轉(zhuǎn)基因大豆環(huán)境安全檢測(cè)技術(shù)規(guī)范 第3部分：對(duì)生物多樣性影響的檢測(cè) NY T 719.3-2003

1、轉(zhuǎn)基因大豆環(huán)境安全檢測(cè)技術(shù)規(guī)范 第3部分：對(duì)生物多樣性影響的檢測(cè) NY T 719.3-2003 NY/T 719. 3-2003 14 前言NY /T 719(轉(zhuǎn)基因大豆環(huán)境安全檢測(cè)技術(shù)規(guī)范分為以下三個(gè)部分:第 1 部分 z生存競(jìng)爭(zhēng)能力檢測(cè);第 2 部分:外源基因流散的生態(tài)風(fēng)險(xiǎn)檢測(cè);一一第 3 部分 z對(duì)生物多樣性影響的檢測(cè)。本部分是 NY/T719 的第 3 部分。本部分附錄 A 為規(guī)范性附錄。本部分由中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)部提出并歸口。本部分起草單位 2 中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院植物保護(hù)研究所、南京農(nóng)業(yè)大學(xué)、農(nóng)業(yè)部科技發(fā)展中心。本部分主要起草人 s彭于發(fā)、彭德良、喻德躍、強(qiáng)勝、李寧、付仲文。1 范圍轉(zhuǎn)

2、基因大豆環(huán)境安全檢測(cè)技術(shù)規(guī)范第 3 部分:對(duì)生物多樣性影晌的檢測(cè)NY /T 719.3 的本部分規(guī)定了轉(zhuǎn)基因大豆對(duì)生物多樣性影響的檢測(cè)方法。NY/T 719.3-2003 NY /T 719.3 的本部分適用于轉(zhuǎn)基因大豆對(duì)大豆田節(jié)肢動(dòng)物多樣性、大豆病害及大豆根瘤菌影響的檢測(cè)。2 規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過(guò) NY/T 719 本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內(nèi)容)或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本部分達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本部分。GB/T 3543.4 農(nóng)作物種

3、子檢驗(yàn)規(guī)程 發(fā)芽試驗(yàn)GB 4404. 2 糧食作物種子豆類NY /T 719.1-2003 轉(zhuǎn)基因大豆環(huán)境安全檢測(cè)技術(shù)規(guī)范 第 l 部分 z生存競(jìng)爭(zhēng)能力檢測(cè)3 要求按 NY/T 719. 1-2003 中第 3 章的要求。4 試驗(yàn)方法4. 1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)小區(qū)采用隨機(jī)排列，小區(qū)間設(shè)有 2m 寬隔離帶，小區(qū)面積不小于 150 m2 ? 四次重復(fù)。處理 13轉(zhuǎn)基因大豆不噴施農(nóng)藥;處理 2 :受體大豆不噴施農(nóng)藥$一一處理 32 當(dāng)?shù)仄胀ㄔ耘啻蠖蛊贩N不噴施農(nóng)藥;一一處理 42 當(dāng)?shù)仄胀ㄔ耘啻蠖蛊贩N噴施農(nóng)藥。4.2 播種播種深度 3 cm4 cm，每平方米播種 10g12g 。4.3 管理按當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)栽培方式

4、管理。4.4 調(diào)查和記錄4. 4. 1 對(duì)大豆田節(jié)肢動(dòng)物多樣性的影響4. 4. 1. 1 調(diào)查方法直接觀察法 z從出苗到成熟，每 10 d 調(diào)查一次，每次調(diào)查時(shí)每小區(qū)對(duì)角線 5 點(diǎn)取樣，每點(diǎn)調(diào)查20 株，記載大豆上、中、下 3 個(gè)葉位的節(jié)股動(dòng)物的種類和所處的發(fā)育階段。在調(diào)查時(shí)應(yīng)包括:害蟲 z 粉虱、班牙蟲、到馬、蜻類、斜紋夜娥、豆天峨等;捕食性昆蟲 z蜘蛛、瓢蟲、草齡、花蟠、獵螃;擬寄生昆蟲 z赤眼蜂(成蟲階段)。吸蟲器調(diào)查法 z在大豆齊苗后 V3-V5 調(diào)查第 1 次，以后在 R1 和 R5 期各調(diào)查 1 次。每處理調(diào)查NY/T 719. 3-2003 5 點(diǎn)，每點(diǎn)用吸蟲器由下往上吸取 10

5、 株大豆(全株)及其地麗上的節(jié)肢動(dòng)物。樣品用 75% 乙醇溶液浸泡，帶回室內(nèi)整理和分類鑒定。4. 4. 1. 2 調(diào)查和記錄記錄節(jié)肢動(dòng)物粉虱、螃蟲、到馬、蜻類、斜紋夜峨、豆夭峨、蜘蛛、瓢蟲、草嶺、花蟠、豬蟠、赤眼蜂等的發(fā)生種類和數(shù)量。4.4.2 對(duì)大豆主要病害的影晌4. 4. 2. 1 調(diào)查方法病毒病 z在大豆苗期、鼓粒期各調(diào)查次，按對(duì)角線 5 點(diǎn)取樣，每點(diǎn) 20 株。霜霉病 g在大豆出苗后 30 d、始花期、鼓粒期各調(diào)查一次，按對(duì)角線 5 點(diǎn)取樣，每點(diǎn) 20 株。于包囊線蟲病 2在大豆出苗后 V3-V5 期調(diào)查一次，按對(duì)角線 5 點(diǎn)取樣，每點(diǎn) 20 株。4.4.2.2 記錄記錄大豆田病毒病、

6、霜霉病和于包囊線蟲病的發(fā)病株數(shù)、發(fā)病級(jí)別和調(diào)查總株數(shù)。按分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)調(diào)查植株發(fā)病程度，以發(fā)病率和病情指數(shù)表示。分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)見規(guī)范性附錄 Ao4.4.2.3 結(jié)果表述發(fā)病率按式(1)計(jì)算 2D= 嘗 ) l ( ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? ? 式中 zD一一-發(fā)病率，% ; N，-發(fā)病植株數(shù)，單位為株 gT，一一調(diào)查總株數(shù)，單位為株。病情指數(shù)按式(2)計(jì)算:IZ旦4旦(T2 X M) .( 2 ) 式中 zI 病情指數(shù)，% ; Nz一一各級(jí)發(fā)病植株數(shù)，單位為株 gR一一發(fā)病等級(jí);T2 調(diào)查總株數(shù)，單位為株 gM 分級(jí)的最高級(jí)別。4.

7、4.3 對(duì)大豆根鋪菌的影響4. 4. 3. 1 調(diào)查方法在大豆收獲期，每小區(qū)按對(duì)角線 5 點(diǎn)取樣，每點(diǎn) 20 株。4.4.3.2 記錄統(tǒng)計(jì)單株大豆全根系根瘤數(shù)。4.5 結(jié)果分析用方差分析法比較轉(zhuǎn)基因大豆與其他大豆對(duì)大豆田節(jié)肢動(dòng)物多樣性、大豆病害及大豆根瘤菌影響的差異。16 病情級(jí)別。級(jí)1 級(jí)2 級(jí)3 級(jí)4 級(jí)病情級(jí)另IJ。級(jí)級(jí)2 級(jí)3 級(jí)4 級(jí)5 級(jí)病情級(jí)別。級(jí)l 級(jí)3 級(jí)5 級(jí)7 級(jí)9 級(jí)附錄 A(規(guī)范性附錄)分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)表 A. 1 大豆花葉病毒病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)癥狀描述植株正常，無(wú)癥狀植株正常，葉平展，呈輕花葉或黃花斑駁(元脈枯植株基本正常，花葉，斑駁花葉，卷葉花葉植株略矮，皺縮花葉植株矮化，葉片畸形皺縮，系統(tǒng)脈枯或枯斑，芽枯表 A.2 大豆霜霉病分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)癥 狀 描述無(wú)病斑或其他感染標(biāo)志有少數(shù)局限型病斑，小點(diǎn)狀，直徑 1 mm 以下$病斑約占葉面積 1% 以下散生不規(guī)則形褪綠病斑，直徑 2 mm 左右，病斑約占葉面積 1%-5%病斑擴(kuò)展，直徑 3 mm.4 mm，病斑約占葉面積 6%-20%擴(kuò)展型病斑，直徑 4 mm 以上，病斑約占葉面積 21%-50%擴(kuò)展型病斑，病