【畢業(yè)學位論文】（Word原稿）水貂胰蛋白酶消化模型的建立及外源酶對水貂消化和生產(chǎn)性能的影響特種經(jīng)濟動物飼養(yǎng)博士論文

密級 論文編號： 中國農(nóng)業(yè)科學院 學位論文 水貂 胰蛋白酶 消化模型的建立及外源酶對水貂消化和生產(chǎn)性能的影響 i 摘 要 本文 通過 四個 試驗 對 水貂消化道參數(shù)與生產(chǎn)性能的研究， 來 建立 水貂胰蛋白酶消化模型及 確定 外源酶對 水貂消化和生產(chǎn)性能的影響 ，分為以下幾個主要部分： 試驗一：水貂胰蛋白酶作用模型的建立。 試驗采用 66只水貂，采食后每隔 30 分鐘測定 300分鐘內(nèi)消化道內(nèi)蛋白酶活性與 ，反映水貂采食后消化道內(nèi)消化規(guī)律 的變化 。由試驗結(jié)果可知， 水貂采食后消化道前段 為酸性，隨采食時間的延長， 呈現(xiàn)先 升 高后 降 低的變化，但一直保持酸性 ；消化道后段 為堿性，采食后其 隨時間變化規(guī)律與消化道前段則 正相反，呈現(xiàn)先變低，后升高的趨勢 ， 但一直保持堿性 0120 分鐘；水貂采食后消化道各部 位蛋白 酶活性 逐漸升高，大約在采食后 60 120 分鐘時間段內(nèi)達到最高，以后逐漸降低 ，在降低的過程中存在 活 性 升高的波峰出現(xiàn)； 水貂消化道各部位蛋白酶活性以回腸 部位 最高。 試驗二： 外源酶對水貂生產(chǎn)性能及腸道主要消化參數(shù)的影響。 試驗采用 3 3 復因子試驗設(shè)計， 在水貂傳統(tǒng)日糧中添加外源酶，通過生產(chǎn)性能指標、消化道各部位的胰蛋白酶 活性 與 來驗證添加外源酶對水貂生產(chǎn)性能與對水貂消化的影響。試驗結(jié)果表明， 添加外源酶對水貂的 總體 生產(chǎn)性能未產(chǎn)生明顯影響 ，但對 公貂活體長 產(chǎn)生了極顯著的影響，中水平蛋白酶添加組比 對照組公貂活體長提高 了 對 水貂母貂胃蛋白酶 活性 并無顯著影響 ； 對公貂間胃蛋白 活 性 的影響達到極顯著水平 ，添加脂肪酶組公貂胃蛋白 活 性 最高 ； 對水貂十二指腸胰蛋白 活 性 、回腸胰蛋白 活 性 、 公貂空腸胰蛋白 活 性 并無顯著影響 ； 對母貂間空腸胰蛋白 活 性 影響達顯著水平 ，添加低水平淀粉酶與蛋白酶組 顯著高于其他組 ； 對水貂結(jié)腸胰蛋白 活 性 影響達極顯著水平 ， 添加蛋白酶與脂肪酶的最高水平組顯著高于添加淀粉酶的中低水平組 ； 對水貂公貂直腸胰蛋白 活 性 并無顯著影響 ； 對水貂母貂直腸胰蛋白 活 性 影響達極顯著水平 ； 對水貂胃內(nèi) 母貂腸內(nèi)各部位 對水 貂公貂腸內(nèi)各部位 的影響均達極顯著水平 ， 添加脂肪酶組與對照組在腸 道 內(nèi)以回腸為分界 線， 回腸以前較 高 ，以后較 低 ； 添加淀粉酶組正相反。添加蛋白酶組則在小腸各部位 試驗三：外源酶對水貂糖代謝的影響。 本試驗 采 用 56 只 16 周齡健康短毛黑水貂，采用 2 3復因子試驗設(shè)計，研究添加外源淀粉酶與蛋白酶對水貂糖代謝水平 的影響 。結(jié)果表明， 在 育成期與冬毛生長期 水貂傳統(tǒng)日糧類型條件下，添加試驗用淀粉酶與蛋白酶，對各試驗組水貂肝糖元含量 、 公貂血糖水平影響不顯著 ； 對各試驗組水貂母貂血糖水平影響顯著（ P 。添加高水平淀粉酶組效果最明顯 , 其血糖水平高于對照組 試驗四：外源酶的添加與水貂日糧類型之間 的 關(guān)系。 試驗采用 3 3 復因子試驗設(shè)計， 在水貂特定日糧中添加外源酶，通過生產(chǎn)性能指標、營養(yǎng)物質(zhì)消化率來驗證 適宜的試驗日糧類型 及在該日糧類型條件下適宜添加的外源酶類 型。 結(jié)果表明，在水貂冬毛生長期，在本試驗日糧類型條件下，添加試驗用 酶 對水貂活體長 無 顯著影響；對各組水貂體重影響 達 極顯著 水平 。植物性蛋白 代水平越高，水貂越冬體重損失越大； 對飼料蛋白質(zhì)消化率的影響達極顯著水平 ，表現(xiàn)為 植物性蛋白質(zhì)替代水平越高， 水貂對飼料中蛋白質(zhì)的消化率越低， 中 性 蛋白酶可極顯著的提高水貂對飼料中蛋白質(zhì)的消化率 。其中 30%植物性蛋白替代并添加酸性蛋白酶試驗組的 飼料蛋白質(zhì)消化率比不添加酶 60%植物性蛋白替代試驗組提高 對水貂飼料脂肪消化率的影響達極顯著水平 ，其中 30%植物性蛋白替代試驗組 添加酸性蛋白酶的飼料脂肪消化率比不添加酶 60%植物性蛋白替代試驗組提高 關(guān)鍵詞 :水貂， 胰蛋白 酶，模型，生產(chǎn)性能 to of of to in by in of of of in 66 1 of pH in 0 00 in of pH in of is pH of of is pH of of H is PH of of is pH of of is pH of of pH is pH of 0 120 of in It at 0 120 it of in in of of in is of of to in of 3 to of of pH in in of to of of to of is P . of to of is P . of in is of to of is P . of in is of to of of of is P. of to of of of is P . of to of of of is P . of to of of of is P . of of in is of to of of of is P . of to of of of is P . of to pH in is P . of to pH of is P . of to pH of is P is as pH in of in is pH in in is pH of in is pH of in pH of in of to in 56 16 3 of to in of to of is P is in of to of of is P . of to of of is P . of to of of is of of in is of of 3 to of of in It is in of to of is P is in of to of is P . of is is of to of is P . of is of in is of in is of in 0% of is no 0% of of to of is P . of in 0% of is no 0% of v 目 錄 中文摘要 英文摘要 第一章 引 言 1 些 生物學特性 1 4 源酶制劑在 畜牧業(yè)中 的應(yīng)用 14 義和總體設(shè)計方案 22 第二章 試驗研究 25 驗 一 水貂 胰蛋白 酶作用模型的建立 25 料 與方法 25 果 27 論 33 結(jié) 39 驗二 外源酶對水貂 生產(chǎn)性能及 腸道主要消化 參數(shù)的影響 40 料與方法 40 果 41 論 54 結(jié) 58 驗三 外源酶對水貂糖代謝的影響 59 料與方法 59 果 61 論 64 結(jié) 66 驗四 外源酶的添加與水貂日糧類型之間關(guān)系的研究 67 料與方法 67 果 70 論 74 結(jié) 78 第三章 總結(jié)與結(jié)論 79 文的總結(jié) 79 文的主要結(jié)論 81 文的創(chuàng)新點 82 待于進一步研究的問題 82 參考文獻 83 致謝 95 作者簡歷 96 1 1 4 14 of 22 25 25 25 27 33 39 40 40 41 54 58 59 59 61 64 66 67 67 70 74 78 79 79 81 82 to 82 83 95 96 中國農(nóng)業(yè)科學院博士學位論文 引 言 1 第一章 引言 水貂是我國主要的小型珍貴毛皮動物。它起源于美洲和歐洲的野生水貂， 50年代 末從前蘇聯(lián)引入中國，在我國的東南沿海發(fā)展迅速，經(jīng)過多年的選育， 開始形成自己的品種，水貂其經(jīng)濟價值主要在于其毛皮可以作為高檔裘皮服裝原料，貂油可以作為高檔的化妝品的原料 ， 貂 心可以入藥。 近幾年隨著人們生活水平的提高，裘皮服飾已經(jīng)走入我們普通百姓家庭，對其的需求量也不斷增加 （樸厚坤， 1989） 。 同時，隨著 我國飼料工業(yè)的發(fā)展和壯大，特種養(yǎng)殖已經(jīng)成為畜牧業(yè)不可或缺的一部分 ，發(fā)展特種動物飼料已經(jīng)引起廣泛的關(guān)注。 水貂的某些生 物學特性 貂的 分類學地位 水貂（ 動物的分類學上隸屬于哺乳綱（ 食肉目（ 鼬科（ 鼬屬（ 自然界中 ， 有在形態(tài)上相似的美洲水貂（ 歐洲水貂（ .）兩種，因美洲水貂較歐洲水貂被毛美觀，故目前世界上各國廣為飼養(yǎng)的水貂均為美洲水貂的后裔 （鄒興淮， 1986） 。 美洲水貂主要的分布區(qū)域在北美洲的阿拉斯加到墨西哥灣以及俄羅斯的西伯利亞等地 區(qū)。美洲水貂共有 11 個亞種，其中經(jīng)濟價值最高、與家養(yǎng)水貂關(guān)系組密切的有 3個亞種（ 貂的 形態(tài)與 習性 水貂是一種小型珍貴毛皮動物，體細長，外形與黃鼬相似。頭較小，耳殼小，四肢短，前后肢均具有五指和五趾，指、趾端有利爪，指、趾間有微蹼，后趾間的蹼比前指明顯，尾細長，尾毛長而蓬松。 野生狀態(tài)下 的 水貂毛色多為淺褐色，人工飼養(yǎng)下，由于長期選擇的結(jié)果，毛色加深，多為黑褐色或者深褐色，叫標準色，通過變異及人工分離，已經(jīng)培育出白色、 銀藍、鋼藍、咖啡、米黃、藍寶石、紅色、黑十字、紫羅蘭等幾十種色型。 野生狀態(tài)下，水貂多在沖毀的河床，淺水湖岸或林中小溪、近水處棲息，以自然形成的巖洞營巢，冬季，喜在冰洞或在不結(jié)冰的急流暖水一帶活動棲息。 水貂為肉食性動物，野生時主要捕捉鼠類、鳥類、蛙類、蛇等為食， 有 在巢穴中貯食習性。水貂視覺較弱，聽覺靈敏，行動敏捷，性兇殘，攻擊力較強。多在夜間活動覓食，善于游泳與潛水。水貂的壽命約為 12 15 年，具有 8 10 年的繁殖能力。人工飼養(yǎng)條件下，種貂利用率高，利用年限為 2 3年，少數(shù)優(yōu)良個體 4 5年，幼貂 9 10月 齡達到性成熟。 水貂是季節(jié)性發(fā)情，季節(jié)性換毛動物，每年春季發(fā)情， 2 月底到 3 月上中旬。一年換 2 次被毛，春季脫冬毛長夏毛，秋季脫夏毛長冬毛。 中國農(nóng)業(yè)科學院博士學位論文 引 言 2 貂的經(jīng)濟價值 水貂皮是高檔裘皮原料 ， 自古有裘皮之王的美稱，是世界裘皮市場的領(lǐng)頭品種 ， 價格昂貴。其毛細密、平齊，有好的光澤度，富有彈性，板質(zhì)堅韌輕柔。貂皮可制高檔的裘皮大衣、皮領(lǐng)、帽子等，具有保暖，輕柔，華麗，穿著舒適等特點。 水貂副產(chǎn)品有多種用途 ： 貂心具有很高的藥用價值。對治療風濕性心臟病、充血性心力衰竭有獨特療效。貂的睪丸和陰莖制成 的 藥酒，具有滋補壯陽的 功效。貂油含有豐富的不飽和脂肪酸，除了食用外，現(xiàn)已成為高級化裝品和香皂的原料。貂肉 的 營養(yǎng)豐富，含有較高的蛋白質(zhì)。是一種獨特的野味佳肴。貂糞 是 農(nóng)作物的優(yōu)質(zhì)肥料。處理后 的 貂糞還可以喂豬。 總之，水貂全身都是寶，經(jīng)過充分利用可以增加收益，提高其經(jīng)濟價值。 貂的消化生理特性 水貂屬中型鼬科動物， 單胃動物 。同時也是嚴格的肉食動物， 在很多特性上不同于雜食性和草食性動物，表現(xiàn)在對飼料 消化 利用的特殊性上。首先水貂的消化道適合于動物性飼料的 消化 ，門齒短小，犬齒非常尖銳發(fā)達，臼齒咀嚼面不發(fā)達，這表明水貂的牙齒不適 合咀嚼食物，特別是不適于磨碎植物性的根莖或纖維素，而適合于捕食食物 并撕成小塊。其次，水貂的消化道的相對長度比草食性動物的消化道短 的 多，草食性動物的消化道長度是動物本身體長的 17 倍左右， 豬的消化道長度為其體長的 25倍。 而水貂的消化道是體長的 4倍，空、回腸無明顯的界限，空、回腸總長度約為 110 147厘米 ，大腸包括結(jié)腸與直腸，全長 20厘米 左右，無盲腸，直腸末端為肛門 。 水貂的胃腸道與其他動物相比具有較小的容積，僅為 60 100毫升 ，消化道中蛋白酶與脂肪酶較多，而淀粉酶較少，因此，對含有大量蛋白質(zhì)和一定數(shù)量 脂肪的動物性飼料的消化能力強，對植物性飼料的消化能力弱，只能消化淀粉和糖，而不能消化纖維素。水貂的消化進行得非常強烈， 采食咀嚼少，食物通過腸道的速度快，對飼料的消化率需求及酶的產(chǎn)量要求都很高。飼料在水貂的消化道中停留的時間較短。在胃中的時間僅為 1小時 30分至 2小時 30 分鐘。而草食性動物飼料在消化道中可停留 7 8 天。所以水貂宜于消化吸收營養(yǎng)價值 大、 蛋白質(zhì)含量高的動物性飼料。 國外學者在水貂腸道發(fā)育、消化酶的分泌及對蛋白質(zhì)消化代謝方面的研究較多，認為水貂主要依靠酶的消化（ ， 1988），其消化系統(tǒng)相 對成熟較晚， 4 6 周齡期間水貂腸水解酶經(jīng)歷迅速的變化，依賴腸的生長，整個酶活力在 6 10 周齡進一步增強（ 1996） 。根據(jù) 的研究，仔貂蛋白酶、胰蛋白酶原、胰凝乳蛋白酶原活性或數(shù)量在 1 12 周間逐漸增加，水貂消化酶活性如胰蛋白酶，直到 10 周齡才達到最大水解能力（ ， 1988） 。 工飼養(yǎng) 水貂的 一些習性 水貂的馴化，長久以來程度不高。因為一些行業(yè)因素以及水貂物種本身的特點，水貂馴化程度的提高進展緩慢。近年來，隨著水貂養(yǎng)殖量的提高，水貂的馴化程度也 有了明顯的提高。人工飼養(yǎng)的水貂與野生水貂在生活習性方面有著一定的差異，但還有很大的相似性。在食欲與食性上，中國農(nóng)業(yè)科學院博士學位論文 引 言 3 人工飼養(yǎng)的水貂還保留著野生動物的一些特點。比如在經(jīng)過長期人工喂養(yǎng)后，大部分水貂仍然保留著在巢穴中儲存食物的習性。因其在野生狀態(tài)下的晝伏夜出的習性，馴化后的水貂即使飼料供給充足，仍然是大部分的采食活動都發(fā)生在夜間。在采食習性上，水貂有如下特點： 其一 ， 在采食時間的分配上，水貂一般采食過程很長，邊玩邊吃。隨著馴化程度的提高，水貂的采食時間有縮短的趨勢。 其二，對食物要求很高。飼料中動物性蛋白質(zhì)要達到一定水平 ，且愈新鮮愈好。不能粉碎的過細，要在水貂采食過程中，能形成撕咬動作為佳。 其三，喜食動物性飼料，且消化率較高，對谷物飼料的消化率低。谷物飼喂前要熟化。否則容易引起腹?jié)q。 其四， 水貂的食欲根據(jù)時間變化，有一定規(guī)律的變化。在上午，因氣溫相對較高，故采食較少，到中午之前，基本停止采食。 應(yīng)少量飼喂。 下午因氣溫漸漸開始降低，采食活動開始密集。但主要還是集中在夜間，夏季尤其明顯。 下午應(yīng)加大飼喂量。 中國農(nóng)業(yè)科學院博士學位論文 引 言 4 貂蛋白質(zhì)營養(yǎng)研究進展 中國水貂皮生產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的 10%以上。我國水貂飼養(yǎng)業(yè) ， 大致 經(jīng)歷了國家扶持發(fā)展階段 (1956 1978年 )、規(guī)模發(fā)展階段 (80年代 )和發(fā)展調(diào)整階段 (90年代以來 )。自 1956年以來 ， 國家陸續(xù)支持在東北、華北、西北和華東等地建立水貂飼養(yǎng)場 ， 到 1978年底 ， 種貂存欄數(shù)達 30 多萬只 ， 水貂養(yǎng)殖場 2000余個 ， 年產(chǎn)水貂皮 75萬多張。 1980年開始 ， 出現(xiàn)了許多個體養(yǎng)貂戶 ， 使水貂的養(yǎng)殖規(guī)模迅速擴大。 1988 年，全國水貂飼養(yǎng)場發(fā)展近 3000 個 ， 種貂 300 多萬只 ， 取皮近600 萬張 ， 出口水貂皮 330 萬張 ， 換回外匯約 2 億美元。幾十年來，國內(nèi)外學者在水貂營養(yǎng)研究方面做了很多工作，但目前國內(nèi) 外關(guān)于水貂的營養(yǎng)研究方面還存在許多空白，有待科研人員的進一步努力。 水貂的主要經(jīng)濟性狀是毛皮的生長，因此，蛋白質(zhì)及氨基酸營養(yǎng)，特別是含硫氨基酸營養(yǎng)對水貂來說，至關(guān)重要。盡管水貂高的蛋白質(zhì)攝入與低的蛋白質(zhì)存留相比，存留僅約占攝入的 8%，但日糧氨基酸組成對水貂的健康和毛皮質(zhì)量還是非常重要的。 貂體氨基酸組成 蛋白質(zhì)是水貂機體生命活動的基礎(chǔ)，也是構(gòu)成水貂體組織、體細胞的基本原料和更新修補體組織的必需物質(zhì)。水貂體內(nèi)除了水分