病理學(xué)技士專(zhuān)業(yè)知識(shí)考試大綱知識(shí)點(diǎn)

1、專(zhuān)業(yè)知識(shí)病理解剖的意義：收集病理教學(xué)機(jī)科研資料的一個(gè)重要途徑，大量病理資料的積累促進(jìn)了醫(yī)學(xué)的發(fā)展與進(jìn)步。通過(guò)解剖尸體觀察和發(fā)現(xiàn)死者器官、組織的病理變化，找出主要病變，分析判斷直接死亡原因的一種重要方法。可以驗(yàn)證臨床診斷的正確性及治療效果，發(fā)現(xiàn)臨床診斷和治療上存在的問(wèn)題，最后通過(guò)臨床病理討論會(huì)的形式，實(shí)現(xiàn)病理和臨床的交流與統(tǒng)一。病理解剖室的清潔與消毒 地面及靠近地面的墻壁用水沖洗干凈。紫外線燈進(jìn)行空氣消毒，照射劑量不小于9000uw-s/cm2。室內(nèi)溫度不低于20度，相對(duì)適度不超過(guò)50%，照射2030分鐘。必要時(shí)噴霧2%過(guò)氧乙酸8ml/m2密閉消毒30分鐘。解剖器械的消毒 清水沖洗干凈，浸泡在1

2、:1000苯扎溴銨內(nèi)含0.5%亞硝酸鈉溶液中46小時(shí)、10%甲醛水溶液中24小時(shí)。個(gè)人防護(hù) 戴橡膠手套，外再戴薄質(zhì)紗手套，戴上口罩、帽子，穿手術(shù)衣，外戴塑料圍裙。固定 將組織浸入某些化學(xué)試劑，是細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)盡量接近其生活狀態(tài)時(shí)的形態(tài)結(jié)構(gòu)和位置。 意義是保存組織細(xì)胞的抗原性，使抗原物質(zhì)不發(fā)生彌散和抗原性喪失。 作用：保持細(xì)胞與生活時(shí)的形態(tài)相似、保持細(xì)胞內(nèi)特殊的成分與生活狀態(tài)時(shí)相仿、便于區(qū)別不同組織成分、有利于切片、固定劑的不良影響（影響常規(guī)染色、固定造成物質(zhì)損失、組織皺縮）。固定劑的選擇 細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)與固定劑的關(guān)系：組成細(xì)胞的主要成分為蛋白質(zhì)、脂類(lèi)、糖類(lèi)，根據(jù)研究目的的不同選擇不同的固定劑。mas

3、son染色，甲醛升汞、zenker液、bouin液。嗜鉻細(xì)胞，含鉻的固定液。細(xì)胞內(nèi)糖原，用carnoy液。 固定液的量（組織塊總體積的45倍） 穿透力（23mm/24h或0.5cm的多孔疏松組織） 時(shí)間（固定24小時(shí)后保存于70%乙醇。一般324小時(shí)） 特殊固定（制備1um厚的半薄切片，先用戊二醛固定再用餓酸進(jìn)行二次固定） 固定容器（相對(duì)大些，防止組織與容器粘連產(chǎn)生固定不良。瓶底墊一棉絮，使固定液均勻滲入組織塊。輕輕攪動(dòng)，利于滲入。）單純固定劑 甲醛（40%甲醛氣體水溶液，又稱(chēng)福爾馬林。）滲透力強(qiáng)，固定均勻，組織收縮小。固定保存大體標(biāo)本。 甲醛色素：甲醛氧化產(chǎn)生的蟻酸在組織中與血紅蛋白結(jié)合形成

4、棕色的甲醛色素。類(lèi)：醛類(lèi)，甲醛，戊二醛，多聚甲醛，丙烯醛，已二醛，丙二醛等。類(lèi)：氧化劑類(lèi)，四氧化鋨（奧酸），高錳酸鉀，重鉻酸鉀等。類(lèi)：蛋白變性類(lèi)，甲醇，乙醇，醋酸等。類(lèi)：其他，氯化汞，苦味酸等。 重鉻酸鉀：橘紅色結(jié)晶，有毒性，1%3%水溶液。固定高爾基體和線粒體。 苦味酸：黃色結(jié)晶體，強(qiáng)酸易燃易爆。沉淀一切蛋白質(zhì)，穿透慢，組織收縮明顯，組織無(wú)明顯硬化。 升汞：針狀結(jié)晶。5%7%飽和水溶液。固定蛋白質(zhì)。 醋酸：保存染色體。 鉻酸：三氧化鉻的水溶液。0.5%1%。線粒體和高爾基體。 餓酸：四氧化餓，淡黃色結(jié)晶，1%2%的水溶液，脂類(lèi)。 丙酮：酶組織化學(xué)的各種酶的固定。 三氯醋酸：無(wú)色易潮解的結(jié)晶體

5、。蛋白質(zhì)沉淀。 乙醇：80%95%，糖原的固定。（1）b-5固定液淋巴組織（2）bouin氏固定液外科活檢標(biāo)本、結(jié)締組織染色（三色較佳）（3）carnoy氏液胞質(zhì)和胞核，染色體固定佳（4）miiller氏液媒染和硬化神經(jīng)組織（5）orth氏液胚胎組織、神經(jīng)組織、脂肪組織（6）pfg液肽類(lèi)抗原的固定，免疫電鏡研究（7）plp液和plpd液富含糖類(lèi)組織的固定（8）rosman液糖原固定好（9）zenker液固定多種組織，使細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)染色較清楚，常用三色染色（10）4%多聚甲醛-0.1mol /lpb 適用光鏡免疫組化（11）4%多聚甲醛-磷酸二鈉/氫氯化鈉液光鏡和電鏡免疫組化（12）甲醛-鈣液

6、脂肪組織和組織化學(xué)染色（13）乙醇-甲醛液皮下組織肥大細(xì)胞（14）乙醚-酒精液細(xì)胞涂片（15）中性緩沖甲醛液免疫組化（16）中性甲醛液常用（40%甲醛120ml、蒸餾水880ml、磷酸二氫鈉4g、磷酸氫二鈉13g。）組織的脫水和脫水劑 脫水：借某些溶媒置換組織內(nèi)水分的過(guò)程。 酒精脫水能力強(qiáng)，硬化組織，收縮明顯，梯度脫水丙酮快速脫水或固定兼脫水異丙醇乙醇替代品，收縮小，硬化作用弱正丁醇脫水后的組織科直接浸蠟和包埋，電鏡中的中間脫水劑透明：組織塊中的水分被溶劑取代，其折射指數(shù)接近于組織蛋白的折射指數(shù)，組織塊變得透亮。二甲苯：常規(guī)透明劑，折射指數(shù)1.50，對(duì)組織的收縮性強(qiáng)，易使組織變硬變脆。石蠟切片

7、：組織經(jīng)石蠟包埋制成蠟塊，用切片機(jī)制成切片的過(guò)程。一般厚度46um。蛋白質(zhì)的著色原理：蛋白質(zhì)分子中的氨基酸殘基含有酸性基團(tuán)或堿性基團(tuán)，可以與染料分子以離子鍵、氫鍵、配價(jià)鍵結(jié)合。核酸染色原理：核酸包括dna和rna。是由單核苷酸連接而成的大分子。在dna雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核酸鏈上的磷酸基向外，并電離為負(fù)離子，使dna雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷，易和帶正電荷的堿性染料以及媒染染料以離子鍵或氫鍵相結(jié)合。胞質(zhì)的主要成分：蛋白質(zhì)、rna、脂蛋白等，多為兩性化學(xué)物。 在ph3.64.7之間，胞核帶負(fù)電荷為堿性染料染色；胞質(zhì)帶正電荷為酸性染料染色。細(xì)胞膜的成分：類(lèi)脂和蛋白質(zhì)，形成流動(dòng)鑲嵌脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)。 在膜表面分

8、布有糖脂、磷脂、蛋白質(zhì)分子，含有較多的極性基團(tuán)，負(fù)電基團(tuán)和正點(diǎn)基團(tuán)。負(fù)點(diǎn)基團(tuán)占優(yōu)勢(shì)總結(jié)果使細(xì)胞膜外表面帶負(fù)電，易被堿性染料染色。7.he染色的原理（1）細(xì)胞核染色原理：細(xì)胞核的染色質(zhì)主要是dna，dna的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條鏈上的磷酸基向外，帶負(fù)電荷，稱(chēng)酸性，易與帶正電荷的蘇木精堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。（2）細(xì)胞質(zhì)染色的原理：在染料中加入醋酸，使胞質(zhì)帶正電荷，可被負(fù)電荷的染料結(jié)合。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子，與蛋白質(zhì)的氨基正電荷結(jié)合而使細(xì)胞質(zhì)染色。二甲苯的作用：脫去切片中的石蠟；透明切片的作用。（3）乙醇的作用：洗脫用于脫蠟的二甲苯，再使水分進(jìn)入切片；脫去組織中的水分。水洗的作

9、用：使水進(jìn)入切片中，蘇木素染液進(jìn)入細(xì)胞核中；洗去未結(jié)合的染料；除去為結(jié)合的染料和中止分化。（4）分化的作用：洗去細(xì)胞核中結(jié)合過(guò)多的染料和胞質(zhì)中吸附的染料。返藍(lán)的作用：分化后的蘇木精在酸性下處于紅色離子狀態(tài)，在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài)，使蘇木精染上的細(xì)胞核變成藍(lán)色。8、石蠟切片和he染色的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（切片完整，厚度46um，厚薄均勻，無(wú)褶無(wú)刀痕；染色核質(zhì)分明，紅藍(lán)適度，透明潔凈，封婊美觀。）十、常用的特殊染色技術(shù) 1.結(jié)締組織復(fù)合染色法（1）應(yīng)用（鑒別梭形細(xì)胞軟組織腫瘤的來(lái)源屬于纖維性、肌肉性、神經(jīng)性）（2）mallory三色法結(jié)果（膠原和網(wǎng)狀纖維呈藍(lán)色，軟骨黏液淀粉樣變物質(zhì)呈淡藍(lán)色，神經(jīng)膠質(zhì)纖

10、維、肌纖維和酸性顆粒呈紅色，髓鞘和紅細(xì)胞呈橘紅色）（3）masson三色法結(jié)果（膠原纖維呈綠色，肌纖維呈紅色，紅細(xì)胞呈橘紅色）（4）顯示膠原、網(wǎng)狀和彈力纖維三聯(lián)染色法結(jié)果（膠原纖維呈紅色，網(wǎng)狀纖維呈綠色，肌肉和紅細(xì)胞呈淡黃色）2.膠原纖維染色法（1）應(yīng)用（鑒別腫瘤來(lái)源于纖維細(xì)胞、心肌瘢痕灶、早期肝硬化。及其他組織纖維增加或減少等）（2）van gieson法的缺點(diǎn)（甲乙兩液需分瓶存放，甲液配制后數(shù)天即可用，不易配制過(guò)多，乙液配制后立即使用。（3）麗春紅s染色的結(jié)果（膠原纖維呈鮮紅色，肌纖維、細(xì)胞質(zhì)、紅細(xì)胞呈黃色，胞核呈藍(lán)褐色）（4）天狼星紅的染色結(jié)果（膠原纖維呈紅色，細(xì)胞核呈綠色，其他呈黃色）

11、（5）天狼星紅染色在偏光顯微鏡下的結(jié)果型膠原纖維：排列緊密，顯示很強(qiáng)的雙折光性，呈黃色或紅色的纖維。型膠原纖維：顯示弱的雙折光，呈多種色彩的疏松網(wǎng)狀分布。型膠原纖維：顯示弱的雙折光，呈綠色的細(xì)纖維。型膠原纖維：顯示弱的雙折光的基膜，呈淡黃色。3.網(wǎng)狀纖維染色法（1）應(yīng)用（常區(qū)別上皮還是非上皮性來(lái)源的腫瘤；肝組織的網(wǎng)狀支架塌陷破壞或增生的情況）（2）銀染色的原理（組織蛋白質(zhì)與銀化合物的結(jié)合，再經(jīng)過(guò)甲醛還原成為金屬銀而沉淀于組織內(nèi)及表面的物質(zhì)）（3）gomori銀染色法結(jié)果（網(wǎng)狀纖維呈黑色，胞核呈紅色（核固紅復(fù)染），膠原纖維呈黃棕色，細(xì)胞質(zhì)呈淡紅色（紅夜復(fù)染）（4）james銀染色的原理和結(jié)果4.

12、彈力纖維染色法（1）應(yīng)用（皮膚組織增生和變化，呼吸道支氣管擴(kuò)張，老年性肺氣腫的纖維斷裂、變性、萎縮；心內(nèi)膜彈性纖維異常增生癥等）（2）維多利亞蘭和麗春紅s染色的結(jié)果（彈性纖維呈藍(lán)綠色，膠原纖維呈紅色，背景呈淡黃色）5.肌肉染色法（1）應(yīng)用（腫瘤細(xì)胞出現(xiàn)橫紋肌纖維）（2）mallory氏ptah法結(jié)果（胞核、纖維、肌肉、神經(jīng)膠質(zhì)纖維、纖維蛋白、橫紋肌等均呈藍(lán)色，膠原纖維、網(wǎng)狀纖維軟骨基質(zhì)及骨呈黃色或玫瑰紅色；粗彈性纖維有時(shí)被染成微紫色；有缺血缺氧早期病變的心肌呈紫藍(lán)色或棕黃色。）（3）早期心肌病變組織染色nagar-olsen染色法結(jié)果（缺氧心肌、紅細(xì)胞呈紅色，正常心肌呈黃色或黃棕色，細(xì)胞核呈藍(lán)

13、色。） poley染色法結(jié)果（缺氧心肌呈紅色，胞核呈紫色，其他組織呈綠色。）6.糖類(lèi)染色法（1）分類(lèi)（多糖、中性黏液物質(zhì)、酸性黏液物質(zhì)）（2）糖原染色的應(yīng)用（鑒別細(xì)胞內(nèi)的空泡狀變性；是被水溶性固定液溶解還是脂肪被脂溶劑溶解）（3）pas染色法的原理（過(guò)碘酸把多糖的葡萄糖分子中的兩個(gè)相鄰的羥基的cc鍵打開(kāi)，而生成醛基再與染色劑結(jié)合。堿性復(fù)紅經(jīng)亞硫酸和二氧化硫作用下，醌式結(jié)構(gòu)的雙鍵被破壞而消失，成為無(wú)色復(fù)紅，經(jīng)過(guò)氧化后的醛基與無(wú)色復(fù)紅液進(jìn)行結(jié)合呈紫紅色）結(jié)果（糖原及其他陽(yáng)性物呈紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色）7.粘多糖染色法（1）應(yīng)用（粘液性疾?。?）alcian blue染色和結(jié)果（唾液酸及若硫酸化黏液物

14、質(zhì)以及一般黏液呈藍(lán)色，各種強(qiáng)酸化黏液物質(zhì)不著色或淡染，胞核紅色）（3）中性粘多糖的pas染色結(jié)果（）（4）mowry染色結(jié)果（中性黏多糖物質(zhì)呈紅色，酸性黏多糖物質(zhì)呈藍(lán)色，混合型黏多糖呈紫紅色）8.色素類(lèi)染色（1）色素的種類(lèi)（外生性色素及沉淀物、人為色素及沉淀物；甲醛色素、黑色素）（2）黑色素染色的應(yīng)用（顯示異常的黑色素）（3）masson fontana法（黑色素及嗜銀細(xì)胞顆粒呈黑色，膠原纖維呈紅色，背景呈淡藍(lán)色）（4）lillie染色法黑色素結(jié)果（黑色素呈暗綠色，背景淺綠或不著色。肌纖維和背景呈黃色）（5）含鐵血黃素染色的應(yīng)用（組織內(nèi)的鐵質(zhì)以含鐵血黃素的方式存在）（6）含鐵血黃染色有哪幾種證

15、明方法和原理（7）脂褐素染色的應(yīng)用（觀察膽道阻塞和血紅蛋白的代謝障礙等疾患所以起的膽汁淤積。病理時(shí)，出現(xiàn)在肝細(xì)胞、毛細(xì)血管、小膽管、庫(kù)普弗細(xì)胞等）10.淀粉樣物質(zhì)染色（1）性質(zhì)（糖蛋白成分）（2）應(yīng)用（分為原發(fā)性和繼發(fā)性，腫瘤的診斷與鑒別）（3）剛果紅染色的結(jié)果（淀粉樣物質(zhì)呈紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色）（4）jurgens甲紫染色結(jié)果（淀粉樣物質(zhì)呈紅色或紫紅色，細(xì)胞核呈藍(lán)色）11.真菌染色（5）高碘酸復(fù)紅染色的原理（真菌的基本結(jié)構(gòu)成分是較多的黏多糖和蛋白質(zhì)，經(jīng)適當(dāng)?shù)难趸瘎┖脱趸瘯r(shí)間，促使糖類(lèi)結(jié)構(gòu)分子的乙二醇或氨羥基的碳鍵斷裂，生成醛類(lèi)化合物，暴露的游離醛基與schiff試劑進(jìn)行結(jié)合。結(jié)果（真菌呈紫紅色

16、，紅細(xì)胞呈淡黃色）12.細(xì)菌染色（1）細(xì)菌（一類(lèi)病原微生物，體積較小，需放大到千倍以上才能看到，根據(jù)特殊方法可以把細(xì)菌分為一般細(xì)菌和抗酸桿菌兩大類(lèi)。）（2）革蘭氏染色的原理和結(jié)果（堿性原料與細(xì)菌的核糖核酸鎂鹽-蛋白質(zhì)復(fù)合物結(jié)合，因此革蘭陽(yáng)性菌攝取結(jié)晶紫多且較牢固，其結(jié)果呈藍(lán)色或紫色。而陰性易被酸性復(fù)紅和中性紅染成紅色。）（3）胃幽門(mén)螺桿菌染色的應(yīng)用（與慢性胃炎和消化性潰瘍有關(guān)；含有蛋白質(zhì)和多糖物質(zhì)，在一定溫度硝酸銀溶液作用下能夠吸附銀離子，再經(jīng)過(guò)還原的顯色劑使幽門(mén)螺桿菌被還原為金屬銀）（4）抗酸桿菌染色的原理和結(jié)果（含有脂質(zhì)、蛋白質(zhì)和多糖類(lèi)，并有糖脂形成一個(gè)蠟質(zhì)的外殼，能與苯酚、堿性復(fù)紅結(jié)合成

17、復(fù)合物，其能酸的脫色。（5）ziel-neelsen方法染色結(jié)果（抗酸桿菌呈紅色，背景呈灰紅色）和區(qū)分結(jié)核桿菌與麻風(fēng)桿菌以及診斷意義（檢查結(jié)核病的結(jié)核性干酪樣壞死灶、麻風(fēng)病變，泡沫細(xì)胞內(nèi)能夠顯示抗酸桿菌陽(yáng)性反應(yīng)的即為結(jié)核病和麻風(fēng)病。結(jié)核（細(xì)長(zhǎng)和帶彎曲的桿狀菌，長(zhǎng)短粗細(xì)不一）麻風(fēng)（較短、粗，聚集成堆，其數(shù)量有明顯較多）（6）淋球菌染色的應(yīng)用13.螺旋體染色 （1）螺旋體的性質(zhì)和形態(tài)(介于細(xì)菌和原蟲(chóng)之間的微生物，是一群細(xì)長(zhǎng)、柔軟彎曲呈螺旋狀，并能自由運(yùn)動(dòng)的原核細(xì)胞微生物。)（2）常用的螺旋體染色方法結(jié)果和應(yīng)用（giemsa染色法，螺旋體及細(xì)菌呈藍(lán)到淡紫色，細(xì)胞質(zhì)呈藍(lán)色，紅細(xì)胞呈橘黃色；ryu碳酸鈉

18、堿性復(fù)紅法，螺旋體呈紅色）（3）梅毒螺旋體染色應(yīng)用（4）釣端螺旋體染色應(yīng)用14.病毒包涵體染色（1）病毒包涵體的性質(zhì)和形態(tài)（形態(tài)大小與紅細(xì)胞相似，胞核嗜酸性，周?chē)型该鲿灒|(zhì)呈嗜酸性，少部分嗜堿性。）（2）應(yīng)用（3）染色方法的結(jié)果（紅色）15.乙型肝炎病毒表面抗原染色（1）應(yīng)用（2）shikata染色法結(jié)果（hbsag陽(yáng)性呈棕色）（3）macchiavello染色法結(jié)果(乙肝表面抗原陽(yáng)性物質(zhì)呈紫色，結(jié)締組織呈紅色，紅細(xì)胞及基質(zhì)呈黃色)（4）維多利亞藍(lán)染色結(jié)果(hbsag陽(yáng)性物質(zhì)呈藍(lán)綠色，細(xì)胞核呈紅色。)16.神經(jīng)組織染色（1）髓鞘染色的應(yīng)用()（2）wergert-pal染色法的結(jié)果(髓鞘呈

19、黑藍(lán)色。背景：淡灰色。)（3）weil染色法的結(jié)果（髓鞘呈藍(lán)黑色。背景：淡灰色。）（4）kullshitsky髓鞘染色結(jié)果（髓鞘呈藍(lán)黑色。背景：淡黃色。）（5）luxol fast blue髓鞘染色結(jié)果（髓鞘呈藍(lán)色，核仁呈紫色，尼氏小體呈紫色）（6）變色酸2r-亮綠髓鞘染色法結(jié)果（神經(jīng)髓鞘呈深紅色，軸索及間質(zhì)成綠色，脫髓鞘纖維不著色。）（7）marchi退變髓鞘染色結(jié)果（退變髓鞘成黑色，背景呈淺棕色）（8）鋨酸-a-萘胺染髓鞘的結(jié)果（）（9）holmes神經(jīng)纖維的染色結(jié)果（神經(jīng)纖維呈黑色，背景灰紫色）（10）bielschowsky神經(jīng)纖維染色結(jié)果（神經(jīng)纖維呈黑色，背景紫色）（11）von b

20、raunmubl神經(jīng)染色的結(jié)果（神經(jīng)纖維和扣結(jié)呈黑色，老年斑呈黑色，背景淺灰色。）（12）eager退變神經(jīng)纖維染色的結(jié)果（退變神經(jīng)纖維呈黑色，背景淺棕色）（13）神經(jīng)細(xì)胞尼氏小體染色的應(yīng)用和結(jié)果(神經(jīng)細(xì)胞的正?；虍惓＝褂妥先旧ǎ耗崾闲◇w呈紫色，膠質(zhì)細(xì)胞呈淡紫色，背景無(wú)色；einarson染色法：尼氏小體呈黑藍(lán)紫色，核呈藍(lán)色，背景無(wú)色；甲苯胺藍(lán)染色法：細(xì)胞核呈淡藍(lán)色，尼氏小體呈深藍(lán)色，背景無(wú)色。)（14）星形細(xì)胞染色的結(jié)果和應(yīng)用（原漿性及纖維性星形細(xì)胞呈紫黑色）（15）小膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞染色結(jié)果和應(yīng)用（神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞及少突膠質(zhì)細(xì)胞呈黑色，背景黃棕色。）17.神經(jīng)內(nèi)分泌細(xì)胞染色（1）親銀反

21、應(yīng)(dnes細(xì)胞含有5-羥色胺類(lèi)和多肽激素，其細(xì)胞質(zhì)的5-ht和甲醛形成還原復(fù)合物，在堿性下與銀氨液作用后而還原為金屬銀。)（2）lillie masson二胺銀反應(yīng)法結(jié)果（親銀顆粒細(xì)胞呈黑色，細(xì)胞核呈紅色，背景呈淡灰黑色）（3）gomori-burtner六胺銀法結(jié)果（親銀細(xì)胞呈黑色，背景呈淺紅色）（4）嗜銀反應(yīng)（dnes細(xì)胞含有5-羥色胺類(lèi)和多肽激素，有的組織中由于含量多而銀的反應(yīng)使其陽(yáng)性增高，所以這種細(xì)胞質(zhì)顆粒中的物質(zhì)不與甲醛液結(jié)合，也能形成還原性復(fù)合物。）（5）de grandi改良反應(yīng)法的結(jié)果（嗜銀細(xì)胞顆粒呈棕黑色，胞核呈紅色）（6）堿性重氮反應(yīng)法結(jié)果（嗜銀細(xì)胞顆粒呈橘紅色至紅色，細(xì)

22、胞核呈藍(lán)色，胞質(zhì)呈黃色。）18.嗜鉻細(xì)胞染色（1）geimsa改良染色法結(jié)果（嗜鉻細(xì)胞呈紅色至紫紅色，皮質(zhì)細(xì)胞呈藍(lán)色，紅細(xì)胞呈粉紅色。）（2）wiesel染色法結(jié)果（嗜鉻細(xì)胞質(zhì)呈黃綠色，細(xì)胞核呈紅色，其他均染成藍(lán)色）十二、酶組織細(xì)胞化學(xué)技術(shù) 1.主要方法的原理（1）金屬沉淀反應(yīng)法：酶作用于底物：能分解產(chǎn)物與底物混合液中的某種物質(zhì)結(jié)合，沉著在作用的局部，接著用金屬置換結(jié)合物質(zhì)，通過(guò)金屬顯色來(lái)證明酶的存在。酶作用于底物后生成的分解產(chǎn)物與底物孵育液中的金屬離子相結(jié)合，直接沉著與酶的反應(yīng)局部而進(jìn)行顯色。使用人工合成底物：在酶的作用下，底物分解產(chǎn)物與特定的金屬相結(jié)合而顯色。（2）偶聯(lián)偶氮法：用人工合成的

23、酶底物，在酶的作用下，產(chǎn)生分解產(chǎn)物，與重氮鹽結(jié)合，可引起偶氮偶聯(lián)，使其形成不溶性的沉淀-偶氮染料。（3）色素形成法：染色劑在酶的作用下，使無(wú)色的化學(xué)物質(zhì)在局部形成色素沉著。2.酶組織化學(xué)的影響因素（1）溫度（動(dòng)物3540人體37植物4050）（2）ph值（多數(shù)7.0，堿性9.29.5,酸性5.0）（3）激活劑：能夠使酶活性減弱，抑制酶的活力；抑制劑：能提高酶活性的物質(zhì)。十三、免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)3.免疫酶組織化學(xué)主要染色方法的原理（1）基本原理（利用抗原與抗體的特異性反應(yīng)，在細(xì)胞或組織中定位抗原或抗體）（2）直接法原理（用已知的特異性抗體與熒光素或酶結(jié)合，直接與待測(cè)組織中的抗原反應(yīng)）（3）間接法（

24、夾心法）原理（兩步組成，用于檢測(cè)抗原或抗體。檢測(cè)抗原時(shí)，第一步以未標(biāo)記的特異性抗體（第一抗體）與組織或細(xì)胞中的抗原反應(yīng)。洗去未與抗原結(jié)合的第一抗體后，再以酶或熒光素標(biāo)記的第二抗體（種族特異性）與第一抗體結(jié)合，然后進(jìn)行顯色或熒光反應(yīng)。）（4）pap法原理（將游離酶和抗酶抗體在使用前先制成穩(wěn)定的酶-抗酶抗體復(fù)合物（pap復(fù)合物），再稀釋后使用，解決了酶與抗酶抗體的比例難以確定的問(wèn)題。）（5）abc法原理（通過(guò)abc復(fù)合物中親和素的橋梁作用，將abc復(fù)合物與生物素化的抗體結(jié)合在一起，達(dá)到檢測(cè)抗原的目的）（6）sp法原理（用鏈親和素分子直接與酶分子結(jié)合，形成酶-鏈親和素復(fù)合物，再與生物素標(biāo)記的第二抗體

25、結(jié)合）（7）envision法原理（利用線狀的葡萄糖分子與大量的酶結(jié)合，再將葡萄糖-酶復(fù)合物連接到第二抗體上，形成酶-葡萄糖-第二抗體復(fù)合物。）（8）epos法原理（）（9）apaap法原理（由堿性磷酸酶代替pap中的過(guò)氧化物酶而成）（10）雙重和多重法原理（）4.免疫組化染色方法的選擇原則（五s原則）（1）specilicity特異性（2）sensitivity敏感性（3）simplicity簡(jiǎn)便性（4）safely安全性（5）save of time and money省時(shí)省錢(qián)5.免疫染色的對(duì)照實(shí)驗(yàn)（1）陽(yáng)性對(duì)照（用已知抗原陽(yáng)性的切片作為對(duì)照與待檢標(biāo)本同時(shí)進(jìn)行免疫細(xì)胞組織化學(xué)染色，對(duì)照切片

26、應(yīng)呈陽(yáng)性結(jié)果）（2）陰性對(duì)照（用確證不含已知抗原的標(biāo)本作對(duì)照，應(yīng)呈陰性結(jié)果。）（3）自身對(duì)照（）6.增強(qiáng)特異性染色方法的原理 （1）抗原修復(fù)（2）合適的抗體稀釋度（3）多層染色法（4）cas方法（5）顯色反應(yīng)的控制（成色質(zhì)濃度和反應(yīng)時(shí)間；雙氧水濃度過(guò)大使反應(yīng)過(guò)快而致背景加深，過(guò)量抑制酶的活性。）7.減少或消除非特異性染色（1）非特性染色的產(chǎn)生主要原因（蛋白質(zhì)吸附于高電荷的膠原和結(jié)締組織成分上。）（2）怎樣識(shí)別非特性染色（不限于單個(gè)細(xì)胞，而是累計(jì)一片細(xì)胞。）8.免疫組織化學(xué)染色結(jié)果的判斷（1）陽(yáng)性細(xì)胞的染色特征（陽(yáng)性細(xì)胞染色分布有三種類(lèi)型：胞質(zhì)、細(xì)胞核、細(xì)胞膜表面；陽(yáng)性細(xì)胞分布可為灶性和彌漫性；染色強(qiáng)度不一；陽(yáng)性細(xì)胞