中藥化學(xué)2研究方法.ppt

第二章 中藥化學(xué)成分的一般研究方法,教學(xué)內(nèi)容 2.1 中藥化學(xué)成分類型及生合成簡(jiǎn)介 2.2 中藥化學(xué)成分的一般提取分離方法 2.3 中藥化學(xué)成分結(jié)構(gòu)的研究方法。,2.1 中藥化學(xué)成分類型及生合成簡(jiǎn)介 2.1.1 中藥化學(xué)成分的主要類型 一、分類依據(jù)及分類結(jié)果 （一）按物質(zhì)基本類型分：有機(jī)物、無(wú)機(jī)物。 （二）按元素組成、結(jié)構(gòu)母核分：生物堿、黃酮、苷、醌、甾、萜、苯丙素類等。 （三）按酸堿性分：酸性、堿性、中性。 （四）按溶解性分：非極性（親脂性）、中極性、極性（親水性）,第二章 中藥化學(xué)成分的一般研究方法,（五）按活性分：有效成分、無(wú)效成分 具有生物活性，能用分子式和結(jié)構(gòu)式表示，并具有一定的物理常數(shù)的單體化合物，稱為有效成分。 與有效成分共存的無(wú)生物活性的成分稱為無(wú)效成分。 （六）按生合成途徑分：一級(jí)代謝產(chǎn)物（如糖、蛋白質(zhì)）、二級(jí)代謝產(chǎn)物（如生物堿、黃酮、皂苷）。,二、重要類型化學(xué)成分及其理化性質(zhì) 糖類單糖、低聚糖、多糖：水溶性 苷類水溶性至中等極性 醌類多具有酚羥基，有一定酸性；游 離醌類多溶于乙醇、乙醚、氯 仿、苯等有機(jī)溶劑，難溶于水。 苯丙素類游離時(shí)為親脂性。 黃酮類多具有酚羥基，有一定酸性； 游離時(shí)易溶于甲醇、乙醇、乙 酸乙酯、乙醚等有機(jī)溶劑。,萜和揮發(fā)油游離萜類親脂性強(qiáng)；揮發(fā) 油可隨水蒸氣蒸餾、與水不相混溶。 生物堿有堿性，能與酸成鹽。游離時(shí)多難溶于 水，能溶于乙醇、氯仿、 乙醚等；成鹽 后則易溶于水和乙醇。 甾類游離甾類親脂性強(qiáng)；甾體皂苷極性大，易 溶于熱水、稀醇，難溶于親脂性有機(jī)溶劑。 三萜游離三萜親脂性強(qiáng)；三萜甾體皂苷極性 大，易溶于熱水、稀醇，難溶于親脂性有 機(jī)溶劑。 鞣質(zhì)復(fù)雜的多元酚，極性大，易溶于水、乙 醇、含水丙酮。,2.1.1 中藥化學(xué)成分的生合成簡(jiǎn)介 一、基本概念 生合成：生物體內(nèi)物質(zhì)代謝過(guò)程中發(fā)生的 合成反應(yīng)，產(chǎn)生各種產(chǎn)物的過(guò)程。 一級(jí)代謝產(chǎn)物：普遍存在、維持機(jī)體生存 的必需物質(zhì)。 二級(jí)代謝產(chǎn)物：有科、屬、種的特征，大多 具有特殊生理活性；以某些 一級(jí)代謝產(chǎn)物為前體或原 料，經(jīng)過(guò)不同代謝過(guò)程產(chǎn) 生的物質(zhì)。,二、主要生合成途徑： （一）乙酸-丙二酸途徑（AA-MA途徑）： 1、脂肪酸： 丙二酸單酰輔酶A 乙酰輔酶A 偶數(shù)碳脂肪酸 縮合、還原 丙酰輔酶A 奇數(shù)碳脂肪酸 甲基丙二酸單酰輔酶A 異丁酰輔酶A 支鏈脂肪酸 甲基丁酰輔酶A,2、酚類 縮合 乙酰輔酶A 間苯酚類 3、醌類 縮合 環(huán)合 乙酰輔酶A 多酮 醌類,（二）甲戊二羥酸途徑（MVA） 乙酰輔酶A 甲戊二羥酸單酰輔酶A 甲戊二羥酸 焦磷酸酯 萜類、甾類 （三）莽草酸途徑 丙酮酸磷酸酯、磷酸赤蘚糖- 莽草酸 苯丙氨酸 桂皮酸、苯甲酸 C6-C3、C6-C1類化合物（苯丙素）,（四）氨基酸途徑 脫羧、甲基化 苯丙氨酸、鳥(niǎo)氨酸、色氨酸等 生物堿 氧化、還原、重排 （五）復(fù)合途徑 乙酸-丙二酸途徑 黃酮的A環(huán) 莽草酸途徑 黃酮的B環(huán),第二章 中藥化學(xué)成分的一般研究方法,2.2 中藥化學(xué)成分的提取分離方法 一、基本概念 1、提?。豪眠m當(dāng)?shù)娜軇┗蚍椒?，將所要成分盡可能從原料中完全提出的過(guò)程。 2、分離：將提取物中所含的各種成分一一分開(kāi)，并將得到的單體加以精制的過(guò)程。,二、提取方法 溶劑提取法 水蒸氣蒸餾法 超臨界流體萃取法（SFE） 其他方法：升華、壓榨、微波、超聲 組織破碎法等,（一）溶劑提取法 1、定義和原理 定義：根據(jù)被提取成分的溶解性，選擇合 適的溶劑和方法進(jìn)行提取。 原理：相似相溶。,2、選擇溶劑的原則 * 對(duì)所要成分溶解度大 * 沸點(diǎn)適中容易回收 * 低毒安全 * 價(jià)廉 生產(chǎn)中最常用的溶劑為乙醇和水。,3、溶劑的分類 * 強(qiáng)極性溶劑：水 * 親水性有機(jī)溶劑： 能與水任意混溶（甲醇、乙醇、丙酮） * 親脂性有機(jī)溶劑： 不與水任意混溶，可分層（正丁醇、乙醚、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷、環(huán)己烷、石油醚） 常用溶劑的極性大小順序： 石油醚四氯化碳苯氯仿乙醚乙酸乙酯正丁醇丙酮乙醇（甲醇）水,4、化合物的結(jié)構(gòu)與溶解性的關(guān)系 （1）分子結(jié)構(gòu)中親水性基團(tuán)（羧基、羥基、氨基）越多，極性越大，親水性越強(qiáng)。 （2）分子中非極性部分越大，碳鏈越長(zhǎng)或結(jié)構(gòu)越大，則親脂性越強(qiáng)。 （3）結(jié)構(gòu)母核相同的成分，分子中功能基的極性越大，或極性功能基數(shù)量越多，則整個(gè)分子的極性越大，親水性越強(qiáng)。,5、操作方法 浸漬法 滲漉法 溶劑提取的方法 煎煮法 回流提取法 連續(xù)回流提取法,（1）浸漬法： 藥材粗粉加溶劑反復(fù)浸漬、過(guò)濾，減壓回收溶劑，得提取物。 （2）滲漉法： 粉碎悶潤(rùn)滲漉回收溶劑 （3）煎煮法： 粗粉或飲片加水悶潤(rùn)、煮沸、過(guò)濾，濃縮。 （4）回流提取法： 有機(jī)溶劑、水浴加熱回流 （5）連續(xù)回流提取法： 索氏提取器、有機(jī)溶劑、水浴加熱回流,6、影響溶劑提取法的因素 （1）溶劑 （2）提取方法 （3）藥材的粉碎度 （4）提取溫度 （5）提取時(shí)間 （6）提取次數(shù),（二）水蒸氣蒸餾法 適用于具有揮發(fā)性，能隨水蒸氣蒸餾而不被破壞的成分的提取。 如：揮發(fā)油、小分子生物堿、酚類、游離醌類等。,（三）超臨界流體萃取法（SFE） 1、超臨界流體： 當(dāng)一種物質(zhì)處于臨界溫度與臨界壓力以上的狀態(tài)下，形成既非液體又非氣體的單一相態(tài)時(shí)，稱為超臨界流體（SF）。,2、超臨界流體的特性 密度：接近液體 擴(kuò)散系數(shù)：比液體大100倍 粘度：接近氣體 物質(zhì)的溶解度與溶劑的密度、擴(kuò)散系數(shù)成正比，而與粘度成反比。 結(jié)論：超臨界流體對(duì)許多物質(zhì)有很強(qiáng)的溶 解能力，是很好的溶劑。 CO2 （最常用）、NH3、C2H6 等,3、超臨界流體 CO2： 臨界溫度為31.4，臨界壓力為7.37Mpa，易操作，價(jià)格便宜，無(wú)毒，本身惰性。 4、 CO2超臨界萃取 CO2 在高于臨界溫度和壓力的條件下成為超臨界流體，溶解出中藥原料中的成分，當(dāng)恢復(fù)常壓時(shí)，溶解在CO2超臨界流體中的成分便與氣體CO2自動(dòng)分離，直接得到萃取物。,5、 CO2超臨界萃取法的特點(diǎn)： 優(yōu)點(diǎn)： （1）接近室溫，不破壞或散失成分。 （2）幾乎不用有機(jī)溶劑，無(wú)有機(jī)溶劑 殘留，環(huán)保。 （3）提取效率高，節(jié)約能耗。 局限性： 溶解作用有一定的選擇性，對(duì)親脂性較小分子易萃取，極性大的成分可加夾帶劑（15%）。,（四）其他法： 升華法: 可升華的物質(zhì) 如：樟腦、咖啡因等 壓榨法: 用于富含油脂的中藥 如：巴豆等 組織破碎法：不穩(wěn)定的成分 如：鞣質(zhì) 超聲法：多數(shù)成分均可,三、分離精制方法, （一）溶劑法 （二）沉淀法 （三）分餾法 （四） 膜分離法 （五）結(jié)晶法 （六）色譜法,三、分離精制方法 （一）溶劑法 1、酸堿溶劑法（PH梯度萃取法） （1）適用對(duì)象： 酸堿性不同的成分。 （2）使用注意： 酸堿的強(qiáng)度、加熱溫度、與被分離成分接觸的時(shí)間等。 （3）操作方法： 舉例：,總提物的乙酸乙酯溶液 酸水萃取 酸水層 乙酸乙酯層 堿化 NaHCO3萃取 有機(jī)溶劑萃取 有機(jī)層 水層 水層 有機(jī)層 （堿性成分） （強(qiáng)極性 酸化 NaOH萃取 中性成分） 有機(jī)溶劑 萃取 有機(jī)層 有機(jī)層 堿水層 （有機(jī)酸）（中性） 酸化 有機(jī)溶劑 萃取 有機(jī)層（酚類）,2、溶劑分配法 （1）原理：利用混合物中各成分在互不相溶的兩相溶劑中分配系數(shù)不同而達(dá)到分離目的。 （2）溶劑的選擇： 極性較大的成分：正丁醇水 中等極性成分：乙酸乙酯水 低極性成分：氯仿（乙醚、石油醚、環(huán)己烷等）水 （3）所用裝置： 分液漏斗、連續(xù)液-液萃取裝置、液滴逆流層析裝置。 （4）方法： 1）液-液萃取法：多在分液漏斗中進(jìn)行 常用來(lái)粗分，是將總提物分散于水中，依次用石油醚（或環(huán)己烷）、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別減壓回收溶劑得到相應(yīng)極性的成分。,2）連續(xù)液-液萃取法 原理：兩相溶劑比重不同而自然分層，分散的 液滴逆行發(fā)生傳質(zhì) 裝置：一根或數(shù)根萃取管，管內(nèi)填充小瓷圈 管內(nèi)小瓷圈的作用： 增加液滴上升的路程和在連續(xù)相中停留的時(shí)間，更重要的是上升的液滴因撞擊填充物而被分散，擴(kuò)大了兩相溶劑萃取的接觸面積，使萃取更完全。 優(yōu)點(diǎn)： 克服了分液漏斗多次萃取和易乳化的麻煩。,3）逆流分布法（CCD） 對(duì)分配系數(shù)相差不大的成分分離效果好。 基本原理仍是利用混合物中各成分在兩相中分配系數(shù)的不同，經(jīng)過(guò)多次(數(shù)十次)轉(zhuǎn)移而分離。,4）液滴逆流層析法（DCCC） 是在逆流分布法基礎(chǔ)上發(fā)展的高分離效能的逆流分布法，分離管有1001000根，互相串聯(lián)，上行法時(shí)，分離管內(nèi)充滿重相作為固定液相，利用泵將輕相（移動(dòng)相）帶著樣品液進(jìn)入分離管，形成液滴通過(guò)分離管，流出的移動(dòng)相通過(guò)檢測(cè)，分別收集。 影響因素: 形成大小合適的液滴（界面張力、比重差、輸液管口徑、分離管材料）；泵的送液速度。,* 溶劑系統(tǒng)的選擇原則： （1）兩相溶劑不相混溶； （2）混合物中各成分在溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)差別越大越好； （3）分離酸堿兩性化合物時(shí)，緩沖液是很好的溶劑。 * 操作注意： （1）最好先將兩相溶劑相互飽和。 （2）欲分離混合物的濃度不宜過(guò)高。 （3）防止乳化（加熱、鹽析、離心破乳）,（二）沉淀法 原理：加入某些試劑后使某些成分溶解度降 低；與某些試劑生成沉淀（可逆）。 1、酸堿沉淀法： 例如：生物堿、黃酮、蒽醌、香豆素 2、專屬試劑沉淀法： 例如：雷氏銨鹽沉淀季銨堿；膽甾醇沉淀甾體皂苷； 明膠沉淀鞣質(zhì)。 3、分級(jí)沉淀法： 改變加入溶劑的極性或數(shù)量使沉淀逐步析出的方法。 例如：多糖、蛋白質(zhì)的水溶液，分次加乙醇，使含醇量逐步提高，則可得到分子量由大到小的多糖、蛋白質(zhì)；皂苷的乙醇液，分次加入乙醚或乙醚-丙酮，可按極性從大到小逐步沉淀。,4、鉛鹽沉淀法 （1）試劑： 中性醋酸鉛：與含羧基和鄰二酚羥基的酸性物質(zhì)沉淀 堿式醋酸鉛：所有酸性成分及某些中性大分子物質(zhì)。 （2）操作方法：中藥水或醇提液，先加中性醋酸鉛沉淀，過(guò)濾，濾液再加堿式醋酸鉛沉淀，過(guò)濾，兩次的沉淀分別脫鉛，得相應(yīng)的成分。 （3）脫鉛方法：硫化氫（硫化鉛沉淀）；硫酸鈉（硫酸鉛沉淀） 5、鹽析法 在混合物水溶液中，加入無(wú)機(jī)鹽（NaCL，MgSO4，（NH4）2SO4等）至一定濃度或達(dá)到飽和，使某些成分沉淀析出或用有機(jī)溶劑萃取出而達(dá)到分離的目的。如：麻黃堿、苦參堿、小檗堿等。,（三）分餾法 利用混合組分中各成分的沸點(diǎn)不同而分離的一種方法。用于液體混合物的分離。 （四） 膜分離法 定義：利用天然或人工合成的高分子膜，以外加 壓力或化學(xué)位差為推動(dòng)力，對(duì)混合物溶液進(jìn) 行分離、分級(jí)、提純和富集的方法。 如： 反滲透、超濾、微濾、電滲析、透析法 原理：大分子不能透過(guò)膜而被截留，小分子能透過(guò) 膜，使分子大小不同的物質(zhì)得到分離。 關(guān)鍵：選擇適宜的膜。,（五）結(jié)晶法 1、溶劑： 選擇合適溶劑對(duì)結(jié)晶的形成是關(guān)鍵。 合適的溶劑： （1）對(duì)欲分離的成分熱時(shí)溶解度大，冷時(shí)溶解度小，而對(duì)雜質(zhì)則冷熱溶解度一致。 （2）沸點(diǎn)要適中。 （3）不與被分離成分產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)。 例如：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、醋酸、吡啶,2、溫度 通常在加溫的情況下溶解，過(guò)濾，除雜，濃縮，放冷，一般結(jié)晶溫度在510。 3、時(shí)間 一般3 5天或更長(zhǎng)時(shí)間。 4、濃度 一般是多一些溶劑或剛好飽和，放置使其慢慢揮發(fā)到合適的濃度。 5、使用注意： 一般用于最終的純化，共存物不超過(guò)3個(gè)，且雜質(zhì)含量較低。,（六）色譜法 1、 吸附色譜 2、分配色譜 3、離子交換色譜 4、大孔樹(shù)脂色譜 5、凝膠色譜 6、超臨界流體色譜,色譜的分類： 按原理分：吸附、分配、排阻、離子交換 按場(chǎng)所分：柱、紙、薄層 按擔(dān)體分：SiO2；Ai2O3；Polyamide；Sephadex 1、吸附色譜 利用吸附劑對(duì)混合物中各種成分吸附能力的差異而使各成分分離。 吸附色譜法的分離效果，由吸附劑、洗脫劑和被分離物質(zhì)的性質(zhì)決定。,（1）吸附劑： * 硅膠： 性能：多孔，微酸性，其吸附能力稍弱 于氧化鋁。 硅膠吸附作用的強(qiáng)弱與硅膠表面的硅醇基含量有關(guān)。硅醇基易吸附水分，吸附的水分越多，吸附其他化合物的能力越弱，因此當(dāng)硅膠吸水量超過(guò)12%時(shí)，就不能作吸附劑了。,活化： 加熱到100-110除去絕大多數(shù)硅醇基吸附的水分。 當(dāng)溫度上升到500時(shí)，硅膠表面的硅醇基則脫水縮合轉(zhuǎn)變?yōu)楣柩醐h(huán)結(jié)構(gòu)，從而喪失吸附活性。 適用范圍： 硅膠適于分離的化合物范圍很廣泛，但一般不宜分離堿性化合物。,* 氧化鋁 由氫氧化鋁高溫下脫水制得，帶微堿性（有中性、堿性、酸性三種規(guī)格），適于分離堿性、中性親脂性成分。 * 聚酰胺 聚酰胺以氫鍵吸附為主。適于分離黃酮、酚類、醌類等。 * 活性炭 在水中吸附能力強(qiáng)，多用于脫色除雜。,（2） 溶劑（洗脫劑） 對(duì)于極性吸附劑，溶劑極性越大，洗脫能力越強(qiáng)。 對(duì)于非極性吸附劑，則相反。 （3）被分離物質(zhì) 對(duì)于極性吸附劑，被分離物質(zhì)的極性越強(qiáng)，吸附力越大，越難洗脫。,（4）操作方式 1） 薄層色譜： 制板 點(diǎn)樣 展開(kāi) 顯色 2） 柱色譜： 裝柱 上樣 洗脫 收集 濃縮 檢識(shí) 合并 結(jié)晶,2、分配色譜 （1）基本原理 利用物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)不同而達(dá)到分離。 （2）分類 正相色譜：固定相極性流動(dòng)相極性，用 于分離極性和中等極性的成分。 反相色譜：固定相極性流動(dòng)相極性，用 于分離非極性和中等極性的成分,（3）洗脫規(guī)律： 正相色譜中，極性小的化合物先被洗脫，極性大的化合物后被洗脫；反相色譜正好相反。 （4）常用的固定相和流動(dòng)相 固定相：正相色譜中常用氰基或氨基鍵合相；反相色譜中常用C18或C8鍵合相。 流動(dòng)相：正相色譜中主要用有機(jī)溶劑，不含水；反相色譜中常用甲醇-水或乙腈-水系統(tǒng)。,3、離子交換色譜 （1）基本原理 基于各成分解離度的不同而分離。解離度越大，越容易交換到樹(shù)脂上，越難被洗脫下來(lái)。 （2）離子交換劑的種類 離子交換樹(shù)脂、離子交換纖維素、離子交換凝膠等。 （3）應(yīng)用 主要用于生物堿、有機(jī)酸及氨基酸、蛋白質(zhì)、多糖等水溶性成分的分離純化。 （4）操作要點(diǎn) 裝柱前要用水充分溶脹，并用酸、堿預(yù)處理。,（5）操作方法舉例： 水提液 強(qiáng)酸性陽(yáng)離子樹(shù)脂柱 流出液 （酸性、中性） 樹(shù)脂床（堿性） 強(qiáng)堿性陰離子樹(shù)脂柱 稀堿洗脫 流出液 （中性） 樹(shù)脂床（酸性） 洗脫液（堿） 樹(shù)脂床 稀酸洗脫 稀酸洗 再生陽(yáng)離子樹(shù)脂 洗脫液（酸） 樹(shù)脂床 稀堿洗 再生陰離子樹(shù)脂,4、大孔樹(shù)脂色譜 （1）性能及分離原理 1） 性能： 是一種不含交換基團(tuán)，具有大孔結(jié)構(gòu)的高分子吸附劑。白色顆粒，2060目。理化性質(zhì)穩(wěn)定，不溶于酸、堿及有機(jī)溶劑。在水中吸附力強(qiáng)。選擇性好。 2）原理： 吸附作用：范德華引力或氫鍵吸附 排阻作用：多孔性網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),（2）洗脫順序 一般表現(xiàn)為反相色譜行為：被分離物質(zhì)極性越大，越先被洗脫下來(lái)，極性越小，越后被洗脫下來(lái)。分子量越大越先被洗脫下來(lái)。 （3）樹(shù)脂柱的清冼和再生 用乙醇（甲醇）洗、水洗、25%鹽酸洗、水洗、25%氫氧化鈉洗、水洗、醇洗。再生也可以用丙酮、異丙醇洗脫或回流。,（4） 應(yīng)用 1）成分的類型與樹(shù)脂的選擇： 2）優(yōu)點(diǎn)：吸附容量大，選擇性好，成本低，收率較高，再生容易等優(yōu)點(diǎn)。,5、凝膠色譜法 （1）性能及分類 性能：葡聚糖凝膠是右旋糖酐和甘油，通過(guò)醚橋鍵交聯(lián)而成的多孔網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)物質(zhì)。 交鏈度越大，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)越緊密，孔徑越小，吸水膨脹就越小，可用于小分子量物質(zhì)的分離。反之，則用于大分子量物質(zhì)的分離。 常見(jiàn)類型： 葡聚糖凝膠（Sephadex G） 羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20） 聚丙烯酰胺凝膠(Sephacrylose,商品名Bio-gel P) 瓊脂糖凝膠（Sepharose, 商品名Bio-gel A）,（2）分離原理 葡聚糖凝膠吸水后，形成凝膠粒子，在交鏈鍵的骨架中存在著許多網(wǎng)眼，只能使小分子進(jìn)入，大分子則被排阻在凝膠顆粒的外部難以進(jìn)入網(wǎng)眼內(nèi)部，因此大分子物質(zhì)首先被洗脫出來(lái)。 （3）應(yīng)用 多用于分離水溶性大分子化合物。,6、超臨界流體色譜 利用程序升壓或程序升溫，改變超臨界流體的特性，將極性大小不同的成分進(jìn)行分離的方法稱為超臨界流體色譜。 用超臨界流體做流動(dòng)相時(shí)，兼具氣體和液體的特點(diǎn)，可以分離氣相不能適用的不揮發(fā)性的較大分子，又能分離揮發(fā)油，其分離速度比液相快510倍，分辨能力大5倍。,2.3 中藥化學(xué)成分結(jié)構(gòu)的研究方法 （一）純度測(cè)定 1、外觀性狀 2、物理常數(shù)：mp 3、色譜法：TLC, HPLC 4、已知物可與對(duì)照品對(duì)照（混熔點(diǎn)、色譜） （二）化學(xué)成分的理化鑒定 1、物理常數(shù)的測(cè)定 2、分子式的確定：元素分析、高分辨質(zhì)譜 3、結(jié)構(gòu)母核與官能團(tuán)的確定： 顯色反應(yīng)；化學(xué)降解法；衍生物制備等。,（三）波譜法 1、紅外光譜（IR) 化合物用量只需510微克，測(cè)定范圍4000500cm-1。 1000 4000cm-1為特殊功能區(qū)，可以確定羰基、苯環(huán)、羥基等功能基。 1000500cm-1為指紋區(qū)，每個(gè)化合物有自己的特征指紋圖譜。 應(yīng)用： 功能基的確認(rèn)。,2、 紫外光譜（UV） 只有分子結(jié)構(gòu)中具有共軛體系，即可產(chǎn)生- 、n-躍遷和某些n-躍遷的化合物才能在紫外光區(qū)產(chǎn)生吸收。 應(yīng)用： 根據(jù)紫外吸收光譜初步推測(cè)化合物的共軛體系的結(jié)構(gòu)。,3、核磁共振(NMR) （1） 1H-NMR: 參數(shù)：化學(xué)位移(: 020ppm)，偶合常數(shù)(J) 及質(zhì)子數(shù)。 應(yīng)用：推測(cè)氫的數(shù)目、種類、相鄰基團(tuán)結(jié)構(gòu) -H: 68.5ppm -OH: 9ppm COO-CH- 或 -O-CH-O- : 45ppm -CH-或-CH-O-R : 34ppm OCH3: 3.8ppm CO-CH-: 23ppm R-CH,CH2,CH3 : 0.82ppm,（2） 13C-NMR: 參數(shù)：化學(xué)位移(: 0250ppm)、偶合常數(shù)(JCH) 及弛豫時(shí)間。 測(cè)定技術(shù)： 質(zhì)子寬帶去偶： 13C信號(hào)在圖譜上均為單峰。 偏共振去偶： 連接質(zhì)子的碳有殘余裂分：CH為雙峰； CH2為三重峰； CH3為四重峰。 INEPT（低靈敏核極化轉(zhuǎn)移增強(qiáng)法）： 通過(guò)調(diào)節(jié)弛豫時(shí)間（）來(lái)調(diào)節(jié)CH、 CH2、CH3信號(hào)的強(qiáng)度。 =1/4 JCH時(shí)， CH、 CH2、CH3均為正峰； =2/4 JCH時(shí)， 僅CH為正峰； =3/4 JCH時(shí)， CH、 CH3為正峰， C