徒手切片基本要求

1、、目的與要求1、學(xué)習(xí)并掌握臨時(shí)裝片的制作方法和步驟。2、學(xué)習(xí)徒手切片技術(shù)。3、了解細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)和厚角組織的特點(diǎn)。二、材料和用品1、自備材料：解剖器（鑷子 、解剖針、單面刀片或雙面刀片） ；洋蔥鱗莖、青紅椒、 芹菜葉柄、女貞葉片或其它植物的葉片、胡蘿卜塊等。2、其它材料和用品：顯微鏡、蓋玻片、載玻片、紗布、蒸餾水、吸水紙、10%甘油水溶液、 50%甘油水溶液、純甘油、碘碘化鉀稀溶液、培養(yǎng)皿、吸管。三、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1、臨時(shí)裝片的制作方法2、徒手切片方法四、實(shí)驗(yàn)方法 要觀察、研究植物細(xì)胞、組織和器官的微細(xì)結(jié)構(gòu)，以及一些很微小的藻、菌植物等，這 些用肉眼是無法看到的，必須借助于顯微鏡來觀察，要用顯微鏡觀察

2、，首先必須制成各 種制片，放在顯微鏡下才能觀察。制片的方法很多，這里著重介紹臨時(shí)裝片法和徒手切 片的方法技術(shù)。1、臨時(shí)裝片的制作方法 臨時(shí)裝片法是用少量的新鮮植物材料， 如單個(gè)細(xì)胞、薄的表皮或切成的薄片以及其它小 的或扁平的材料（如絲狀或葉狀的藻類、菌類、蕨類的原葉體和孢子囊、纖細(xì)的苔蘚植 物等等），把這些材料放在載玻片的水滴中，再蓋上蓋玻片做成玻片標(biāo)本的方法。這種 方法制成的標(biāo)本， 可以保持材料的生活狀態(tài)和天然的色彩。此法一般多做為臨時(shí)觀察使 用，也可根據(jù)需要選擇適宜的染料染色，制成永久制片或用某些化學(xué)試劑作組織化學(xué)反 應(yīng)。臨時(shí)裝片的制作方法和步驟如下：（1）清潔玻片：將蓋玻片和載玻片用清水

3、洗凈，再用紗布擦干，擦玻片時(shí)用左手食指 和拇指夾住玻片的兩邊，右手食指和拇指包住紗布，同時(shí)擦到的玻片的兩面，用力要均 勻。 注意：由于蓋玻片很薄，所以擦蓋玻片時(shí)要特別小心，用力要輕，右手食指和拇指要輕 輕捻動(dòng)，以免把蓋玻片捏破。（2）放置材料：先將載玻片平放在桌面上，于載玻片中央滴一滴蒸餾水或稀甘油，然 后用鑷子鑷取或吸管吸取少量要觀察的材料（如洋蔥鱗葉表皮或水綿） ，放在載玻 片中央的水滴或甘油中， 再用鑷子和解剖針將材料展平或分散開， 勿使材料折疊或干燥。（3）加蓋玻片及其它處理：為了避免產(chǎn)生氣泡，蓋蓋玻片時(shí)，應(yīng)該以大拇指和食指拿著蓋玻片的兩個(gè)角或用鑷子夾住其一端，使蓋玻片的一邊先與載玻片

4、上的水滴邊緣接 觸 ，而后徐徐放下另一邊，當(dāng)蓋玻片被夾持的一邊將貼近載玻片時(shí)，則可放手或抽出 鑷子，使其自然輕輕復(fù)蓋，這樣可以使蓋玻片下的空氣擠出，免生氣泡。注意載玻片中 央的液滴要適中， 既要使其充滿蓋玻片， 又要不會(huì)使蓋玻片浮動(dòng)或使液滴從蓋片下外溢， 假如水不夠， 可用吸管小心地從蓋玻片的邊上再滴入一小滴水， 使它和蓋玻片下面的水 相接觸；如果水太多，溢出蓋玻片，則可用吸水紙吸去，蓋玻片的上面，一定不能被水 浸濕，如果發(fā)生這種情況，應(yīng)該小心地取下蓋 玻片，擦干以后，再按上述方法重新蓋 上。這樣做好的裝片，便可在顯微鏡下進(jìn)行觀察。根據(jù)需要，臨時(shí)水裝片做好后還可以 進(jìn)行簡(jiǎn)單的染色（例如用碘碘化

5、鉀或番紅等來染色） ，其方法是直接在蓋玻片的一側(cè) 加一滴染液， 用吸水紙條在蓋玻片的另一側(cè)吸水， 引入染液， 以使蓋片下的材料染上色。1 / 11注意：臨時(shí)裝片根據(jù)需要可以水封片或以甘油封片，凡用以臨時(shí)觀察，不欲久留的裝片 均可用水封片， 制成水裝片； 需要提前半天或一天就備出的裝片或者觀察后須保留一定 時(shí)間的裝片， 為防止水分蒸發(fā)， 出現(xiàn)材料收縮現(xiàn)象， 則適宜用甘油封片， 制成甘油封片， 用甘油封片時(shí)， 保留時(shí)間短者， 可用 10% 甘油水溶液， 保留時(shí)間長(zhǎng)者則須從 10%甘油中 再轉(zhuǎn)入 50%甘油水溶液中或在此液中浸一小時(shí)后再轉(zhuǎn)入純甘油中封片。用甘油做臨時(shí)裝片的優(yōu)點(diǎn)是不僅封片保留時(shí)間長(zhǎng)，且

6、有加強(qiáng)材料透明的作用。本實(shí)驗(yàn)以洋蔥（或大蔥）鱗莖內(nèi)表皮為材料，通過撕皮法做臨時(shí)裝片，用碘碘化鉀做 染色劑，在觀察做片效果時(shí)同時(shí)了解細(xì)胞的基本結(jié)構(gòu)，如細(xì)胞壁、細(xì)胞質(zhì)、液泡、細(xì)胞 核等。2、徒手切片法徒手切片法簡(jiǎn)稱手切片法， 即手拿刀片將材料切成能在顯微鏡下觀察其內(nèi)部結(jié)構(gòu)的薄片 的方法。 是植物形態(tài)解剖學(xué)實(shí)驗(yàn)及研究中最簡(jiǎn)單和最常用的方法，也是最重要的基本技 能之一。徒手切片的材料一般是新鮮的，有時(shí)也可用預(yù)先固定好的。這種切片方法雖然 有其缺點(diǎn)，如：不易做到將整個(gè)切面切得薄而完整，往往切出的片子厚薄不一；過軟過 硬的材料比較難切。但其優(yōu)點(diǎn)很多，如：工具簡(jiǎn)單，只要有一把鋒利的剃刀或雙面刀片 就夠了；方

7、法簡(jiǎn)便， 容易學(xué)會(huì)； 節(jié)省時(shí)間，只要有現(xiàn)成材料， 可以立刻用刀片切成薄片， 當(dāng)即觀察，即便要染色，時(shí)間也不長(zhǎng)；還有一個(gè)獨(dú)特的優(yōu)點(diǎn)就是可以看到組織細(xì)胞內(nèi)的 自然結(jié)構(gòu)和天然顏色。 徒手切片的方法見圖 22。一般材料的徒手切片方法（1）將材料切成長(zhǎng)約 23 厘米的小段，削平切面。（2）左手大拇指和食指的第一關(guān)節(jié)指彎夾住材料，使之固定不動(dòng)搖。為防止刀傷，拇 指應(yīng)略低于食指，并使材料上端超出手指2 3 毫米，不可高出過多，否則切片時(shí)材料容易動(dòng)搖，也不容易切薄。（3）右手大拇指和食指捏住刀片的右下角 （刀片要非常鋒利， 雙面刀片必須是新用的） 刀口向內(nèi)，并與材料切面平行，切片前先將材料和刀口上蘸些水，使之

8、切時(shí)滑潤(rùn)。（4）切的方法，以刀口自外側(cè)左前方向內(nèi)側(cè)右后方拉切，這樣可以邊切邊看清切片的 進(jìn)展情況， 同時(shí)切起來也比較順手。 切片時(shí)只用臂力而不要用腕力及握刀指關(guān)節(jié)的力量， 左手保持不動(dòng)， 不要兩手同時(shí)拉動(dòng)， 兩手不要緊靠身體或壓在桌子上， 并且動(dòng)作要敏捷， 材料要一次切下，切忌中途停頓或推前拖后作“拉鋸”式切割。關(guān)鍵是要切得薄而平。 如此連續(xù)切片，切下數(shù)片后，用濕毛筆將切片輕輕移入培養(yǎng)皿的清水中備用。（5）在切片過程中刀口和材料要不斷蘸水，以保持刀口鋒利和避免材料失水變形。所 切的材料和刀片一定要保持水平方向，不要切斜，如果切斜，即使很薄，但由于細(xì)胞切 面偏斜，同樣影響觀察。（6）切下足夠多的

9、切片后，挑選薄而平的切片做成臨時(shí)裝片供鏡檢，必要時(shí)也可以制 成永久裝片。挑選切片時(shí)，不一定要材料切得很完整，只要切得很薄就行，有時(shí)只要有 一小部分就可以看清其結(jié)構(gòu)了，如玉米莖橫切片，只要有四分之一或者更少的小片，就 可以看出內(nèi)外維管束的大小、 多少及每個(gè)維管束的構(gòu)造。 因此切下的切片不是每一片都 適用，也不是只有全面切得薄的才能用，要根據(jù)需要進(jìn)行選擇，一次可多選幾片置于載 玻片上，制成臨時(shí)裝片，通過鏡檢再進(jìn)一步選擇理想的材料用以觀察。柔軟和堅(jiān)硬材料的徒手切片方法 過于柔軟的材料，如植物的葉片或其他薄而微小的材料，難以直接執(zhí)握手切，則須夾入 堅(jiān)固而易切的夾持物中切。 常用的夾持物有胡蘿卜根（用胡

10、蘿卜時(shí)可將中間硬心即木質(zhì) 部切去用其余部分） 、土豆塊莖、接骨木的髓部及通草髓等。但須要注意的是通草髓遇 水既變軟，可將其保存在酒精中備用。切前先將夾持物切成長(zhǎng)方小體，上端與縱軸垂直2 / 11 面削平，若被切材料屬葉狀體一類的薄片，將夾持物從上至下縱切一縫，材料夾于其中 即可，如不是葉狀體，即將材料夾于其中，或根據(jù)材料不同在縫里挖一個(gè)和材料形狀相 似、大小相同的凹陷，把材料夾在凹陷里。然后用手握住夾持物，采用上述方法將夾持 物和其中的材料一齊切成薄片，除去夾持物的薄片，便得到材料的薄片。堅(jiān)硬的材料要經(jīng)軟化處理后再切。軟化的方法：一種是對(duì)于比較硬的材料，先把材料切 成小塊，后進(jìn)行煮沸，經(jīng) 3

11、4 小時(shí)煮沸后，再浸入軟化劑（ 50%酒精甘油 11） 中數(shù)天至更長(zhǎng)些時(shí)間，而后再切。另一種，對(duì)于已干或含有礦物質(zhì)，比較更硬的材料， 要先在 15%氫氟酸的水溶液中浸漬數(shù)周，充分浸洗后，再置入甘油里軟化后再切。 本實(shí)驗(yàn)主要以青紅椒、 芹菜葉柄為材料做徒手切片練習(xí)。 并通過青紅椒切片結(jié)果裝鏡觀 察來了解細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)中葉綠體和有色體； （提示：青椒切片細(xì)胞內(nèi)綠色的小顆粒為葉 綠體，紅椒切片細(xì)胞內(nèi)紅色的小顆粒為有色體。 ）通過芹菜葉柄切片結(jié)果裝鏡觀察來了 解厚角組織的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。 （提示：芹菜切片在顯微鏡下觀察，在棱角處稍靠?jī)?nèi)方有一團(tuán) 具有珠光色彩的組織即為厚角組織。在高倍鏡下觀察，可見其細(xì)胞壁厚為角

12、隅處，其細(xì) 胞壁的性質(zhì)是初生壁性質(zhì)，主要成分為纖維素，有強(qiáng)烈的吸水性，故顯微鏡下有珠光色 彩。）五、綜合分析1、臨時(shí)裝片和徒手切片的特點(diǎn)和適用范圍各是什么？2、做臨時(shí)裝片蓋蓋玻片時(shí)應(yīng)注意什么？3、徒手切片法切取柔軟和堅(jiān)硬材料時(shí)應(yīng)怎樣進(jìn)行？六、實(shí)驗(yàn)報(bào)告 自選材料制做幾種不同材料的臨時(shí)裝片和徒手切片，寫出你所做裝片的步驟和要點(diǎn)。學(xué)案六 實(shí)驗(yàn)一可溶性還原糖脂肪蛋白質(zhì)的鑒定一、解讀兩綱1. 識(shí)記鑒定實(shí)驗(yàn)所用的材料，懂得選材的要求。2. 掌握實(shí)驗(yàn)原理、步驟，理解實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、方法?. 學(xué)會(huì)制備生物組織樣液， 正確選用鑒定試劑， 并能按規(guī)范的要求操作， 獨(dú)立完成鑒定 工作。4. 明確觀察對(duì)象， 正確說出鑒定

13、過程中樣液的顏色變化， 并能用準(zhǔn)確的語言解釋實(shí)驗(yàn)現(xiàn) 象，作出實(shí)驗(yàn)結(jié)論。5. 能熟練制作徒手切片，臨時(shí)裝片和使用低倍顯微鏡，了解高倍顯微鏡的使用方法。6. 具備驗(yàn)證相關(guān)生物學(xué)事實(shí)的能力， 并能對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、 分析和處理； 能 對(duì)一些生物學(xué)問題進(jìn)行初步的探究性研究。二、高考熱線1. 題型以選擇題為主， 也可能以簡(jiǎn)答題出現(xiàn)， 重點(diǎn)是以對(duì)比的方式考查相關(guān)實(shí)驗(yàn)的異同 點(diǎn)。2. 以教材實(shí)驗(yàn)為依據(jù)， 設(shè)置實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)題是今后考查的重點(diǎn)， 如“設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)證明淀粉酶是 蛋白質(zhì)”，就是依據(jù)教材中的實(shí)驗(yàn) 3 的原理和步驟。三、學(xué)法指點(diǎn)3 / 111. 運(yùn)用對(duì)比的方法認(rèn)識(shí)三種物質(zhì)的鑒定原理、過程及注意事項(xiàng)。2.

14、 對(duì)比三種物質(zhì)鑒定過程中的相同點(diǎn)和不同點(diǎn)，重點(diǎn)掌握試劑使用上的區(qū)別。3. 根據(jù)所學(xué)的原理鑒定類似物質(zhì)，設(shè)計(jì)相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)程序。四、教材梳理（一）實(shí)驗(yàn)原理生物組織中含有可溶性還原糖（如 、 、）、脂肪、蛋白質(zhì)等化學(xué)成分，可分別與某些化學(xué)試劑作用產(chǎn)生特定的 。（1）可溶性還原糖 + 試劑磚紅色沉淀可溶性還原糖 +班氏糖定性試劑 （2）脂肪 +染液染成橘黃色脂肪 +蘇丹染液染成 （3）蛋白質(zhì) + 試劑溶液呈紫色（ 二 ） 實(shí)驗(yàn)?zāi)康?. 初步掌握鑒定可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的基本方法。（ 三 ） 實(shí)驗(yàn)材料（四） 方法步驟1. 可溶性還原糖的鑒定（1）制備組織樣液：蘋果切塊、研磨、 。（2）鑒定組織樣液：

15、 1 支試管 +2mL+2mL，振蕩試管，（溶液色?），2min 左右，觀察溶液顏色變化。 （ 色棕色 色）。2. 脂肪的鑒定（1）切片制作：用花生子葉作徒手切片。（2）染色： 1塊載玻片 +切片+ 3 滴染液， 3min 后吸去染液 + 2 滴50%溶液去浮色，吸去后 + 2 滴 ，蓋蓋玻片。（3）鏡檢鑒定：先用低倍鏡觀察， 找到子葉最薄處， 再用高倍鏡觀察。 （圓形的脂肪顆粒 為色）。3. 蛋白質(zhì)的鑒定（1）制備樣液：大豆切片、 、 。（2）鑒定：1 支試管 +2mL黃豆組織樣液 +2mL，振蕩試管（溶液 色），+4 滴，試管，觀察溶液顏色變化。 （色 色色）。（五）結(jié)論與討論1. 結(jié)論：

16、從斐林試劑與蘋果樣液作用、 蘇丹 III 染液與花生種子作用、 雙縮脲試劑與大 豆樣液作用的顏色變化可以得出：2. 討論鑒定依據(jù)。 因?yàn)槟承┗瘜W(xué)試劑與生物組織中的有關(guān) 發(fā)生一定的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生有固定顏色的新化合物。故可根據(jù)待檢物與某些化學(xué)試劑反應(yīng)的 , 如橘黃色、 色、 色等，鑒定生物組織中含有 、可溶還原糖和自我校對(duì) 原理 ：葡萄糖 果糖 麥芽糖 顏色反應(yīng) 斐林 磚紅色沉淀蘇丹 III紅色 雙縮脲 步驟 ：過濾 蘋果組織樣液 剛配制的斐林試劑 淡藍(lán)水浴加熱淡藍(lán) 磚紅 蘇丹 III 酒精 蒸餾水 橘黃 過濾 雙縮脲試劑 A 乳白 雙縮脲試劑 B 乳白 紫色 結(jié)論與討論 ：蘋果、花生種子和大豆中

17、分別含有可溶還原糖、 脂肪和蛋白質(zhì) 化合物 固有顏色 磚紅 紫色 脂肪 蛋白質(zhì)4 / 11五、疑難精析1生物組織中的還原糖是指分子結(jié)構(gòu)中含有還原性基團(tuán)（如游離醛基或酮基 ） 的糖，如葡萄糖、 麥芽糖、 果糖，淀粉、蔗糖不具有還原性， 斐林試劑只能檢驗(yàn)可溶性還原糖的存在， 而不能鑒定可溶性非還原糖或不溶性糖。2可溶性還原糖鑒定實(shí)驗(yàn)的選材原則。選用可溶性還原糖含量較高的生物組織，而且 組織的顏色較淺，或近于白色。常用的植物組織是：蘋果、梨、白色甘藍(lán)葉、白蘿卜。雙子 葉植物光合作用的主要產(chǎn)物為淀粉，其葉不理想。有些單子葉植物，如韭菜、鳶尾等，其葉 內(nèi)含有大量的可溶性單糖， 但由于葉片中葉綠素顏色較深

18、， 影響鑒定時(shí)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象的觀察， 也 不宜作實(shí)驗(yàn)材料。3可溶性還原糖鑒定實(shí)驗(yàn)的關(guān)鍵性的步驟在于斐林試劑現(xiàn)用現(xiàn)配及用量。很不穩(wěn)定， 故應(yīng)將組成斐林試劑的甲液 （0.1g mL的 NaOH溶液）和乙液 （0.05g mL的 CuS04溶液 ）分別 配制、儲(chǔ)存；使用時(shí)，再臨時(shí)配制，將45 滴乙液滴入 2mL甲液中，配完混合均勻后 得到淡藍(lán)色的 Cu（OH）2沉淀的懸濁液 立即使用。如果過早混合會(huì)產(chǎn)生 Cu（OH）2沉淀，加入到組 織樣液中并加熱時(shí)會(huì)產(chǎn)生黑色 CuO沉淀。 而臨時(shí)混合所得斐林試劑立即用于實(shí)驗(yàn)，即可使新制的 Cu（OH）2 作氧化劑與可溶性還原糖發(fā)生氧化 - 還原反應(yīng)，生成磚紅色的 Cu2

19、O沉淀。溶液 的變化過程：淡藍(lán)色棕色磚紅色沉淀。4在可溶性還原糖的鑒定中，在對(duì)盛有組織樣液與斐林試劑混合物的試管直接用酒精 燈加熱易破， 因?yàn)樵嚬苁軣岵痪鶆颍?若要避免此現(xiàn)象產(chǎn)生應(yīng)改用水浴加熱。 此時(shí)試管底部不 要觸及燒杯底部，試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者，以免溶液沸騰時(shí)沖出試管造成燙傷。5雙縮脲試劑并不是雙縮脲分子。所謂雙縮脲是由兩分子尿素經(jīng)脫氨縮合而成的化合 物。該化合物在堿性溶液中能與 CuSO4反應(yīng)產(chǎn)生紫色絡(luò)合物， 此反應(yīng)稱雙縮脲反應(yīng)。 蛋白質(zhì) 分子中含有許多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵， 因此也能起雙縮脲反應(yīng)。 特別要提醒學(xué)生的是實(shí) 驗(yàn)桌上兩瓶不同濃度的 CuS04溶液，避免拿錯(cuò)。6蛋白質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)

20、中，最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織，植物材料常用的是大豆，動(dòng) 物材料常用的是雞蛋。 其關(guān)鍵性步驟在于先加雙縮脲試劑 A （0.1g/mLNaOH 溶液）再加雙縮脲 試劑 B（0.01g/mLCuSO4 溶液 ） 。如果用雞蛋白稀釋液，則濃度不宜過大，以免實(shí)驗(yàn)后粘住試 管壁，不易洗凈。7. 脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)材料最好選用富含脂肪的種子，其關(guān)鍵性步驟在于子葉要 削成理想薄片。 為了作好徒手切片， 種子浸泡的時(shí)間不宜過長(zhǎng)。 也可改成刮取種子子葉泥制 作臨時(shí)裝片，易做，效果又好。8. 填表比較實(shí)驗(yàn) 1 和 3：比較項(xiàng)目試劑及成分原理溶液濃度方法加熱與 否結(jié)果可溶還原 糖的鑒定斐林試劑NaOH和CuS

21、O4新配制的Cu（OH）2 溶液NaOH 濃 度 為 0.1g/mL ， CuS04 的濃 度 為 0.05g mL先把 NaOH溶液 和 CuSO4溶液混 合，而后立即使 用。水浴加 熱磚紅 色沉 淀蛋白質(zhì)的 鑒定雙縮脲試劑NaOH和CuSO4在堿性環(huán) 境下的Cu2+NaOH的濃度為 0.1g mL， CuS04的濃度 為 O.01g mL先加入 Na0H溶 液，然后再加 CuS04溶液。（ 不能過量 ）不需要溶液 呈紫 色9. 本實(shí)驗(yàn)為驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)， 也用注意對(duì)照。 如在鑒定可溶性還原糖和蛋白質(zhì)時(shí)， 鑒定之前 需留一部分樣液，以便與鑒定后樣液顏色變化作對(duì)比。5 / 11例1 用下列實(shí)驗(yàn)材料做

22、特定實(shí)驗(yàn)，從理論上講能否成功?說明依據(jù)的道理。(1)用韭菜葉片做可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)；(2)用蓖麻種子做脂肪鑒定實(shí)驗(yàn)；(3)用卵白做蛋白質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)。 解析 此題是要求根據(jù)課本實(shí)驗(yàn)原理進(jìn)行拓展和應(yīng)用，這也是近幾年高考的一個(gè)趨勢(shì)。韭菜在進(jìn)行光合作用時(shí)并不能將光合作用的產(chǎn)物葡萄糖轉(zhuǎn)變成淀粉， 因此葉內(nèi)含有大量的可 溶性還原糖，但是， 由于葉片中葉綠素含量較多， 綠色較深， 對(duì)于鑒定時(shí)的顏色反應(yīng)起著掩 蓋作用， 導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象不明顯， 因此不宜用這些單子葉植物作此實(shí)驗(yàn)材料； 后兩個(gè)實(shí)驗(yàn)材料 從理論上說是可行的。答案： (1) 用韭菜葉片做還原糖實(shí)驗(yàn)不能成功， 因?yàn)槿~片內(nèi)雖然含有大量可溶性還原糖， 但葉

23、片中葉綠素含量較多，顏色較深，對(duì)鑒定時(shí)的顏色反應(yīng)起著遮蓋作用； (2) 若用蓖麻種 子做脂肪鑒定實(shí)驗(yàn)， 從理論上說可以成功，因?yàn)樵摲N子含較多的脂肪， 種子也比較大， 便于 進(jìn)行徒手切片； (3) 由于卵白中含有大量的蛋白質(zhì)，從理論上講做蛋白質(zhì)鑒定實(shí)驗(yàn)是會(huì)成功 的。六、趁熱打鐵(一)選擇題1將面團(tuán)包在紗布中在清水中搓洗，鑒定黏留在紗布上的黏稠物質(zhì)和洗出的白漿用的 試劑分別是( )A. 碘液、蘇丹溶液 B 雙縮脲試劑、碘液C. 亞甲基藍(lán)溶液、蘇丹 D 碘液、斐林試劑 2蛋白質(zhì)的鑒定時(shí)，事先留出一些黃豆組織樣液的目的是( )A. 與反應(yīng)后混合液的顏色做對(duì)比 B 失敗后重做一遍C. 鑒定可溶性還原糖用

24、 D. 留下次實(shí)驗(yàn)用 3用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí)，溶液的顏色變化過程為( )A. 淺藍(lán)色棕色磚紅色B無色淺藍(lán)色棕色C. 磚紅色淺藍(lán)色棕色D. 棕色綠色無色4在鑒定可溶性糖的實(shí)驗(yàn)中，對(duì)試管中的溶液進(jìn)行加熱時(shí)，操作不正確的是( )A. 將這支試管放進(jìn)盛開水的大燒杯中 B 試管底部不要觸及燒杯底部C. 試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者 D. 試管底部緊貼燒杯底部 5現(xiàn)有如下實(shí)驗(yàn)材料：西瓜汁菜籽 豆?jié){草莓果實(shí) 花生仁 雞蛋清，6. 青蘋果汁遇碘液顯蘭色，熟蘋果汁能與斐林試劑作用產(chǎn)生磚紅色沉淀，這說明 ( )它們與斐林試劑作用呈磚紅色、驗(yàn)材料分別為 ( )與蘇丹試劑作用呈橘黃色、 與雙縮脲試劑作用呈紫色的實(shí)A.

25、 、B 、C. 、D 、A. 青蘋果汁含有淀粉，不含有糖類 B 熟蘋果汁含有糖類，不含有淀粉C 蘋果成熟時(shí)，淀粉水解成單糖 D. 蘋果成熟時(shí)，單糖合成淀粉7. 下列關(guān)于生物組織中三大有機(jī)物的鑒定操作步驟，正確的是 ( )A. 用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑，可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定B 脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色脂肪滴C. 鑒定可溶性還原糖時(shí)，要加入斐林試劑甲液搖均后再加入乙液D. 用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑 A液與 B 液要混合均勻后， 再加入含樣品的試管中， 且必須現(xiàn)配現(xiàn)用6 / 11B 標(biāo)本切得厚薄不均勻D 細(xì)準(zhǔn)焦螺旋未調(diào)好制備生物組織樣液時(shí)加入少許石英砂，其目的是 防止糖被

26、破壞8某同學(xué)在顯微鏡下觀察被蘇丹染液染色后的花生種子子葉切片，當(dāng)轉(zhuǎn)動(dòng)細(xì)準(zhǔn)焦螺 旋調(diào)焦距時(shí)，有一部分細(xì)胞看得很清楚，另一部分細(xì)胞較模糊，這是由于 ()A. 反光鏡沒調(diào)好C. 顯微鏡物鏡損壞9可溶性還原糖的鑒定中，無作用A. 研磨充分 B. 防止糖被破壞 C 防止反應(yīng) D.(產(chǎn)生磚紅色沉淀(10. 在過氧化氫酶溶液中加入雙縮脲試劑，其結(jié)果應(yīng)是A. 產(chǎn)生氣泡 B. 溶液呈紫色 C. 溶液呈藍(lán)色 D.11. 雙縮脲試劑可以鑒定蛋白質(zhì)是因?yàn)锳. 蛋白質(zhì)都有肽鍵B.蛋白質(zhì)都有氨基酸C. 蛋白質(zhì)都有羧基D.蛋白質(zhì)都有氨基12. ( 多選) 下列物質(zhì)用斐林試劑檢測(cè)時(shí)可能出現(xiàn)磚紅色沉淀的是A. 葡萄糖 B 果糖

27、 C 麥芽糖 D 淀粉13. ( 多選) 下列各組中前項(xiàng)為所鑒定的物質(zhì)， 中項(xiàng)為所使用試劑， 后項(xiàng)為所產(chǎn)生的顏色。 正確的是 ( )A. 葡萄糖、斐林試劑、橘黃色B. 脂肪、蘇丹染液、磚紅色C. 蛋白質(zhì)、雙縮脲試劑、紫色D. 淀粉、碘液、藍(lán)色二、非選擇題14做“生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定”實(shí)驗(yàn)時(shí)，需根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選 擇不同的實(shí)驗(yàn)材料。請(qǐng)根據(jù)下表所列各種材料回答問題：各種可供實(shí)驗(yàn)的材料梨黃桃胡蘿卜黃豆種子花生種子小麥種子(1) 其中適合于鑒定糖的是 ，理由是(2) 小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪，這是因?yàn)?。但小麥種子中糖類化合物 含量很高，卻 不適合用來鑒定 ，這是因?yàn)?

28、15在做“可溶性還原糖的鑒定”實(shí)驗(yàn)時(shí) :(1) 所用斐林試劑甲液的質(zhì)量濃度為 g mL，乙液的質(zhì)量濃度為 g/mL，如何用這兩種溶液配制斐林試劑 ( 簡(jiǎn)要步(2) 斐林試劑甲液與乙液混合后產(chǎn)生 色沉淀，它與葡萄糖在加熱條件下發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生 色沉淀。(3) 請(qǐng)解釋為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，不能放置太久(4) 做此實(shí)驗(yàn)時(shí)，試管直接用酒精燈加熱易破，其原因是 ，若要避免此現(xiàn)象產(chǎn)生應(yīng)改用 。16用蘋果和黃豆做實(shí)驗(yàn)材料時(shí)， 都需將其研磨碎， 在研磨時(shí)加入少量石英砂的作用是 ；在研磨后二者都需要對(duì)研磨液進(jìn)行過濾，過濾的目的是除去 ，在過濾中為什么只用一層紗布，不用濾 紙? 。17(設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，論證結(jié)論)

29、請(qǐng)根據(jù)下列材料和實(shí)驗(yàn)原理，設(shè)計(jì)一個(gè)證明淀粉酶是蛋白7 / 11質(zhì)的實(shí)驗(yàn)。(1) 實(shí)驗(yàn)器材：雞蛋、人的唾液、清水、 0.1g/mLNaOH溶液、 0.01g/mLCuSO4 溶液、小 燒杯、玻璃棒、試管和滴瓶。(2) 實(shí)驗(yàn)原理： 雞蛋的蛋清主要成分是蛋白質(zhì)， 在堿性條件下， 蛋白質(zhì)與 CuSO4反應(yīng)產(chǎn) 生紫色物質(zhì)， 即雙縮脲反應(yīng)。 如通過實(shí)驗(yàn)再證明淀粉酶能發(fā)生雙縮脲反應(yīng)， 即可證明淀粉酶 是蛋白質(zhì)。(3) 實(shí)驗(yàn)步驟： 第一步：制備蛋清液。取雞蛋一個(gè)，打破蛋殼(不破壞蛋黃) ，取少許蛋清注入小燒杯 中，加入 30mL清水，用玻璃棒攪拌均勻備用。第二步：第三步：(4) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：(5) 結(jié)果分析：8

30、 / 11還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定 一、實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵及注意事項(xiàng)1.實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵在于實(shí)驗(yàn)材料的選擇。(1) 可溶性還原糖的鑒定實(shí)驗(yàn)中， 最理想的實(shí)驗(yàn)材料是含糖量較高的生物組織(或器官 )，而且組織的顏色較淺，或近于白色的。經(jīng)試驗(yàn)比較，顏色反應(yīng)的明顯程度依次為蘋果、梨、白色 甘藍(lán)葉、白蘿卜。(2)脂肪的鑒定實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)材料最好選用富含脂肪的種子，且徒手切片要成功。(3)蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)，最好選用富含蛋白質(zhì)的生物組織，植物材料常用的是大豆，動(dòng)物材 料常用的是雞蛋。2.注意事項(xiàng)：(1) 斐林試劑很不穩(wěn)定，故應(yīng)將組成斐林試劑的甲液 的 NaOH 溶液 和乙液 (0.05g/mL 的 CuSO溶液)

31、分別配制、 儲(chǔ)存，使用時(shí)，再臨時(shí)配制， 將 4 5滴乙液滴入 2mL 甲液中，配完后立即使用。(2)雙縮脲試劑的使用，應(yīng)先加試劑 A(0.1g/mL 的 NaOH 溶液 )，造成堿性的反應(yīng)環(huán)境，再加 試劑 B(0.01g/mL 的 CuSO溶液 ) 。(3) 在鑒定可溶性糖的實(shí)驗(yàn)中，對(duì)試管中的溶液進(jìn)行加熱時(shí)，試管底部不要觸及燒杯底部， 另外，試管口不要朝向?qū)嶒?yàn)者，以免沸騰的溶液沖出試管，造成燙傷。(4) 在蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中，若用蛋白質(zhì)作實(shí)驗(yàn)材料，必須稀釋，以免實(shí)驗(yàn)后粘住試管，不 易洗刷。(5) 在鑒定脂肪的實(shí)驗(yàn)中，若用花生種子作實(shí)驗(yàn)材料，必須提前浸泡34 小時(shí)，浸泡時(shí)間短了，不容易切片，浸泡時(shí)間過長(zhǎng)，則組織太軟，切下的薄片不易成形，染色時(shí)間不宜過長(zhǎng)。二、實(shí)驗(yàn)檢測(cè)(一)選擇題1.可用于鑒定生物組織中可溶性還原糖的試劑是( )A. 斐林試劑