酶藕聯(lián)（簡稱抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián)）是特異性治療腫瘤并減少對正常細(xì)胞傷害的最新研究方向。堿性磷酸酶是抗腫瘤藥物多柔比星前體的專一性活化酶，醫(yī)學(xué)研究中利用抗體導(dǎo)向酶偶聯(lián)機(jī)理將堿性磷酸酶與單克隆抗體制成“生物導(dǎo)彈”，通過活化多柔比星使其對DNA造成損傷，進(jìn)而抑制以DNA為模板進(jìn)行的生理活動，達(dá)到治療腫瘤的目的。下列說法正確的是（）A.為獲得單克隆抗體應(yīng)首先給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原，得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞B.制備單克隆抗體的過程中至少要經(jīng)過兩次原理和目的均不同的篩選過程C.生物導(dǎo)彈綜合利用了堿性磷酸酶的定向制導(dǎo)作用和單克隆抗體的特異性殺傷能力D.多柔比星只作用于有增殖能力的細(xì)胞14、生長圖形法是一種測定微生物營養(yǎng)需求的簡便方法。為探究某嗜熱菌所需生長因子的種類；研究小組把該菌的懸浮液與不含任何生長因子但含有其他必需營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基混合后倒成平板，然后在平板上劃分?jǐn)?shù)區(qū)，將甲；乙、丙三種生長因子分別添加到不同區(qū)域，培養(yǎng)結(jié)果如圖所示，下列說法正確的是（）

A.倒成平板后直接培養(yǎng)可判斷有無污染B.倒成平板后需要進(jìn)行滅菌處理C.圖示結(jié)果表明該菌需要生長因子乙或丙D.生長圖形法還可用于某些菌種的篩選15、下列關(guān)于植物基因工程應(yīng)用的說法，正確的是（）A.將某種含必需氨基酸多的蛋白質(zhì)導(dǎo)入植物體中以提高該植物體內(nèi)氨基酸的含量B.植物基因工程可用來培育高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和抗逆性強(qiáng)的作物C.利用基因工程可以改造植物細(xì)胞的基因，使其能夠生產(chǎn)人類所需要的藥物D.通過植物基因工程培育的抗蟲植物必然可以抗病毒16、利用膠體金檢測技術(shù)檢測抗原最常用的是雙抗夾心法。雙抗夾心法需要準(zhǔn)備待測抗原的配對抗體；一個抗體用膠體金標(biāo)記（即膠體金標(biāo)記抗體）并固定在結(jié)合墊上，另一個抗體固定在NC膜的檢測線（T線）上。另外，還需要準(zhǔn)備能與金標(biāo)抗體特異性結(jié)合的二抗并固定于NC膜的控制線（C線）上，如圖所示。下列說法錯誤的是（）

A.樣品中含有待測抗原時，T線和C線均會顯色B.圖中的抗體都需要與抗原結(jié)合C.結(jié)合墊是為了固定金標(biāo)抗體D.若T線不顯色說明檢測結(jié)果無效17、如圖為煙草植物組織培養(yǎng)過程的流程圖。下列有關(guān)敘述錯誤的是（）

A.對過程①獲取的根組織塊應(yīng)做較徹底的滅菌處理B.過程②應(yīng)根據(jù)要求使用適宜的培養(yǎng)基，在避光的環(huán)境中進(jìn)行C.過程③發(fā)生脫分化，其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)D.定向誘導(dǎo)X細(xì)胞可得到有利的突變體18、圖甲為培育轉(zhuǎn)基因生物時選用的載體，圖乙是含有目的基因的一段DNA序列，圖中標(biāo)注了相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)。下列敘述錯誤的是（）

A.若通過PCR技術(shù)提取該目的基因，應(yīng)該選用引物a和引物cB.構(gòu)建表達(dá)載體時應(yīng)選用BamHⅠ和HindⅡ這兩種限制酶C.圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經(jīng)過四輪復(fù)制得到所需目的基因的分子數(shù)為8個D.只利用含四環(huán)素的培養(yǎng)基就可以直接篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞評卷人得分三、填空題(共8題，共16分)19、在課題1中，我們學(xué)習(xí)了稀釋涂布平板法。這一方法常用來統(tǒng)計樣品中_________________的數(shù)目。當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，____________________。20、人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)一一培養(yǎng)基。其中，配制成的_______________的基質(zhì)稱為液體培養(yǎng)基，配制成的固體狀態(tài)的基質(zhì)稱為________________________。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑_______________________后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基，它是實(shí)驗室中最常用的培養(yǎng)基之一。微生物在_________________培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。（瓊脂是一種從紅藻中提取的____________________。瓊脂在98℃以上熔化，在44℃以下凝固，在常規(guī)培養(yǎng)條件下呈現(xiàn)固態(tài)。）21、載體具備的條件：①_____。②具有一至多個限制酶切點(diǎn)，供外源DNA片段插入。③______。22、為了避免外源DNA等因素污染，PCR實(shí)驗中使用的微量離心管、槍頭、緩沖液以及蒸餾水等在使用前必須進(jìn)行_____________。而使用的緩沖液并在__________℃存儲。23、DNA的粗提取實(shí)驗中，如果實(shí)驗材料是非哺乳動物如雞血細(xì)胞，需要在雞血細(xì)胞中加入一定量的____________，如果實(shí)驗材料是植物細(xì)胞，需要先使用_______________溶解細(xì)胞膜。24、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。

組織培養(yǎng)技術(shù)除了在農(nóng)業(yè)上的應(yīng)用外，還廣泛應(yīng)用于另一個重要的領(lǐng)域，即______。25、應(yīng)用：______（微型繁殖、作物脫毒、神奇的人工種子）、______、細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。26、動物細(xì)胞培養(yǎng)的條件：_____、_____、_____、_____等。評卷人得分四、判斷題(共3題，共21分)27、釀酒酵母的最適生長溫度為30度。()A.正確B.錯誤28、對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域，是因為微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單、生長繁殖快、對環(huán)境因素敏感和容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作等優(yōu)點(diǎn)。（選擇性必修3P101）()A.正確B.錯誤29、“設(shè)計試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要對胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。()A.正確B.錯誤評卷人得分五、實(shí)驗題(共2題，共18分)30、（1）在大腸桿菌培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮______、______和滲透壓等條件。由于該細(xì)菌具有體積小、結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、______、______等優(yōu)點(diǎn)；因此常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗材料。

（2）在微生物培養(yǎng)操作過程中，為防止雜菌污染，需對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行________（消毒、滅菌）；操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和______；靜止空氣中的細(xì)菌可用紫外線殺滅，其原因是紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能__________。

（3）若用稀釋涂布平板法計數(shù)大腸桿菌活菌的個數(shù)，要想使所得估計值更接近實(shí)際值，除應(yīng)嚴(yán)格操作、多次重復(fù)外，還應(yīng)保證待測樣品稀釋的_______。

（4）通常，對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀、大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的____________。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是_________。

（6）若用大腸桿菌進(jìn)行實(shí)驗，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過_______處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。31、黏多糖貯積癥是由IDUA基因突變導(dǎo)致的遺傳病。科研人員對此病的治療進(jìn)行相關(guān)研究。

(1)黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因由于堿基對___________造成突變，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變但提前出現(xiàn)終止密碼子，最終導(dǎo)致合成的IDUA酶分子量___________；與正常IDUA酶的空間結(jié)構(gòu)差異顯著而失去活性，積累過多的黏多糖無法及時清除，造成人體多系統(tǒng)功能障礙。

(2)抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)、功能相同，但它的反密碼子可以與終止密碼子配對。在上述這一類突變基因的翻譯過程中，加入sup-tRNA可以發(fā)揮的作用是___________；從而誘導(dǎo)通讀獲得有功能的全長蛋白。

(3)不同的sup-tRNA可以攜帶不同氨基酸；為比較它們的通讀效果，科研人員進(jìn)行了相關(guān)研究，實(shí)驗結(jié)果如圖。

注：“-”代表未加入。

據(jù)圖分析，實(shí)驗組將___________基因?qū)胧荏w細(xì)胞，并采用___________技術(shù)檢測導(dǎo)入基因的表達(dá)情況。據(jù)結(jié)果分析，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能___________。

(4)科研人員利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠及IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，檢測肝臟細(xì)胞IDUA酶活性和組織黏多糖的積累量，與不治療的小鼠相比較，實(shí)驗結(jié)果為_____________，表明攜帶酪氨酸的sup-tRNA可以治療黏多糖貯積癥。評卷人得分六、綜合題(共3題，共15分)32、類胡蘿卜素具有抗癌；降血脂等多種生物學(xué)功能。P蛋白是催化類胡蘿卜素形成的關(guān)鍵酶；研究者從裙帶菜中克隆了P基因，按下圖所示流程進(jìn)行基因工程操作。

（1）研究者從裙帶菜中提取了總RNA，利用逆轉(zhuǎn)錄方法獲得_________（作為模板），設(shè)計特異性_________，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到P基因。將P基因與質(zhì)粒載體重組時，需要使用的酶包括_________。流程圖中①_______菌，②_________技術(shù)。

（2）隨機(jī)選取9株轉(zhuǎn)基因苗，利用PCR、電泳檢測的結(jié)果如圖2，分析結(jié)果說明沒有成功轉(zhuǎn)入P基因的植株是_________。檢測P基因的mRNA相對含量，結(jié)果如圖3，研究者選擇轉(zhuǎn)基因煙草植株2進(jìn)行后續(xù)研究，請說明理由_________。

（3）同學(xué)A說：“因為大腸桿菌菌落本身無色，所以可以通過觀察菌落顏色，檢測P基因在工程菌株1中是否表達(dá)”。你是否同意他的說法，請說明理由___________。

（4）請預(yù)期基因工程菌株1的可能應(yīng)用___________。33、2020年諾貝爾化學(xué)獎授予“CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)”的發(fā)明者；以表彰他們在基因組編輯領(lǐng)域的貢獻(xiàn)。CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)能對基因進(jìn)行定點(diǎn)編輯，其原理是由一條單鏈向?qū)NA（sgR-NA）引導(dǎo)核酸內(nèi)切酶Cas9到一個特定的基因位點(diǎn)進(jìn)行切割（如圖）?；卮鹣铝袉栴}：

(1)CRISPR復(fù)合體中的sgRNA的主要功能是_____，Cas9蛋白催化斷裂的化學(xué)鍵位于_____之間。若采用基因工程的方法獲得Cas9蛋白，構(gòu)建重組質(zhì)粒需要的酶是_____。

(2)一般來說，在使用CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)對不同基因進(jìn)行編輯時，應(yīng)使用Cas9和_____（填“相同”或“不同”）的sgRNA進(jìn)行基因的相關(guān)編輯。

(3)若將CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)培育轉(zhuǎn)基因生物，與傳統(tǒng)的基因工程相比，其明顯優(yōu)點(diǎn)是_____。

(4)通過上述介紹，你認(rèn)為CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)在_____（寫出兩點(diǎn)）等方面有廣闊的應(yīng)用前景。34、犬細(xì)小病毒（CPV）主要感染幼犬；傳染性極強(qiáng)，死亡率也高。利用小鼠制備抗CPV單克隆抗體的基·本流程如圖所示。回答下列問題：

(1)制備單克隆抗體依賴的生物學(xué)技術(shù)有__________和__________。步驟①中，用滅活的CPV免疫小鼠需要在一定時間內(nèi)間隔注射3次，其目的是___________。

(2)經(jīng)過步驟②后獲得的是多種類型的雜交細(xì)胞，原因是__________。對雜交細(xì)胞用特定的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選得到雜交瘤細(xì)胞，對雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行__________；經(jīng)過多次篩選才能獲得足夠數(shù)量的能分泌抗CPV抗體的細(xì)胞。

(3)體外培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞后從培養(yǎng)液中提取到抗CPV單克隆抗體。雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)液中有各種營養(yǎng)物質(zhì)，還需要添加__________以補(bǔ)充細(xì)胞生長所需的未知營養(yǎng)物質(zhì)。

(4)對疑似感染CPV的幼犬進(jìn)行確診時，可用獲得的抗CPV單克隆抗體進(jìn)行___________檢測。參考答案一、選擇題(共9題，共18分)1、A【分析】【分析】

單克隆抗體的制備過程中；要經(jīng)過兩次篩選，第一次篩選是為了獲得雜交瘤細(xì)胞，需要用到特定的選擇培養(yǎng)基，第二次篩選是為了得到能產(chǎn)生所需要的特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。

【詳解】

在單克隆抗體制備過程中；骨髓瘤細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞誘導(dǎo)融合后，先用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞，在這種培養(yǎng)基上不能存活；增殖的細(xì)胞有：未融合的細(xì)胞，同種核相融合的細(xì)胞，即①B淋巴細(xì)胞、②骨髓瘤細(xì)胞、③B淋巴細(xì)胞自身融合、④骨髓瘤細(xì)胞自身融合均不可存活，而⑤骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、⑥骨髓瘤細(xì)胞與漿細(xì)胞融合屬于雜交瘤細(xì)胞，能在特定的選擇培養(yǎng)基上存活、增殖。

故選A。

【點(diǎn)睛】

解答本題的關(guān)鍵是明確單克隆抗體的制備過程，以及兩次篩選的目的。2、D【分析】【分析】

1；生殖性克隆就是以產(chǎn)生新個體為目的克隆。即用生殖技術(shù)制造完整的克隆人。目的是產(chǎn)生一個獨(dú)立生存的個體。于此相對的是治療性克隆；指的是產(chǎn)生研究所用的克隆細(xì)胞，不產(chǎn)生可獨(dú)立生存的個體。

2；中國政府禁止生殖性克隆人；堅持四不原則(不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗)不反對治療性克隆人。

【詳解】

A；生殖性克隆人屬于無性繁殖；不能豐富人類基因的多樣性，A錯誤；

B；生殖性克隆人采用的技術(shù)有核移植和胚胎移植；不涉及重組DNA技術(shù)，B錯誤；

C；克隆技術(shù)不成熟；也存在倫理問題，C錯誤；

D；我國政府不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人實(shí)驗；D正確。

故選D。3、C【分析】【分析】

對微生物的基因改造是基因工程中研究最早；最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域；這是因為微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單、生長繁殖快、對環(huán)境因素敏感和容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作等優(yōu)點(diǎn)。

【詳解】

A；微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單的優(yōu)點(diǎn)；便于研究，A正確；

B；微生物的生長周期短；具有生長繁殖快的優(yōu)點(diǎn)，B正確；

C；微生物對環(huán)境因素敏感；如在某種抗生素的環(huán)境中不能生存，C錯誤；

D；微生物的遺傳物質(zhì)簡單；具有容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作的優(yōu)點(diǎn)，D正確。

故選C。4、B【分析】微生物常見的接種的方法①平板劃線法：將已經(jīng)熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板；接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)。在劃線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數(shù)逐漸減少，最后可能形成單個菌落。

②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經(jīng)過大量稀釋后；均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經(jīng)培養(yǎng)后可形成單個菌落。

【詳解】

A；平板劃線法要求要連續(xù)多次劃線；且除了第一次劃線外，每一次劃線的起點(diǎn)都是上一次劃線的終點(diǎn)，逐步稀釋成單個菌，A正確；

B；接種環(huán)每次使用前都要進(jìn)行灼燒滅菌；B錯誤；

C；如果菌液本來濃度不高；則可以適當(dāng)降低稀釋倍數(shù)，C正確；

D；充分稀釋和連續(xù)劃線的目的都是為了使形成的菌落是由單一的細(xì)菌細(xì)胞繁殖而成；D正確。

故選B。

【點(diǎn)睛】5、B【分析】【分析】

受精是精子與卵子結(jié)合形成合子(即受精卵）的過程；包括受精前的準(zhǔn)備階段和受精階段。在自然條件下，哺乳動物的受精在輸卵管內(nèi)完成。

【詳解】

A；收集的精子需誘導(dǎo)獲能后才能與成熟的卵細(xì)胞體外受精；A正確；

B；采集來的初級卵母細(xì)胞需要進(jìn)一步成熟后；才能用于體外受精，B錯誤；

C；早期胚胎植入子宮后需對母體進(jìn)行妊娠檢查；以便確認(rèn)胚胎成功著床，C正確；

D；試管嬰兒技術(shù)通過體外受精；解決了某些不孕夫婦的生育問題，D正確。

故選B。6、C【分析】【分析】

基因工程是將目的基因在體外接入基因表達(dá)載體；然后導(dǎo)入活細(xì)胞，并在活細(xì)胞中表達(dá)該基因，以改變生物原有的遺傳特性；獲得新品種、生產(chǎn)新產(chǎn)品的遺傳技術(shù)。限制酶能夠識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂，DNA連接酶能在兩個DNA片段之間形成磷酸二酯鍵，DNA聚合酶是用來將單個脫氧核苷酸連接起來形成脫氧核糖核酸鏈，是DNA復(fù)制需要的酶，基因工程所用的工具酶是限制酶和DNA連接酶；

【詳解】

A；基因工程所用的工具酶是限制酶和DNA連接酶；A錯誤；

B；構(gòu)成重組質(zhì)粒的限制酶并不一定只能用一種酶切割質(zhì)粒和目的基因；為防止出現(xiàn)自身環(huán)化，需要盡量用兩種限制酶切割質(zhì)粒和目的基因，B錯誤；

C；選用細(xì)菌作為重組質(zhì)粒的受體細(xì)胞是因為細(xì)菌繁殖快；并且遺傳物質(zhì)少，C正確；

D；目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后需要檢測和鑒定；不一定能成功實(shí)現(xiàn)表達(dá)，D錯誤。

故選C。7、C【分析】【分析】

植物的體細(xì)胞雜交是將不同植物的細(xì)胞通過細(xì)胞融合技術(shù)形成雜種細(xì)胞；進(jìn)而利用植物的組織培養(yǎng)將雜種細(xì)胞培育成多倍體的雜種植株。植物體細(xì)胞雜交依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動性和植物細(xì)胞的全能性。

【詳解】

A；獲得原生質(zhì)體需要去掉植物的細(xì)胞壁；植物細(xì)胞壁主要由纖維素和果膠組成，所以需要使用纖維素酶和果膠酶，A正確；

B、雜交過程的關(guān)鍵是原生質(zhì)體的融合，人工誘導(dǎo)原生質(zhì)體融合的方法有物理法（電融合法、離心法等）和化學(xué)法（聚乙二醇融合法、高Ca2+—高pH融合法等）；B正確；

C；若提供A、B細(xì)胞的植株都為二倍體；則圖中雜種植株應(yīng)該為異源四倍體且是可育的，C錯誤；

D；培養(yǎng)愈傷組織發(fā)育為雜種植株的培養(yǎng)基為MS培養(yǎng)基；MS培養(yǎng)基中需要加入蔗糖和一些植物激素（主要是生長素和細(xì)胞分裂素）等，D正確。

故選C。8、C【分析】【分析】

1；基因工程又叫DNA重組技術(shù)；是指按照人們的意愿，進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計，并通過體外DNA重組和轉(zhuǎn)基因等技術(shù)，賦予生物以新的遺傳特性，從而創(chuàng)造出更符合人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。

2；細(xì)胞工程包括植物細(xì)胞工程和動物細(xì)胞工程；植物細(xì)胞工程包括植物組織培養(yǎng)和植物體細(xì)胞雜交等技術(shù)，動物細(xì)胞工程包括動物細(xì)胞培養(yǎng)、動物細(xì)胞融合和單克隆抗體的制備等。

3；胚胎工程包括胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞等技術(shù)。

【詳解】

抗蟲棉的培育采用了基因工程技術(shù)；番茄－馬鈴薯的創(chuàng)造采用了細(xì)胞工程中的體細(xì)胞雜交技術(shù)；單克隆抗體的制備采用了動物細(xì)胞融合和動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；屬于細(xì)胞工程；胚胎分割技術(shù)屬于胚胎工程。C正確。

故選C。

【點(diǎn)睛】9、D【分析】【分析】

限制酶的選擇依據(jù)：（1）根據(jù)目的基因兩端的限制酶切點(diǎn)確定限制酶的種類：①應(yīng)選擇位于目的基因兩端的限制酶；②不能選擇目的基因內(nèi)部的限制酶。（2）根據(jù)質(zhì)粒的特點(diǎn)確定限制酶的種類：①通常選擇與切割目的基因相同的限制酶；以確保出現(xiàn)相同的黏性末端；②在只有一種標(biāo)記基因時，選擇的限制酶不能破壞標(biāo)記基因。

【詳解】

A；構(gòu)建L1-GFP融合基因需要先用內(nèi)切酶處理獲得L1基因和GFP基因；并將二者連接，故需要用到E1、E2、E4三種酶，A正確；

B；圖中限制酶E1—E4處理產(chǎn)生的黏性末端均不相同；E1、E4雙酶切可以有效減少載體自身連接和融合基因自身連接，保證L1-GFP融合基因與載體準(zhǔn)確連接，B正確；

C；綠色熒光蛋白（GFP）在紫外光或藍(lán)光激發(fā)下會發(fā)出綠色熒光；這一特性可用于檢測細(xì)胞中目的基因的表達(dá)，C正確；

D；為了獲得L1蛋白；可將表達(dá)載體轉(zhuǎn)入受精卵中而不是乳腺細(xì)胞，用于培育乳汁中含有L1蛋白的轉(zhuǎn)基因羊，D錯誤。

故選D。二、多選題(共9題，共18分)10、A:C【分析】【分析】

分析題圖：小鼠的卵細(xì)胞體外培養(yǎng)到囊胚時期；取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞培養(yǎng)成孤雌單倍體ES細(xì)胞，取大鼠的精子體外培養(yǎng)到囊胚時期，取內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞培養(yǎng)成孤雄單倍體ES細(xì)胞，兩種ES細(xì)胞融合成異種雜合二倍體胚胎干細(xì)胞，據(jù)此答題。

【詳解】

A；圖中的單倍體囊胚1最可能是由小鼠的卵子（卵細(xì)胞）發(fā)育而來；所采用的技術(shù)應(yīng)為早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)，圖中的單倍體ES應(yīng)取自囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞，該部位的細(xì)胞具有發(fā)育的全能性，A正確；

B；培養(yǎng)過程中使用的培養(yǎng)液除含有一些無機(jī)鹽和有機(jī)鹽外；還需添加維生素、激素、氨基酸、核苷酸等營養(yǎng)成分以及血清等物質(zhì)，為避免雜菌污染，需要加入抗生素，B錯誤；

CD；ES在形態(tài)上表現(xiàn)為體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯；且在體外培養(yǎng)時可以維持只增殖不分化的狀態(tài)，C正確、D錯誤。

故選AC。11、A:B【分析】【分析】

動物細(xì)胞培養(yǎng)的原理利用的是細(xì)胞的增殖；培養(yǎng)過程需要無毒無菌的環(huán)境；充足的營養(yǎng)、適宜的溫度和pH以及適宜的氣體環(huán)境。

【詳解】

A；細(xì)胞體外培養(yǎng)所需的營養(yǎng)物質(zhì)與體內(nèi)基本相同；需要加入血清，以補(bǔ)充培養(yǎng)基中缺乏的物質(zhì)，A正確；

B；在體外連續(xù)培養(yǎng)時；常采用胰蛋白酶或者膠原蛋白酶將細(xì)胞分開，B正確；

C；骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞可以分化成胰島樣組織細(xì)胞；但沒有發(fā)育成一個完整的個體人，不能說明其具有發(fā)育的全能性，C錯誤；

D；由于導(dǎo)入的是胰島樣細(xì)胞；與血型無關(guān)，治療成功后康復(fù)者的血型不可能發(fā)生改變，D錯誤。

故選AB。12、A:B:C:D【分析】【分析】

分析曲線圖：引物2的Tm高于引物1；說明引物2的熱穩(wěn)定性較高。

【詳解】

A；PCR過程是目的基因DNA受熱變性后解鏈為單鏈；引物與單鏈互補(bǔ)結(jié)合，合成的子鏈在Taq聚合酶的作用下進(jìn)行延伸，所以兩引物分別與DNA的兩條互補(bǔ)單鏈結(jié)合，是子鏈延伸的起點(diǎn)，A正確；

B；PCR過程中；復(fù)性溫度應(yīng)低于引物的Tm值以提高PCR效率，B正確；

C；DNA含有的氫鍵數(shù)越多；其熱穩(wěn)定性越高，而A和T堿基對間有兩個氫鍵，C和G堿基對間有三個氫鍵，曲線圖顯示：引物2的Tm高于引物1，說明引物2的熱穩(wěn)定性較高，因此若兩引物的脫氧核苷酸數(shù)相同，推測引物2的（G＋C）含量較高，C正確；

D；適當(dāng)減少引物2的脫氧核苷酸數(shù)；會降低引物2的熱穩(wěn)定性，可使其Tm值接近引物1，D正確。

故選ABCD。13、A:B【分析】【分析】

單克隆抗體的制備。

（1）制備產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞：向免疫小鼠體內(nèi)注射特定的抗原；然后從小鼠脾內(nèi)獲得相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞。

（2）獲得雜交瘤細(xì)胞。①將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與脾細(xì)胞中形成的B淋巴細(xì)胞融合。②用特定的選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；該雜種細(xì)胞既能夠增殖又能產(chǎn)生抗體。

（3）克隆化培養(yǎng)和抗體檢測。

（4）將雜交瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)或注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖。

（5）提取單克隆抗體：從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠的腹水中提取。

【詳解】

A；單克隆抗體制備過程中；需要給小白鼠注射腫瘤細(xì)胞表面抗原，刺激小鼠產(chǎn)生體液免疫，才能得到能產(chǎn)生特定抗體的B淋巴細(xì)胞，A正確；

B；制備單克隆抗體的過程中至少要經(jīng)過兩次原理和目的均不同的篩選過程；第一次篩選雜交瘤細(xì)胞，第二次篩選能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞，B正確；

C；生物導(dǎo)彈綜合利用了單克隆抗體的定向制導(dǎo)作用和堿性磷酸酶的特異性殺傷能力；C錯誤；

D；根據(jù)題干信息“通過活化多柔比星使其對DNA造成損傷；進(jìn)而抑制以DNA為模板進(jìn)行的生理活動”，說明多柔比星還可以抑制細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄過程，而不增殖的細(xì)胞也具有轉(zhuǎn)錄過程，D錯誤。

故選AB。14、A:D【分析】【分析】

培養(yǎng)基的概念及營養(yǎng)構(gòu)成。

（1）概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求；配制出的供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。

（2）營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水；碳源、氮源、無機(jī)鹽；此外還要滿足微生物生長對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求．例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時需將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌時需將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧微生物時則需要提供無氧的條件。

【詳解】

A；平板上不含任何生長因子；若倒成平板后直接培養(yǎng)，出現(xiàn)菌落說明已被雜菌感染，因為該嗜熱菌不能在缺乏生長因子的培養(yǎng)基中生長，A正確；

B；制備平板時；先滅菌再倒平板，B錯誤；

C；圖中菌落生活在乙丙區(qū)域之間；說明同時需要乙和丙，C錯誤；

D；不同菌種所需生長因子不同；可利用生長圖形法篩選菌種，D正確。

故選AD。15、B:C【分析】【分析】

基因工程是指按人們的意愿；進(jìn)行嚴(yán)格的設(shè)計，并通過體外重組DNA分子和轉(zhuǎn)基因技術(shù)，獲得人們需要的新的生物類型和生物產(chǎn)品。其基因改變的方向是認(rèn)為決定的。

【詳解】

A；科學(xué)家將必需氨基酸含量多的的蛋白質(zhì)相關(guān)基因?qū)胫参镏校换蛘吒淖冞@些氨基酸合成途徑中某種關(guān)鍵酶的活性，以提高氨基酸的含量，A錯誤；

B；可以將某些比如抗逆性、高產(chǎn)等基因?qū)胫参矬w內(nèi)；培育出高產(chǎn)、穩(wěn)產(chǎn)、品質(zhì)優(yōu)良和抗逆性強(qiáng)的作物，B正確；

C；利用基因工程可以改造植物細(xì)胞的基因；使其能夠生產(chǎn)人類所需要的藥物，比如紫草寧等藥品，C正確；

D；用基因工程培育的抗蟲植物只含有抗蟲特性；但不能抗病毒，D錯誤。

故選BC。16、B:D【分析】【分析】

T線和C線處同時顯示橫杠；即陽性，若樣品中不含病毒，樣品經(jīng)過結(jié)合墊時由于不存在病毒抗原，則不存在抗原抗體特異性結(jié)合，顯色組分仍會隨樣品繼續(xù)向前運(yùn)動，由于不存在病毒抗原，抗體不能與待測抗原結(jié)合，故在T線不會顯色。

【詳解】

A；分析題圖可知；若有抗原存在，T線上的抗體能夠結(jié)合抗原（該抗體經(jīng)過結(jié)合墊時已經(jīng)與膠體金抗體結(jié)合），則T線顯色，過量的膠體金抗體會移動到C線處與二抗結(jié)合，C線也會顯色，故樣品中含有待測抗原時，兩條線均會顯色，A正確；

B；題圖中過量的膠體金抗體沒有結(jié)合抗原；而是與二抗結(jié)合，B錯誤；

C；據(jù)題意可知；樣本中含有某種抗原，就會首先被結(jié)合墊上的膠體金標(biāo)記抗體結(jié)合，形成“抗原—金標(biāo)抗體”復(fù)合物，所以結(jié)合墊中固定了金標(biāo)抗體，C正確；

D；若T線不顯色；說明樣品中沒有抗原，D錯誤。

故選BD。17、A:C:D【分析】分析題圖：圖示表示煙草植物組織培養(yǎng)過程的流程圖；其中①表示獲取外植體，②表示脫分化，③表示再分化，④表示從愈傷組織中獲取細(xì)胞X，⑤表示進(jìn)一步發(fā)育形成幼苗。

【詳解】

A；對過程①獲取的根組織塊應(yīng)進(jìn)行消毒處理；如果采用滅菌技術(shù)，會使根組織塊失去活力，無法進(jìn)行組織培養(yǎng)，A錯誤；

B；過程②是脫分化形成愈傷組織的過程；需要在避光的環(huán)境中進(jìn)行，B正確；

C；過程③發(fā)生再分化；其實(shí)質(zhì)是基因的選擇性表達(dá)，C錯誤；

D；可以通過誘導(dǎo)使細(xì)胞產(chǎn)生突變；但突變是不定向的，D錯誤。

故選ACD。18、B:D【分析】【分析】

分析題圖：構(gòu)建表達(dá)載體時；不能選用限制酶BamHⅠ，否則會導(dǎo)致兩種抗性基因都被破壞，因此應(yīng)該選擇Bc1I和HindⅢ這兩種限制酶，根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c。

【詳解】

A；PCR技術(shù)要求兩種引物分別和目的基因的兩條單鏈結(jié)合；根據(jù)引物的延伸方向，所用的引物為圖乙中引物a和引物c，A正確；

B；根據(jù)圖甲可知；BamHⅠ會導(dǎo)致兩種抗性基因都被破壞，同時為防止目的基因自身環(huán)化，因此只能選BclI和HindⅢ兩種限制酶切割，B錯誤；

C；圖乙中一個DNA分子在PCR儀中經(jīng)過四輪復(fù)制可得到16個DNA片段；其中所需目的基因的分子數(shù)為8個，C正確；

D；由于選擇BclI和HindⅢ這兩種限制酶；破壞了氨芐青霉素抗性基因，但沒有破壞四環(huán)素抗性基因，因此應(yīng)該先用含四環(huán)素的培養(yǎng)基篩選出含有基因表達(dá)載體和普通質(zhì)粒的大腸桿菌，再用含氨芐青霉素的培養(yǎng)基篩選含重組質(zhì)粒的大腸桿菌，培養(yǎng)基加氨芐青霉素含普通質(zhì)粒的大腸桿菌能生存，而含重組質(zhì)粒的不能生存，從而篩選出成功導(dǎo)入表達(dá)載體的受體細(xì)胞，D錯誤。

故選BD。三、填空題(共8題，共16分)19、略

【解析】①.活菌②.培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌20、略

【解析】①.液體狀態(tài)②.固體培養(yǎng)基③.瓊脂④.固體⑤.多糖21、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】能在受體細(xì)胞中復(fù)制并穩(wěn)定保存具有標(biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇22、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】高壓滅菌—2023、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】蒸餾水洗滌劑和食鹽24、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)。25、略

【分析】【分析】

【詳解】

略【解析】植物繁殖的新途徑作物新品種的培育（單倍體育種、突變體利用）26、略

【分析】略【解析】營養(yǎng)無菌、無毒的環(huán)境適宜的溫度、pH和滲透壓氣體環(huán)境四、判斷題(共3題，共21分)27、B【分析】【詳解】

釀酒酵母的最適生長溫度是28℃；但在發(fā)酵過程中，一般將溫度控制在18-30℃，這是因為果皮表面附著的野生酵母菌可能有多種（有多種酵母菌參與了發(fā)酵過程），從實(shí)踐的角度看，大致控制溫度范圍比較簡單易行。

故本說法錯誤。28、A【分析】【詳解】

微生物具有生理結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)簡單的優(yōu)點(diǎn)，便于研究，生長周期短，具有生長繁殖快的優(yōu)點(diǎn)，遺傳物質(zhì)簡單，具有容易進(jìn)行遺傳物質(zhì)操作的優(yōu)點(diǎn)，對環(huán)境因素敏感，因此對微生物的基因改造是基因工程中研究最早、最廣泛和取得實(shí)際應(yīng)用成果最多的領(lǐng)域，這句話是正確的。29、A【分析】【分析】

“設(shè)計試管嬰兒”在植入前需要對胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；而“試管嬰兒”是解決不孕不育等問題，不需要進(jìn)行遺傳學(xué)診斷。

【詳解】

“設(shè)計試管嬰兒”與“試管嬰兒”相比在植入前需要通過多種技術(shù)手段對胚胎進(jìn)行遺傳學(xué)診斷；以便選擇合適的設(shè)計出來的試管嬰兒。

故正確五、實(shí)驗題(共2題，共18分)30、略

【分析】【分析】

1；大腸桿菌屬于細(xì)菌；是原核生物。微生物營養(yǎng)成分主要有碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等，另外還需要注意滲透壓、溫度、pH等條件。大腸桿菌常作為遺傳學(xué)研究的實(shí)驗材料．微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌技術(shù)，防止外來雜菌的污染。

2；微生物培養(yǎng)的關(guān)鍵是無菌操作。使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外一切微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子的過程稱為滅菌；常用的方法有灼燒滅菌、干熱滅菌和高壓蒸汽滅菌。消毒是指用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體體表或內(nèi)部的一部分微生物的過程。常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外線或化學(xué)藥物消毒法等。

【詳解】

（1）大腸桿菌具有體積??；結(jié)構(gòu)簡單、變異類型容易選擇、易培養(yǎng)、生活周期短等優(yōu)點(diǎn)；培養(yǎng)過程中，除考慮營養(yǎng)條件外，還要考慮溫度、酸堿度和滲透壓等條件。

（2）滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物；所以對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿進(jìn)行滅菌；消毒使用較為溫和的物理或化學(xué)方法，僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物，操作者的雙手需要進(jìn)行清洗和消毒，紫外線能使蛋白質(zhì)變性，還能損傷DNA的結(jié)構(gòu)。

（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋；然后將不同稀釋度的菌液，分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，應(yīng)保證樣品稀釋的比例適合。

（4）對獲得的純菌種還可以依據(jù)菌落的形狀；大小等菌落特征對細(xì)菌進(jìn)行初步的鑒定。

（5）培養(yǎng)大腸桿菌時；在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應(yīng)采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（6）因為有的大腸桿菌會釋放一種強(qiáng)烈的毒素；并可能導(dǎo)致腸管出現(xiàn)嚴(yán)重癥狀，使用過的培養(yǎng)基及其培養(yǎng)物必須經(jīng)過滅菌處理后才能丟棄，以防止培養(yǎng)物的擴(kuò)散。

【點(diǎn)睛】

本題主要考查微生物培養(yǎng)的相關(guān)知識，要求考生能夠識記大腸桿菌的培養(yǎng)條件以及其作為遺傳實(shí)驗的優(yōu)點(diǎn)，區(qū)分掌握不同材料消毒和滅菌的方法，識記菌種鑒定的方法等，屬于基礎(chǔ)題?！窘馕觥竣?溫度②.酸堿度③.易培養(yǎng)④.生活周期短⑤.滅菌⑥.消毒⑦.損傷DNA的結(jié)構(gòu)⑧.比例合適⑨.鑒定(或分類)⑩.將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生.?.滅菌31、略

【分析】【分析】

基因突變是指DNA分子中發(fā)生堿基對的替換；增添和缺失；而引起的基因結(jié)構(gòu)的改變。翻譯是指在核糖體上，以mRNA為模板、以氨基酸為原料合成蛋白質(zhì)的過程，該過程還需要tRNA來運(yùn)轉(zhuǎn)氨基酸。

密碼子由位于mRNA上決定一個氨基酸的三個相鄰的堿基組成。終止密碼子的作用是終止翻譯過程。

基因工程中檢測目的基因在受體細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)可以用抗原-抗體雜交技術(shù)。

【詳解】

（1）由題干信息可知；黏多糖貯積癥患者細(xì)胞中IDUA基因突變后，轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度不變，說明其沒有發(fā)生堿基對的增添和缺失，因為這兩者改變會導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄出的mRNA長度改變，因此推測其基因突變是由于堿基對替換。由于終止密碼子提前出現(xiàn)，導(dǎo)致翻譯提前終止，肽鏈變短，IDUA酶分子量變小，空間結(jié)構(gòu)改變而失活。

（2）由題干可知；抑制性tRNA（sup-tRNA）可以最終誘導(dǎo)核糖體通讀mRNA上的遺傳信息合成具有功能的全長蛋白，并且抑制性tRNA（sup-tRNA）與普通tRNA的結(jié)構(gòu)；功能相同，據(jù)此推測該抑制性tRNA可以攜帶氨基酸至核糖體并與終止密碼子堿基配對使翻譯過程繼續(xù)。

（3）本實(shí)驗?zāi)康氖潜容^攜帶不同氨基酸的sup-tRNA的通讀效果；需要保證實(shí)驗組細(xì)胞含有突變IDUA基因，即其不能合成具有正常功能的IDUA酶（防止正常IDUA酶對實(shí)驗結(jié)果產(chǎn)生干擾），同時保證在不同的實(shí)驗組細(xì)胞中可以轉(zhuǎn)錄出攜帶不同中氨基酸的sup-tRNA，因此實(shí)驗組中受體細(xì)胞中應(yīng)該含有導(dǎo)入攜帶不同氨基酸的sup-tRNA基因和突變IDUA基因。若要判斷各個實(shí)驗組細(xì)胞中攜帶不同氨基酸的sup-tRNA是否成功誘導(dǎo)了具有功能的IDUA酶，可以采用該酶的特異性抗體對其進(jìn)行檢測，即進(jìn)行抗原-抗體雜交。分析題圖可知，與對照組（含正常IDUA基因的組）相比，含攜帶酪氨酸的sup-tRNA的受體細(xì)胞中表達(dá)的全長IDUA蛋白量比其他實(shí)驗組都多，說明其能有效恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成，且效果最好。

（4）由以上實(shí)驗可知，攜帶酪氨酸的sup-tRNA能有效誘導(dǎo)核糖體對突變IDUA基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA進(jìn)行通讀，進(jìn)而產(chǎn)生具有正常功能的IDUA酶，因此利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA突變基因純合小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA突變基因純合小鼠相比，治療組小鼠的IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；同時，利用攜帶酪氨酸的sup-tRNA對IDUA基因敲除小鼠進(jìn)行治療，與不進(jìn)行治療的IDUA基因敲除小鼠相比，由于二者都不含有IDUA基因，則其細(xì)胞內(nèi)都沒有相應(yīng)mRNA，因此攜帶酪氨酸的sup-tRNA無法發(fā)揮作用，最終導(dǎo)致治療組與不治療組的IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異?！窘馕觥?1)替換減少。

(2)識別終止密碼子并攜帶氨基酸至核糖體使翻譯過程繼續(xù)。

(3)攜帶不同氨基酸的suptRNA基因和變IDUA抗原一抗體雜交恢復(fù)細(xì)胞中全長IDUA蛋白的合成；且效果最好。

(4)IDUA突變基因純合小鼠IDUA酶活性高，組織黏多糖積累量少；IDUA基因敲除小鼠IDUA酶活性與組織黏多糖積累量無明顯差異六、綜合題(共3題，共15分)32、略

【分析】【分析】

基因工程技術(shù)的基本步驟：（1）目的基因的獲?。悍椒ㄓ袕幕蛭膸熘蝎@?。焕肞CR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成。（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟；基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動子、終止子和標(biāo)記基因等。（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱游锛?xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法。（4）目的基因的檢測與鑒定：分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

【詳解】

（1）逆轉(zhuǎn)錄是以RNA為模板；形成DNA的過程，研究者從裙帶菜中提取了總RNA，利用逆轉(zhuǎn)錄方法獲得CDNA，設(shè)計特異性引物，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到P基因。將P基因與質(zhì)粒載體重組時，需要使用的酶包括限制酶和DNA連接酶，流程圖中①農(nóng)桿菌，流程②是植物組織培養(yǎng)技術(shù)。

（2）從圖上可以看出；1和4電泳沒有條帶，說明沒有成功轉(zhuǎn)入P基因的植株。植株2的P基因轉(zhuǎn)錄量（mRNA相對含量）最高，推測可能合成的P蛋白最多，所以選擇轉(zhuǎn)基因煙草植株2進(jìn)行后續(xù)研究。

（3）同意；若工程菌的菌落顏色為黃色（或橙黃色），則表明P基因編碼的P蛋白發(fā)揮了催化形成類胡蘿卜素的功能