實驗二_檢測生物組織中的糖類脂肪和蛋白質(zhì)學(xué)案

1、檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)實驗報告姓名 ： 班級： 【實驗?zāi)康摹?、嘗試檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì)，探討細胞中主要化合物的種類。2、掌握實驗的操作技能。3、認識到脂肪、糖類、蛋白質(zhì)和淀粉是生物組織的重要成分?！緦嶒炘怼磕承┗瘜W(xué)試劑能夠使生物組織中的有關(guān)有機化合物產(chǎn)生特定的顏色反應(yīng)。脂肪可以被蘇丹染液染成橘黃色也可以被蘇丹染液染成紅色。糖類中的還原性糖（如葡萄糖、果糖）可以與斐林試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生磚紅色沉淀。蛋白質(zhì)與雙縮脲試劑發(fā)生作用，產(chǎn)生紫色反應(yīng)。淀粉遇碘變藍色。因此，可以根據(jù)與某些化學(xué)試劑所產(chǎn)生的顏色反應(yīng)，檢測生物組織中糖類、脂肪或蛋白質(zhì)的存在?！静牧掀骶摺?.實驗材料：蘋

2、果或梨勻漿，馬鈴薯勻漿，花生種子，花生種子勻漿，豆?jié){。2.儀器：解剖刀，試管（最好用刻度試管），試管架，試管夾，滴管，大小燒杯，量筒，酒精燈，三腳架，石棉網(wǎng)，火柴，載玻片，蓋玻片，毛筆，吸水紙，顯微鏡。3.試劑：斐林試劑（甲夜：質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液，乙夜：質(zhì)量濃度為0.05g/ml的CuSO4溶液）蘇丹III或蘇丹染液，雙縮脲試劑（A夜：質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液，B夜：質(zhì)量濃度為0.01g/ml的CuSO4溶液），體積分數(shù)為50的酒精溶液，蒸餾水，碘液?！緦嶒炞⒁鈫栴}】1、 一定要聽從老師的安排，不讓動的堅決不動。2、 保持安靜，堅決不能大聲喧嘩。3、 注意實驗

3、安全4、 注意愛護實驗器材，誰損壞誰負責(zé)?！緦嶒炦^程】（一）可溶性糖的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋1. 制備組織樣液。（去皮、切塊、研磨、過濾）蘋果或梨組織液必須臨時制備。因蘋果多酚氧化酶含量高，組織液很易被氧化成褐色，將產(chǎn)生的顏色掩蓋。2. 取1支試管，向試管內(nèi)注入2mL組織樣液。3. 向試管內(nèi)注入1mL新制的斐林試劑，振蕩。應(yīng)將組成斐林試劑的甲液、乙液分別配制、儲存， 實驗前才將甲、乙液等量混勻成斐林試劑；切勿將甲液、乙液分別加入蘋果組織樣液中進行檢測。斐林試劑很不穩(wěn)定，甲、乙液混合保存時，生成的Cu ( OH ) 2在70900C下分解成黑色CuO和水；甲、乙液分別加入時可能會

4、與組織樣液發(fā)生反應(yīng)，無Cu ( OH ) 2生成。4. 試管放在盛有50650C溫水的大燒杯中，加熱約2分鐘，溶液顏色：淺藍色 棕色 （沉淀）最好用試管夾夾住試管上部，使試管底部不觸及燒杯底部，試管口不朝向?qū)嶒炚?。也可用酒精燈水浴加熱。防止試管?nèi)的溶液沖出試管，造成燙傷；縮短實驗時間。（二）脂肪的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋花生種子浸泡、去皮、切下一些子葉薄片，將薄片放在載玻片的水滴中，用吸水紙吸去裝片中的水。干種子要浸泡34小時，新花生的浸泡時間則可縮短。因為浸泡時間短，不易切片，浸泡時間過長，組織較軟，切下的薄片不易成形。切片要盡可能薄些，便于觀察。在子葉薄片上滴23滴蘇丹或蘇丹

5、染液，染色1分鐘。染色時間不宜過長。用吸水紙吸去薄片周圍染液，用50%酒精洗去浮色，再用吸水紙吸去酒精。酒精用于洗去浮色，若不洗去，會影響對橘黃色脂肪滴的觀察。同時，酒精是脂溶性溶劑，可將花生細胞中的脂肪顆粒溶解成油滴。用吸水紙吸去薄片周圍酒精，滴上12滴蒸餾水，蓋上蓋玻片。滴上清水可防止蓋蓋玻片時產(chǎn)生氣泡。低倍鏡下找到花生子葉薄片最薄處，可看到細胞中有染成 或 圓形小顆粒。裝片不宜久放。時間一長，油滴會溶解在乙醇中。（三）蛋白質(zhì)的鑒定操 作 方 法注 意 問 題解 釋制備組織樣液。（浸泡、去皮研磨、過濾。）黃豆浸泡1至2天，容易研磨成漿，也可購新鮮豆?jié){以節(jié)約實驗時間。鑒定。加樣液約2ml于試

6、管中，加入雙縮脲試劑A液1ml，搖勻；再加入雙縮脲試劑B液34滴，搖勻，溶液變 。A液和B液也要分開配制，儲存。CuSO4溶液不能多加。先加NaOH溶液，為Cu2+與蛋白質(zhì)反應(yīng)提供一個堿性的環(huán)境。A、B液混裝或同時加入，會導(dǎo)致Cu2+變成Cu ( OH ) 2沉淀，而失效。否則CuSO4的藍色會遮蓋反應(yīng)的真實顏色?？捎玫扒宕娑?jié){。蛋清要先稀釋。如果稀釋不夠，在實驗中蛋清粘在試管壁，與雙縮脲試劑反應(yīng)后會粘固在試管內(nèi)壁上，使反應(yīng)不容易徹底，并且試管也不易洗干凈。附：淀粉的檢測和觀察:用試管取2ml待測組織樣液，向試管內(nèi)加2滴碘液，觀察顏色變化。碘液不要滴太多以免影響顏色觀察【實驗結(jié)論】實驗結(jié)果和

7、分析：生物組織樣液化學(xué)試劑特定顏色反應(yīng)證明某種化合物存在梨花生種子黃豆馬鈴薯【課后鞏固】1、以花生子葉為材料進行脂肪的檢測時，制作臨時裝片的正確步驟是()蓋蓋玻片切子葉蘇丹染液染色滴加蒸餾水酒精洗去浮色A.B. C.D.2、下列各組中的前項為需檢測的物質(zhì)，中項為使用的試劑,后項為產(chǎn)生的顏色，正確的是()A.葡萄糖、斐林試劑、磚紅色 B.脂肪、蘇丹染液、紅色C.蛋白質(zhì)、雙縮脲試劑、藍色 D.脂肪、蘇丹染液、橘黃色3、醫(yī)院確認糖尿病的常用方法及結(jié)果是( )A. 加入斐林試劑,出現(xiàn)磚紅色B.加入碘碘化鉀溶液,出現(xiàn)藍色C. 加入蘇丹溶液,出現(xiàn)橘黃色D.加入碘碘化鉀溶液,出現(xiàn)淡黃色4、在可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗中，對實驗材料的選擇敘述錯誤的是( ) A.馬鈴薯塊莖中含有較多的糖且近于白色，可用于進行可溶性還原糖的鑒定B.花生種子富含脂肪且子葉肥厚，是用于脂肪鑒定的好材料C.大豆種子蛋白質(zhì)含量高，是進行蛋白質(zhì)鑒定的理想植物組織材料D.雞蛋清含蛋白質(zhì)多，是進行蛋白質(zhì)鑒定的動物材料5、在鑒定可溶性還原糖的實驗中,加入斐林試劑時