蛋白質(zhì)連接技術(shù)課件

1、蛋白質(zhì)連接技術(shù),1,學(xué)習(xí)交流PPT,蛋白質(zhì)交聯(lián)系指將小分子物質(zhì)（如藥物、半抗原等）或大分子物質(zhì)(如酶、蛋白毒素等)以共價鍵的方式連接于蛋白質(zhì)分子，以制備人工抗原、酶標抗體、載體釋放藥物、抗體導(dǎo)向藥物和免疫毒素等。,2,學(xué)習(xí)交流PPT,交聯(lián)方法,游離氨基 游離羧基 苯基 酚基 巰基 羥基 咪唑基 吲哚基 胍基,3,學(xué)習(xí)交流PPT,重氮化法： 蛋白質(zhì) 連接分子 酚羥基的鄰位、咪唑環(huán)、吲哚環(huán) 含芳香胺的化合物,副反應(yīng)多，故一般限于人工抗原的制備,4,學(xué)習(xí)交流PPT,戊二醛法：連接兩個伯胺,最溫和的交聯(lián)反應(yīng)之一，可在440溫度范圍，pH6.08.0的緩沖水溶液中進行，但是緩沖組份中不得含有氨基化合物，

2、本交聯(lián)方法易形成相同蛋白間的連接；產(chǎn)物的均二性較差。因此，多用于酶標抗體的制備。,5,學(xué)習(xí)交流PPT,過碘酸鹽氧化法：,蛋白質(zhì) 連接分子 氨基 鄰二醇,比較溫和，可在常溫和中性pH的條件下進行,6,學(xué)習(xí)交流PPT,混合酸酐法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 羧基,7,學(xué)習(xí)交流PPT,碳二亞胺法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 羧基,由于碳二亞胺的縮合反應(yīng)沒有選擇性；易形成蛋白分子間的自身聚合，產(chǎn)生非均一性產(chǎn)物；先將含羧基的藥物或半抗原分子與EDC反應(yīng)，活化羧基后，再加入蛋白反應(yīng)物，可以減少蛋白分子交聯(lián),8,學(xué)習(xí)交流PPT,活潑酯法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 羧基,9,學(xué)習(xí)交流PPT,多元酸酐法：,蛋

3、白質(zhì) 連接分子 伯氨基 氨基、羥基,10,學(xué)習(xí)交流PPT,二異氰酸酯法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 氨基,11,學(xué)習(xí)交流PPT,偶氮苯甲酸法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 苯基,12,學(xué)習(xí)交流PPT,O羧甲基羥胺法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 酮基,13,學(xué)習(xí)交流PPT,對-肼基苯甲酸法：,14,學(xué)習(xí)交流PPT,疊氮化法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 羧酸甲酯衍生物,15,學(xué)習(xí)交流PPT,氯乙酸鈉法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 羥基,16,學(xué)習(xí)交流PPT,亞胺酸酯法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 氨基,17,學(xué)習(xí)交流PPT,鹵代硝基苯法：,蛋白質(zhì) 連接分子 氨基、羥基、巰基 氨基、羥基、巰基,18,

4、學(xué)習(xí)交流PPT,Mannich反應(yīng)法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 酮、酚類,19,學(xué)習(xí)交流PPT,苯醌法：,蛋白質(zhì) 連接分子 氨基、羥基、巰基 氨基、羥基、巰基,20,學(xué)習(xí)交流PPT,E11man試劑法：,兩分子蛋白的連接,E11man試劑即55二硫2，2雙硝基苯甲酸(DTNB)，該試劑可以與巰基作用,21,學(xué)習(xí)交流PPT,馬來酰亞胺基類活潑酯法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 巰基,22,學(xué)習(xí)交流PPT,SPDP試劑法：,異型雙功能交聯(lián)劑N-羥基琥珀亞胺基-3(2-吡啶基二硫)丙酸酯(SPDP),蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 巰基、氨基,23,學(xué)習(xí)交流PPT,苯丁酸氮芥衍生物法：,蛋白質(zhì) 連接分子 伯氨基 氨基,24,學(xué)習(xí)交流PPT,鹵代乙酰衍生物法：,連接基團：氨基、巰基,25,學(xué)習(xí)交流PPT,雙馬來酰亞胺試劑法：,連接兩個巰基,26,學(xué)習(xí)交流PPT,三氯三嗪試劑法：,蛋