促進(jìn)消化功能評價方法(征求意見稿)及修訂說明

1、.附件9：國家食品藥品監(jiān)督管理局許可司： 根據(jù)2012年8月1日保健食品檢驗(yàn)與評價技術(shù)規(guī)范修訂研討會議專家提出的意見，我們對“有助于促進(jìn)消化功能檢驗(yàn)方法”進(jìn)行了再次修改，形成第二稿。現(xiàn)提交“有助于促進(jìn)消化功能檢驗(yàn)方法（征求意見稿）”（附件一）“保健食品評價試驗(yàn)項(xiàng)目、試驗(yàn)原則及結(jié)果判定”（附件二）；“人體試食原始記錄格式、動物試驗(yàn)原始記錄格式”（附件三）；“編制說明”（附件四）；“專家意見匯總表”（附件五）。北京市疾病預(yù)防控制中心2012年8月29日促進(jìn)消化功能評價方法（征求意見稿）保健食品評價保健食品評價試驗(yàn)項(xiàng)目、試驗(yàn)原則及結(jié)果試驗(yàn)項(xiàng)目、試驗(yàn)原則及結(jié)果判定判定Items, Principles

2、 and Result Assessment1 試驗(yàn)項(xiàng)目1.1 動物實(shí)驗(yàn)1.1.1 體重、體重增重、攝食量和食物利用率1.1.2 小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)1.1.3 消化酶測定1.2 人體試食試驗(yàn)1. 2.1 臨床癥狀觀察1. 2.2 胃/腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn) 2 試驗(yàn)原則2.1 動物實(shí)驗(yàn)和人體試食試驗(yàn)所列指標(biāo)均為必做項(xiàng)目。2.2 在進(jìn)行人體試食試驗(yàn)時，應(yīng)對受試樣品的食用安全性作進(jìn)一步的觀察。3 結(jié)果判定3.1 動物實(shí)驗(yàn)：動物體重、體重增重、攝食量、食物利用率，小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)和消化酶測定三方面中任二方面實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，可判定該受試樣品有助于促進(jìn)消化功能動物實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性。3.2 人體試食試驗(yàn)：臨床癥狀積分結(jié)果和胃/腸運(yùn)動

3、實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，可判定該受試樣品有助于促進(jìn)消化功能人體試食試驗(yàn)結(jié)果陽性。3.3動物實(shí)驗(yàn)和人體試食試驗(yàn)均為陽性結(jié)果，可判斷受試樣品具有有助于促進(jìn)消化功能的作用。.促進(jìn)消化功能檢驗(yàn)方法Method for the Assessment of Facilitating Digestion Function1 動物實(shí)驗(yàn)1.1 實(shí)驗(yàn)原理胃腸道是營養(yǎng)物質(zhì)的攝取、消化與吸收的器官，對食物的消化作用主要是依靠其運(yùn)動、消化酶的分泌來完成的。如果某一保健食品能對這一環(huán)節(jié)或幾環(huán)節(jié)有調(diào)節(jié)作用，那它就有可能有促進(jìn)消化功能的作用。1.2 實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目促進(jìn)消化功能動物實(shí)驗(yàn)包括大鼠體重、體重增重、攝食量和食物利用率實(shí)驗(yàn)；小腸運(yùn)動實(shí)

4、驗(yàn)；消化酶的測定等三部分。1.3 實(shí)驗(yàn)動物根據(jù)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目可選用單一性別成年小鼠或大鼠。小鼠18g22g，每組10只15只，大鼠120g150g，每組8只12只。1.4 劑量分組及受試樣品給予時間實(shí)驗(yàn)設(shè)三個劑量組和一個陰性對照組，以人體推薦量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）為其中的一個劑量組，另設(shè)二個劑量組，必要時設(shè)陽性對照組和模型對照組。受試樣品給予時間30d（小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)受試樣品給予時間7d15d），必要時可延長至45d。1.5 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1.5.1 體重、體重增重、攝食量和食物利用率選用同一性別的大鼠。實(shí)驗(yàn)開始時動物體重的差異應(yīng)不超過平均體重的10。分不同劑量實(shí)驗(yàn)組和陰性對照組，經(jīng)口給予受試樣品

5、，每周測2次體重和食物攝入量。實(shí)驗(yàn)結(jié)束時計(jì)算體重、體重增重、攝食量和食物利用率。1.5.2 小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)選用同一性別的小鼠，分不同劑量實(shí)驗(yàn)組、空白對照組和模型對照組，模型對照組用復(fù)方地芬諾酯或洛哌丁胺造模。可用墨汁或炭末加阿拉伯樹膠作為指示劑。經(jīng)口給予受試樣品。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前禁食不禁水20h，于測定當(dāng)天各實(shí)驗(yàn)組和空白及模型對照組再給予一次受試樣品或蒸餾水，30min后各實(shí)驗(yàn)組和模型對照組給予復(fù)方地芬諾酯5mg/kgbw 6mg/kgbw或洛哌丁胺5mg/kgbw 6mg/kgbw(依據(jù)復(fù)方地芬諾酯或洛哌丁胺的實(shí)用劑量取用，用研缽研碎呈粉末后按實(shí)驗(yàn)所需濃度配制，注意要待溶質(zhì)完全溶解、充分搖勻后使用。

6、)，空白對照組給予蒸餾水，30min后各組再給予指示劑(精確稱取阿拉伯樹膠100g，加水800ml，煮沸至溶液透明，稱取活性碳粉100g加至上述溶液中煮沸三次，待溶液涼后定容到1000ml，于冰箱中4保存，用前搖勻)，25min后斷頸處死動物，計(jì)算墨汁推進(jìn)率。按下式計(jì)算墨汁推進(jìn)率：墨汁推進(jìn)率（%） 墨汁推進(jìn)長度（cm）/ 小腸總長度（cm） 100%。 1.5.3 消化酶的測定選用同一性別的大鼠。分不同劑量實(shí)驗(yàn)組和陰性對照組，實(shí)驗(yàn)開始時動物體重的差異應(yīng)不超過平均體重的10。經(jīng)口給予受試樣品。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前各組動物禁食不禁水24h，采用乙醚麻醉大鼠幽門結(jié)扎法收集一定時間內(nèi)排出的胃液，測定單位時間內(nèi)胃

7、液量。取胃液1mL放入50mL的三角燒瓶中，加入0.05mol/L鹽酸溶液15mL搖勻，放入新鮮制作的蛋白管兩根。塞好瓶口，在37恒溫箱中孵育24h，取出蛋白管，用尺測量蛋白管兩端透明部分的長度（mm），以四端之值求其平均值。計(jì)算胃蛋白酶活性和胃蛋白酶排出量。胃蛋白酶活性單位（/mL）四端蛋白管透明部分長度均值216胃蛋白酶排出量（/h）胃蛋白酶活性每h胃液量1.6 數(shù)據(jù)處理和結(jié)果判定 計(jì)量資料可用方差分析，但需按方差分析的程序先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，方差齊，計(jì)算F值，F(xiàn)值50）的資料應(yīng)用秩和檢驗(yàn)。表 臨床癥狀積分癥狀 輕（1分）中（2分）重（3分）食欲食欲較差食欲差食欲很差腹痛持續(xù)時間短，不需服

8、藥經(jīng)常發(fā)作，引發(fā)兩脅不適頻繁發(fā)作，引發(fā)兩脅疼痛腹脹腹脹有時發(fā)作腹脹較頻繁，在較長時間內(nèi)不緩解腹脹頻繁噯氣 泛酸 燒心間有發(fā)作，偶有噯氣、泛酸、燒心飲食不適即泛酸、燒心引起兩脅不適較頻繁發(fā)作，泛酸、燒心可有兩脅疼痛失眠 疲乏偶有發(fā)作飲食不適即發(fā)作較頻繁發(fā)作2.6.1 臨床癥狀結(jié)果判定2.6.1.1試食前后試食組自身比較及試食后試食組與空白對照組組間比較， 臨床癥狀積分明顯減少，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理差異有顯著性，可判定該指標(biāo)陽性。（適用于選用空白對照組）2.6.1.2試食前后試食組自身比較臨床癥狀積分明顯減少，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理差異有顯著性，且試食后試食組與陽性對照組組間比較，臨床癥狀積分無明顯增加，可判定該指標(biāo)陽

9、性。（適用于選用陽性對照組） 2.6.2 胃腸運(yùn)動試驗(yàn)結(jié)果判定試食前后試食組自身比較及試食后試食組與對照組組間比較，胃腸運(yùn)動試驗(yàn)指標(biāo)明顯改善，且鋇條排出率大于等于30%為有效，經(jīng)統(tǒng)計(jì)處理差異有顯著性，可判斷該指標(biāo)陽性。2.6.3人體試食試驗(yàn)結(jié)果判定x. 臨床癥狀積分結(jié)果和胃/腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)結(jié)果陽性，可判定該受試樣品有助于促進(jìn)消化功能人體試食試驗(yàn)結(jié)果陽性。臨床癥狀積分結(jié)果和胃腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)結(jié)果均為陽性，可判定該受試樣品人體試食試驗(yàn)結(jié)果陽性。附件：人體試食原始記錄格式、動物試驗(yàn)原始記錄人體試食原始記錄格式、動物試驗(yàn)原始記錄格式格式有助于促進(jìn)消化功能保健食品人體試食觀察表產(chǎn)品名稱_ 編號_姓名_ 性別_ 年

10、齡_ 職業(yè)_ 民族_住址或電話_既往史_家族史_胃鏡檢查結(jié)果：_誘因： 情志不暢 飲食不節(jié) 勞累 受寒吸煙史： 年 支/日 飲酒史： 年 兩/日發(fā)病時間_ 病程_年工作性質(zhì): 腦力 輕體力 重體力癥狀變化觀察項(xiàng)目 試 食 前 年 月 日 試 食 中年 月 日試 食 后年 月 日食欲不振早飽餐后飽脹不適上腹痛反酸 燒心噯氣惡心便秘 便溏 小 結(jié)注：癥狀 重度3分；中度2分；輕度1分；無癥狀0分體格檢查 項(xiàng) 目試食前試食后項(xiàng) 目試食前 試食后發(fā)育營養(yǎng)狀況脊柱四肢五官及頸部胸部：心，肺腹部檢查：壓痛 （肝脾）心率（次/分）血壓（mmHg）精 神小 便臨床檢測項(xiàng) 目結(jié) 果項(xiàng) 目結(jié) 果項(xiàng) 目結(jié) 果EKG

11、B超胸 透化驗(yàn)檢查 項(xiàng) 目試食前試食后項(xiàng) 目試食前試食后HGB g/LCREumol/LRBC*1012/LBUNmmol/LWBC*109/LTC mmol/LALT u/LTG mmol/LAST u/LTP G/LGLUmmol/LALB G/L胃動力檢查項(xiàng) 目試 食 前試 食 后胃腸運(yùn)動試驗(yàn)鋇條試驗(yàn)報(bào)告：試食前_試食后_診 斷： 療效判斷： 有效 無效并發(fā)癥： 不良反應(yīng)：觀 察 者： 年 月 日 有助于促進(jìn)消化功能保健食品動物試驗(yàn)原始記錄格式1劑量設(shè)計(jì)：推薦量 /人日( /kgBW)樣品前處理及配制： 1.1 墨汁配制：準(zhǔn)確稱取阿拉伯樹膠100g，加去離子水800ml,煮沸至溶液透明，

12、稱取活性炭50g加入上述溶液混勻，煮沸3次，冷卻至室溫加去離子水定容至1000ml。于4冰箱中存放，用前搖勻。1.2 0.5mg/ml復(fù)方地芬諾酯懸液配制：取復(fù)方地芬諾片20片(2.5mg/片)，用乳缽研磨后，加去離子水至100ml，臨用前配制。1.3 0.05mol/L鹽酸：取12N濃鹽酸1.25ml加去離子水至300ml。2 操作步驟:2.1 小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)： 動物檢疫 年 月 日- 年 月 日，未見異常，可用于試驗(yàn)。于 年 月 日選健康小鼠 只，雌性，隨機(jī)分為5組，每組 只。分別按推薦日攝入量( /kgBW)即 、 、 10、 倍即 、 、 /kgBW為三個劑量組。以 為溶劑，按 ml/1

13、0gBW經(jīng)口灌胃。陰性對照組按 ml/10gBW經(jīng)口灌胃給予溶劑。模型對照組按 ml/10gBW經(jīng)口灌胃給予溶劑。各組每天灌胃一次，連續(xù) 天。于 月 日，隔夜禁食16h，不限水。于 月 日進(jìn)行檢測小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)。小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)以復(fù)方地芬諾酯（5mg/kgBW）按10mL/kgBW對劑量組及模型對照組動物經(jīng)口灌胃。陰性對照組給予等量去離子水經(jīng)口灌胃。30min后，各劑量組動物按10mL/kgBW經(jīng)口給予以含不同劑量受試物的墨汁，對照組動物給予墨汁，按10mL/kgBW經(jīng)口灌胃。25min后處死，剖腹測量小腸全長及墨汁前沿與幽門的距離，按下式計(jì)算墨汁推進(jìn)率。2.2測定：體重、體重增長、攝食量、食物利用

14、率：動物檢疫 年 月 日- 年 月 日，未見異常，可用于試驗(yàn)。 月 日選健康 雄性 種大鼠 只，按體重隨機(jī)分為 組，每組 只。動物單籠飼養(yǎng)。 分別按推薦日攝入量( /kgBW) 、5、 倍，即 /kgBW為三個劑量組。以 為溶劑，按 ml/100gBW經(jīng)口灌胃。陰性對照組按 ml/100gBW經(jīng)口灌胃給予溶劑。各組每天灌胃一次，連續(xù) d。每w稱體重 次,記錄進(jìn)食量。于 月 日，隔夜禁食24h，不限水。于 月 日各組動物測定胃液量和消化酶。2.3消化酶的測定：受試動物逐只用戊巴比妥鈉(50mg/kgBW)麻醉，固定于解剖臺，無菌條件下，于腹腔做一小切口，小心找到胃幽門結(jié)扎，常規(guī)縫合。動物繼續(xù)禁食

15、，不禁水。 h后，打開腹腔，結(jié)扎噴門，取出全胃，用試管取出全部胃液，計(jì)算單位時間內(nèi)胃液分泌量，取胃液1 ml放入帶蓋平皿中，加入0.05mol/L鹽酸溶液15ml，搖勻，放入新鮮制作蛋白管2支，封蓋，置37溫箱孵育24h，取出蛋白管，測量透明部分長度(mm)，求四端均值。測定胃蛋白酶活性。蛋白管制作方法：采用麥特(Mett)的毛細(xì)管法，將內(nèi)徑1-2mm粗細(xì)均勻的毛細(xì)血管截成10cm ,洗凈烤干。取適量蛋清充分打勻后，用紗布過濾，將上述毛細(xì)血管利用虹吸作用，灌滿蛋清(管內(nèi)應(yīng)無氣泡混入)。放置于85熱蒸汽使蛋白凝固。待冷卻后，取出石蠟將蛋白管兩端封固，貯冰箱中備用。單位時間胃液量計(jì)算：單位時間胃液

16、量(ml/h)=胃液總量/ h消化酶計(jì)算：胃蛋白酶活性單位(m/ml)=四端蛋白管透明帶長度均值2*16胃蛋白酶排出量(m/h)=胃蛋白酶活性*單位時間胃液量2.4統(tǒng)計(jì)：數(shù)據(jù)采用SPSS 11.0 for windows 軟件進(jìn)行方差分析。小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)測定數(shù)據(jù)經(jīng) 轉(zhuǎn)換，并經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)再進(jìn)行方差分析。若變量轉(zhuǎn)換后仍未達(dá)到正態(tài)或方差齊的目的，改用秩和檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。食物利用率及胃蛋白酶測定試驗(yàn)動物一般情況原始記錄日期溫度()()濕度(RH%)RH)中毒體征、死亡情況（以下空白）檢測者： 復(fù)核者： 年 月 日 年 月 日食物利用率組別總增重總耗食量第四端 總利用率總利用率轉(zhuǎn)換后胃蛋白酶組別第一端()

17、第二端第三端第四端胃Pr酶活性4h胃液量1h胃液量胃Pr酶排出量（以下空白）檢測者： 復(fù)核者： 年 月 日 年 月 日胃液和胃蛋白酶含量測定記錄 編號對照組低劑量組中劑量組高劑量組h胃液(ml)蛋白消化(mm)h胃液(ml)蛋白消化(mm)h胃液(ml)蛋白消化(mm)h胃液(ml)蛋白消化(mm)第1端第2端第3端第4端第1端第2端第3端第4端第1端第2端第3端第4端第1端第2端第3端第4端12345678910（以下空白）檢測者： 復(fù)核者： 年 月 日 年 月 日 墨汁推進(jìn)率記錄 單位：cm編號 陰性對照組 植物油組 低劑量組 中劑量組 高劑量組 模型對照組 墨汁推進(jìn) 小腸總長 墨汁推進(jìn)

18、小腸總長 墨汁推進(jìn) 小腸總長 墨汁推進(jìn) 小腸總長 墨汁推進(jìn) 小腸總長 墨汁推進(jìn) 小腸總長1 2345678910 （以下空白）檢測者： 復(fù)核者： 年 月 日 年 月 日 體重增長記錄 單位：g編號 初始重 第一周 第二周 第三周 1 2345678910（以下空白）檢測者： 復(fù)核者： 年 月 日 年 月 日 促進(jìn)消化功能評價方法修訂說明一、承擔(dān)單位北京市疾病預(yù)防控制中心為本項(xiàng)目的牽頭單位。本單位是國家標(biāo)準(zhǔn)“食品安全性毒理學(xué)評價程序和方法”GB15193.X-2003修訂版、化妝品衛(wèi)生規(guī)范-2007年版等多項(xiàng)國家標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)規(guī)范的起草單位之一，是保健食品功能檢驗(yàn)單位，在保健食品功能學(xué)方法應(yīng)用、國家

19、標(biāo)準(zhǔn)、規(guī)范的起草和方法的驗(yàn)證方面積累了較豐富的經(jīng)驗(yàn)。因此在保健食品功能檢驗(yàn)方法的制定中有很好的基礎(chǔ)和經(jīng)驗(yàn)。二、主要工作過程本項(xiàng)目于2009年11月啟動。由北京市疾病預(yù)防控制中心衛(wèi)生毒理所牽頭成立項(xiàng)目協(xié)作組，中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院、衛(wèi)生部北京醫(yī)院和天津市疾病預(yù)防控制中心三家為本項(xiàng)目的協(xié)作單位。2010年1月到3月進(jìn)行了廣泛的意見征詢及文獻(xiàn)調(diào)研工作，于2010年3月召開了“關(guān)于促消化人體試食修訂工作方案研討”課題協(xié)作組第一次工作會議，對“有助于促消化人體試食檢驗(yàn)方法修訂”原則和具體指標(biāo)作了充分的討論，制定了工作計(jì)劃和修訂方案，協(xié)作單位進(jìn)行了明確分工，形成了“有助于促消化功能檢驗(yàn)方法”人體試食試驗(yàn)方

20、案初稿。會后又分別征求了相關(guān)專家意見，對初稿再次進(jìn)行了修改。2010年5月召開了第二次研討會，確定了試食樣品，細(xì)化試驗(yàn)方案，對試食人群的篩選、提高試食人群依從性等具體質(zhì)量控制方案進(jìn)行了討論，形成了“有助于促消化功能檢驗(yàn)方法”人體試食試驗(yàn)方案和統(tǒng)一的原始記錄表格。中國中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院、衛(wèi)生部北京醫(yī)院和天津市疾病預(yù)防控制中心三家協(xié)作單位按照統(tǒng)一要求于2010年5月2011年6月進(jìn)行“有助于促消化功能檢驗(yàn)方法”人體試食試驗(yàn)方法驗(yàn)證，并進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，最終形成了有助于促消化功能檢驗(yàn)方法（征求意見稿）。三、編制原則1合法性原則：修訂工作符合國家相關(guān)法律法規(guī)并遵循相關(guān)管理部門的政策要求。2. 科學(xué)性原則：

21、修訂工作遵循科學(xué)性的原則，廣泛征求相關(guān)領(lǐng)域?qū)＜业囊庖姴⑦M(jìn)行文獻(xiàn)調(diào)研，各項(xiàng)技術(shù)指標(biāo)應(yīng)具有科學(xué)依據(jù)并經(jīng)科學(xué)驗(yàn)證。3. 先進(jìn)性原則：注意國內(nèi)管理部門發(fā)布的新管理措施，兼顧了技術(shù)發(fā)展的前瞻性。4. 實(shí)用性原則：從保護(hù)公眾身體健康的角度出發(fā)，充分考慮國情，兼顧我國保健食品功能檢測機(jī)構(gòu)的水平，對內(nèi)容進(jìn)行客觀量化和具體明確化，盡量提高可操作性。5協(xié)調(diào)性原則：盡可能與本規(guī)范的其他部分一致，注意合理性與有效性、通俗性和規(guī)范性之間的關(guān)系。四、確定相關(guān)技術(shù)內(nèi)容及新舊規(guī)范的對比本部分的主要內(nèi)容涉及有助于促消化功能檢驗(yàn)人體試食試驗(yàn)的基本原則、方法和要求，適用于檢測保健食品的有助于促消化功能檢驗(yàn)。新規(guī)范的本部分內(nèi)容包括受

22、試者納入標(biāo)準(zhǔn)、受試者排除標(biāo)準(zhǔn)、試驗(yàn)設(shè)計(jì)及分組要求、受試物的劑量和使用方法、觀察指標(biāo)、功效判定標(biāo)準(zhǔn)、數(shù)據(jù)處理和統(tǒng)計(jì)分析、結(jié)果判定。與原檢驗(yàn)方法比較，在受試者納入標(biāo)準(zhǔn)、受試者排除標(biāo)準(zhǔn)、觀察指標(biāo)及結(jié)果判定四方面進(jìn)行了修改。對試食試驗(yàn)原始記錄及報(bào)告所需要的基本信息也作了要求。與原檢驗(yàn)方法相比，試驗(yàn)內(nèi)容更詳盡，更具有可操作性，語言編寫及描述更科學(xué)。具體修改部分見下表。序號原方法現(xiàn)方法修訂理由序號內(nèi)容序號內(nèi)容1名稱“促進(jìn)消化功能”有助于促進(jìn)消化功能更科學(xué)21.3實(shí)驗(yàn)動物 小鼠1822克，每組1015只，大鼠120150克，每組812只。1.3實(shí)驗(yàn)動物 小鼠18g22g，每組10只15只，大鼠120g150

23、g，每組8只12只。更科學(xué)31.4劑量分組及受試樣品給予時間 受試樣品給予時間30天（小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)受試樣品給予時間1530天），必要時可延長至45天。1.4劑量分組及受試樣品給予時間 受試樣品給予時間30d（小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)受試樣品給予時間7d15d），必要時可延長至45d。更科學(xué)，與“通便功能”一致41.5.2“小時”、“分鐘”1.5.2改為“h”、“min”更科學(xué)51.5.3“小時”1.5.3改為“h”更科學(xué)61.5.2 小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)原方法：1.5.2 小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)選用同一性別的小鼠，分不同劑量實(shí)驗(yàn)組、空白對照組和模型對照組，模型對照組用復(fù)方地芬諾酯造模?？捎媚蛱磕┘影⒗畼淠z作為指示劑。

24、經(jīng)口給予受試樣品。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前禁食不禁水16小時，于測定當(dāng)天各實(shí)驗(yàn)組和空白及模型對照組再給予一次受試樣品或蒸餾水，30分鐘后各實(shí)驗(yàn)組和模型對照組給予復(fù)方地芬諾酯（0.0250.05），空白對照組給予蒸餾水，30分鐘后各組再給予指示劑，25分鐘后斷頸處死動物，計(jì)算墨汁推進(jìn)率。按下式計(jì)算墨汁推進(jìn)率： 墨汁推進(jìn)長度（cm） 墨汁推進(jìn)率100%小腸總長度（cm） 1.5.2 小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn) 與“通便功能”做一致修改。改為1.5.2 小腸運(yùn)動實(shí)驗(yàn)選用同一性別的小鼠，分不同劑量實(shí)驗(yàn)組、空白對照組和模型對照組，模型對照組用復(fù)方地芬諾酯或洛哌丁胺造模?？捎媚蛱磕┘影⒗畼淠z作為指示劑。經(jīng)口給予受試樣品。實(shí)驗(yàn)結(jié)

25、束前禁食不禁水20h，于測定當(dāng)天各實(shí)驗(yàn)組和空白及模型對照組再給予一次受試樣品或蒸餾水，30min后各實(shí)驗(yàn)組和模型對照組給予復(fù)方地芬諾酯5mg/kgbw 6mg/kgbw或洛哌丁胺5mg/kgbw 6mg/kgbw(依據(jù)復(fù)方地芬諾酯或洛哌丁胺的實(shí)用劑量取用，用研缽研碎呈粉末后按實(shí)驗(yàn)所需濃度配制，注意要待溶質(zhì)完全溶解、充分搖勻后使用。)，空白對照組給予蒸餾水，30min后各組再給予指示劑(精確稱取阿拉伯樹膠100g，加水800ml，煮沸至溶液透明，稱取活性碳粉100g加至上述溶液中煮沸三次，待溶液涼后定容到1000ml，于冰箱中4保存，用前搖勻)，25min后斷頸處死動物，計(jì)算墨汁推進(jìn)率。按下式計(jì)

26、算墨汁推進(jìn)率：墨汁推進(jìn)率（%） 墨汁推進(jìn)長度（cm）/ 小腸總長度（cm） 100%。與“通便功能”一致，更合理72人體試食試驗(yàn) 根據(jù)不同受試樣品適應(yīng)人群的區(qū)別，促進(jìn)消化功能人體試食試驗(yàn)建立兩套試食試驗(yàn)方案，即針對適應(yīng)人群主要為兒童的兒童方案和適應(yīng)人群主要為成人的成人方案。刪除本段描述新方法僅保留成人方案822.1 兒童方案取消。保護(hù)兒童、青少年等脆弱人群92.2.1受試者納入標(biāo)準(zhǔn) 選擇功能性消化不良，伴有長期胃腸不適，主訴食欲不振，早飽、氣多，胃腸脹滿，嘔吐，不明原因慢性腹瀉或大便秘結(jié)等自愿受試者。2.1受試者納入標(biāo)準(zhǔn) 增加年齡范圍。改為“選擇功能性消化不良，伴有長期胃腸不適，主訴食欲不振，早飽、氣多，胃腸脹滿，等18至65歲的自愿受試者?！北Ｗo(hù)兒童、青少年等脆弱人群更具體102.2.6 表 臨床癥狀積分“腹痛” 判定標(biāo)準(zhǔn) 中（2分）：疼痛時間較長，每日超4h，尚能忍受2.6表 臨床癥狀積分 “腹痛”判定標(biāo)準(zhǔn)改為： 中（2分）：經(jīng)常發(fā)作，引發(fā)兩脅不適更科學(xué)112.2.6表 臨床癥狀積分 第三行癥狀名稱“噯氣”判斷標(biāo)準(zhǔn)：輕（1分）：間有發(fā)作； 中（