實驗16骨骼肌單收縮的分析收縮的總和與強直收縮.ppt

實驗16骨骼肌單收縮的分析收縮的總和與強直收縮,基礎生物學實驗（三）,一、實驗目的 1、觀察骨骼肌單收縮過程。分析骨骼肌單收縮的3個時期。比較直接刺激肌肉與刺激支配肌肉的神經，其收縮曲線有何不同。 2、了解骨骼肌收縮的總和現(xiàn)象。觀察不同頻率的閾上刺激引起肌肉收縮形式的改變。,二、實驗原理 1、肌組織對于一個閾上強度的刺激，發(fā)生一次迅速的收縮反應，稱為單收縮。單收縮的過程可分為3個時期：潛伏期；收縮期和舒張期。 2、兩個同等強度的閾上刺激，相繼作用于神經肌肉標本，如果刺激間隔大于單收縮的時程，肌肉則出現(xiàn)兩個分離的單收縮；,如果刺激間隔小于單收縮的時程而大于不應期，則出現(xiàn)兩個收縮反應的重疊，稱為收縮的總和。當同等強度的連續(xù)閾上刺激作用于標本時，則出現(xiàn)多個收縮反應的疊加，此為強直收縮。當后一收縮發(fā)生在前一收縮的舒張期時，稱為不完全強直收縮；后一收縮發(fā)生在前一收縮的收縮期時，各自的收縮則完全融合，肌肉出現(xiàn)持續(xù)的收縮狀態(tài)，此為完全強直收縮。,三、實驗材料與儀器 1、蟾蜍(或蛙)的坐骨神經腓腸肌標本、常用手術器械、計算機采集系統(tǒng)、支架、雙凹夾、肌槽、不銹鋼盤或培養(yǎng)皿、神經屏蔽盒、滴管、任氏液、橡皮泥、棉線。,四、實驗方法 1、制備蛙或蟾蜍坐骨神經干標本。 2、實驗裝置的連接 將神經屏蔽盒與計算機連接，屏蔽盒的地線良好接地。 3、儀器的操作和實驗參數(shù)的設置,(1)本實驗在Windows界面的PcLab平臺下進行，打開PcLab。 (2)采樣窗參數(shù)的設置 點擊快捷工具欄上的“采樣條件設置”快捷按鈕，打開“采樣條件設置”窗口，“顯示模式”為“記憶示波”，“采樣間隔為25ls，“觸發(fā)方式”為刺激器觸發(fā)，“采樣窗口”為2通道。將采樣窗右側顯示控制區(qū)的參數(shù)設置為“通用(mV)”，“全通”設置為10kHz。 (3)刺激參數(shù)的設置 選取“主周期刺激”設定刺激參數(shù)。選擇刺激模式為“主周期”方式，刺激器參數(shù)為1，波寬(ms)：01，幅度(v)：0.12(根據(jù)刺激需要調節(jié))，間隔(ms)：50，延時(ms)：1-20，根據(jù)顯示需要調節(jié))，脈沖數(shù)：1。,4、將蛙的坐骨神經干標本置于屏蔽盒內的電極上，神經干的中樞端置于刺激電極一側，從末梢端引導動作電位。 5、實驗觀察與記錄 點擊“開始”按鈕，采樣窗開始掃描，再點擊“刺激”按鈕，刺激所產生的生物電信號即顯示在采樣窗上。如果刺激中途需要停止，則點擊“停止”按鈕。如果需要改變y軸的生物信號波幅，將鼠標箭頭移至采樣窗的右側顯示控制區(qū)，到上方時，則出現(xiàn)“放大圖形”，到下方時，則出現(xiàn)“壓縮圖形”，用鼠標每點擊一次，可使生物電信號圖形成比例地放大或縮小一次。也可點擊采樣窗最左側的“左顯示控制區(qū)”按鈕，改變放大器增益。如果需要改變x軸的生物信號的波形寬度，則用鼠標點擊“X軸顯示控制區(qū)”的“橫向擴展曲線”或“橫向壓縮曲線”，以使生物信號圖形顯示至最佳需要狀態(tài)。,(1)神經干興奮閾值的測定 刺激強度從01 V開始，逐漸增加刺激強度，當剛剛出現(xiàn)動作電位時的刺激強度，即為神經干的興奮閾值。 (2)雙相動作電位 在刺激閾值的基礎上逐漸加大刺激強度，可見動作電位的圖形為雙相，而且其幅值隨刺激強度增大而加大。當刺激增加到一定強度時，可見動作電位的幅值不再增大。 (3)動作電位參數(shù)的測量 用鼠標點擊“快捷工具欄”的“觀察”， 移動鼠標，測出動作電位的一系列參數(shù)。 (4)單相動作電位 在兩個引導電極之間損傷神經干標本，即可使原來的雙相動作電位的下相消失，變?yōu)閱蜗?；注意上相動作電位的圖形有什么變化。,6、開啟計算機采集系統(tǒng)，連接張力傳感器(100 g)與刺激輸出。將標本的骨頭固定在肌槽的骨頭固定孔內，腓腸肌肌腱上的扎線與張力傳感器應變梁相連，調節(jié)好扎線的張力，不可過松或過緊，以使肌肉自然拉平為宜(保證肌肉一旦收縮，即可牽動張力傳感器的應變梁)。將神經搭在肌槽的電極上，接通電極與刺激輸出的線路。 7、實驗觀察 (1)收縮的總和 啟動波形顯示圖標，調節(jié)掃描速度為510mms，調節(jié)單收縮幅度為15 cm左右。調節(jié)刺激設置為雙刺激方式，并使兩個閾上刺激強度相等。先調節(jié)刺激間隔大于單收縮的時程，然后逐漸縮短刺激間隔，分別觀察并記錄肌肉收縮形式的變化,(2)強直收縮 減慢掃描速度(5mm/s)并衰減振幅增益，使單收縮的幅度減小至35 mm。調節(jié)刺激設置為串刺激方式，分別以15次s(串長為5)、6次/s(串長為10)、10次/s(串長為20)、30次/s(串長為35)和45次/s(串長為50)的頻率刺激標本，觀察并記錄肌肉收縮曲線的變化。注意用任氏液濕潤標本，兩次刺激之間稍有間歇，使肌肉休息片刻。,五、注意事項 1、實驗過程中注意保持標本的活性良好，經常用任氏液濕潤之。 2、如果在顯示窗上發(fā)現(xiàn)動作電位圖形倒置，將引導電極位置對換即可。,六、作業(yè) 1、本實驗的