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文檔簡介
1、課時(shí)43:動(dòng)物細(xì)胞工程.考綱要求:動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克隆 A級(jí)。細(xì)胞融合與單克隆抗體 A級(jí)。學(xué)習(xí)重點(diǎn): 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的過程、條件;單克隆抗體的制備過程及其應(yīng)用。學(xué)習(xí)難點(diǎn): 動(dòng)物細(xì)胞工程與植物細(xì)胞工程技術(shù)的比較。教學(xué)步驟:一、 課前自主學(xué)習(xí)1其它動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)的基礎(chǔ)是 。2動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的原理是 。用于培養(yǎng)的材料大多取自 或 。將離體的動(dòng)物組織塊分散成單個(gè)細(xì)胞需用 酶處理,原代培養(yǎng)后的細(xì)胞仍需用該酶處理分瓶實(shí)行 培養(yǎng)。一般分裂 代后的細(xì)胞,其核型可能發(fā)生變化,獲得 性。3動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)為了防止雜菌感染,需加入 ,為了防止有害代謝產(chǎn)物的影響,需要 ;加入的O2的作用是 ,CO2的作用是 。為了提
2、供一些未知成分,可加入 。4用核移植的方法得到的動(dòng)物稱為 。它的原理是 。核移植的受體細(xì)胞是處于 期的卵母細(xì)胞,供體細(xì)胞是 代以內(nèi)的細(xì)胞,原因是 。胚胎細(xì)胞核移植較體細(xì)胞核移植容易的原因是 。5動(dòng)物細(xì)胞融合的原理是 。動(dòng)物細(xì)胞融合不同于植物原生質(zhì)體融合的方法是 。動(dòng)物細(xì)胞融合的主要用途是 。6單克隆抗體制備過程中的第一次篩選的目的是 ;第二次篩選的目的是 。雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn)是 。單克隆抗體的特點(diǎn)是 。二、課內(nèi)互動(dòng)學(xué)習(xí)(一)合作探究1.動(dòng)物細(xì)胞融合和植物體細(xì)胞雜交的比較中,準(zhǔn)確的是 ( )誘導(dǎo)融合的方法完全相同 所用的技術(shù)手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細(xì)胞A. B. C. D.2
3、甘草酸是中藥甘草中的主要活性成分。為了快速檢測甘草酸,科研人員利用細(xì)胞工程技術(shù)制備了抗甘草酸的單克隆抗體,其基本操作過程如下圖。相關(guān)敘述準(zhǔn)確的是( ) A過程注射相對應(yīng)抗原后應(yīng)立即從小鼠脾臟中提取細(xì)胞甲B過程誘導(dǎo)細(xì)胞融合,利用了細(xì)胞膜的選擇透過性C過程、的篩選方法相同,細(xì)胞丙、丁遺傳物質(zhì)相同D過程無論在體內(nèi)還是體外實(shí)行,細(xì)胞丁都可大量增殖3.回答下列相關(guān)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的問題:(1)在動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中,當(dāng)貼壁細(xì)胞分裂生長到細(xì)胞表面 時(shí),細(xì)胞會(huì)停止分裂增殖,這種現(xiàn)象稱為細(xì)胞的 。此時(shí),瓶壁上形成的細(xì)胞層數(shù)是 。要使貼壁的細(xì)胞從瓶壁上分離下來,需要用酶處理,可用的酶是 。(2)隨著細(xì)胞傳代次數(shù)的增多
4、,絕絕大部分細(xì)胞分裂停止,進(jìn)而出現(xiàn) 的現(xiàn)象;但極少數(shù)細(xì)胞能夠連續(xù)增殖,其中有些細(xì)胞會(huì)因遺傳物質(zhì)發(fā)生改變而變成 細(xì)胞,該種細(xì)胞的黏著性 ,細(xì)胞膜表面蛋白質(zhì)(糖蛋白)的量 。(3)現(xiàn)用某種大分子染料,對細(xì)胞實(shí)行染色時(shí),觀察到死細(xì)胞被染色,而活細(xì)胞不染色,原因是 。(4)檢查某種毒物是否能改變細(xì)胞染色體的數(shù)目,最好選用細(xì)胞分裂到 期的細(xì)胞用顯微鏡實(shí)行觀察。(5)在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,通常在 條件下保存細(xì)胞。因?yàn)樵谶@種條件下,細(xì)胞中 的活性降低,細(xì)胞 的速率降低。(6)給患者移植經(jīng)細(xì)胞培養(yǎng)形成的皮膚組織后,發(fā)生了排斥現(xiàn)象,這是因?yàn)闄C(jī)體把移植的皮膚組織當(dāng)作 實(shí)行攻擊。4右圖是制備分泌抗X抗體的過程,根據(jù)圖解
5、回答問題:(1)給小鼠注射抗原的目的是_。(2)在單克隆抗體制備過程中之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_的特性。(3)由圖中可看出,單克隆抗體制備過程運(yùn)用了_ _和_的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段,前者常用的誘導(dǎo)劑與植物原生質(zhì)體融合不同的是可用_。(4)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、無機(jī)鹽、維生素等,與植物細(xì)胞培養(yǎng)基有所不同的是,還含有_。(5)在動(dòng)物細(xì)胞融合過程中,需要將所選取的組織細(xì)胞離散開,以利于細(xì)胞融合,可用_處理離體組織細(xì)胞使之分散開。(6)圖中有兩次篩選過程,其中步驟的目的是篩選出_,步驟的目的是篩選出_。(7)請根據(jù)以下信息,設(shè)計(jì)一方法(不
6、考慮機(jī)械方法),從培養(yǎng)液中篩選出雜交瘤細(xì)胞。已知細(xì)胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基嘌呤阻斷。人淋巴細(xì)胞中有這兩種DNA的合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細(xì)胞中盡管沒有S途徑,但能不斷分裂增殖,將這兩種細(xì)胞在試管中混合,加聚乙二醇促融,獲得雜種細(xì)胞。方法: 。原理: 。(二)拓展延伸(三)小結(jié)與反思課外鞏固練習(xí)43 班級(jí) 姓名 普及基礎(chǔ)題1用動(dòng)、植物成體的體細(xì)胞進(jìn)行離體培養(yǎng),下列敘述不正確的是 ()A都需用CO2培養(yǎng)箱 B都須用液體培養(yǎng)基C都要在無菌條件下進(jìn)行 D都可體現(xiàn)細(xì)胞的全能性2對于下面制備單克隆抗體過程示意圖,不正確的敘述是 ()A表示B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞均是從小鼠
7、的脾臟中提取的B中的篩選是通過抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行的C促進(jìn)細(xì)胞融合的方法可以利用聚乙二醇作介導(dǎo)D可以無限增殖3.一只羊的卵細(xì)胞的核被另一只羊的體細(xì)胞核置換后,這個(gè)卵細(xì)胞經(jīng)過多次卵裂,再植入第三只羊的子宮內(nèi)發(fā)育,結(jié)果產(chǎn)下一只羊羔。這種克隆技術(shù)有多種用途,但是不能( ) A有選擇地繁殖某一性別的家畜 B繁殖家畜中的優(yōu)秀個(gè)體 C用于保存物種 D改變動(dòng)物的基因型4.下列不屬于動(dòng)物細(xì)胞工程應(yīng)用的是 ( ) A大規(guī)模生產(chǎn)干擾素,用于預(yù)防病毒引起的感染 B為大面積燒傷病人提供移植的皮膚細(xì)胞 C大規(guī)模生產(chǎn)食品添加劑、香料等 D利用胚胎移植技術(shù),加快良種家畜的繁殖5.生產(chǎn)單克隆抗體時(shí),在培養(yǎng)液中加入某種試劑能篩選出
8、雜交瘤細(xì)胞,因?yàn)樵撛噭?) A能抑制淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制 B能阻止淋巴細(xì)胞的原癌基因被激活 C選擇性抑制骨髓瘤細(xì)胞的DNA復(fù)制 D能阻止雜交瘤細(xì)胞核糖體上所有蛋白質(zhì)的合成6.關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞融合的敘述,不正確的是 ( ) A動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)需人工誘導(dǎo) B動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)應(yīng)先用纖維素酶處理 C動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)存在細(xì)胞核的融合 D該技術(shù)的主要用途是制備單克隆抗體鞏固提高題7下圖是制備抗體的兩個(gè)途徑的模式圖,下列敘述正確的是(多選) () A圖中獲得的抗體1和抗體2結(jié)構(gòu)完全相同B抗體1和抗體2的制備過程均涉及細(xì)胞篩選C過程所需的氣體CO2的作用維持培養(yǎng)液的pHD和過程的原理分別是細(xì)胞增殖和堿基互
9、補(bǔ)配對原則8下列過程中,發(fā)生膜的融合的是(多選) ( ) A植物體細(xì)胞雜交 B受精過程 C氧進(jìn)入細(xì)胞中的線粒體 D效應(yīng)B細(xì)胞產(chǎn)生抗體9自然界中有一種含有葉綠體的原生動(dòng)物眼蟲,這說明植物的細(xì)胞器同樣可以在某些動(dòng)物細(xì)胞中存活。某同學(xué)提出問題“動(dòng)物細(xì)胞與植物細(xì)胞之間可以實(shí)現(xiàn)雜交嗎?”他嘗試設(shè)計(jì)出下列具體的實(shí)驗(yàn)方案。結(jié)合實(shí)驗(yàn)方案回答:實(shí)驗(yàn)原理:根據(jù)眼蟲的特點(diǎn),動(dòng)物細(xì)胞和植物細(xì)胞之間在理論上是可以實(shí)現(xiàn)雜交的。實(shí)驗(yàn)步驟如下:(1)中選的植物材料細(xì)胞中,必須有的細(xì)胞器是 。(2)過程所用的酶是 和 (3)過程除了用電激之外,還可以用 、 等做誘導(dǎo)因素。(4)過程動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的條件是 、 、 、
10、。(5)在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中,要強(qiáng)調(diào)所用的器械的滅菌和實(shí)驗(yàn)人員的無菌操作,原因是 。 (6)在過程中,通常要添加血清,原因是 。(7)如果讓動(dòng)植物雜交細(xì)胞批量培養(yǎng)生產(chǎn),可以用 技術(shù)。參考答案:一、 課前自主學(xué)習(xí)1、 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)2、 細(xì)胞增殖 早期胚胎 幼齡動(dòng)物組織器官 胰蛋白酶 傳代培養(yǎng) 10-50 不死3、 適量抗生素 定期更換培養(yǎng)液 用于細(xì)胞的有氧呼吸 維持培養(yǎng)液的PH的穩(wěn)定 動(dòng)物血清、血漿4、 克隆 動(dòng)物的細(xì)胞核具有全能性 減中 10 10代以內(nèi)的細(xì)胞核型沒有發(fā)生改變 胚胎細(xì)胞分化程度低,全能性易表達(dá)5、 細(xì)胞膜的流動(dòng)性 用滅活的病毒誘導(dǎo) 制備單克隆抗體6、 選出雜交瘤細(xì)胞 選出能產(chǎn)生特定
11、抗體的雜交瘤細(xì)胞 既能大量增殖又能產(chǎn)生特定抗體 特異性強(qiáng)、靈敏度高、易大量制備。二、合作探究1、C 2、A3、(1)相接觸 接觸抑制 一層 胰蛋白酶(2)衰老、死亡 癌 下降 減少 (3)活細(xì)胞膜有選擇透過性,大分子染料不能進(jìn)入活細(xì)胞內(nèi),故活細(xì)胞不能著色(4)中(5)低溫 酶 代謝(6)抗原4、(1)獲得能產(chǎn)生相應(yīng)抗體的B淋巴細(xì)胞(2)既能無限增殖,又能產(chǎn)生特定抗體(3)動(dòng)物細(xì)胞融合 動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng) 滅活病毒 (4)動(dòng)物血清(5)胰蛋白酶 (6)雜交瘤細(xì)胞 能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞(7)方法:培養(yǎng)液中加入氨基嘌呤,收集增殖的細(xì)胞原理:加入氨基嘌呤后,使D合成途徑阻斷,僅有D合成途徑的骨髓瘤細(xì)胞及其彼此融合的細(xì)胞就不能增殖,但人淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合后的雜種細(xì)胞可以利用淋巴細(xì)胞中的S途徑合成DNA而增殖課外鞏固練習(xí):1、D 2、A 3、D 4、C 5、C 6、B 7、BC 8、
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