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細菌的分離計數(shù)一選擇題(每小題2分)1下列哪項不是菌落的特征( )A大小和形狀B光澤度和透明度C顏色和硬度D氣味和PH2下列關于微生物分離和培養(yǎng)的有關敘述,錯誤的是()A微生物培養(yǎng)前,需對培養(yǎng)基進行消毒B測定土壤樣品中的細菌數(shù)目,常用菌落計數(shù)法C分離土壤中不同的微生物,要采用不同的稀釋度D分離能分解尿素的細菌,要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源3能合成脲酶的微生物所需的碳源和氮源分別是( )ACO2和N2B葡萄糖和NH3CCO2和尿素D葡萄糖和尿素4統(tǒng)計細菌數(shù)目的方法有( )涂布平板法直接計數(shù)法濾膜法ABCD5欲從土壤中分離出能分解尿素的細菌,下列實驗操作中不正確的是()A將土壤用無菌水進行一系列的梯度稀釋B同一濃度的土壤稀釋液應至少涂布三個平板C可將未接種的培養(yǎng)基在相同條件下培養(yǎng)作為對照D用加入剛果紅指示劑的培養(yǎng)基可篩選出能分解尿素的細菌6關于測定土壤中細菌的數(shù)量,正確的敘述是A一般選用103107倍的稀釋液分別涂布B測定放線菌的數(shù)量,一般選用103、104和105倍稀釋C測定真菌的數(shù)量,一般選用103、104和105倍稀釋D當?shù)谝淮螠y量某種細菌的數(shù)量時,可以將104106倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)7在本課題的實驗中,下列關于土壤取樣的敘述,錯誤的是( )A土壤取樣時應選取肥沃、濕潤的土壤B先鏟去表層土3cm左右,再取樣C取樣用的小鐵鏟和信封在使用前不用滅菌D應在火焰旁邊稱取土壤8用稀釋涂布夾板法測定同一土壤樣品中的細菌數(shù),大對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中,得到以下幾種統(tǒng)計結果,正確的是( )A涂布了一個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是230B涂布了兩個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260,取平均值238C涂布了3 個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212、256,取平均值163D涂布了3 個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240、250,取平均值2339在做分離分解尿素的細菌實驗時,A同學從對應106培養(yǎng)基上篩選出大約150個菌落,而其它同學只選擇出50個菌落。A同學的結果產(chǎn)生的原因可能有( )土樣不同培養(yǎng)基污染操作失誤沒有設置對照ABCD10關于測定土壤中細菌、放線菌、真菌的數(shù)量,下列敘述正確的是( )A測定細菌的數(shù)量一般選用103107倍的稀釋液分別涂布培養(yǎng)B測定放線菌的數(shù)量一般選用103、104和105倍的稀釋液分別涂布培養(yǎng)C測定真菌的數(shù)量一般選用103、104和105倍的稀釋液分別涂布培養(yǎng)D當?shù)谝淮螠y某細菌的數(shù)量時,可以將101107倍的稀釋液分別涂布到平板上培養(yǎng)11從土壤中篩選蛋白酶產(chǎn)生菌時,所用培養(yǎng)基為( )A加富培養(yǎng)基B選擇培養(yǎng)基C基礎培養(yǎng)基D鑒別培養(yǎng)基12以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑,培養(yǎng)細菌后,指示劑將( )A變藍色B變紅色C變黑色D變棕色13下列是關于“檢測土壤中細菌總數(shù)”實驗操作的敘述,其中錯誤的是( ) A用蒸餾水配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,經(jīng)高溫、高壓滅菌后倒平板B取104、105 、106倍的土壤稀釋液和無菌水各0.1ml,分別涂布于各組平板上C將實驗組和對照組平板倒置,37恒溫培養(yǎng)24-48小時D確定對照組無菌后,選擇菌落數(shù)在300以上的實驗組平板進行計數(shù)14用來判斷選擇培養(yǎng)基是否起到了選擇作用需要設置的對照是( )A未接種的選擇培養(yǎng)基B未接種的牛肉高蛋白胨培養(yǎng)基C接種了的牛肉高蛋白胨培養(yǎng)基D接種了的選擇培養(yǎng)基15用稀釋涂布平板法來統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目,其結果與實際值比( )A比實際值要高B 比實際值要低 C和實際值一樣D 比實際值可能高也可能低16下列能選擇出分解尿素的細菌的培養(yǎng)基是 ( )AKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、葡萄糖、尿素、瓊脂、水BKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、葡萄糖、瓊脂、水CKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、尿素、瓊脂、水DKH2PO4、Na2HP04、MgS047H20、牛肉膏、蛋白胨、瓊脂、水17下列關于從土壤中分離細菌的操作步驟中,正確的是( )土壤取樣 稱取10g土壤取出加入盛有90mL無菌水的錐形瓶中 吸取0.1mL進行平板涂布依次稀釋至101、102、103、104、105、106、107稀釋度ABCD18下列有關微生物分離和培養(yǎng)的有關敘述,錯誤的是( )A微生物培養(yǎng)前,需對培養(yǎng)基進行消毒B測定土壤樣品中的細菌數(shù)目,常用稀釋涂布平板法 C分離土壤中不同的微生物,要采用不同的稀釋度 D分離能分解尿素的細菌,要以尿素作為培養(yǎng)基中唯一的氮源19需在火焰旁操作的有( )土壤取樣 稱取土壤 稀釋土壤溶液 涂布平板 微生物培養(yǎng)ABCD20下列關于微生物的培養(yǎng)敘述錯誤的是 ( )A細菌一般在3037的溫度下培養(yǎng)12 d B放線菌一般在2528的溫度下培養(yǎng)57 dC霉菌一般在2528的溫度下培養(yǎng)34 dD不同種類的微生物,一般需要相同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間21以下操作用到接種環(huán)的是( )A平板劃線操作B系列稀釋操作C涂布平板操作D倒平板操作二填空題22(12分)人的糞便中含有致病菌,但是通常因數(shù)量少而不易檢測。大腸桿菌是生存在人體腸道中的正常菌群,每天糞便中約有109個,且能與致病菌混雜生長。如果食物中出現(xiàn)大腸桿菌,就意味著食物可能被糞便污染而帶上致病菌,因而常將大腸桿菌的數(shù)量作為食品衛(wèi)生的檢測的指標之一。請回答下列問題:(1)用稀釋涂布平板法來測定大腸桿菌的數(shù)目,實際統(tǒng)計的是培養(yǎng)基上 的數(shù)目。(2)計數(shù)時所用的培養(yǎng)基是固體培養(yǎng)基,接種前需要對其滅菌,常用的方法是 。(3)某班不同實驗小組在測定牛奶中大腸桿菌數(shù)是否超標時,分別得到如下數(shù)據(jù),A組:457個/平板,B組:76個/平板,C組:9個/平板。你認為哪組同學的數(shù)據(jù)比較準確_,此數(shù)據(jù)比實際值要_(低/高),其原因是_ 。實驗完成后需要對培養(yǎng)基進行_處理,然后才能倒掉。23(10分)自然界中的微生物往往是混雜生長的,人們在研究微生物時一般要將它們分離提純,然后進行數(shù)量的測定。下面是對大腸桿菌進行數(shù)量測定的實驗步驟:制備稀釋倍數(shù)為102、103、104、105、106的系列稀釋液為了得到更加準確的結果,你選用_接種樣品適宜溫度下培養(yǎng)請回答有關問題:結果分析:(1)測定的大腸桿菌數(shù),在對應稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中,得到以下幾種統(tǒng)計結果,正確可信的是( )A一個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是23B兩個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)是22和26,取平均值24C三個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、5和52,取平均值26D四個平板,統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、30、24和25,取平均值25(2)一同學在稀釋倍數(shù)為105的培養(yǎng)基中測得平板上菌落數(shù)的平均值為23.4,那么每毫升樣品中的菌株數(shù)是(涂布平板時所用稀釋液的體積為02mL) _。(3)某同學在測定大腸桿菌的密度時發(fā)現(xiàn),在培養(yǎng)基上還有其他雜菌的菌落,能否肯定該大腸桿菌的品系被污染了?為什么? 24(6分)在做土壤中分解尿素的細菌的分離與計數(shù)實驗時,出現(xiàn)如下問題,請給予解答:(1)一位同學用稀釋倍數(shù)為106的稀釋液在培養(yǎng)基中涂布了3個平板,統(tǒng)計的菌數(shù)數(shù)為21、212和256,該同學以這3個平板上菌落數(shù)的平均值163作為統(tǒng)計結果。你認為這一結果是否接近真實值?如果需要改進,如何改進?_ 。 (2)A同學篩選出的菌落為150個,其他同學只選擇出50個,并且他在設計實驗時并沒有設置對照。你認為A同學結果產(chǎn)生的原因可能有哪些?_ 。如何設計對照實驗排除可能影響實驗結果的因素:_ 。25(16分)尿素是一種重要的農業(yè)肥料,但若不經(jīng)細菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物種類和數(shù)量繁多,某同學試圖從土壤中篩選出能高效降解尿素的細菌(目的菌),表中所示是該同學配制的培養(yǎng)基成分:KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖10.0 g(NH4)2SO41.0 g瓊脂15.0 g蒸餾水定容到1000 mL(1)該培養(yǎng)基中的主要營養(yǎng)物質包括_。從狀態(tài)上看,該培養(yǎng)基屬于_培養(yǎng)基。(2)在生物的培養(yǎng)中,一般要對配制的培養(yǎng)基采用高壓滅菌,其中“高壓”是為了_。(3)若培養(yǎng)從土壤中分離出來的目的菌,該培養(yǎng)基成分如何調整?_,依據(jù)是_。該目的菌同化作用類型是_。(4)該同學在純化土壤中的目的菌時,最常用的接種方法是_。在純化土壤中該目的細菌時,發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上的菌落連成一片,最可能的原因是_。附加題:1.(10分)將50mL牛奶煮沸,倒入經(jīng)消毒的一個錐形瓶內,錐形瓶口用棉團堵住,每日觀察牛奶的情況(如下圖),共進行4天。 (1)這個實驗可證明_。 (2)為這個實驗設計的對照實驗應該是_。 (3)實驗結束時,牛奶會_,檢測方法是_,產(chǎn)生這一現(xiàn)象的原因是_。 (4)牛奶在這個實驗中的作用是_。 (5)實驗前先將牛奶煮沸的原因是_。 (6)加入土樣前,先讓牛奶冷卻至室溫的原因是_。 (7)用棉團堵住錐形瓶的原因是_。 (8)實驗前對錐形瓶進行消毒這一個步驟是否是必要的?_,理由是_。 2.(10分)不同微生物生長所要求的最適溫度不同。請就測定大腸桿菌生長的最適溫度的實驗完成下列問題: (1)依次按稱量、溶化、調pH、分裝(每管5mL)、_、包扎的順序,完成培養(yǎng)基的配制,再用_(方法)滅菌后,取8支試管分別標明20、28、37、45四種溫度,每種溫度2管。 (2)向每管中接入處于分裂旺盛期的大腸桿菌液0.1mL,混勻。在相應溫度下培養(yǎng)24h。 (3)測定結果顯示,45下菌體最少,因為細胞內的_等發(fā)生了不可逆的破壞。37 細菌的分離計數(shù)答案1-5DADDD 6-10BCDAB 11-15BBDCB 16-21ACADDA22(1)菌落(1分)(2)高壓蒸汽滅菌法(2分) (3)B組(1分) 低(1分) 培養(yǎng)基中可能有兩個或多個菌落緊挨在一起,共同形成一個菌落(2分) 滅菌(1分)23稀釋涂布平板法、(1)D (2)1. 17107 (3)不能肯定、也可能是培養(yǎng)基污染或操作不當24(1)不接近真實值,接種前將菌液搖勻后重新實驗 (2)可能是土樣不同,也可能是培養(yǎng)基污染或操作失誤;方案有二:一是由其他同學用與A同學一樣的土壤進行實驗,如果與A同學一致,則證明無誤,如果結果不同,則證明A同學存在操作失誤或培養(yǎng)基配制有問題。另一種方案是將A同學配制的培養(yǎng)基在不加土樣的情況下進行培養(yǎng),作為空白對照,以證明培養(yǎng)基是否受到污染。(4分) 25(1)氮源、碳源、無機鹽和水固體(2)殺死培養(yǎng)基中的細菌芽孢(3)將(NH4)2SO4換成尿素要篩選出降解尿素的細菌,只能以尿素作為唯一的氮源異養(yǎng)型(4)稀釋涂布平板法和平板劃線法菌液濃度過高(或培養(yǎng)過程中被雜菌污染,或用接種針劃下一
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