第九章球菌.ppt

1、總論:微生物學(xué)的基本原理 (生物學(xué)性狀 / 感染 / 抗感染免疫 / 遺傳與變異 / 醫(yī)學(xué)微生態(tài)學(xué)與醫(yī)院內(nèi)感染 / 消毒與滅菌 / 病原學(xué)診斷與防治 / 細(xì)菌的耐藥性與控制策略)各論:細(xì)菌學(xué) 三性兩原則 病毒學(xué) (生物學(xué)性狀/ 致病性/免疫性/ 真菌學(xué) 微生物學(xué)檢查原則/防治原則),細(xì)菌學(xué)各論,coccus,球菌,化膿性細(xì)菌 能感染人體并引起化膿性炎癥的細(xì)菌 （皮膚、皮下軟組織、深部組織、內(nèi)臟器官、膿毒血癥） 化膿性球菌： 革蘭氏陽性球菌主要介紹葡萄球菌、鏈球菌、肺炎球菌； 革蘭氏陰性球菌主要介紹腦膜炎雙球菌、淋球菌 化膿性桿菌： 主要為革蘭氏陰性桿菌，如: 大腸埃希菌屬、變形桿菌屬 假單胞菌

2、屬、 厭氧菌等,第一節(jié) 葡萄球菌屬(staphylococcus),堆積樣排列，G（+），分布廣泛 大部分為腐物寄生菌 病原性球菌 一般引起化膿性感染，亦可引起敗血癥，是最常見的化膿性細(xì)菌，80%以上的化膿性炎癥由其引起 葡萄球菌屬包括40多個種，主要包括三個： 金黃色葡萄球菌（s.aureus) 表皮葡萄球菌(s.epidermidis) 腐生葡萄球菌(s.saprophyticus),一、生物學(xué)性狀,1.形態(tài)與染色 球形，直徑平均1m，葡萄串狀，G+，無鞭毛，無芽孢，體外培養(yǎng)一般不形成莢膜 在青霉素等作用下可變?yōu)長型,Staphylococcus (SEM),2.培養(yǎng)特性,易培養(yǎng),兼性厭氧

3、或需氧；37；pH7.4 液體培養(yǎng)基（肉湯） 混濁生長 固體培養(yǎng)基 菌落 普通平板 中等大小S型菌落 脂溶性色素 金黃色/白色/檸檬色 血瓊脂平板 金葡菌溶血毒素形成完全透明的 溶血環(huán)（溶血）,上為金黃色葡萄球菌，下為表皮葡萄球菌,培養(yǎng)特性（ 固體培養(yǎng)基生長現(xiàn)象）,3.生化反應(yīng),觸酶陽性（與鏈球菌區(qū)分標(biāo)準(zhǔn)） 多數(shù)菌分解葡萄糖、麥芽糖和蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 致病菌分解甘露醇,葡萄球菌A蛋白(SPA) 存在于細(xì)胞壁上的表面抗原，可與IgG的Fc段結(jié)合，可進(jìn)行協(xié)同凝集，并具有抗吞噬等生物學(xué)活性。 莢膜：利于黏附 多糖抗原（磷壁酸抗原）：群特異性（A/B）,4.抗原構(gòu)造,capsule,polysacch

4、aride (teichoic acid),SPA,SPA（staphylococcal protein A）,SPA（staphylococcal protein A）,協(xié)同凝集試驗（coagglutination）,SPA功能 體內(nèi)作用： SPA與IgG結(jié)合后所形成的復(fù)合物具有抗吞 噬、促細(xì)胞分裂、引起超敏反應(yīng)、損傷血小 板等多種生物活性。 體外作用：用于多種微生物抗原檢測。,S. aureus 借助SPA抵抗調(diào)理作用,金黃色葡萄球菌（S.aureus） 表皮葡萄球菌（S.epidermidis） 腐生葡萄球菌（S.saprophyticus）,5.分類,色素、生化反應(yīng),三種葡萄球菌的主要

5、性狀,分類,凝固酶 陰性菌 陽性菌 噬菌體 群 23型 群引起葡萄球菌腸毒素食物中毒 DNA 16sRNA 分48個種和亞種,抵抗力是無芽胞細(xì)菌中最強的 對熱、干燥、消毒劑、UV等因素均有較強抵抗力 耐鹽，在1015%NaCl培養(yǎng)基中生長（選擇） 對染料及龍膽紫敏感 對青霉素、金霉素、紅霉素等抗生素均高度敏感，但對青霉素的耐藥菌株90%,6.抵抗力,二、致病性,致病物質(zhì),毒素 葡萄球菌溶素 毒性休克綜合征毒素1 殺白細(xì)胞素 腸毒素 表皮剝脫毒素 酶 凝固酶 耐熱核酸酶 纖維蛋白溶酶 透明質(zhì)酸酶 酯酶 表面結(jié)構(gòu)蛋白 粘附素、莢膜、胞壁肽聚糖、SPA,凝固酶（coagulase）,概念 使含有抗凝

6、劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類 游離凝固酶free coagulase 結(jié)合凝固酶bound coagulase 意義 鑒別有無致病性的重要指標(biāo) 與金黃色葡萄球菌致病性相關(guān) 抵抗吞噬細(xì)胞的吞噬 保護(hù)病菌不受血清中殺菌物質(zhì)的破壞 使感染局限化和形成血栓。 決定了金黃色葡萄球菌引起化膿性感染時的感染特點：病灶局限、不易擴(kuò)散、而且膿汁粘稠。,葡萄球菌溶素（staphylolysin）,損傷細(xì)胞膜的毒素（細(xì)胞毒素） 分 等，溶素為主要致病因子，溶解紅細(xì)胞，破壞白細(xì)胞，血小板及多種其它組織細(xì)胞 攻擊中性粒細(xì)胞和巨噬細(xì)胞 抵抗宿主吞噬細(xì)胞，增強細(xì)菌侵襲力,殺白細(xì)胞素（panton-valentine，PV）

7、：破壞中性粒細(xì)胞和吞噬細(xì)胞、抗吞噬、增強病菌侵襲力。,腸毒素（enterotoxin）,約1/3臨床分離金黃色葡萄球菌可產(chǎn)生 引起急性胃腸炎，即食物中毒 特點： 耐熱，10030min 引起毒素性食物中毒 抗胃腸液中蛋白酶 作用機制：刺激嘔吐中樞導(dǎo)致以嘔吐為主要癥狀的食物中毒,表皮剝脫毒素（exfoliative toxin）,引起機體發(fā)熱，增加對內(nèi)毒素的敏感性 引起發(fā)熱、休克、腎衰、皮疹等多個器官功能紊亂，毒性休克綜合征（TSS） 引起燙傷樣皮膚綜合征（staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS） 有絲氨酸蛋白酶功能，裂解表皮組織的棘狀顆粒層，破壞細(xì)胞

8、間連接，表皮與真皮脫落燙傷樣皮膚綜合征（staphylococcal scalded skin syndrome，SSSS） 患者皮膚彌漫性紅斑水皰，表皮上層大片脫落,毒性休克綜合征毒素-1（TSST-1）,所致疾病 侵襲性感染： 局部感染癤、癰、毛囊炎、蜂窩組織炎、氣管炎、膿胸 全身感染 敗血癥、膿毒血癥 毒素性疾?。?食物中毒 假膜性腸炎（菌群失調(diào)癥） 燙傷樣皮膚綜合征 毒性休克綜合征,毛囊炎,局部感染及燙傷樣皮膚綜合征,癤,膿皰病,1個1周大早產(chǎn)兒的燙傷樣皮膚綜合征,三、免疫性,有一定天然免疫力 機體免疫力降低時易感 感染后能獲得一定的免疫力，但不強,小貓試驗,四、微生物檢查法,標(biāo)本,膿

9、汁，血液，剩余食物，嘔吐物等,分離培養(yǎng),血漿凝固酶 發(fā)酵甘露醇 耐熱核酸酶,直接涂片鏡檢,革蘭陽性葡萄球菌,生長現(xiàn)象,色素，溶血，,生化反應(yīng),毒素檢查,致病性葡萄球菌的鑒定依據(jù)：產(chǎn)生血漿凝固酶、耐熱核酸酶、金黃色色素、溶血素、發(fā)酵甘露醇。,五、防治原則,防,注意 消毒隔離,注意 個人衛(wèi)生,防止 醫(yī)源性感染,防止 耐藥性產(chǎn)生,治,抗菌素 藥敏試驗,自身菌苗療法,凝固酶陰性葡萄球菌（coagulase negative staphylococcus，CNS）,過去認(rèn)為不致病，但目前已成為醫(yī)源性感染的常見重要病原菌，且耐藥菌株日益增多；當(dāng)機體免疫功能低下或細(xì)菌進(jìn)入非正常寄居部位時，CNS可引起多種感

10、染，各類感染中僅次于大腸埃希菌，居病原菌的第2位，造成診治困難，引起臨床微生物學(xué)工作者關(guān)注。 CNS十余種與致病有關(guān)，最多是表皮葡萄球菌和腐生葡萄球菌。還包括溶血葡萄球菌、人葡萄球菌、頭葡萄球菌等30多種。 常引起泌尿系統(tǒng)感染、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎、敗血癥、術(shù)后及植入醫(yī)用器械引起的感染。,第二節(jié) 鏈球菌屬（steptococcus）,鏈球菌屬分類 根據(jù)血平板上溶血現(xiàn)象分類 1.甲型溶血性鏈球菌：菌落外12mm寬草綠色不完全溶血環(huán)（ 溶血），為條件致病菌。 2.乙型溶血性鏈球菌：菌落外23mm寬透明的完全溶血環(huán)（溶血），致病力最強。 3.丙型鏈球菌：不溶血，不致病。,根據(jù)溶血現(xiàn)象分為3類,根據(jù)抗原結(jié)構(gòu)

11、的分類 多糖抗原C抗原分群：A、B、C等20群，對 人致病的90%屬A群 細(xì)胞壁 蛋白抗原M型抗原分型：A群100型、B群4型、 C群13型等 根據(jù)氧的需要分類 需氧鏈球菌 致病菌 兼性厭氧鏈球菌 厭氧鏈球菌 條件致病菌,溶血,溶血,反應(yīng),一、A群鏈球菌,一、A組鏈球菌 G+，球形，鏈狀排列，革蘭染色陽性(G+),單個菌體呈球形，G+，鏈狀排列，無芽胞，無鞭毛，有菌毛，幼齡時有透明質(zhì)酸莢膜，可自溶；與葡萄球菌比較，菌體略小，在其卵圓端連接,鏈球菌（革蘭染色）,培養(yǎng)特性：,營養(yǎng)要求高：血平板或含血清培養(yǎng)基 液體培養(yǎng)易形成長鏈，為沉淀生長 血平板呈灰白色表面光滑小菌落，不同菌株溶血不一,生化反應(yīng),

12、分解葡萄糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣 不分解菊糖，不被膽汁溶解 （鑒別甲型溶血性鏈球菌與肺炎鏈球菌）,蛋白質(zhì)抗原（表面抗原）型特異性， 主要為M抗原 胞壁多糖抗原（C抗原）群特異性 核蛋白抗原（P抗原）無特異性,抗原構(gòu)造,分20個群， A群 致病菌 (溶血性鏈球菌或化膿性鏈球菌）,根據(jù)蛋白抗原 進(jìn)一步分類 M抗原,莢膜,細(xì)胞壁,蛋白質(zhì),多糖,肽聚糖,細(xì)胞膜,細(xì)胞質(zhì),蛋白質(zhì)抗原/表面抗原 多糖抗原/C抗原 核蛋白抗原/P抗原,鏈球菌抗原結(jié)構(gòu)模式圖,較弱 對青霉素敏感 耐藥菌株少,抵抗力,致 病 性,致病物質(zhì) 細(xì)胞壁成分 粘附素：脂磷壁酸（LTA） 增強細(xì)菌對細(xì)胞的黏附（表面受體） F蛋白（protein F）

13、 利于細(xì)菌在宿主體內(nèi)定植和繁殖 M蛋白 抗吞噬 與人類心肌、腎小球基底膜有共同抗原， 引起超敏反應(yīng)性疾病 肽聚糖,外毒素類 致熱外毒素（紅疹毒素）發(fā)熱、紅色皮疹（猩紅熱） 鏈球菌溶血素：根據(jù)對O2的穩(wěn)定性分為SLO和SLS,SLO 含有-SH蛋白質(zhì)，對O2敏感，還原后具有溶血作用 破壞紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板，對心肌、神經(jīng)細(xì)胞也有毒性作用 抗原性強，23周出現(xiàn)抗“O”抗體，維持?jǐn)?shù)月至1年，其效價1：400可做為新近感染或風(fēng)濕活動指標(biāo) SLS 小分子糖肽，對O2穩(wěn)定 血平板上溶血 無抗原性,侵襲性酶 透明質(zhì)酸酶 擴(kuò)散因子 分解細(xì)胞間質(zhì)的透明質(zhì)酸組織中擴(kuò)散 鏈激酶（鏈球菌溶纖維蛋白酶） 有利于細(xì)菌擴(kuò)

14、散 鏈道酶（鏈球菌DNA酶）,感染特點：感染病灶與周圍界限不清，易于擴(kuò)散，膿汁稀薄,所致疾病：,A群鏈球菌,淋巴管炎，,猩紅熱,超敏反應(yīng)性疾病,化膿性感染,中毒性疾病,蜂窩組織炎，,扁桃體炎等,風(fēng)濕熱,急性腎小球腎炎,鏈球菌感染沿淋巴管擴(kuò)散,丹毒,猩紅熱,草莓色舌,彌散的紅色皮疹,甲型鏈球菌,感染性心內(nèi)膜炎,D群鏈球菌,齲齒,條件致病,免疫性,可刺激機體產(chǎn)生各種抗體 抗M蛋白抗體有保護(hù)作用 型別間無交叉免疫 猩紅熱患者可建立牢固的同型抗毒素免疫,微生物學(xué)檢查法,標(biāo)本,直接涂片鏡檢,革蘭陽性鏈球菌,分離培養(yǎng),膿汁，血液，咽喉拭子,與金葡菌的鑒別,與肺炎鏈球菌的鑒別,血清學(xué)檢查,抗“O”試驗（AS

15、O test）：鏈球菌侵入體內(nèi)產(chǎn)生SLO，刺激機體產(chǎn)生相應(yīng)抗體ASO，當(dāng)兩者中和后，在加入SLO 乳膠試劑，因 病人血清中ASO量很多，未被中和掉的抗體與乳膠試劑反應(yīng)，產(chǎn)生清晰凝集，為陽性；無凝集，為陰性。 原理：中和試驗 方法：間接凝集 結(jié)果：效價400單位 意義：風(fēng)濕熱及其活動性的輔助診斷,防治原則： 積極治療兒童鏈球菌感染,治療首選青霉素G ，避免鏈球菌感染完全可減少風(fēng)濕熱和腎小球腎炎的發(fā)病。,二、肺炎鏈球菌,1、形態(tài)染色 G+菌，菌體呈矛頭狀，成對排列，鈍端相對，銳端相背，有莢膜，無芽胞，無鞭毛。 2 、培養(yǎng) 要求較高，在血平板上產(chǎn)生草綠色溶血環(huán)（溶血）與甲鏈相似，有自溶現(xiàn)象。 3 、

16、與甲鏈的鑒別方法 菊糖分解（+）、膽汁溶菌（+）Optpchin實驗（+）。 4、 測定C反應(yīng)蛋白 C多糖存在于該菌細(xì)胞壁上的特異性多糖，能被人血清中的C反應(yīng)蛋白（CRP）所沉淀，CRP正常人只含微量，急性炎癥時劇增，故可用C多糖測定CRP。 5、 分型原則 根據(jù)莢膜多糖抗原可分為84個血清型和若干亞型 6、抵抗力 較弱 7、致病性 肺炎鏈球菌是一種條件致病菌，可以引起大葉性肺炎 及繼發(fā)感染,矛頭狀：平面相對 尖面相背,革蘭染色陽性，雙球菌,Streptococcus pneumoniae,生長現(xiàn)象,有厚莢膜,無芽胞,無鞭毛,致病物質(zhì)：,致病性與免疫性,莢膜 肺炎鏈球菌溶素O 脂磷壁酸 神經(jīng)氨

17、酸酶,所致疾?。?免疫性：,建立同型免疫 產(chǎn)生型特異的莢膜多糖抗體,大葉性肺炎,微生物檢查法,直接涂片鏡檢：,G+有莢膜的雙球菌,分離培養(yǎng)：,與甲鏈鑒別,菊糖分解試驗 膽汁溶菌試驗 Optochin敏感試驗 動物試驗,痰中肺炎鏈球菌占很大比例,防治原則：,多價肺炎球菌莢膜多糖菌苗,預(yù)防,治療,抗生素,三、其它鏈球菌,B群鏈球菌（GBS）無乳鏈球菌 GBS正常寄居陰道與直腸，帶菌率30% 新生兒感染（經(jīng)產(chǎn)道或呼吸道）敗血癥及腦膜炎死亡率高。 D群鏈球菌牛鏈球菌、馬腸鏈球菌、（腸球菌：現(xiàn)已單獨列出為腸球菌屬） 條件致病菌，為醫(yī)院感染的重要致病菌，常見尿路感染。 甲型溶血性鏈球菌 條件致病菌，可引起

18、亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎(SBE) ( 由此菌引起的SBE占全部病例50%) 變異鏈球菌與齲齒發(fā)病有關(guān)。,第三節(jié) 腸球菌屬,糞腸球菌、屎腸球菌等29個種 G+，正常菌群 醫(yī)院感染的重要病原菌，耐藥嚴(yán)重 可致：尿路感染、腹盆腔感染、敗血癥、心內(nèi)膜炎,第四節(jié) 奈瑟菌屬 （Neisseria）,腦膜炎奈瑟菌（N.meningitidis),生物學(xué)性狀 形態(tài)染色： G ，呈腎型，成雙排列 （凹面相對，凸面相背），有莢膜及菌毛 培養(yǎng)特性 營養(yǎng)要求較高，血平板或巧克力平板或卵黃雙抗平板，形成光滑透明“露滴樣”菌落 專性需氧，510%CO2，37（40 30均不生長）pH7.47.6 易產(chǎn)生自溶酶 生化反應(yīng)：氧

19、化酶及觸酶（+），分解葡萄糖和麥芽糖 抗原和分類：根據(jù)莢膜多糖群特異性抗原的不同可分為13個血清群，根據(jù)膜蛋白不同，各血清群又可分為若干血清型 抵抗力：很弱,抗原構(gòu)造與分類,莢膜多糖群特異性抗原 分群 外膜蛋白型特異性抗原 分型 脂多糖抗原 核蛋白抗原,抵抗力,很弱,四怕 熱 寒冷 干燥 消毒劑,革蘭陰性雙球菌,腎形或豆形,腦膜炎奈瑟菌形態(tài),培養(yǎng)特性,腦膜炎雙球菌的致病特點是冬末春初好發(fā)，存在于鼻咽部，兒童由于血腦屏障發(fā)育不完全，發(fā)病率較高 致病物質(zhì) 莢膜：抗吞噬，增強侵襲力 菌毛：有利于細(xì)菌黏附和侵入 內(nèi)毒素：引起小血管、毛細(xì)血管壞死、出血，導(dǎo)致皮膚淤斑、腎上腺出血、微循環(huán)障礙、DIC、中毒

20、性休克等。,致病性與免疫性, 致病過程：細(xì)菌飛沫呼吸道鼻 咽部黏膜血流 腦脊 髓膜化膿性炎癥 內(nèi)毒 素,所致疾病流行性腦脊髓膜炎 人是唯一宿主：5-15%正常人鼻咽帶菌（流行期70-80%，我國A群為主 傳染源：帶菌者、病人 傳播途徑：飛沫傳播，經(jīng)呼吸道感染 潛伏期：2-3天 臨床類型 普通型：高熱、出血性皮疹、腦膜刺激癥狀 爆發(fā)型：內(nèi)毒素休克、DIC，24h之內(nèi)死亡 慢性敗血癥型：少數(shù)成人病程遷延數(shù)日 前兩種以兒童多見 免疫性 體液免疫為主,皮膚瘀斑,微生物學(xué)檢查,標(biāo)本,分離培養(yǎng)與鑒定,病人：腦脊液、血液、皮疹液 帶菌者：鼻咽拭子 標(biāo)本保溫保濕送檢，最好床邊接種立即送檢，培養(yǎng)基預(yù)溫,直接涂片

21、鏡檢,中性粒細(xì)胞內(nèi)、外有革蘭陰性雙球菌，可作出初步診斷。,巧克力（色）培養(yǎng)基,快速診斷,對流免疫電泳，SPA協(xié)同凝集試驗,防治原則,兒童 注射流腦莢膜多糖疫苗進(jìn)行特異性預(yù)防,提高免疫力、接種疫苗、治療首選青霉素G,二、淋病奈瑟菌（gonococcus） 淋球菌,生物學(xué)特性 形態(tài)染色：與腦膜炎奈瑟菌相似， G雙球菌，咖啡豆?fàn)睿?有莢膜和菌毛，無芽胞，無鞭毛 膿汁標(biāo)本中 急性病人：細(xì)菌位于中性粒細(xì)胞內(nèi) 慢性病人：細(xì)菌位于細(xì)胞外,電鏡,培養(yǎng)特性：與腦膜炎奈瑟菌相似，專性需氧,營養(yǎng)要求更高，只能在巧克力平板及專用培養(yǎng)基上生長，形成灰白色細(xì)小S型菌落,對熱、冷、干燥和消毒劑極度敏感 1%石炭酸 3 mi

22、n或1:4000硝酸銀2 min即死亡 本菌能自溶,生化反應(yīng)：氧化酶（+），只分解葡萄糖，不分解麥芽糖等其它糖類 抗原及分類：以外膜蛋白抗原分16個血清型 抵抗力：極弱（與腦膜炎奈瑟菌相似）,致病物質(zhì),菌毛：粘附作用；抵抗吞噬。 外膜蛋白：有助于粘附。 IgA蛋白酶：能破壞黏膜表面sIgA。 內(nèi)毒素：損害人體黏膜的重要因素。,1.淋病,人類是淋病奈瑟菌的唯一宿主，屬性傳播疾?。╡xually transmitted disease ，STD） 主要通過性接觸引起泌尿道和生殖系統(tǒng)炎癥。,所致疾病,gonorrhea,（化膿性炎癥）,潛伏期2-5天,2.新生兒淋菌性結(jié)膜炎/新生兒膿漏眼,新生兒由產(chǎn)道感染有淋病性陰道炎或子宮頸炎的孕婦，胎兒經(jīng)產(chǎn)道娩出時可被感染。,3.淋病奈瑟菌性結(jié)膜炎及幼女陰道炎,所致疾病,通過毛巾、浴池間接感染。,人類對淋病奈瑟菌的感染無天然抵抗力 免疫力不持久,免疫性,微生物學(xué)檢查法,標(biāo)本,用無菌棉拭沾取,直接涂片鏡檢,中性粒細(xì)胞內(nèi)發(fā)現(xiàn)革蘭陰性雙球菌，有診斷價值,分離培養(yǎng)與鑒定,標(biāo)本采集后應(yīng)注意保暖保濕，立即送檢接種,子宮頸口表面分泌物,泌尿生殖道膿性分泌物,巧克力色