高中生物專題2微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用第6課時(shí)土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)同步備課課件新人教版選修1

,第6課時(shí) 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù),專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用,學(xué)習(xí)導(dǎo)航 1.通過分析具體培養(yǎng)基的配方，歸納選擇培養(yǎng)基的選擇作用，理解篩 選微生物的原理。 2.結(jié)合實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，分析微生物數(shù)量測定實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生偏差的原因及解決 措施，學(xué)會(huì)微生物的計(jì)數(shù)方法，并對(duì)培養(yǎng)結(jié)果進(jìn)行分析和評(píng)價(jià)。 重難點(diǎn)擊 1.研究培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用，進(jìn)行微生物數(shù)量的測定。 2.能利用選擇培養(yǎng)基分離細(xì)菌，運(yùn)用相關(guān)技術(shù)解決生產(chǎn)生活中有關(guān)微 生物的計(jì)數(shù)問題。,一、研究培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用,當(dāng)堂檢測,二、進(jìn)行微生物數(shù)量的測定,內(nèi)容索引,一、研究培養(yǎng)基對(duì)微生物的選擇作用,基礎(chǔ)梳理,1.篩選菌株 (1)自然界中目的菌株的篩選 原理：根據(jù)目的菌株對(duì) 的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。 實(shí)例：能產(chǎn)生耐高溫的Taq DNA聚合酶的 就是從熱泉中篩選出來的。 (2)實(shí)驗(yàn)室中目的菌株的篩選 原理：人為提供有利于 生長的條件(包括營養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí) 其他微生物生長。 實(shí)例：從土壤中篩選能分解尿素的細(xì)菌。 方法：利用 培養(yǎng)基進(jìn)行微生物的篩選。,選擇,生存環(huán)境,Taq細(xì)菌,目的菌株,抑制或阻止,2.選擇培養(yǎng)基 (1)概念：允許 種類的微生物生長，同時(shí) 其他種類微生物生長的培養(yǎng)基。 (2)舉例：篩選土壤中分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基是以 為唯一氮源，按物理性質(zhì)歸類為固體培養(yǎng)基。,尿素,特定,抑制或阻止,1.篩選分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基 下面是本課題使用的培養(yǎng)基的配方，請分析：,問題探究,答案 碳源是葡萄糖，氮源是尿素。,(1)在培養(yǎng)基的配方中，為微生物的生長提供碳源和氮源的分別是什么物質(zhì)？,答案,答案 該選擇培養(yǎng)基的配方中，尿素是培養(yǎng)基中的唯一氮源，因此，只有能夠利用尿素的微生物才能夠生長。,(2)分離分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基是如何進(jìn)行選擇的？,答案 分解尿素的微生物能合成脲酶，而脲酶可將尿素分解成氨，從而為微生物提供氮源。,(3)為什么只有能分解尿素的微生物才能在該培養(yǎng)基上生長？,答案 增設(shè)牛肉膏蛋白胨基礎(chǔ)培養(yǎng)基并進(jìn)行涂布平板操作，如果牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基上的菌落數(shù)明顯多于選擇培養(yǎng)基上的菌落數(shù)，則說明選擇培養(yǎng)基的確起到了篩選能分解尿素的細(xì)菌的作用。,2.設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn) (1)如何設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該選擇培養(yǎng)基的確篩選到了能分解尿素的細(xì)菌？,答案 設(shè)置一個(gè)未涂布平板的能篩選分解尿素的細(xì)菌的選擇培養(yǎng)基。,(2)如何設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證所用的選擇培養(yǎng)基沒有受到污染？,答案,歸納總結(jié),選擇培養(yǎng)基的分類 (1)利用營養(yǎng)缺陷型選擇培養(yǎng)基進(jìn)行的選擇培養(yǎng)：通過控制培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分，使?fàn)I養(yǎng)缺陷型微生物不能正常生長。 (2)利用化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行的選擇培養(yǎng)：在完全培養(yǎng)基中加入某些化學(xué)物質(zhì)，利用加入的化學(xué)物質(zhì)抑制某些微生物的生長，同時(shí)選擇所需的微生物。 (3)利用培養(yǎng)條件進(jìn)行的選擇培養(yǎng)：改變微生物的培養(yǎng)條件(如高溫、特殊pH等)，篩選特定微生物。,拓展應(yīng)用,1.下列有關(guān)微生物篩選的敘述中，不正確的是 A.用全營養(yǎng)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基篩選大腸桿菌 B.用高NaCl的培養(yǎng)基篩選抗鹽突變菌株 C.含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解尿素的菌株 D.利用高溫條件篩選耐熱的Taq細(xì)菌,答案,解析,解析 全營養(yǎng)牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基常用于大腸桿菌的培養(yǎng)，該培養(yǎng)基對(duì)微生物無選擇作用，A項(xiàng)錯(cuò)誤。 抗鹽突變菌株具有耐高鹽的能力，因此可以利用高NaCl的選擇培養(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，B項(xiàng)正確。 分解尿素的菌株會(huì)分解尿素形成氨，使培養(yǎng)基pH升高，因此可以利用含酚紅的尿素培養(yǎng)基篩選鑒別出分解尿素的菌株，C項(xiàng)正確。 利用高溫條件可以篩選耐熱的Taq細(xì)菌，D項(xiàng)正確。,2.下表是微生物培養(yǎng)基的成分。下列有關(guān)說法錯(cuò)誤的是,答案,解析,A.此培養(yǎng)基可用來培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物 B.此表中的營養(yǎng)成分共有三類，即水、無機(jī)鹽、氮源 C.若除去，此培養(yǎng)基可培養(yǎng)圓褐固氮菌 D.培養(yǎng)基中若加入氨基酸，則它可充當(dāng)碳源、氮源和生長因子,解析 由題知，該培養(yǎng)基成分中含有水、無機(jī)鹽、氮源，但不含含碳有機(jī)物，可用來培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物，選項(xiàng)A、B均對(duì)； 圓褐固氮菌同化類型為異養(yǎng)型，培養(yǎng)基中必須存在含碳有機(jī)物，所以該培養(yǎng)基不能用來培養(yǎng)圓褐固氮菌，C錯(cuò)。,選擇培養(yǎng)基的常見類型 (1)分離微生物所用的選擇培養(yǎng)基一定是固體培養(yǎng)基，因?yàn)榫渲荒茉诠腆w培養(yǎng)基上形成。 (2)常見的選擇培養(yǎng)基 加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。 加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。 無氮源培養(yǎng)基可以分離固氮微生物。 以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基，可以分離能消除石油污染的微生物。 將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)，可以分離耐高溫的微生物。,二、進(jìn)行微生物數(shù)量的測定,基礎(chǔ)梳理,1.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 (1)方法： 。 (2)統(tǒng)計(jì)依據(jù)：當(dāng)樣品的 足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落，來源于樣品稀釋液中的一個(gè) 。通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌。 (3)操作 設(shè)置重復(fù)組，增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性。 為保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在 的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。 統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌實(shí)際數(shù)目 。,活菌計(jì)數(shù)法、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法,稀釋度,活菌,30300,低,(4)計(jì)算公式：每克樣品中的菌株數(shù)(CV)M，其中C代表某一稀釋度下平板上生長的 ，V代表涂布平板時(shí)所用的 ，M代表 。 2.設(shè)置對(duì)照 (1)對(duì)照實(shí)驗(yàn)：是指除了 以外，其他條件都相同的實(shí)驗(yàn)。 (2)主要目的：排除實(shí)驗(yàn)組中 對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。例如，為了確認(rèn)培養(yǎng)基是否被雜菌污染，需以不進(jìn)行接種的培養(yǎng)基培養(yǎng)作為空白對(duì)照。,平均菌落數(shù),稀釋液的體積(mL),稀釋倍數(shù),被測試條件,非測試因素,3.實(shí)驗(yàn)操作流程 (1)土壤取樣 取樣原因：土壤有“微生物的 ”之稱，同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物數(shù)量 ，種類 。 土壤要求：富含 ，pH接近 且潮濕。 取樣部位：距地表約 的土壤層。 (2)樣品稀釋 稀釋原因：樣品的 直接影響平板上生長的 。 稀釋標(biāo)準(zhǔn)：選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在 之間，便于計(jì)數(shù)。,天然培養(yǎng)基,最大,最多,有機(jī)質(zhì),中性,38 cm,稀釋程度,菌落數(shù)目,30300,(3)微生物的培養(yǎng)與觀察 培養(yǎng)：根據(jù)不同微生物的需要，控制適宜的培養(yǎng) 和培養(yǎng)時(shí)間。 觀察 a.觀察方法：每隔24 h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，最后選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。 b.菌落的特征：包括菌落的 、 、隆起程度和 等。 (4)菌種鑒定 原理：細(xì)菌合成的 將尿素分解成氨，使培養(yǎng)基的 增強(qiáng)。 方法：以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入 指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，若指示劑變 ，可初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。,溫度,形狀,大小,顏色,脲酶,堿性,酚紅,紅,4.操作提示 (1)無菌操作 取土樣的用具在使用前都需要 。 實(shí)驗(yàn)操作均應(yīng)在 進(jìn)行。 (2)做好標(biāo)記：本實(shí)驗(yàn)使用的平板和試管比較多，為避免混淆，使用前應(yīng)標(biāo)明培養(yǎng)基的 、 以及平板上培養(yǎng)樣品的 等。 (3)制定計(jì)劃：對(duì)于耗時(shí)較長的生物實(shí)驗(yàn)，要事先制定計(jì)劃，以便提高_(dá)。,滅菌,火焰旁,種類,培養(yǎng)日期,稀釋度,工作效率,右面是土壤中尿素分解菌的分離與計(jì)數(shù)的實(shí)驗(yàn)流程示意圖，請結(jié)合教材提供的資料分析回答下列問題。 1.試寫出分離土壤中分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)流程,問題探究,答案 土壤取樣樣品稀釋取樣涂布微生物培養(yǎng)觀察并記錄結(jié)果細(xì)菌計(jì)數(shù)。,答案,答案 不真實(shí)。為增加實(shí)驗(yàn)的說服力與準(zhǔn)確性，應(yīng)設(shè)置重復(fù)實(shí)驗(yàn)，在同一稀釋度下涂布3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)結(jié)果后計(jì)算平均值。,2.統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目 甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)。在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下兩種統(tǒng)計(jì)結(jié)果。 (1)甲同學(xué)在該濃度下涂布了一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)為230，該同學(xué)的統(tǒng)計(jì)結(jié)果是否真實(shí)可靠？為什么？,答案,答案 不合理。微生物計(jì)數(shù)時(shí)，如果實(shí)驗(yàn)中出現(xiàn)重復(fù)實(shí)驗(yàn)的結(jié)果不一致的情況，應(yīng)分析實(shí)驗(yàn)過程中可能的影響因素，找出差異的原因，而不能簡單地舍棄后進(jìn)行計(jì)數(shù)。,(2)乙同學(xué)在該濃度下涂布了3個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別為21、212、256，該同學(xué)將21舍去，然后取平均值。該同學(xué)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的處理是否合理？為什么？,答案,答案 105的稀釋度下取0.1 mL涂布的三個(gè)平板上的菌落數(shù)在30300之間，計(jì)算其平均值為(212234287)/3244。進(jìn)一步可以換算出1 g樣品中活菌數(shù)為(2440.1)1052.44108。,(3)某同學(xué)在三種稀釋度下吸取0.1 mL的菌液涂布平板，統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，得到以下的數(shù)據(jù)，試計(jì)算1 g樣品的活菌數(shù)。,答案,答案 當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一個(gè)菌落。,(4)為什么統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)比活菌的實(shí)際數(shù)目低？,答案,答案 可能是他選擇的土壤樣品不同于其他同學(xué)；也可能是培養(yǎng)基受到了污染或操作失誤。,3.對(duì)照實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的分析 分析教材P22“設(shè)置對(duì)照”中的實(shí)例，探討下列問題： (1)在A同學(xué)確定自己操作無誤的情況下，A同學(xué)得出的菌落數(shù)多于其他同學(xué)的原因可能有哪兩種？,答案,答案 其他同學(xué)用與A同學(xué)一樣的土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，如果結(jié)果與A同學(xué)一致，則證明A同學(xué)操作無誤；如果結(jié)果不同，證明A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題； 將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下培養(yǎng)作為空白對(duì)照，以判斷培養(yǎng)基是否受到污染。,(2)如何設(shè)計(jì)對(duì)照實(shí)驗(yàn)幫助A同學(xué)排除上述兩個(gè)可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的因素？,答案,答案 土壤中各種微生物的數(shù)量是不同的，為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離。,4.微生物數(shù)量測定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì) (1)為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？,答案 每隔24 h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果。,(2)本實(shí)驗(yàn)中應(yīng)如何統(tǒng)計(jì)培養(yǎng)基上生長的菌落數(shù)？,答案 培養(yǎng)基、錐形瓶、試管、鏟子、信封等，需要進(jìn)行滅菌。 稱取土壤要在火焰旁進(jìn)行。 稀釋土壤溶液的每一步操作都要在火焰旁進(jìn)行。,(3)實(shí)驗(yàn)中的無菌操作主要有哪些？,答案,歸納總結(jié),分離尿素分解菌操作中的注意事項(xiàng),(1)在實(shí)驗(yàn)操作中，每個(gè)步驟都要注意無菌操作，以防培養(yǎng)基被污染，影響實(shí)驗(yàn)效果。 (2)樣品稀釋液的最佳濃度為獲得每個(gè)平板上有30300個(gè)菌落，這個(gè)稀釋度細(xì)菌一般為104、105、106倍稀釋液，放線菌一般為103、104、105倍稀釋液，真菌一般為102、103、104倍稀釋液。 (3)為排除非測試因素(培養(yǎng)基)的干擾，實(shí)驗(yàn)需設(shè)置牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基進(jìn)行空白對(duì)照。 (4)每一稀釋倍數(shù)的菌液都至少要涂布3個(gè)平板，作為重復(fù)實(shí)驗(yàn)，求其平均值，若其中有菌落數(shù)與其他平板懸殊過大的，需要對(duì)該平板重新制作。,拓展應(yīng)用,3.如圖為“土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離和計(jì)數(shù)”實(shí)驗(yàn)中樣品稀釋示意圖。據(jù)圖分析下列敘述正確的是 A.4號(hào)試管中稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)得 到的菌落平均數(shù)一定恰為5號(hào)的10倍 B.5號(hào)試管的結(jié)果表明每克該土壤中 的菌株數(shù)目為1.7108個(gè) C.在用移液管吸取菌液進(jìn)行梯度稀釋時(shí)，可用手指輕壓移液管上的橡皮頭， 吹吸三次，使菌液與無菌水充分混勻 D.某一稀釋度下至少涂3個(gè)平板，該實(shí)驗(yàn)方法統(tǒng)計(jì)得到的結(jié)果常會(huì)比實(shí) 際活菌數(shù)目高,答案,4.自然界中的微生物往往是混雜生長的。人們在研究微生物時(shí)一般要將它們分離提純，然后進(jìn)行數(shù)量的測定。下面是對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量測定的實(shí)驗(yàn)，請回答有關(guān)問題。 (1)實(shí)驗(yàn)步驟 制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液。 為了得到更加準(zhǔn)確的結(jié)果，應(yīng)選用 法接種樣品。 適宜溫度下培養(yǎng)。,稀釋涂布平板,答案,(2)結(jié)果分析 測定大腸桿菌數(shù)目時(shí)，在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計(jì)結(jié)果，與事實(shí)更加接近的是 。 A.一個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是230 B.兩個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是220和260，取平均值240 C.三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是400、212和256，取平均值289 D.四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)分別是210、260、240和250，取平均值240,答案,一同學(xué)在稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基上測得平板上菌落數(shù)的平均值為212，那么每毫升樣品中的菌落數(shù)約是(涂布平板時(shí)所用的稀釋液體積為0.2 mL) 。 用這種方法測定菌體密度時(shí)，實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量 (填“多”或“少”)，因?yàn)開 。,答案,解析,問題導(dǎo)析,1.06109個(gè),多,當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起時(shí)，平板上觀察到的只是一,個(gè)菌落,問題導(dǎo)析 (1)因?yàn)轭}中操作的目的是對(duì)大腸桿菌進(jìn)行數(shù)量的測定，所以接種的方法是 。 (2)測定活菌數(shù)量時(shí)，選擇的平板越多誤差 ，且選擇的平板要能形成 個(gè)菌落。 (3)所做的多個(gè)平板中，如果其中一個(gè)平板中菌落的數(shù)目明顯_ 其他幾個(gè)平板，則說明該平板不符合要求，應(yīng) 或舍棄。,答案,返回上頁,稀釋涂布平板法,越小,30300,多于或少于,重做,返回上頁,解析 (1)若對(duì)大腸桿菌進(jìn)行計(jì)數(shù)，則需要用稀釋涂布平板法接種樣品。 (2)應(yīng)選取多個(gè)菌落數(shù)相差不大的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，取其平均值。 2120.21061.06109(個(gè))。 因?yàn)橐粋€(gè)菌落可能由兩個(gè)或多個(gè)細(xì)菌連在一起生長而成，所以實(shí)際活菌數(shù)量要比測得的數(shù)量多。,答案 低。因?yàn)橄♂尡稊?shù)太低，則大部分菌落是由多個(gè)細(xì)菌繁殖而成，所以測定的菌落的數(shù)值要偏低。,一題多變 (1)如果某同學(xué)的稀釋倍數(shù)僅為104，則測定的數(shù)值要比題中測定的數(shù)值高還是低？為什么？,答案 培養(yǎng)基被污染，一些菌落是由雜菌繁殖而成的； 接種過程中由于操作不當(dāng)感染了雜菌； 取菌液時(shí)沒有搖晃，導(dǎo)致所取菌液中細(xì)菌個(gè)體濃度偏大等。,(2)第(2)問第小題C項(xiàng)中菌落數(shù)為400的平板不符合要求，試分析該平板中菌落數(shù)目多于其他平板的可能的原因。,答案,用稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)微生物的方法 (1)稀釋涂布平板操作要求：按照平行重復(fù)的原則，每一稀釋度的菌液涂布3個(gè)或3個(gè)以上的平板。 (2)計(jì)數(shù)的時(shí)機(jī)：當(dāng)各平板上菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)進(jìn)行計(jì)數(shù)。 (3)選擇可用于計(jì)數(shù)的平板：選擇菌落數(shù)在30300之間的平板(相同稀釋度的平板均符合該特點(diǎn))進(jìn)行計(jì)數(shù)，然后取平均值。,課堂小結(jié),目的菌株,稀釋涂布平板法,顯微鏡直接計(jì)數(shù)法,當(dāng)堂檢測,2,3,4,5,1,1.選擇培養(yǎng)基是根據(jù)某一種或某一類微生物的特殊營養(yǎng)要求或?qū)σ恍┪锢?、化學(xué)抗性而設(shè)計(jì)的培養(yǎng)基。利用這種培養(yǎng)基可以將所需要的微生物從混雜的微生物中分離出來。為選擇酵母菌和硝化細(xì)菌，應(yīng)選用的培養(yǎng)基分別為 A.伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基 B.含青霉素的培養(yǎng)基、含氨的無機(jī)培養(yǎng)基 C.含氨的無機(jī)培養(yǎng)基、含青霉素的培養(yǎng)基 D.含青霉素的培養(yǎng)基、伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基,答案,解析,2,3,4,5,1,解析 酵母菌是真菌，通?？梢杂煤嗝顾氐呐囵B(yǎng)基進(jìn)行選擇培養(yǎng)，因?yàn)榍嗝顾啬軌蛞种萍?xì)菌生長，但不能夠抑制真菌生長。硝化細(xì)菌為自養(yǎng)型生物，能夠利用氨轉(zhuǎn)變?yōu)閬喯跛岷拖跛崴尫诺哪芰堪褵o機(jī)物轉(zhuǎn)變?yōu)橛袡C(jī)物以維持自身生命活動(dòng)，利用含氨的無機(jī)培養(yǎng)基可進(jìn)行選擇培養(yǎng)。,2,3,4,1,5,2.下列操作步驟順序正確的是 土壤取樣 稱取10 g土樣，加入盛有90 mL無菌水的錐形瓶中 吸取0.1 mL土壤溶液進(jìn)行平板涂布 依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度 A. B. C. D.,答案,3.在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑的目的是 A.篩選出能分解尿素的細(xì)菌 B.對(duì)分離的菌種作進(jìn)一步鑒定 C.作細(xì)菌的營養(yǎng)成分 D.如指示劑變藍(lán)就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素,解析 篩選出能分解尿素的細(xì)菌用選擇培養(yǎng)基即可，不需要加指示劑。加入指示劑的培養(yǎng)基，目的是對(duì)要分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定。,2,3,4,1,5,答案,解析,4.從土壤中分離以尿素為氮源的細(xì)菌，下列實(shí)驗(yàn)操作不正確的是 A.將土壤用無菌水稀釋，制備103106倍的土壤稀釋液 B.將不同濃度的土壤稀釋液涂布于不同平板上 C.用加入剛果紅指示劑的選擇培養(yǎng)基篩選分解尿素的細(xì)菌 D.從周圍出現(xiàn)紅色環(huán)帶的菌落中挑取能夠分泌脲酶的菌株,解析 用加入酚紅指示劑的鑒別培養(yǎng)基可以鑒別分解尿素的細(xì)菌。,2,3,4,1,5,答案,解析,5.尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)肥料，但若不經(jīng)細(xì)菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多，同學(xué)們試圖探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌(目的菌)。培養(yǎng)基成分如下表所示，實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示。請分析回答下列問題：,2,3,4,1,5,將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1 000 mL。,解析 植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基中需要含有氮、磷、鉀及鋅、銅、鉬、鐵等元素，需要蔗糖為植物細(xì)胞提供能量，還需要