標(biāo)本的正確采集PPT演示幻燈片

1、1,各種標(biāo)本的留取方法,2,標(biāo)本類型,血液 尿液 糞便 痰及上呼吸道標(biāo)本 腦脊液 漿膜腔積液 膽汁 膿性分泌物,3,血液標(biāo)本,4,采血指征,患者出現(xiàn)一下體征時可作為采血的重要指征： 發(fā)熱（ 38 ）或低溫（ 36 ），寒戰(zhàn) 白細(xì)胞增多（計數(shù)大于10，000109/L,特別有“核左移”未成熟的或桿狀的白細(xì)胞），粒細(xì)胞減少（成熟的多核白細(xì)胞小于1000 109/L ），血小板減少， 皮膚粘膜出血，昏迷，多器官衰竭，血壓降低，CRP升高及呼吸加快 或同時具備上述幾種體征應(yīng)采血培養(yǎng) 對入院危重患者未進(jìn)行系統(tǒng)性抗生素治療之前，應(yīng)及時采集血培養(yǎng),5,皮膚消毒程序,70%酒精檫拭靜脈穿刺部位待30秒以上 1

2、%-2%碘酊作用30秒或10%碘伏作用60秒，從穿刺向外以1.5cm-2cm直徑畫圈進(jìn)行消毒 70%酒精脫碘 （對碘過敏的患者，用70%酒精消毒60秒，帶酒精揮發(fā)干燥后采血）,6,培養(yǎng)瓶消毒程序,用70%酒精消毒血培養(yǎng)瓶橡皮塞，作用60秒 用無菌紗布或棉簽清除橡皮塞表面酒精，然后把血液注入培養(yǎng)瓶。,7,靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序,在穿刺前或穿刺期間，防止靜脈滑動，帶無菌乳膠手套固定靜脈，如行第二次穿刺，應(yīng)換針頭。 用注射器對成人不同部位穿刺取血，勿換針頭直接注入血培養(yǎng)瓶，或嚴(yán)格按廠商推薦方法采血。 血樣接種到培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻防止血液凝固。 用70%酒精清潔皮膚穿刺部位去除殘留碘。在皮膚上避

3、免使用膠粘劑或不透氣的敷料。 立即送檢，勿冷藏。,8,采血量,成人：8-10ml 兒童：1-5ml 一般血液標(biāo)本與培養(yǎng)基比例為1：10為宜,9,血培養(yǎng)份數(shù)和采血時間,采血培養(yǎng)應(yīng)該盡量在使用抗菌藥之前進(jìn)行，在24h內(nèi)采集2-3份血培養(yǎng)。 對間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱應(yīng)在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前0.5-1h采集，或在寒戰(zhàn)或發(fā)熱后1h進(jìn)行。,10,對特殊的全身性和局部感染患者采集血培養(yǎng)的建議,懷疑急性原發(fā)性菌血癥、腦膜炎、骨髓炎、關(guān)節(jié)炎及肺炎的患者，應(yīng)立即采集2或3份進(jìn)行血培養(yǎng)。 不明病原的發(fā)熱，如隱形膿腫、傷寒熱和波浪熱，先采集2或3份以上。 懷疑菌血癥或真菌菌血癥，但血培養(yǎng)持續(xù)陰性，應(yīng)改變血培養(yǎng)方法，以獲得

4、罕見的（或苛氧的）微生物。 對急性心內(nèi)膜炎患者，在1-2h內(nèi)采集3份血培養(yǎng)，如果24h后陰性，在采集3份以上的血培養(yǎng)。入院前兩周內(nèi)接受抗生素治療的患者，連續(xù)三天，每天采集2份。,11,標(biāo)本運(yùn)送,采血后應(yīng)立即送檢，如不能立即送檢，需室溫保存或置3537孵箱中，切勿冷藏。 自動連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng)雖有允許延遲上機(jī)監(jiān)測微生物生長的原理，還是應(yīng)該盡量減少延遲上機(jī)時間。,12,尿液標(biāo)本,13,采集時間及送檢,通常應(yīng)采集晨起第一次尿液送檢，原則上應(yīng)選擇在抗菌藥物應(yīng)用之前采集。 盡量采集晨尿，因?yàn)榻?jīng)過膀胱的夜間孵育，細(xì)菌量會增加。對于無癥狀的病人應(yīng)連續(xù)三天晨尿送檢。 不要因想得到病人的自排尿而強(qiáng)迫他們攝入過多的水分

5、，額外的攝入會稀釋尿液并有可能使細(xì)菌計數(shù)降至105CFU/ml以下 尿液標(biāo)本采集后應(yīng)在2h內(nèi)進(jìn)行培養(yǎng)，否則應(yīng)置4-8 冰箱冷藏保存，經(jīng)冷藏的標(biāo)本盡量在8h內(nèi)進(jìn)行接種。,14,標(biāo)本采集,Midstream voided urine (中段尿) 腎盂尿采集法 膀胱穿刺術(shù),15,中段尿,臨床上最多采用的方法 簡單易行，無感染的危險 這種方法不適合厭氧培養(yǎng)，因在尿道及周圍有許多厭氧菌存在，有污染可能,16,女性患者,先以肥皂水或以1：1000高錳酸鉀水溶液沖洗外陰部及尿道口 再用滅菌水清洗 最后用滅菌紗布擦拭 排尿棄去前段尿，留取中段尿10ml左右于無菌容器內(nèi)加蓋送驗(yàn) 采集中段尿最好由專門護(hù)士采集，以

6、減少污染。,17,男性患者,先用肥皂水清洗尿道口 再用清水沖洗后留取中段尿 包皮過長者為防止包皮內(nèi)細(xì)菌的污染，將包皮翻開沖洗后再留取中段尿。,18,兒童患者,采集中段尿較困難 如尿中細(xì)菌明顯增多，可高度懷疑urinary tract infection(尿路感染)， 無細(xì)菌則可否定 細(xì)菌數(shù)居中時，有必要用導(dǎo)尿或膀胱穿刺術(shù)采集尿液。,19,腎盂尿采集法,確定bacteriuria(菌尿)是否來自腎臟，可通過膀胱鏡，輸尿管插管采集左、右腎盂尿。,20,膀胱穿刺術(shù),采用恥骨上膀胱穿刺術(shù)取尿 一般用于anaerobe培養(yǎng)，故在取得尿液后，針頭插于無菌橡皮塞上立即送檢 一般應(yīng)用于新生兒、幼兒以及中段尿培

7、養(yǎng)陰性又懷疑泌尿系感染的患者。,21,便標(biāo)本,22,臨床問題,人體腸道中的細(xì)菌種類和數(shù)量繁多，健康人腸道內(nèi)常見細(xì)菌有無芽孢厭氧桿菌（如擬桿菌等）、大腸埃希菌、產(chǎn)氣腸桿菌、變形桿菌、銅綠假單胞菌、糞產(chǎn)堿桿菌、枯草桿菌、棒狀桿菌、葡萄球菌、腸球菌及酵母菌、念珠菌屬等，這些細(xì)菌在腸腔內(nèi)通常是不致病的。引起腹瀉的病原菌有致病性大腸埃希菌、志賀菌屬、沙門菌屬、耶爾森菌屬、愛德華菌屬、弧菌屬、彎曲菌屬、厭氧芽孢桿菌屬等。,23,臨床問題,腹瀉是我國的常見病、多發(fā)病，其中多數(shù)是屬于感染性腹瀉。感染性腹瀉是一大類發(fā)病急、傳播快、危害廣的常見感染性疾病，輕者表現(xiàn)為輕度腹瀉，重者可造成患者脫水、敗血癥甚至死亡。因

8、此及時、準(zhǔn)確地檢出致病微生物，對于發(fā)現(xiàn)傳染源、控制疾病流行及有效治療腹瀉病患者都有著重要的意義。,24,臨床問題,不同地區(qū)、不同年齡的患者感染性腹瀉的病因存在著一定的差異。腹瀉病原菌監(jiān)測結(jié)果顯示非沙門菌、志賀菌性腹瀉日益增加。目前隨著抗生素的廣泛應(yīng)用，影響到了腸內(nèi)細(xì)菌微生態(tài)平衡，出現(xiàn)抗生素相關(guān)性結(jié)腸炎等。不同的致病細(xì)菌引起患者的臨床癥狀不盡相同，患者的治療方案也存在著差異，因此糞便細(xì)菌培養(yǎng)結(jié)果對于提高臨床治療針對性，促進(jìn)抗菌藥物的合理應(yīng)用起著重要作用。,25,送檢指征,當(dāng)腹瀉患者出現(xiàn)以下任何一種情況時建議送檢糞便細(xì)菌培養(yǎng)， 糞便涂片鏡檢白細(xì)胞5/HP存在，提示患者為志賀菌、EIEC等細(xì)菌引起的

9、侵襲性腹瀉 重癥腹瀉 體溫大于38.5 血便 便中有膿液 未經(jīng)抗生素治療的持續(xù)性腹瀉患者 來自疫區(qū)的患者。,26,標(biāo)本的采集,標(biāo)本采集應(yīng)爭取在發(fā)病早期和使用抗菌藥物治療之前 自然排便采集糞便標(biāo)本時，取有膿血、粘液、組織碎片部分的糞便（2-3g）。液體糞便則取絮狀物，一般取1-2ml，直接裝入無菌便盒或保存液或轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中送檢 直腸拭子采集糞便標(biāo)本，常適于排便困難患者或嬰幼兒。常用肥皂水將肛門周圍洗凈，用無菌鹽水、保存液或增菌液濕潤的棉拭子插入肛門，成人約4-5cm,兒童約2-3cm, 與直腸粘膜表面接觸，輕輕旋轉(zhuǎn)，必須將拭子植于適當(dāng)?shù)倪\(yùn)送培養(yǎng)基內(nèi)。,27,標(biāo)本的采集,直腸指診時，亦可從手套上獲

10、得標(biāo)本，及時送檢 容器應(yīng)是無菌、帶蓋、廣口的（不宜使用紙盒）、送檢的標(biāo)本中不應(yīng)加入防腐劑,28,糞便細(xì)菌培養(yǎng)標(biāo)本驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)及處理方法,29,標(biāo)本運(yùn)送,糞便標(biāo)本應(yīng)于1h內(nèi)送檢，如不能及時送檢可加入pH7.0的磷酸鹽甘油或轉(zhuǎn)運(yùn)培養(yǎng)基中，但不宜超過24h。 直腸拭子采集的標(biāo)本必須插入合適的轉(zhuǎn)送培養(yǎng)基中送檢，轉(zhuǎn)運(yùn)時間不宜超過2h。 高度懷疑霍亂弧菌感染時，標(biāo)本送至專門實(shí)驗(yàn)室復(fù)檢時，必須妥善包裝，防止溢漏，由專人負(fù)責(zé)，送檢容器用后必須經(jīng)過消毒處理。,30,呼吸道標(biāo)本,31,標(biāo)本采集,自然咳痰法 支氣管鏡采集法 胃內(nèi)采痰法 氣管穿刺法 小兒取痰法 上呼吸道標(biāo)本,32,自然咳痰法,患者清晨起床后，為減少口腔正

11、常菌群的污染，用清水反復(fù)嗽口后用力咳出第一口痰于無菌容器內(nèi) 對于痰量少或無痰的患者可采用霧化吸入加溫至45的10%NaCl水溶液，使痰易于排出 對痰量較少的小兒，可輕輕壓迫胸骨上部的氣管，使其咳嗽 收集痰后立即送檢，以防某些細(xì)菌在外環(huán)境中死亡,33,支氣管鏡采集法,用支氣管鏡采集法在肺內(nèi)病灶附近用導(dǎo)管吸引或用支氣管刷直接取得標(biāo)本 該方法對患者有一定痛苦，不易被接受,34,胃內(nèi)采痰法,無自覺癥狀的慢性結(jié)核病人, 尤其嬰幼兒有時將痰誤咽入胃內(nèi) 可采集胃內(nèi)容物，做結(jié)核桿菌培養(yǎng)，其陽性率比咳痰高10%左右 以清晨空腹采集胃液為好,35,氣管穿刺法,通過氣管穿刺取得痰，此方法主要用于厭氧菌培養(yǎng),36,小

12、兒取痰法,用彎壓舌板伸向舌根部壓舌，用棉拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳嗽時，可噴出肺部或氣管分泌物，粘在拭子上 立即送檢,37,上呼吸道標(biāo)本,通常用無菌棉拭子，取咽后壁或腭垂的后側(cè),38,注意事項(xiàng),采集后應(yīng)立即送檢，以防某些細(xì)菌在外環(huán)境中死亡。 作結(jié)核桿菌檢查，痰量要多或留取24小時痰液，嬰兒肺結(jié)核要用胃管取痰 約有1/4-1/2肺部感染患者可能發(fā)生菌血癥，應(yīng)同時作血培養(yǎng)。,39,腦脊髓液標(biāo)本,正常人體中，均為無菌的，細(xì)菌侵入該部位，會引起這些部位的感染。,40,標(biāo)本采集,通過腰椎穿刺術(shù)以無菌手續(xù)收集CSF 3-5毫升于無菌小瓶或無菌試管中 一般采用第二管CSF用于微生物的培養(yǎng)。收集CSF后在

13、常溫下15分鐘內(nèi)必須送到實(shí)驗(yàn)室 如果CSF量足夠的話，可以3000 rpm離心15分鐘取沉淀物進(jìn)行接種,41,注意事項(xiàng),CSF切勿放入冰箱，否則會使致病菌死亡。尤其是肺炎鏈球菌、腦膜炎奈瑟菌、嗜血桿菌 當(dāng)CSF收集量較少時，應(yīng)首先做微生物學(xué)檢查，再做其他檢查，以免標(biāo)本被污染。 應(yīng)在用抗菌藥物之前采集CSF,42,漿膜腔積液標(biāo)本,漿膜腔通常是無菌的 多因漿膜腔發(fā)生循環(huán)障礙、炎癥、癌侵潤等病變，腔內(nèi)液體滲漏增加所致,43,標(biāo)本采集,臨床醫(yī)師在無菌操作下穿刺抽取，取5-10ml于無菌小瓶中，同時加入109mmol/L 枸櫞酸鈉1：10體積，充分混勻后立即送檢。,44,膽汁標(biāo)本,45,標(biāo)本采集,十二指

14、腸引流法 膽囊穿刺法 手術(shù)采集法,46,十二指腸引流法,在無菌操作下用引流管作十二指腸引流采集膽汁，所采集的膽汁分A、B、C三部分 A液來自膽總管，為橙黃色或金黃色 B液來自膽囊，為棕黃綠色 C液來自肝膽管，為檸檬色 因插管時通過口腔，可混入口腔的正常菌群。一般以B液作菌培養(yǎng)的意義較大,47,膽囊穿刺法,行膽囊照影術(shù)時，可同時采集膽汁，此法采集的膽汁不易被污染適宜作細(xì)菌培養(yǎng)。,48,手術(shù)采集法,在進(jìn)行膽囊或膽管手術(shù)時可直接穿刺采集膽汁,49,注意事項(xiàng),由于厭氧菌在感染中占有較大比例，在作需氧培養(yǎng)的同時應(yīng)考慮到作厭氧培養(yǎng) 標(biāo)本采集后應(yīng)立即送檢,50,膿性分泌物標(biāo)本,51,標(biāo)本采集,開放性感染和已

15、破潰的化膿灶 感染與體腔或外界相通的部位 閉索性膿腫,52,開放性感染和已破潰的化膿灶,標(biāo)本采集前先用滅菌生理鹽水沖洗表面污染菌，再用無菌針管或注射器吸取膿性分泌物 慢性感染 如污染嚴(yán)重，很難分離到致病菌，可取感染部位下層的組織，經(jīng)研磨勻漿后分離培養(yǎng) 瘺管內(nèi)膿液 用滅菌棉拭子擠壓瘺管棄取前端膿液后用滅菌容器收集膿汁，并注意是否有“硫磺顆?！?，（確定有無放線菌）。,53,感染與體腔或外界相通的部位,眼結(jié)膜膿性分泌物 先用無菌生理鹽水沖洗眼部，用滅菌棉拭子拭干，再用滅菌棉拭子采集分泌物。分泌物較多時，用滅菌棉球擦拭，再用滅菌棉拭子取結(jié)膜囊分泌物 耳、鼻、喉膿性分泌物 耳、鼻、喉拭子采集時易被粘膜上的正常菌群污染，所以采集標(biāo)本時應(yīng)盡量避免與周圍粘膜接觸。 生殖道分泌物 男性應(yīng)沖洗尿道口，采集從尿道口溢出的膿性分泌物或用白金耳棉拭子插入尿道內(nèi)24厘米處取分泌物。女性則用