p16和ki67雙染檢測(cè)助力宮頸癌前病變?cè)\斷

1、p16 與 Ki-67 雙染檢測(cè) ,助力宮頸癌前病變?cè)\斷研究發(fā)現(xiàn) ,全球絕大部分宮頸癌病例都就是由人乳頭瘤 病毒(HPV)所引起，只有長(zhǎng)期持續(xù)感染高危型 HPV病毒才會(huì)導(dǎo) 致高級(jí)別宮頸上皮內(nèi)瘤變 (CIN) ,進(jìn)而發(fā)展為宮頸癌。 宮頸癌防治的關(guān)鍵在于篩查出高風(fēng)險(xiǎn)人群,找出高級(jí)別 CIN患者,及時(shí)干預(yù)。 采用免疫組化雙染技術(shù)在宮頸上皮細(xì)胞或組 織中檢測(cè)兩種生物標(biāo)志物 p16 與 Ki-67 以輔助診斷宮頸癌前 病變已成為當(dāng)前各國(guó)研究的重點(diǎn)。日前 ,在中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四屆全國(guó)細(xì)胞病理學(xué)會(huì)議暨細(xì)胞病 理學(xué)讀片會(huì)上 ,中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院病理科主任余俐教授 同與會(huì)病理及腫瘤領(lǐng)域的專家深入交流并探討了 C

2、INtec?PLUS p16 與 Ki-67 免疫細(xì)胞化學(xué)雙染檢測(cè)對(duì)于輔助 宮頸癌前病變?cè)\斷的重要性。 p16 與 Ki-67 雙染檢測(cè)輔助細(xì) 胞學(xué)診斷 ,有效降低陰道鏡轉(zhuǎn)診率細(xì)胞學(xué)在很多國(guó)家就是標(biāo) 準(zhǔn)的宮頸癌篩查方法 ,但在臨床實(shí)際操作中存在諸多問題 :由 于敏感性較低、 重復(fù)性差 ,檢測(cè)結(jié)果存在一定的假陰性率與假 陽(yáng)性率 ;針對(duì)無明確意義的非典型鱗狀上皮細(xì)胞 (ASC-US) ,不 能明確就是癌前病變還就是反應(yīng)性細(xì)胞改變;實(shí)驗(yàn)室間的結(jié)果差異大 ;對(duì)腺癌不敏感 ;篩查間隔頻繁 ,至少每 23 年就要進(jìn) 行一次檢測(cè)。 余俐教授指出 ,較為理想的宮頸癌篩查手段應(yīng)該 就是在提高細(xì)胞學(xué)檢測(cè)敏感性的同

3、時(shí) ,能夠不損失其特異性或者可以通過客觀的生物標(biāo)志物,標(biāo)記出高級(jí)別病變的細(xì)胞 ,以輔助細(xì)胞學(xué)檢測(cè)結(jié)果的判讀與診斷。2012年，美國(guó)病理學(xué)家協(xié)會(huì)（CAP）與美國(guó)陰道鏡與宮頸病理學(xué) 會(huì)（ASCCP聯(lián)合發(fā)布了下生殖道 HPV相關(guān)的鱗狀病變的命名 標(biāo)準(zhǔn)化計(jì)劃（LAST）指南，最終認(rèn)定p16就是唯一有足夠的臨床 研究數(shù)據(jù)證實(shí)其可用于宮頸癌前病變?cè)\斷的生物標(biāo)志物。對(duì) 于正常細(xì)胞的 HPV 一過性感染 ,免疫組化檢測(cè)不能檢測(cè)到 p16 表達(dá) ,而 HPV 轉(zhuǎn)化性感染則會(huì)引起 p16 的過度表達(dá) , 并被 免疫組化檢測(cè)到。因此 ,p16 可作為 HPV 感染的間接標(biāo)志物 , 廣泛應(yīng)用于宮頸癌前病變?cè)\斷。LAS

4、T指南建議使用特定克隆號(hào)（E6H4）的p16INK4a抗體作為 檢測(cè) HPV 感染就是否影響到細(xì)胞周期調(diào)控的生物標(biāo)志物 ,該 克隆號(hào)就是我國(guó)唯一獲得國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局 （CFDA） 認(rèn)證的 p16INK4a 抗體。2015 年 11 月 26 日 ,CFDA 批準(zhǔn)羅 氏診斷 CINtec PLUS 細(xì)胞學(xué)試劑盒 抗 p16（E6H4） 與 Ki-67（274-11AC3） 單克隆抗體雞尾酒試劑 （免疫細(xì)胞化學(xué)法 ） 用于宮頸脫落細(xì)胞學(xué)診斷。p16 在細(xì)胞周期的阻滯期具有抑制細(xì)胞增殖的功能, 而另一種生物標(biāo)志物 Ki-67 則指示細(xì)胞增殖。在同一個(gè)細(xì)胞周期中 , 如二者同時(shí)表達(dá)則提示細(xì)胞周

5、期失調(diào)。 CINtec PLUS 細(xì)胞學(xué) 雙染檢測(cè)能夠同時(shí)檢測(cè)出 HPV 持續(xù)感染后過表達(dá)的 p16 與 Ki-67 。如雙染陽(yáng)性 ,強(qiáng)烈提示 CIN2+ 病變 ,需立即進(jìn)行陰道鏡 檢查 ;如雙染陰性 ,可隨訪一年后復(fù)查 ,顯著降低陰道鏡轉(zhuǎn)診率 , 減少患者不必要的檢查與治療。2015 年 Besthesda 指南推薦免疫細(xì)胞化學(xué)可輔助細(xì)胞學(xué)診 斷。指南指出，在檢出高度鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）中,p16與 Ki-67 雙染與細(xì)胞學(xué)檢測(cè)的特異性相當(dāng) ,且具有高敏感性。余 俐教授表示 ,CINtec PLUS 檢測(cè)能更準(zhǔn)確地發(fā)現(xiàn)潛在高級(jí)別 病變患者 ,提高宮頸癌前病變檢出率 ,彌補(bǔ)現(xiàn)有宮頸癌細(xì)胞

6、學(xué) 檢測(cè)的不足 ,降低漏診率 ,減少過度診斷。 研究證實(shí)雙染檢測(cè)靈 敏度與特異性高美國(guó)食品與藥物管理局 （FDA）注冊(cè)的美國(guó)本 土最大型的前瞻性宮頸癌篩查臨床試驗(yàn) ATHENA 研究 ,對(duì) 47208 例受試者進(jìn)行了基于 cobas HPV 初篩策略與以細(xì)胞學(xué) 為基礎(chǔ)篩查策略的 3 年隨訪試驗(yàn)。結(jié)果顯示 ,針對(duì) HPV16 與 18 型以外的 12 種高危型 HPV 陽(yáng)性患者 ,CINtec PLUS 檢測(cè)能 夠得到簡(jiǎn)單、 客觀的結(jié)果 ,明確提示患者風(fēng)險(xiǎn)以及就是否需轉(zhuǎn) 診陰道鏡。 CINtec PLUS 陽(yáng)性患者在 3 年內(nèi)進(jìn)展為 CIN3+ 病 變的風(fēng)險(xiǎn)遠(yuǎn)高于細(xì)胞學(xué) ASC-US 以上的患者

7、 ,具有更好的陽(yáng)性 預(yù)測(cè)值 ,需要轉(zhuǎn)診陰道鏡以減少漏診。 CINtec PLUS 陰性患者 ,3 年內(nèi)發(fā)生 CIN3+ 病變的風(fēng)險(xiǎn)低于細(xì)胞學(xué)未見上皮內(nèi)病變或惡 性病變 （NILM） 的患者 ,具有更好的陰性預(yù)測(cè)值 ,不需要轉(zhuǎn)診陰 道鏡 ,幫助減少過度治療。前瞻性 PALMS 研究入組來自 5 個(gè)歐洲國(guó)家的 27349 例病例。大量臨床數(shù)據(jù)顯示 ,CINtec PLUS 雙染檢測(cè)具有高靈敏度與高 特異性 （以 CIN2+ 為終點(diǎn) ）,可用于 ASC-US 分流、低度鱗狀上 皮內(nèi)病變（LSIL分流、HPV初篩后對(duì)高危型 HPV陽(yáng)性者分流、 對(duì)細(xì)胞學(xué)陰性但高危型 HPV 陽(yáng)性患者進(jìn)行分流。該研究 2015 年發(fā)表在癌癥細(xì)胞病理學(xué) （CancerCytopathol） 雜志。最新數(shù)據(jù)顯示 ,對(duì)于細(xì)胞學(xué) ASC-US 患者的分流 中,CINtec PLUS檢測(cè)與HC2HPV檢測(cè)的陰道鏡轉(zhuǎn)診率分別 為26%與42%對(duì)于細(xì)胞學(xué)LSIL