實(shí)驗(yàn)16骨骼肌單收縮的分析收縮的總和與強(qiáng)直收縮.ppt

實(shí)驗(yàn)16骨骼肌單收縮的分析收縮的總和與強(qiáng)直收縮,基礎(chǔ)生物學(xué)實(shí)驗(yàn)（三）,一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1、觀察骨骼肌單收縮過程。分析骨骼肌單收縮的3個(gè)時(shí)期。比較直接刺激肌肉與刺激支配肌肉的神經(jīng)，其收縮曲線有何不同。 2、了解骨骼肌收縮的總和現(xiàn)象。觀察不同頻率的閾上刺激引起肌肉收縮形式的改變。,二、實(shí)驗(yàn)原理 1、肌組織對(duì)于一個(gè)閾上強(qiáng)度的刺激，發(fā)生一次迅速的收縮反應(yīng)，稱為單收縮。單收縮的過程可分為3個(gè)時(shí)期：潛伏期；收縮期和舒張期。 2、兩個(gè)同等強(qiáng)度的閾上刺激，相繼作用于神經(jīng)肌肉標(biāo)本，如果刺激間隔大于單收縮的時(shí)程，肌肉則出現(xiàn)兩個(gè)分離的單收縮；,如果刺激間隔小于單收縮的時(shí)程而大于不應(yīng)期，則出現(xiàn)兩個(gè)收縮反應(yīng)的重疊，稱為收縮的總和。當(dāng)同等強(qiáng)度的連續(xù)閾上刺激作用于標(biāo)本時(shí)，則出現(xiàn)多個(gè)收縮反應(yīng)的疊加，此為強(qiáng)直收縮。當(dāng)后一收縮發(fā)生在前一收縮的舒張期時(shí)，稱為不完全強(qiáng)直收縮；后一收縮發(fā)生在前一收縮的收縮期時(shí)，各自的收縮則完全融合，肌肉出現(xiàn)持續(xù)的收縮狀態(tài)，此為完全強(qiáng)直收縮。,三、實(shí)驗(yàn)材料與儀器 1、蟾蜍(或蛙)的坐骨神經(jīng)腓腸肌標(biāo)本、常用手術(shù)器械、計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)、支架、雙凹夾、肌槽、不銹鋼盤或培養(yǎng)皿、神經(jīng)屏蔽盒、滴管、任氏液、橡皮泥、棉線。,四、實(shí)驗(yàn)方法 1、制備蛙或蟾蜍坐骨神經(jīng)干標(biāo)本。 2、實(shí)驗(yàn)裝置的連接 將神經(jīng)屏蔽盒與計(jì)算機(jī)連接，屏蔽盒的地線良好接地。 3、儀器的操作和實(shí)驗(yàn)參數(shù)的設(shè)置,(1)本實(shí)驗(yàn)在Windows界面的PcLab平臺(tái)下進(jìn)行，打開PcLab。 (2)采樣窗參數(shù)的設(shè)置 點(diǎn)擊快捷工具欄上的“采樣條件設(shè)置”快捷按鈕，打開“采樣條件設(shè)置”窗口，“顯示模式”為“記憶示波”，“采樣間隔為25ls，“觸發(fā)方式”為刺激器觸發(fā)，“采樣窗口”為2通道。將采樣窗右側(cè)顯示控制區(qū)的參數(shù)設(shè)置為“通用(mV)”，“全通”設(shè)置為10kHz。 (3)刺激參數(shù)的設(shè)置 選取“主周期刺激”設(shè)定刺激參數(shù)。選擇刺激模式為“主周期”方式，刺激器參數(shù)為1，波寬(ms)：01，幅度(v)：0.12(根據(jù)刺激需要調(diào)節(jié))，間隔(ms)：50，延時(shí)(ms)：1-20，根據(jù)顯示需要調(diào)節(jié))，脈沖數(shù)：1。,4、將蛙的坐骨神經(jīng)干標(biāo)本置于屏蔽盒內(nèi)的電極上，神經(jīng)干的中樞端置于刺激電極一側(cè)，從末梢端引導(dǎo)動(dòng)作電位。 5、實(shí)驗(yàn)觀察與記錄 點(diǎn)擊“開始”按鈕，采樣窗開始掃描，再點(diǎn)擊“刺激”按鈕，刺激所產(chǎn)生的生物電信號(hào)即顯示在采樣窗上。如果刺激中途需要停止，則點(diǎn)擊“停止”按鈕。如果需要改變y軸的生物信號(hào)波幅，將鼠標(biāo)箭頭移至采樣窗的右側(cè)顯示控制區(qū)，到上方時(shí)，則出現(xiàn)“放大圖形”，到下方時(shí)，則出現(xiàn)“壓縮圖形”，用鼠標(biāo)每點(diǎn)擊一次，可使生物電信號(hào)圖形成比例地放大或縮小一次。也可點(diǎn)擊采樣窗最左側(cè)的“左顯示控制區(qū)”按鈕，改變放大器增益。如果需要改變x軸的生物信號(hào)的波形寬度，則用鼠標(biāo)點(diǎn)擊“X軸顯示控制區(qū)”的“橫向擴(kuò)展曲線”或“橫向壓縮曲線”，以使生物信號(hào)圖形顯示至最佳需要狀態(tài)。,(1)神經(jīng)干興奮閾值的測(cè)定 刺激強(qiáng)度從01 V開始，逐漸增加刺激強(qiáng)度，當(dāng)剛剛出現(xiàn)動(dòng)作電位時(shí)的刺激強(qiáng)度，即為神經(jīng)干的興奮閾值。 (2)雙相動(dòng)作電位 在刺激閾值的基礎(chǔ)上逐漸加大刺激強(qiáng)度，可見動(dòng)作電位的圖形為雙相，而且其幅值隨刺激強(qiáng)度增大而加大。當(dāng)刺激增加到一定強(qiáng)度時(shí)，可見動(dòng)作電位的幅值不再增大。 (3)動(dòng)作電位參數(shù)的測(cè)量 用鼠標(biāo)點(diǎn)擊“快捷工具欄”的“觀察”， 移動(dòng)鼠標(biāo)，測(cè)出動(dòng)作電位的一系列參數(shù)。 (4)單相動(dòng)作電位 在兩個(gè)引導(dǎo)電極之間損傷神經(jīng)干標(biāo)本，即可使原來的雙相動(dòng)作電位的下相消失，變?yōu)閱蜗?；注意上相?dòng)作電位的圖形有什么變化。,6、開啟計(jì)算機(jī)采集系統(tǒng)，連接張力傳感器(100 g)與刺激輸出。將標(biāo)本的骨頭固定在肌槽的骨頭固定孔內(nèi)，腓腸肌肌腱上的扎線與張力傳感器應(yīng)變梁相連，調(diào)節(jié)好扎線的張力，不可過松或過緊，以使肌肉自然拉平為宜(保證肌肉一旦收縮，即可牽動(dòng)張力傳感器的應(yīng)變梁)。將神經(jīng)搭在肌槽的電極上，接通電極與刺激輸出的線路。 7、實(shí)驗(yàn)觀察 (1)收縮的總和 啟動(dòng)波形顯示圖標(biāo)，調(diào)節(jié)掃描速度為510mms，調(diào)節(jié)單收縮幅度為15 cm左右。調(diào)節(jié)刺激設(shè)置為雙刺激方式，并使兩個(gè)閾上刺激強(qiáng)度相等。先調(diào)節(jié)刺激間隔大于單收縮的時(shí)程，然后逐漸縮短刺激間隔，分別觀察并記錄肌肉收縮形式的變化,(2)強(qiáng)直收縮 減慢掃描速度(5mm/s)并衰減振幅增益，使單收縮的幅度減小至35 mm。調(diào)節(jié)刺激設(shè)置為串刺激方式，分別以15次s(串長為5)、6次/s(串長為10)、10次/s(串長為20)、30次/s(串長為35)和45次/s(串長為50)的頻率刺激標(biāo)本，觀察并記錄肌肉收縮曲線的變化。注意用任氏液濕潤標(biāo)本，兩次刺激之間稍有間歇，使肌肉休息片刻。,五、注意事項(xiàng) 1、實(shí)驗(yàn)過程中注意保持標(biāo)本的活性良好，經(jīng)常用任氏液濕潤之。 2、如果在顯示窗上發(fā)現(xiàn)動(dòng)作電位圖形倒置，將引導(dǎo)電極位置對(duì)換即可。,六、作業(yè) 1、本實(shí)驗(yàn)的