光學(xué)顯微鏡的認(rèn)識(shí)、使用及動(dòng)植物細(xì)胞的鏡下觀察.ppt

1、光學(xué)顯微鏡的認(rèn)識(shí)、使用及動(dòng)植物細(xì)胞的鏡下觀察,實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1.了解光學(xué)顯微鏡的基本構(gòu)造，學(xué)會(huì)規(guī)范的顯微鏡操作方法。 2.學(xué)習(xí)并掌握臨時(shí)裝片的制作與鏡下觀察，觀察動(dòng)植物細(xì)胞的不同。 3.學(xué)習(xí)徒手切片技術(shù)，觀察葉的橫切面結(jié)構(gòu)。 4.熟練掌握繪制生物學(xué)圖的基本方法。,實(shí)驗(yàn)原理 1、表面為曲面的玻璃或其他透明材料制成的光學(xué)透鏡可以使物體放大成像，光學(xué)顯微鏡就是利用這一原理將微小的物體放大到人眼足以觀察的尺寸。我們所用的顯微鏡采用兩級放大，分別由焦距很短的物鏡和焦距較長的目鏡組成。被觀察的物體位于物鏡的前方，被物鏡做第一級放大后成一倒立的實(shí)像，然后這一實(shí)像再被目鏡二級放大，成一虛像，人眼看到的就是虛像。其

2、放大的倍數(shù)為物鏡放大倍數(shù)于目鏡放大倍數(shù)的乘積。,2、玻片標(biāo)本類型按照制作標(biāo)本保存時(shí)間長短，分為永久玻片標(biāo)本和臨時(shí)玻片標(biāo)本。臨時(shí)玻片標(biāo)本的制作方法有三種，即切片、涂片、裝片。 3、生物簡圖要求作者從科學(xué)研究的角度出發(fā)，用科學(xué)的觀點(diǎn)去觀察所畫的生物材料，繪圖必須符合實(shí)際，實(shí)事求是。,實(shí)驗(yàn)器材 顯微鏡 鑷子 解剖針 刀片 載玻片 蓋玻片 毛筆 玻璃皿 牙簽 繪圖筆 繪圖紙 吸管 小西紅柿 新鮮菠菜 胡蘿卜,實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及方法 一、正置顯微鏡 1、安放 右手握住鏡臂，左手托住鏡座，使鏡體保持直立。桌面要清潔、平穩(wěn)，要選擇臨窗或光線充足的地方。單筒的一般放在左側(cè)，距離桌邊34厘米處。 2、清潔 檢查顯微鏡是

3、否有毛病，是否清潔，鏡身機(jī)械部分可用干凈軟布擦拭。透鏡要用擦鏡紙擦拭，如有膠或粘污，可用少量二甲苯清潔之。,3、對光 鏡筒升至距載物臺(tái)12厘米處，低倍鏡對準(zhǔn)通光孔。調(diào)節(jié)光圈和反光鏡，光線強(qiáng)時(shí)用平面鏡，光線弱時(shí)用凹面鏡，反光鏡要用雙手轉(zhuǎn)動(dòng)。若使用的為帶有光源的顯微鏡，可省去次步驟，但需要調(diào)節(jié)光亮度的旋鈕。 4、安裝標(biāo)本 將玻片放在載物臺(tái)上，注意有蓋玻片的一面一定朝上。用彈簧夾將玻片固定，轉(zhuǎn)動(dòng)平臺(tái)移動(dòng)器的旋鈕，使要觀察的材料對準(zhǔn)通光孔中央。,5、調(diào)焦 調(diào)焦時(shí)，先旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕慢慢降低鏡筒，并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到物鏡貼近玻片標(biāo)本，然后左眼自目鏡觀察，左手旋轉(zhuǎn)粗調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本物像時(shí)停止

4、，再用細(xì)調(diào)焦旋鈕回調(diào)清晰。 操作注意：不應(yīng)在高倍鏡下直接調(diào)焦；鏡筒下降時(shí)，應(yīng)從側(cè)面觀察鏡筒和標(biāo)本間的間距；要了解物距的臨界值。若使用雙筒顯微鏡，如觀察者雙眼視度有差異，可靠視度調(diào)節(jié)圈調(diào)節(jié)。另外雙筒可相對平移以適應(yīng)操作者兩眼間距。,6、觀察 若使用單筒顯微鏡，兩眼自然張開，左眼觀察標(biāo)本，右眼觀察記錄及繪圖，同時(shí)左手調(diào)節(jié)焦距，使物象清晰并移動(dòng)標(biāo)本視野。右手記錄、繪圖。鏡檢時(shí)應(yīng)將標(biāo)本按一定方向移動(dòng)視野，直至整個(gè)標(biāo)本觀察完畢，以便不漏檢，不重復(fù)。光強(qiáng)的調(diào)節(jié)：一般情況下，染色標(biāo)本光線宜強(qiáng)，無色或未染色標(biāo)本光線宜弱；低倍鏡觀察光線宜弱，高倍鏡觀察光線宜強(qiáng)。除調(diào)節(jié)反光鏡或光源燈以外，虹彩光圈的調(diào)節(jié)也十分重要

5、。,（1）低倍鏡觀察 觀察任何標(biāo)本時(shí)，都必須先使用低倍鏡，因?yàn)槠湟曇按?，易發(fā)現(xiàn)目標(biāo)和確定要觀察的部位。 （2）高倍鏡觀察 從低倍鏡轉(zhuǎn)至高倍時(shí)，只需略微調(diào)動(dòng)細(xì)調(diào)焦旋鈕，即可使物像清晰。使用高倍鏡時(shí)切勿使用粗調(diào)焦旋鈕，否則易壓碎蓋玻片并損傷鏡頭。轉(zhuǎn)動(dòng)物鏡轉(zhuǎn)換器時(shí)，不可用手指直接推轉(zhuǎn)物鏡，這樣容易使物鏡的光軸發(fā)生偏斜，轉(zhuǎn)換器螺紋受力不均勻而破壞，最后導(dǎo)致轉(zhuǎn)換器就會(huì)報(bào)廢。,（3）油鏡的觀察 先用低倍鏡及高倍鏡將被檢物體移至視野中央后，再換油鏡觀察。油鏡觀察前，應(yīng)將顯微鏡亮度調(diào)整至最亮，光圈完全打開。使用油鏡時(shí)，先在蓋玻片上滴加一滴香柏油（鏡油），然后降低鏡筒并從側(cè)面仔細(xì)觀察，直到油鏡浸入香柏油并貼近玻

6、片標(biāo)本，然后用目鏡觀察，并用細(xì)調(diào)焦旋鈕抬升鏡筒，直到看清標(biāo)本的焦段時(shí)停止并調(diào)節(jié)清晰。香柏油滴加要適量。油鏡使用完畢后一定要用擦鏡紙沾取二甲苯擦去香柏油，并再用干的擦鏡紙擦去多余二甲苯。,7、結(jié)束操作 觀察完畢，移去樣品，扭轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)換器，使鏡頭V字型偏于兩旁，反光鏡要豎立，降下鏡筒，擦抹干凈，并套上鏡套。若使用的是帶有光源的顯微鏡，需要調(diào)節(jié)亮度旋鈕將光亮度調(diào)至最暗，再關(guān)閉電源按鈕，以防止下次開機(jī)時(shí)瞬間過強(qiáng)電流燒壞光源燈,二、臨時(shí)裝片的制作 1、擦片 用潔凈的紗布（吸水紙）將載玻片和蓋玻片擦拭干凈。將擦拭干凈的載玻片和蓋玻片放在干凈的培養(yǎng)皿中，取時(shí)用鑷子，不要用手，避免污染。 2、滴水或染液 3、取材

7、 剖開番茄，用解剖針挑取其中少許成熟的果肉細(xì)胞。去菠菜葉下表皮時(shí)，用鑷子輕輕撕下。去口腔上皮細(xì)胞時(shí)，用消毒牙簽的鈍端在淑凈的口腔任一側(cè)的頰部輕刮幾下，次數(shù)不應(yīng)過多。,4、展平 將取下的材料迅速放入載玻片的水滴中，用解剖針展平。番茄果肉細(xì)胞和人的口腔上皮細(xì)胞應(yīng)用解剖針攪散。 5、蓋上蓋玻片 用鑷子夾起蓋玻片，讓其一端先接觸載玻片上的水滴端，再輕輕地蓋上，以免產(chǎn)生氣泡。 6、鏡下觀察并畫圖,二、徒手切片的制作 1、準(zhǔn)備夾持物 夾持物用刀從一端的中線縱向劈開，但不要劈到底，以加持葉片。 2、切取觀察材料 將準(zhǔn)備好的新鮮的葉子切去葉莖葉尖和葉緣，切成長寬都小于夾持物劈縫的長方片，放入夾持物劈縫中。 3

8、、握夾持物和持刀 用左手的拇指和食指捏緊夾有葉片的夾持物，并使劈縫與自己身體本身平行，拇指低于食指。夾持物上端略高于手指。右手拿刀，刀口朝自己，刀身放平，拇指壓緊刀身，捏緊刀片右下角。,4、拉切 拉切的刀先蘸水，在夾持物上端橫切一刀，使其表面平整。然后刀口對著夾持物，繼續(xù)拉切。拉切方向向著操作者，保持水平，速度要快，才能切的又薄又平。連續(xù)拉切后，將切下的薄片迅速刷入清水中備用。 5、在清水中選取最薄的切片制成臨時(shí)裝片。 6、鏡下觀察并繪圖。,三、繪圖 1、鏡下觀察 2、起草 按實(shí)體外形輪廓定一個(gè)比例分割點(diǎn)，并在紙上的適當(dāng)位置畫出這個(gè)點(diǎn)，通過這個(gè)點(diǎn)做一條對稱虛線，然后按照實(shí)體外形輪廓各部到虛線的距離遠(yuǎn)近分別定出各個(gè)點(diǎn)，然后用細(xì)的鉛筆將各個(gè)點(diǎn)連起來，即得到一個(gè)外形圖，內(nèi)部再按比例繪出。先得到略圖，然后再近一步詳繪加工使線條明晰、光滑、整潔。圖形應(yīng)偏左，以便右邊做標(biāo)注。,3、點(diǎn)點(diǎn)襯陰 將畫好的草圖，根據(jù)實(shí)體的薄厚、光線的明暗用鉛筆垂直在紙面上點(diǎn)出許許多多疏密不同粗細(xì)均勻的小圓點(diǎn)來表現(xiàn) 。實(shí)體厚、光線暗，用多而密的點(diǎn)來表現(xiàn)，反之用少而稀疏的點(diǎn)表現(xiàn)。明暗有過渡。打點(diǎn)時(shí)應(yīng)注意，手握筆中部，保持筆桿與紙面垂直，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)筆桿可以畫出大小均勻的