GB5009.181-2016食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中丙二醛的測(cè)定.pdf

中 華 人 民 共 和 國(guó) 國(guó) 家 標(biāo) 準(zhǔn)G B5 0 0 9.1 8 12 0 1 6食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中丙二醛的測(cè)定2 0 1 6 - 0 8 - 3 1發(fā)布2 0 1 7 - 0 3 - 0 1實(shí)施中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)發(fā) 布G B5 0 0 9.1 8 12 0 1 6 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替G B/T5 0 0 9.1 8 12 0 0 3 豬油中丙二醛的測(cè)定 。本標(biāo)準(zhǔn)與G B/T5 0 0 9.1 8 12 0 0 3相比, 主要變化如下: 標(biāo)準(zhǔn)名稱(chēng)修改為“ 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中丙二醛的測(cè)定” ; 保留原標(biāo)準(zhǔn)方法分光光度法為第二法, 擴(kuò)大了方法的適用范圍; 增加了高效液相色譜法為第一法, 擴(kuò)大了方法的適用范圍; 增加了附錄A。G B5 0 0 9.1 8 12 0 1 61 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)食品中丙二醛的測(cè)定1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中丙二醛的測(cè)定方法。本標(biāo)準(zhǔn)第一法適用于食品中丙二醛的測(cè)定; 本標(biāo)準(zhǔn)第二法適用于動(dòng)植物油脂中丙二醛的測(cè)定。第一法 高效液相色譜法2 原理試樣先用酸液提取, 再將提取液與硫代巴比妥酸(T B A) 作用生成有色化合物, 采用高效液相色譜-二極管陣列檢測(cè)器測(cè)定, 外標(biāo)法定量。3 試劑和材料除非另有說(shuō)明, 本方法所用試劑均為分析純, 水為G B/T6 6 8 2規(guī)定的一級(jí)水。3.1 試劑3.1.1 甲醇(CH3OH) : 色譜純。3.1.2 三氯乙酸(C2HC l3O2) 。3.1.3 乙二胺四乙酸二鈉(C1 0H1 4N2N a2O82 H2O) 。3.1.4 硫代巴比妥酸(T B A) (C4H4N2O2S) 。3.2 試劑配制3.2.1 乙酸銨溶液(0.0 1m o l/L) : 稱(chēng)取0.7 7g乙酸銨, 加水溶解, 定容至10 0 0m L, 經(jīng)0.4 5m過(guò)濾器過(guò)濾。3.2.2 三氯乙酸混合液: 準(zhǔn)確稱(chēng)取3 7.5 0g( 精確至0.0 1g) 三氯乙酸(3.1.2) 及0.5 0g( 精確至0.0 1g) 乙二胺四乙酸二鈉(3.1.3) , 用水溶解, 稀釋至5 0 0m L。3.2.3 硫代巴比妥酸(T B A) 水溶液:準(zhǔn)確稱(chēng)取0.2 8 8g( 精確至0.0 0 1g) 硫代巴比妥酸(3.1.4) 溶于水中, 并 稀 釋 至1 0 0 m L( 如 不 易 溶 解, 可 加 熱 超 聲 至 全 部 溶 解, 冷 卻 后 定 容 至1 0 0 m L) , 相 當(dāng)于0.0 2m o l/L。3.3 標(biāo)準(zhǔn)品1,1,3,3 -四乙氧基丙烷( 又名丙二醛乙縮醛,C1 1H2 4O4,C A S號(hào):1 2 2 - 3 1 - 6) : 純度9 7%。3.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制3.4.1 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 0 0g/m L) : 準(zhǔn)確移取0.3 1 5g( 精確至0.0 0 1g)1,1,3,3 -四乙氧基丙烷至G B5 0 0 9.1 8 12 0 1 62 10 0 0m L容量瓶中, 用水溶解后稀釋至10 0 0m L, 置于冰箱4儲(chǔ)存。有效期3個(gè)月。3.4.2 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(1.0 0g/m L) : 準(zhǔn)確移取丙二醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(3.4.1)1.0m L, 用三氯乙酸混合液(3.2.2) 稀釋至1 0 0m L, 置于冰箱4儲(chǔ)存。有效期2周。3.4.3 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)系列溶液: 準(zhǔn)確移取丙二醛標(biāo)準(zhǔn)使用液0.1 0m L、0.5 0m L、1.0m L、1.5m L、2.5m L于1 0m L容量瓶中, 加三氯乙酸混合液(3.2.2) 定容至刻度, 該標(biāo)準(zhǔn)溶液系列濃度為0.0 1g/m L、0.0 5g/m L、0.1 0g/m L、0.1 5g/m L、0.2 5g/m L, 現(xiàn)配現(xiàn)用。4 儀器和設(shè)備4.1 高效液相色譜: 配有二極管陣列檢測(cè)器。4.2 天平: 感量為0.0 0 01g、0.0 1g。4.3 恒溫振蕩器。4.4 恒溫水浴鍋。4.5 水相針式濾器,0.4 5m聚醚砜濾膜。5 分析步驟5.1 試樣制備5.1.1 提取稱(chēng)取均勻的樣品5g( 精確至0.0 1g) , 置入1 0 0m L具塞錐形瓶中, 準(zhǔn)確加入5 0m L三氯乙酸混合液, 搖勻, 加塞密封, 置于恒溫振蕩器上5 0 振搖3 0m i n, 取出, 冷卻至室溫, 用雙層定量慢速濾紙過(guò)濾, 棄去初濾液, 續(xù)濾液備用。5.1.2 衍生化準(zhǔn)確移取5.1.1濾液和標(biāo)準(zhǔn)系列溶液各5m L分別置于2 5m L具塞比色管內(nèi), 加入5m L硫代巴比妥酸(T B A) 水溶液, 加塞, 混勻, 置于9 0水浴內(nèi)反應(yīng)3 0m i n, 取出, 冷卻至室溫, 取適量上層清液過(guò)濾膜上機(jī)分析。5.2 液相色譜參考條件色譜柱:C1 8柱, 柱長(zhǎng)1 5 0mm, 內(nèi)徑4.6mm, 粒徑5m, 或性能相當(dāng)者。流動(dòng)相:0.0 1m o l/L乙酸銨甲醇=7 03 0( 體積比) 。柱溫:3 0。流速:1.0m L/m i n。進(jìn)樣量:1 0L。檢測(cè)波長(zhǎng):5 3 2n m。5.3 測(cè)定分別吸取標(biāo)準(zhǔn)系列工作液(3.4.3) 和待測(cè)試樣的衍生溶液注入高效液相色譜儀中, 測(cè)定相應(yīng)的峰面積, 以標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo), 以峰面積響應(yīng)值為縱坐標(biāo), 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)得到待測(cè)液中丙二醛的濃度, 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)品的液相色譜圖參見(jiàn)附錄A。G B5 0 0 9.1 8 12 0 1 63 6 分析結(jié)果的表述試樣中丙二醛的含量按式(1) 計(jì)算:X=cV10 0 0m10 0 0(1) 式中:X 試樣中丙二醛含量, 單位為毫克每千克(m g/k g) ;c 從標(biāo)準(zhǔn)系列曲線(xiàn)中得到的試樣溶液中丙二醛的濃度, 單位為微克每毫升(g/m L) ;V 試樣溶液定容體積, 單位為毫升(m L) ;m 最終試樣溶液所代表的試樣質(zhì)量, 單位為克(g) ;10 0 0 換算系數(shù)。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示, 結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。7 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過(guò)算術(shù)平均值的1 0%。第二法 分光光度法8 原理丙二醛經(jīng)三氯乙酸溶液提取后, 與硫代巴比妥酸(T B A) 作用生成粉紅色化合物, 測(cè)定其在5 3 2n m波長(zhǎng)處的吸光度值, 與標(biāo)準(zhǔn)系列比較定量。9 試劑和材料除非另有說(shuō)明, 本方法所用試劑均為分析純, 水為G B/T6 6 8 2規(guī)定的三級(jí)水。9.1 試劑9.1.1 三氯乙酸(C2HC l3O2) 。9.1.2 乙二胺四乙酸二鈉(C1 0H1 4N2N a2O82 H2O) 。9.1.3 硫代巴比妥酸(T B A) (C4H4N2O2S) 。9.2 試劑配制9.2.1 三氯乙酸混合液: 準(zhǔn)確稱(chēng)取3 7.5 0g( 精確至0.0 1g) 三氯乙酸及0.5 0g( 精確至0.0 1g) 乙二胺四乙酸二鈉, 用水溶解, 稀釋至5 0 0m L。9.2.2 硫代巴比妥酸(T B A) 水溶液: 準(zhǔn)確稱(chēng)取0.2 8 8g( 精確至0.0 0 1g) 硫代巴比妥酸溶于水中, 并稀釋至1 0 0m L( 如不易溶解, 可加熱超聲至全部溶解, 冷卻后定容至1 0 0m L) , 相當(dāng)于0.0 2m o l/L。9.3 標(biāo)準(zhǔn)品1,1,3,3 -四乙氧基丙烷( 又名丙二醛乙縮醛,C1 1H2 4O4,C A S號(hào):1 2 2 - 3 1 - 6) : 純度9 7%。G B5 0 0 9.1 8 12 0 1 64 9.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制9.4.1 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液(1 0 0g/m L) : 準(zhǔn)確移取0.3 1 5g( 精確至0.0 0 1g)1,1,3,3 -四乙氧基丙烷至10 0 0m L容量瓶中, 用水溶解后稀釋至10 0 0m L, 置于冰箱4儲(chǔ)存。有效期3個(gè)月。9.4.2 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)使用溶液(1.0 0g/m L) : 準(zhǔn)確移取丙二醛標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.0m L, 用三氯乙酸混合液稀釋至1 0 0m L, 置于冰箱4儲(chǔ)存。有效期2周。9.4.3 丙二醛標(biāo)準(zhǔn)系列溶液: 準(zhǔn)確移取丙二醛標(biāo)準(zhǔn)使用液0.1 0m L、0.5 0m L、1.0m L、1.5m L、2.5m L于1 0m L容量瓶中, 加三氯乙酸混合液定容至刻度, 該標(biāo)準(zhǔn)溶液系列濃度為0.0 1g/m L、0.0 5g/m L、0.1 0g/m L、0.1 5g/m L、0.2 5g/m L, 現(xiàn)配現(xiàn)用。1 0 儀器和設(shè)備1 0.1 分光光度計(jì)。1 0.2 天平: 感量為0.0 0 01g、0.0 1g。1 0.3 恒溫振蕩器。1 0.4 恒溫水浴鍋。1 1 分析步驟1 1.1 試樣制備稱(chēng)取樣品5g( 精確到0.0 1g) 置入1 0 0m L具塞錐形瓶中, 準(zhǔn)確加入5 0m L三氯乙酸混合液, 搖勻,加塞密封, 置于恒溫振蕩器上5 0振搖3 0m i n, 取出, 冷卻至室溫, 用雙層定量慢速濾紙過(guò)濾, 棄去初濾液, 續(xù)濾液備用。準(zhǔn)確移取上述濾液和標(biāo)準(zhǔn)系列溶液各5m L分別置于2 5m L具塞比色管內(nèi), 另取5m L三氯乙酸混合液作為樣品空白, 分別加入5m L硫代巴比妥酸(T B A) 水溶液, 加塞, 混勻, 置于9 0水浴內(nèi)反應(yīng)3 0m i n, 取出, 冷卻至室溫。1 1.2 測(cè)定以樣品空白調(diào)節(jié)零點(diǎn), 于5 3 2n m處1c m光徑測(cè)定樣品溶液和標(biāo)準(zhǔn)系列溶液(9.4.3) 的吸光度值,以標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo), 吸光度值為縱坐標(biāo), 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。1 2 分析結(jié)果的表述試樣中丙二醛含量, 按式(2) 計(jì)算:X=cV10 0 0m10 0 0(2) 式中:X 試樣中丙二醛含量, 單位為毫克每千克(m g/k g) ;c 從標(biāo)準(zhǔn)系列曲線(xiàn)中得到的試樣溶液中丙二醛的濃度, 單位為微克每毫升(g/m L) ;V 試樣溶液定容體積, 單位為毫升(m L) ;m 最終試樣溶液所代表的試樣質(zhì)量, 單位為克(g) ;10 0 0 換算系數(shù)。計(jì)算結(jié)果以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的算術(shù)平均值表示, 結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。G B5 0 0 9.1 8 12 0 1 65 1 3 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測(cè)定結(jié)果的絕對(duì)差值