JJG964-2001毛細(xì)管電泳儀.pdf

中華人民共和國國家計量檢定規(guī)程J J G 9 6 4 -2 0 0 1毛 細(xì) 管 電 泳 儀C a p i l l a r y E l e c t r o p h o r e s i s I n s t r u m e n t2 0 0 1 一0 7 一0 6 發(fā)布2 0 0 1 一1 0 一0 1 實施國 家 質(zhì) 量 監(jiān) 督 檢 驗 檢 疫 總 局發(fā)布J J G 9 6 4 - 2 0 01毛細(xì)管電泳儀檢定規(guī)程 V e r i f i c a t i o n R e g u l a t i o n o fC a p i l l a r y E l e c t r o p h o r e s i s I n s t r u me n tJ J G 9 6 4 - 2 0 0 1 9峙尸.令.心-.心.心.勺.今.卜 本規(guī)程經(jīng)國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局于2 0 0 1 年 0 7 月0 6日 批準(zhǔn)， 并自2 0 0 1 年 1 0月 0 1日起施行。歸 口 單 位: 全國物理化學(xué)計量技術(shù)委員會主要起草單位: 河北省計量測試研究所參加起草單位: 福建省計量科學(xué)技術(shù)研究所 保定高新區(qū)天惠分離科學(xué)研究所 北京市新技術(shù)應(yīng)用研究所本規(guī)程委托全國物理化學(xué)計量技術(shù)委員會負(fù)責(zé)解釋J J G 9 6 4 - 2 0 0 1本規(guī)程主要起草人: 劉增明 方靜 鄭吉鵬 參加起草人: 羅峰 丁天惠 王 雅芬( 河北省計量測試研究所)( 河北省計量測試研究所)( 河北省計量測試研究所)( 福建省計量科學(xué)技術(shù)研究所)( 保定高新區(qū)天惠分離科學(xué)研究所)( 北京市新技術(shù)應(yīng)用研究所)J J G 9 6 4 - 2 0 0 1目錄1 范圍 ( 1 )2 概述 。 ( 1 )3 計量性能要求 ( 1 )4 通用技術(shù)要求 一( 2 )5 計量器具控制 ( 2 )附錄 A 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 。 ( 6 )附錄 B 檢定證書 ( 背面)格式 ( 7)附錄C 檢定記錄格式 ( 8 ).I J G 9 6 4 - 2 0 0 1毛細(xì)管電泳儀檢定規(guī)程范 圍本規(guī)程適用于帶有紫外檢測器 的毛細(xì)管電泳儀的首次檢定、后續(xù)檢定和使用中檢2概述 毛細(xì)管電泳儀 ( 以下簡稱儀器)是根據(jù)在電解質(zhì)溶液中，帶電粒子在高壓電場作用下，以不同的速度定向遷移的現(xiàn)象來達(dá)到組分分離的 目的。各組分分離后通過檢測器進行檢測，并根據(jù)各組分的遷移時間和響應(yīng)值進行定性、定量分析。電泳的支持物是彈性石英毛細(xì)管。 儀器主要由高壓電源、進樣器、毛細(xì)管柱、檢測器、數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等幾部分構(gòu)成，工作 原理見 圖 l a毛 細(xì) 俗檢 測 器圖 1毛細(xì)管電泳儀工作原理3 計量 性能要 求3. 23 . 33 . 43 . 53 . 6中心波長誤差 :士 2 n m;濾光片半寬度:鎮(zhèn)巧 n m ( 固定波長紫外檢側(cè)器) 。波長示值誤差 :士 2 n m;波長重復(fù)性:鎮(zhèn)1 n m ( 連續(xù)可調(diào)波長紫外檢測器) ?；€漂移 :毛0 . 0 0 2 A U / h o基線噪聲: 鎮(zhèn)0 . 0 0 0 5 A U a檢測限:鎮(zhèn)1 X 1 0 一 6 g / m l ( 維生素1 3 6 ) 高壓 電源J J G 9 6 4 - 2 0 0 13 . 6 . 1 電壓范圍: 0 - - 3 0 k V，示值誤差為士2 . 0 %03 . 6 . 2 電流范圍: 0 - - 3 0 0 I A ， 示值誤差為士 3 . 0 % .3 . 6 . 3 穩(wěn)定性 觀察 3 mi n內(nèi)電壓穩(wěn)定性鎮(zhèn)1 . 5 %03 . 7 定性、定量測量重復(fù)性3 . 7 . 1 定性測量重復(fù) 性誤差 ( 8 次 測量)S 定 性 51 . 5 %03 . 7 . 2 定量測量重復(fù)性誤差 ( 8 次測量)S 定 值 53 . 0 %0通 用技 術(shù)要求1 儀器外觀1 . 1 儀 器 應(yīng) 有下列 標(biāo)志: 名 稱、 型 號、 制 造廠名、 生產(chǎn)日 期、 產(chǎn)品 編 號、 返 j寶標(biāo)、電源電壓和頻率、最大功率。1 . 2 儀器應(yīng)能平穩(wěn)置于工作臺上，各緊固件均應(yīng)緊固良好 ，各調(diào)節(jié)器、按鍵和開關(guān)44.4.志4.均能正常工作。4. 14 . 2 電纜線的接插件均應(yīng)緊密配合，接觸良好。氣路系統(tǒng):氣路處于正常工作條件下，將氣路末端堵住 ，用皂膜液涂抹各接頭，應(yīng)無氣泡產(chǎn)生。4 . 3 絕緣電阻:絕緣電阻應(yīng)大于 1 0 MC I .5 計t器具控制 計量器具控制包括:首次檢定 、后續(xù)檢定和使用中檢驗。5 . 1 檢定條件5 . 1 . 1 檢定環(huán)境條件5 . 1 . 1 . 1 環(huán)境溫度 :( 2 0 士5 )5 . 1 . 1 . 2 環(huán)境濕度:相對溫度鎮(zhèn)8 5 % R H5 . 1 . 2 供電電源:( 2 2 0 士 2 2 ) V, ( 5 0 士 5 ) H z ,5 . 1 . 3 檢定用設(shè)備5 . 1 . 3 . 1 秒表:分度值 0 . 1 s o5 . 1 . 3 . 2 分析天平: 最大稱量2 0 0 g ， 最小分度為0 . 1 m g o5 . 1 . 3 . 3 電流表: 0 一 5 0 0 fL A , 1 . 。 級。5 . 1 . 3 . 4 靜電電壓表:0 -3 0 k V, 0 . 5 級。5 . 1 . 3 . 5 絕緣電阻表:5 0 0 V, 0 - - 5 0 0 MS 2 , 1 . 0級。5 . 1 . 3 . 6 電阻:2 2 Ma , 1 . 0級。5 . 1 . 4 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和試劑5 . 1 . 4 . 1 維生素氏 ( 分析純) 。5 . 1 . 4 . 2 磷酸氫二鈉 ( 分析純) 。5 . 1 . 4 . 3 紫外吸收標(biāo)準(zhǔn)溶液 G B W ( E ) 1 3 0 0 6 6 0.I .I G 9 6 4 - 2 0 0 15 . 2 檢定項目和檢定方法5 . 2 . 1 外觀檢查 按 4 . 1 -4 . 2條說明進行外觀及初步檢查。5 . 2 . 2 高壓電源的檢定5 . 2 . 2 . 1 電壓示值誤差的檢定 將靜電電壓表接人高壓電源的輸出端，在全量程范圍內(nèi)均勻選取 6 個點 ( 其中包括最大標(biāo)稱輸出電壓) ，測量各點輸出電壓 ，按公式 ( 1 )計算各點的示值誤差，取其最大值作為電壓示值誤差。S V示 二V 標(biāo)一V V ;x 1 0 09 6( 1 )式中: s V 示 電 壓示值誤差，( %); V ; 各點測量電壓值， k V : V 標(biāo) 各點標(biāo)稱電壓值， k V o5 . 2 . 2 . 2 電流示值誤差的檢定 將2 2 MO電阻和電流表 串人高壓電源的輸出端 ，調(diào)整儀器到最大標(biāo)稱輸出電流，讀取電流表的顯示值，按公式 ( 2 )計算輸出電流的示值誤差。a I ,-,I 標(biāo)一I Ix 1 0 09 6( 2 )式中: 8 1 示 電 流示值誤差，( %) ; I 測量電流 值， f A ; 1 標(biāo) 儀器最大 標(biāo)稱輸出電流 值， 拌 A o5 . 2 . 2 . 3 電源穩(wěn)定性 儀器預(yù)熱 3 0 m i n后，設(shè)定輸出電壓為 2 0 k V，接靜電電壓表于高壓電源電壓輸出端，連續(xù)觀察 3 m i n ，記錄電壓表顯示的最大值和最小值。最大值與最小值的差與設(shè)定輸出電壓值之比為電源的穩(wěn)定性。5 . 2 . 3 紫外檢測器性能的檢定5 . 2 . 3 . 1 波長示值誤差及重復(fù)性的檢定5 . 2 . 3 . 1 . 1 固定波長紫外檢測器的中心波長及半寬度檢定 將儀器配置的濾光片取出，按照J(rèn) J G 8 1 2 -1 9 9 3 干涉濾光片檢定規(guī)程檢定中心波長 ( 峰值波長)及半寬度，其誤差及半寬度應(yīng)符合 9 . 1 條的要求。5 . 2 . 3 . 1 . 2 連續(xù)可調(diào)波長紫外檢測器的波長示值誤差及重復(fù)性檢定 采用紫外吸收標(biāo)準(zhǔn)溶液分別在2 3 5 , 2 5 7 , 3 1 3 n m和3 5 0 n m 4 點檢定波長示值誤差。 將檢測器波長設(shè)在比校準(zhǔn)波長低 5 n m處 ( 如檢定 2 5 7 n m時 ，檢測器波長先調(diào)到2 5 2 n m ) ，以1 n m的間隔改變波長， 得到波長特征曲線，曲線波峰、波谷處對應(yīng)的波長為該點測量波長， 重復(fù)測量3 次， 取其平均值。 測量波長平均值與 標(biāo)準(zhǔn)波長之差 為波 .I J G 9 6 4 - 2 0 0 1長示值誤差。用同樣的方法檢定其它 3 點，其最大值與最小值之差為波長的重復(fù)性。5 . 2 . 4 靜態(tài)基線漂移和基線噪聲的檢定 將儀器各部分連接好 ，選擇如下條件進行:波長 2 5 4 n m、毛細(xì)管柱為空管，開機穩(wěn)定 3 0 m i n 后 ，記錄 1 h的基線，計算基線漂移和基線噪聲。5 . 2 . 5 檢測限 儀 器處于正常工作狀態(tài)下， 將檢測器波長調(diào)到2 5 4 nn ， 用7 5 L m x 4 0 c m的毛細(xì)管柱， 柱 溫2 5 ( ; ， 電泳電 壓為1 5 k V 。選擇氣壓8 k P a ， 進樣時間3 s( 氣壓進 樣) ; 高差2 0 c m，時間 1 8 0、( 位差進樣) 。待基線穩(wěn)定后，用 2 0 mm o l / L的磷酸氫二鈉作為緩沖溶 液， 取質(zhì) 量濃度為2 X 1 0 - 6 g / m l 的維生素B 6 溶液， 連續(xù)進樣3 次， 計算其峰高的算術(shù)平均值。 檢測限定義為等于或大于兩倍基線噪聲峰高所代表的樣品的質(zhì)量濃度，按式 ( 3 )計算檢測限。 D一2 HN p / H ( 3 )式中:D 檢測限 ( 最小檢測質(zhì)量濃度) ， g / ml ; H N噪聲峰高， m m; p 樣 品 的 質(zhì) 量 濃 度， g / m l ; H樣品峰高，m m.5 . 2 . 6 定性定量測量重復(fù)性的檢定 將儀器連接好 ，使 之處于正 常工作狀態(tài) ，按 5 . 2 . 5的條件，注人質(zhì)量 濃度為1 X 1 0 - 4 g / m l 的維生素B 6 溶液， 記錄遷移時間和峰面積 ( 峰高) ， 連續(xù)測量8 次， 按式( 4 )計算 相對標(biāo)準(zhǔn)偏差S 定 性 c 2 ) o8 性 (定 ， ) 一 丫 拿 喂 是 刃 三 爭10 096( 4 )式中: S 定 性 淀量 ) 定性 ( 定量) 重復(fù)性; X ; 第 i 次測得的遷移時間或峰面積 ( 峰高) ; X -n次測量結(jié)果的算術(shù)平均值; i 測量序號; n -鋇 d 量次數(shù)。5 . 2 . 7 絕緣電阻的檢定 電源插頭不接人電網(wǎng)，用絕緣電阻表在電源進線與儀器外殼之間施加5 0 0 V直流電壓，穩(wěn)定 5 s 后 ， 測量絕緣電阻應(yīng)大于 1 0 ma.5 . 2 . 8 首次檢定的儀器需按照本檢定規(guī)程的要求全面進行檢定 ，后續(xù)檢定和使用中檢驗可不進行 4 . 3 和 3 . 6 條的檢定。5 . 3 檢定結(jié)果的處理 經(jīng)檢定符合本規(guī)程要求的儀器發(fā)給檢定證書;不符合的發(fā)給檢定結(jié)果通知書，并注J J G 9 6 4 - 2 0 0 1明不合格項 目。5 . 4 檢定周期 毛細(xì)管電泳儀檢定周期一般不超過 2 年。J J G 9 6 4 - 2 0 0 1附級 A標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制A. 1 試劑試 劑 名 稱分子式級別水H2 O二次蒸餾水維生素 B 6幾H 0 3 N H C 1分 析 純磷酸氫二鈉N a 2 H P 0 4 . 1 2 玫O分 析 純A . 2 儀器和玻璃f器名稱規(guī) 格一一名稱規(guī)格/ m l分析天平200 。 ， 、 ， 。 ， m 、 一無分度吸管1容量瓶1 0 0, 2 5 0 n i l無分度吸管2稱量瓶2 0 ml 一一燒杯5 0A . 3 2 . O x 1 0 - 6 g / m l 維生素B 6 溶液的配制 在分析天平上， 準(zhǔn)確稱取1 0 . 0 m g 的維生素氏 固體， 放人5 0 m l 的 燒杯中，加人2 0 m m o l / L的磷酸氫二鈉緩沖溶液使之完全溶解，將此溶液小心移人 1 0 0 ml 容量瓶中，并用2 0 m m o l / L的磷酸氫二鈉緩沖溶液稀釋至刻度，搖勻。該溶液的質(zhì)量濃度為1 . 0 x 1 0 一 4 g / m l ， 然后用緩沖溶液逐級稀釋配制成2 . 0 x 1 0 - 6 g / m l 的 維生素氏溶液。A . 4 2 0 m m o l / L 的磷酸氫二鈉緩沖溶液的配制 在分析天平上稱取 1 . 7 9克磷酸氫二鈉固體，放人 5 0 m l 燒杯中，用蒸餾水稀釋，并移人 2 5 0 m l 的容量瓶中，用少量蒸餾水沖洗燒杯 3次，沖洗液并人容量瓶中，然后用蒸餾水稀釋至刻度，搖勻后倒人磨口瓶中備用。J J G 9 6 4 - 2 0 0 1附錄 B檢定證書 ( 背面)格式檢定結(jié)果1 外觀2 氣路系統(tǒng)3 電壓示值誤差4 電流示值誤差5 穩(wěn)定性6 中心波長誤差7 濾光片半寬度8 波長示值誤差9 波長重復(fù)性1 0 基線漂移n基線噪聲1 2 檢測 限1 3 定性測量重復(fù)性1 4 定量測量重復(fù)性巧絕緣電阻備注 :J J G 9 6 4 - 2 0 0 1附錄 C檢 定 記 錄 格 式證 書編號受檢單位溫 ( 濕)度儀器型號儀器編號檢 定 員制 造 廠檢定 日期核 驗 員夕 卜 觀檢查2 高壓電源2 . 1 電壓范圍及示值誤差電壓示值/ k V51 01 52 02 53 0 ( m a x )輸出電壓/ k V示值誤差/( %)2 . 2 電流示值誤差最大輸出電流介 e A電流表測量值乍A示值誤差/( %)2 . 3 電源穩(wěn)定性電源穩(wěn)定性 3 mi n電壓最大值電壓最小值穩(wěn)定性/(