凝血檢測質(zhì)量保證【優(yōu)選課件】

1、凝血檢測質(zhì)量保證,1,精制課件,炮制雖繁 必不敢省人工 品味雖貴 必不敢減物力,2,精制課件,臨床實(shí)驗(yàn)室的質(zhì)量控制,3,精制課件,室內(nèi)質(zhì)控,室內(nèi)比對,室間比對,室間質(zhì)評,分析前 質(zhì)量控制,分析后 質(zhì)量控制,4,精制課件,1、抗凝劑：109mmol/L枸櫞酸鈉抗凝。 與鈣離子形成可溶性螯合物而起到抗凝作用 有效阻止凝血因子FV、FVIII的降解 不受肝素影響，以用于肝素治療的監(jiān)測 EDTA ：抑制或干擾纖維蛋白凝塊形成纖維蛋白單體聚合， 對FV保護(hù)性差。 肝素：可與AT-作用抑制凝血因子的反應(yīng)。 草酸鹽：與鈣離子形成不溶性沉淀物，影響血凝儀的光電終點(diǎn),分析前,5,精制課件,2、采血管順序（CLS

2、I H3-A6）： 血培養(yǎng)管， 凝血項(xiàng)目管（如：藍(lán)帽） 含有或不含促凝劑、含有或不含分離 膠的血清管（如：紅帽） 含有或不含分離膠的肝素血漿管（如：綠帽） 含有或不含分離膠的EDTA 管（如：紫帽或珍珠色帽） 含酵解抑制劑管（如：灰帽） 對于凝血項(xiàng)目該文件改變了第一管必須棄置的要求，當(dāng)凝血管為第一管時(shí)，無論是正常人或口服華法令患者其PT或INR均不受影響，正常人的APTT不受影響。但是尚不知其它凝血項(xiàng)目是否受到影響，因此對其它凝血項(xiàng)目，還是建議第二管采集,分析前,6,精制課件,3、采血管：內(nèi)壁應(yīng)硅化，而且死腔量越小越好。 4、采血量：通常按1：9的抗凝比例采血。 但對于HCT55%的患者，血漿

3、相對于抗凝劑量會減少，使凝血試驗(yàn)的結(jié)果延長，應(yīng)調(diào)整采血量。 需取出抗凝劑量(ml)=0.3-血量（ml）0.00185 (100-HCT%) 5、標(biāo)本送檢條件：室溫下2小時(shí)內(nèi)送檢，低溫會損傷血小板活化因子，使PT結(jié)果降低。 6、標(biāo)本保存時(shí)間：2-8 4小時(shí)，-20 1周，-80 6個(gè)月。 7、凝血、溶血標(biāo)本為不合格標(biāo)本,分析前,7,精制課件,造成標(biāo)本溶血的原因,8,精制課件,室內(nèi)質(zhì)控,室內(nèi)質(zhì)控的功能：查找分析測定中的誤差，即用室內(nèi)質(zhì)控物的檢測結(jié)果去確認(rèn)常規(guī)標(biāo)本檢測結(jié)果的有效性，如果確認(rèn)通過，此時(shí)的常規(guī)標(biāo)本檢驗(yàn)結(jié)果才可用于疾病的診斷、治療及預(yù)后觀察等,9,精制課件,室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控品的選擇 1.1

4、 檢測系統(tǒng)配套的質(zhì)控品 1.2 第三方質(zhì)控品 1.3 質(zhì)控品要求,10,精制課件,自動質(zhì)控,室內(nèi)質(zhì)控,室內(nèi)質(zhì)控項(xiàng)目、質(zhì)控頻度 2.1 室內(nèi)質(zhì)控項(xiàng)目 PT、INR、APTT、Fbg、TT、DD、FDP 2.2 質(zhì)控頻度,11,精制課件,12,精制課件,允許CV建立與評估 2012年凝血允許CV評估,失控率 儀器失控率 項(xiàng)目失控率,室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控目標(biāo)的確立,13,精制課件,室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控靶值及SD的累積 4.1 靶值設(shè)定？ 質(zhì)控廠商提供的數(shù)據(jù)僅供參考！ 不同儀器對同一批號質(zhì)控的反應(yīng)程度不一樣！ 4.2 SD設(shè)定,14,精制課件,室內(nèi)質(zhì)控,質(zhì)控規(guī)則（Westgard多規(guī)則）http:/ 5.1 警告

5、：12s、10 x、41s 5.2 失控：22s、13s、R4s,15,精制課件,室內(nèi)質(zhì)控,6. 室內(nèi)質(zhì)控月報(bào)表、失控處理記錄,16,精制課件,室內(nèi)比對,1、頻率：每年2次。 2、參與儀器：所有儀器，以參加EQA的儀器為參考儀器。 3、執(zhí)行人員：當(dāng)班人員、質(zhì)控員；組長、主任簽字確認(rèn)。 4、比對血漿：收集高、中、低水平新鮮血漿共20份。 5、比對項(xiàng)目：PT、INR、APTT、FBG、TT、DD。 6、數(shù)據(jù)處理：錄入專用的EXCEL表格，統(tǒng)計(jì)r、bias%。 7、判斷標(biāo)準(zhǔn)：PT、INR、APTT、FBG、DD各項(xiàng) r0.975，并且80%的樣本bias%在下列標(biāo)準(zhǔn) 范圍內(nèi)為合格。 8、比對試驗(yàn)不合

6、格的儀器需啟用校準(zhǔn)程序,17,精制課件,室內(nèi)比對,18,精制課件,WFH,衛(wèi)生部、北京市,CAP,室間質(zhì)評,19,精制課件,室間質(zhì)評,20,精制課件,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評失控處理,21,精制課件,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評失控處理-1,22,精制課件,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評失控處理-2,23,精制課件,室間質(zhì)評,室間質(zhì)評失控處理-3,APTT、TT無定標(biāo)項(xiàng)目 1、訂貨量； 2、東西兩院保持批號一致； 3、試劑更換批號后進(jìn)行標(biāo)本傳遞（質(zhì)控品、標(biāo)本），觀察批間差,24,精制課件,室間質(zhì)評,標(biāo)本傳遞舉例,25,精制課件,怎么來？ 怎么用,APTT 100s或 15s； Fbg 1.0g/L； FDP 40g/ml

7、，同時(shí)Fbg 1.0g/L； PT 70s或9s； TT 150s,危急值,分析后,26,精制課件,分析后,27,精制課件,華法林凝血酶原時(shí)間（Prothrombin Time, PT,Local ISI,28,精制課件,ISI值確定？ ISI是什么：反映試劑對Vitamin K依賴的凝血因子水平的敏感程度，通過國際參考品（International reference preparation，IRP）來溯源,Local ISI,計(jì)算MNPT和ISI值,PT-INR系統(tǒng)校準(zhǔn),Local ISI,30,精制課件,Local ISI,31,精制課件,直接INR測定 用56個(gè)濃度的認(rèn)證血漿（不同系統(tǒng)

8、的定值不一樣）產(chǎn)生本實(shí)驗(yàn)室的校準(zhǔn)線。 使用本實(shí)驗(yàn)的凝血活酶/聯(lián)合試劑測定認(rèn)證血漿的PT值，將所得的結(jié)果和認(rèn)證血漿的INR賦值繪成對數(shù)圖。 可以用線性的或正交的回歸方法繪制校準(zhǔn)線，從校準(zhǔn)線上讀取患者的INR值。這種方法與ISI和正常人PT均值（MNPT）無關(guān)。所有的本地因素都被消除了,PT-INR系統(tǒng)校準(zhǔn),Local ISI,32,精制課件,用參考血漿對試劑進(jìn)行定標(biāo)作校準(zhǔn)曲線，根據(jù)定標(biāo)曲線直接得到INR 室間的變異可以大大降低 多點(diǎn)定標(biāo)進(jìn)行的校準(zhǔn)更加精密準(zhǔn)確 所有的當(dāng)?shù)匾蛩囟急幌?Local ISI,采用INR定值血漿校準(zhǔn)當(dāng)?shù)氐腜T/INR檢測系統(tǒng)，不僅使INR結(jié)果更加準(zhǔn)確，而且加強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)室

9、間的INR結(jié)果的一致性，使口服抗凝劑的監(jiān)測更加有效,33,精制課件,Local ISI定標(biāo): PT-INR的標(biāo)準(zhǔn)化絕不僅僅是對某一儀器或某一試劑的校準(zhǔn)，從實(shí)驗(yàn)室角度出發(fā)是對整個(gè)系統(tǒng)（System）的標(biāo)準(zhǔn)化！ “一個(gè)樣本，一個(gè)結(jié)果”，不同系統(tǒng)結(jié)果趨于一致,Local ISI,34,精制課件,性能驗(yàn)證的目的,確保正確的選擇實(shí)驗(yàn)室方法，并在方法使用前進(jìn)行充分、有效的評價(jià)，以保證方法的可靠性 對實(shí)驗(yàn)室正在使用的檢驗(yàn)系統(tǒng)/方法進(jìn)行定期的、有效的驗(yàn)證，以保證所使用的檢驗(yàn)系統(tǒng)/方法能夠滿足臨床和患者的需求，并保證檢驗(yàn)系統(tǒng)/方法的可靠性,35,精制課件,定量方法的性能驗(yàn)證,精密度 準(zhǔn)確度評價(jià) 線性 攜帶污染

10、方法學(xué)比較 參考范圍驗(yàn)證 分析干擾及稀釋驗(yàn)證,36,精制課件,性能驗(yàn)證內(nèi)容,批內(nèi)不精密度,37,精制課件,性能驗(yàn)證內(nèi)容,日間精密度,38,精制課件,性能驗(yàn)證內(nèi)容,準(zhǔn)確度：是測量結(jié)果中系統(tǒng)誤差與隨機(jī)誤差的綜合，表示測量結(jié)果與真值的一致程度。保證檢驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性最有效的手段是建立和保證檢驗(yàn)結(jié)果的溯源性 計(jì)算定值參考物質(zhì)或校準(zhǔn)品的測定值（測定三次取均值）與靶值的偏差 判斷標(biāo)準(zhǔn)：小于1/2CLIA88允許變異,39,精制課件,性能驗(yàn)證內(nèi)容,線性：選取一份接近預(yù)期上限的高值血漿樣本（H），分別按100%、90%、75%、50%、25%的比例進(jìn)行稀釋，每個(gè)稀釋度重復(fù)測定2次，計(jì)算均值。將實(shí)測值與預(yù)測值作比較

11、（偏離應(yīng)小于10%），計(jì)算 y=ax+b，驗(yàn)證線性范圍。 判斷結(jié)果：a值在10.1范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)R2 0.95,40,精制課件,性能驗(yàn)證內(nèi)容,攜帶污染：指分析物含量高的標(biāo)本對分析物含量低的標(biāo)本其測定結(jié)果的影響 攜帶污染率=(L1-L3)/(H3-L3)*100% 攜帶污染率3,41,精制課件,性能驗(yàn)證內(nèi)容,稀釋驗(yàn)證：選取高值樣本，分別以儀器自動稀釋和手工法兩種方式，按照 原倍、1/2、1/4、1/8、1/16、1/32的比例進(jìn)行稀釋，將兩次結(jié)果比較，偏離應(yīng)小于10,42,精制課件,性能驗(yàn)證內(nèi)容,參考范圍驗(yàn)證： 收集20例健康人血漿，年齡20-70歲，男10例，女10例 計(jì)算檢測系統(tǒng)的R值（R值=落在參考范圍內(nèi)的樣本數(shù)/總樣本數(shù)）。要求R0.9,43,精制課件,性能驗(yàn)證內(nèi)容,方法學(xué)比對：為保證檢驗(yàn)結(jié)果的可比性，使用實(shí)驗(yàn)室的不同分析系統(tǒng)和/或公認(rèn)的參考方法同時(shí)檢測一批病人標(biāo)本，從測定結(jié)果的差異了解不同分析系統(tǒng)之間的偏倚 標(biāo)本范圍應(yīng)涵蓋所比對項(xiàng)目的高中低值，正常結(jié)果占4060%，分別用被比較的儀器方法以及比較儀器方法檢測,44,精制課件,性能驗(yàn)證內(nèi)容,