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文檔簡介
1、、目的與要求1、學習并掌握臨時裝片的制作方法和步驟。2、學習徒手切片技術。3、了解細胞基本結構和厚角組織的特點。二、材料和用品1、自備材料:解剖器(鑷子 、解剖針、單面刀片或雙面刀片) ;洋蔥鱗莖、青紅椒、 芹菜葉柄、女貞葉片或其它植物的葉片、胡蘿卜塊等。2、其它材料和用品:顯微鏡、蓋玻片、載玻片、紗布、蒸餾水、吸水紙、10%甘油水溶液、 50%甘油水溶液、純甘油、碘碘化鉀稀溶液、培養(yǎng)皿、吸管。三、實驗內容1、臨時裝片的制作方法2、徒手切片方法四、實驗方法 要觀察、研究植物細胞、組織和器官的微細結構,以及一些很微小的藻、菌植物等,這 些用肉眼是無法看到的,必須借助于顯微鏡來觀察,要用顯微鏡觀察
2、,首先必須制成各 種制片,放在顯微鏡下才能觀察。制片的方法很多,這里著重介紹臨時裝片法和徒手切 片的方法技術。1、臨時裝片的制作方法 臨時裝片法是用少量的新鮮植物材料, 如單個細胞、薄的表皮或切成的薄片以及其它小 的或扁平的材料(如絲狀或葉狀的藻類、菌類、蕨類的原葉體和孢子囊、纖細的苔蘚植 物等等),把這些材料放在載玻片的水滴中,再蓋上蓋玻片做成玻片標本的方法。這種 方法制成的標本, 可以保持材料的生活狀態(tài)和天然的色彩。此法一般多做為臨時觀察使 用,也可根據需要選擇適宜的染料染色,制成永久制片或用某些化學試劑作組織化學反 應。臨時裝片的制作方法和步驟如下:(1)清潔玻片:將蓋玻片和載玻片用清水
3、洗凈,再用紗布擦干,擦玻片時用左手食指 和拇指夾住玻片的兩邊,右手食指和拇指包住紗布,同時擦到的玻片的兩面,用力要均 勻。 注意:由于蓋玻片很薄,所以擦蓋玻片時要特別小心,用力要輕,右手食指和拇指要輕 輕捻動,以免把蓋玻片捏破。(2)放置材料:先將載玻片平放在桌面上,于載玻片中央滴一滴蒸餾水或稀甘油,然 后用鑷子鑷取或吸管吸取少量要觀察的材料(如洋蔥鱗葉表皮或水綿) ,放在載玻 片中央的水滴或甘油中, 再用鑷子和解剖針將材料展平或分散開, 勿使材料折疊或干燥。(3)加蓋玻片及其它處理:為了避免產生氣泡,蓋蓋玻片時,應該以大拇指和食指拿著蓋玻片的兩個角或用鑷子夾住其一端,使蓋玻片的一邊先與載玻片
4、上的水滴邊緣接 觸 ,而后徐徐放下另一邊,當蓋玻片被夾持的一邊將貼近載玻片時,則可放手或抽出 鑷子,使其自然輕輕復蓋,這樣可以使蓋玻片下的空氣擠出,免生氣泡。注意載玻片中 央的液滴要適中, 既要使其充滿蓋玻片, 又要不會使蓋玻片浮動或使液滴從蓋片下外溢, 假如水不夠, 可用吸管小心地從蓋玻片的邊上再滴入一小滴水, 使它和蓋玻片下面的水 相接觸;如果水太多,溢出蓋玻片,則可用吸水紙吸去,蓋玻片的上面,一定不能被水 浸濕,如果發(fā)生這種情況,應該小心地取下蓋 玻片,擦干以后,再按上述方法重新蓋 上。這樣做好的裝片,便可在顯微鏡下進行觀察。根據需要,臨時水裝片做好后還可以 進行簡單的染色(例如用碘碘化
5、鉀或番紅等來染色) ,其方法是直接在蓋玻片的一側 加一滴染液, 用吸水紙條在蓋玻片的另一側吸水, 引入染液, 以使蓋片下的材料染上色。1 / 11注意:臨時裝片根據需要可以水封片或以甘油封片,凡用以臨時觀察,不欲久留的裝片 均可用水封片, 制成水裝片; 需要提前半天或一天就備出的裝片或者觀察后須保留一定 時間的裝片, 為防止水分蒸發(fā), 出現材料收縮現象, 則適宜用甘油封片, 制成甘油封片, 用甘油封片時, 保留時間短者, 可用 10% 甘油水溶液, 保留時間長者則須從 10%甘油中 再轉入 50%甘油水溶液中或在此液中浸一小時后再轉入純甘油中封片。用甘油做臨時裝片的優(yōu)點是不僅封片保留時間長,且
6、有加強材料透明的作用。本實驗以洋蔥(或大蔥)鱗莖內表皮為材料,通過撕皮法做臨時裝片,用碘碘化鉀做 染色劑,在觀察做片效果時同時了解細胞的基本結構,如細胞壁、細胞質、液泡、細胞 核等。2、徒手切片法徒手切片法簡稱手切片法, 即手拿刀片將材料切成能在顯微鏡下觀察其內部結構的薄片 的方法。 是植物形態(tài)解剖學實驗及研究中最簡單和最常用的方法,也是最重要的基本技 能之一。徒手切片的材料一般是新鮮的,有時也可用預先固定好的。這種切片方法雖然 有其缺點,如:不易做到將整個切面切得薄而完整,往往切出的片子厚薄不一;過軟過 硬的材料比較難切。但其優(yōu)點很多,如:工具簡單,只要有一把鋒利的剃刀或雙面刀片 就夠了;方
7、法簡便, 容易學會; 節(jié)省時間,只要有現成材料, 可以立刻用刀片切成薄片, 當即觀察,即便要染色,時間也不長;還有一個獨特的優(yōu)點就是可以看到組織細胞內的 自然結構和天然顏色。 徒手切片的方法見圖 22。一般材料的徒手切片方法(1)將材料切成長約 23 厘米的小段,削平切面。(2)左手大拇指和食指的第一關節(jié)指彎夾住材料,使之固定不動搖。為防止刀傷,拇 指應略低于食指,并使材料上端超出手指2 3 毫米,不可高出過多,否則切片時材料容易動搖,也不容易切薄。(3)右手大拇指和食指捏住刀片的右下角 (刀片要非常鋒利, 雙面刀片必須是新用的) 刀口向內,并與材料切面平行,切片前先將材料和刀口上蘸些水,使之
8、切時滑潤。(4)切的方法,以刀口自外側左前方向內側右后方拉切,這樣可以邊切邊看清切片的 進展情況, 同時切起來也比較順手。 切片時只用臂力而不要用腕力及握刀指關節(jié)的力量, 左手保持不動, 不要兩手同時拉動, 兩手不要緊靠身體或壓在桌子上, 并且動作要敏捷, 材料要一次切下,切忌中途停頓或推前拖后作“拉鋸”式切割。關鍵是要切得薄而平。 如此連續(xù)切片,切下數片后,用濕毛筆將切片輕輕移入培養(yǎng)皿的清水中備用。(5)在切片過程中刀口和材料要不斷蘸水,以保持刀口鋒利和避免材料失水變形。所 切的材料和刀片一定要保持水平方向,不要切斜,如果切斜,即使很薄,但由于細胞切 面偏斜,同樣影響觀察。(6)切下足夠多的
9、切片后,挑選薄而平的切片做成臨時裝片供鏡檢,必要時也可以制 成永久裝片。挑選切片時,不一定要材料切得很完整,只要切得很薄就行,有時只要有 一小部分就可以看清其結構了,如玉米莖橫切片,只要有四分之一或者更少的小片,就 可以看出內外維管束的大小、 多少及每個維管束的構造。 因此切下的切片不是每一片都 適用,也不是只有全面切得薄的才能用,要根據需要進行選擇,一次可多選幾片置于載 玻片上,制成臨時裝片,通過鏡檢再進一步選擇理想的材料用以觀察。柔軟和堅硬材料的徒手切片方法 過于柔軟的材料,如植物的葉片或其他薄而微小的材料,難以直接執(zhí)握手切,則須夾入 堅固而易切的夾持物中切。 常用的夾持物有胡蘿卜根(用胡
10、蘿卜時可將中間硬心即木質 部切去用其余部分) 、土豆塊莖、接骨木的髓部及通草髓等。但須要注意的是通草髓遇 水既變軟,可將其保存在酒精中備用。切前先將夾持物切成長方小體,上端與縱軸垂直2 / 11 面削平,若被切材料屬葉狀體一類的薄片,將夾持物從上至下縱切一縫,材料夾于其中 即可,如不是葉狀體,即將材料夾于其中,或根據材料不同在縫里挖一個和材料形狀相 似、大小相同的凹陷,把材料夾在凹陷里。然后用手握住夾持物,采用上述方法將夾持 物和其中的材料一齊切成薄片,除去夾持物的薄片,便得到材料的薄片。堅硬的材料要經軟化處理后再切。軟化的方法:一種是對于比較硬的材料,先把材料切 成小塊,后進行煮沸,經 3
11、4 小時煮沸后,再浸入軟化劑( 50%酒精甘油 11) 中數天至更長些時間,而后再切。另一種,對于已干或含有礦物質,比較更硬的材料, 要先在 15%氫氟酸的水溶液中浸漬數周,充分浸洗后,再置入甘油里軟化后再切。 本實驗主要以青紅椒、 芹菜葉柄為材料做徒手切片練習。 并通過青紅椒切片結果裝鏡觀 察來了解細胞基本結構中葉綠體和有色體; (提示:青椒切片細胞內綠色的小顆粒為葉 綠體,紅椒切片細胞內紅色的小顆粒為有色體。 )通過芹菜葉柄切片結果裝鏡觀察來了 解厚角組織的結構特點。 (提示:芹菜切片在顯微鏡下觀察,在棱角處稍靠內方有一團 具有珠光色彩的組織即為厚角組織。在高倍鏡下觀察,可見其細胞壁厚為角
12、隅處,其細 胞壁的性質是初生壁性質,主要成分為纖維素,有強烈的吸水性,故顯微鏡下有珠光色 彩。)五、綜合分析1、臨時裝片和徒手切片的特點和適用范圍各是什么?2、做臨時裝片蓋蓋玻片時應注意什么?3、徒手切片法切取柔軟和堅硬材料時應怎樣進行?六、實驗報告 自選材料制做幾種不同材料的臨時裝片和徒手切片,寫出你所做裝片的步驟和要點。學案六 實驗一可溶性還原糖脂肪蛋白質的鑒定一、解讀兩綱1. 識記鑒定實驗所用的材料,懂得選材的要求。2. 掌握實驗原理、步驟,理解實驗目的、方法。3. 學會制備生物組織樣液, 正確選用鑒定試劑, 并能按規(guī)范的要求操作, 獨立完成鑒定 工作。4. 明確觀察對象, 正確說出鑒定
13、過程中樣液的顏色變化, 并能用準確的語言解釋實驗現 象,作出實驗結論。5. 能熟練制作徒手切片,臨時裝片和使用低倍顯微鏡,了解高倍顯微鏡的使用方法。6. 具備驗證相關生物學事實的能力, 并能對實驗現象和結果進行解釋、 分析和處理; 能 對一些生物學問題進行初步的探究性研究。二、高考熱線1. 題型以選擇題為主, 也可能以簡答題出現, 重點是以對比的方式考查相關實驗的異同 點。2. 以教材實驗為依據, 設置實驗設計題是今后考查的重點, 如“設計實驗證明淀粉酶是 蛋白質”,就是依據教材中的實驗 3 的原理和步驟。三、學法指點3 / 111. 運用對比的方法認識三種物質的鑒定原理、過程及注意事項。2.
14、 對比三種物質鑒定過程中的相同點和不同點,重點掌握試劑使用上的區(qū)別。3. 根據所學的原理鑒定類似物質,設計相應的實驗程序。四、教材梳理(一)實驗原理生物組織中含有可溶性還原糖(如 、 、)、脂肪、蛋白質等化學成分,可分別與某些化學試劑作用產生特定的 。(1)可溶性還原糖 + 試劑磚紅色沉淀可溶性還原糖 +班氏糖定性試劑 (2)脂肪 +染液染成橘黃色脂肪 +蘇丹染液染成 (3)蛋白質 + 試劑溶液呈紫色( 二 ) 實驗目的1. 初步掌握鑒定可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的基本方法。( 三 ) 實驗材料(四) 方法步驟1. 可溶性還原糖的鑒定(1)制備組織樣液:蘋果切塊、研磨、 。(2)鑒定組織樣液:
15、 1 支試管 +2mL+2mL,振蕩試管,(溶液色?),2min 左右,觀察溶液顏色變化。 ( 色棕色 色)。2. 脂肪的鑒定(1)切片制作:用花生子葉作徒手切片。(2)染色: 1塊載玻片 +切片+ 3 滴染液, 3min 后吸去染液 + 2 滴50%溶液去浮色,吸去后 + 2 滴 ,蓋蓋玻片。(3)鏡檢鑒定:先用低倍鏡觀察, 找到子葉最薄處, 再用高倍鏡觀察。 (圓形的脂肪顆粒 為色)。3. 蛋白質的鑒定(1)制備樣液:大豆切片、 、 。(2)鑒定:1 支試管 +2mL黃豆組織樣液 +2mL,振蕩試管(溶液 色),+4 滴,試管,觀察溶液顏色變化。 (色 色色)。(五)結論與討論1. 結論:
16、從斐林試劑與蘋果樣液作用、 蘇丹 III 染液與花生種子作用、 雙縮脲試劑與大 豆樣液作用的顏色變化可以得出:2. 討論鑒定依據。 因為某些化學試劑與生物組織中的有關 發(fā)生一定的化學反應,產生有固定顏色的新化合物。故可根據待檢物與某些化學試劑反應的 , 如橘黃色、 色、 色等,鑒定生物組織中含有 、可溶還原糖和自我校對 原理 :葡萄糖 果糖 麥芽糖 顏色反應 斐林 磚紅色沉淀蘇丹 III紅色 雙縮脲 步驟 :過濾 蘋果組織樣液 剛配制的斐林試劑 淡藍水浴加熱淡藍 磚紅 蘇丹 III 酒精 蒸餾水 橘黃 過濾 雙縮脲試劑 A 乳白 雙縮脲試劑 B 乳白 紫色 結論與討論 :蘋果、花生種子和大豆中
17、分別含有可溶還原糖、 脂肪和蛋白質 化合物 固有顏色 磚紅 紫色 脂肪 蛋白質4 / 11五、疑難精析1生物組織中的還原糖是指分子結構中含有還原性基團(如游離醛基或酮基 ) 的糖,如葡萄糖、 麥芽糖、 果糖,淀粉、蔗糖不具有還原性, 斐林試劑只能檢驗可溶性還原糖的存在, 而不能鑒定可溶性非還原糖或不溶性糖。2可溶性還原糖鑒定實驗的選材原則。選用可溶性還原糖含量較高的生物組織,而且 組織的顏色較淺,或近于白色。常用的植物組織是:蘋果、梨、白色甘藍葉、白蘿卜。雙子 葉植物光合作用的主要產物為淀粉,其葉不理想。有些單子葉植物,如韭菜、鳶尾等,其葉 內含有大量的可溶性單糖, 但由于葉片中葉綠素顏色較深
18、, 影響鑒定時實驗現象的觀察, 也 不宜作實驗材料。3可溶性還原糖鑒定實驗的關鍵性的步驟在于斐林試劑現用現配及用量。很不穩(wěn)定, 故應將組成斐林試劑的甲液 (0.1g mL的 NaOH溶液)和乙液 (0.05g mL的 CuS04溶液 )分別 配制、儲存;使用時,再臨時配制,將45 滴乙液滴入 2mL甲液中,配完混合均勻后 得到淡藍色的 Cu(OH)2沉淀的懸濁液 立即使用。如果過早混合會產生 Cu(OH)2沉淀,加入到組 織樣液中并加熱時會產生黑色 CuO沉淀。 而臨時混合所得斐林試劑立即用于實驗,即可使新制的 Cu(OH)2 作氧化劑與可溶性還原糖發(fā)生氧化 - 還原反應,生成磚紅色的 Cu2
19、O沉淀。溶液 的變化過程:淡藍色棕色磚紅色沉淀。4在可溶性還原糖的鑒定中,在對盛有組織樣液與斐林試劑混合物的試管直接用酒精 燈加熱易破, 因為試管受熱不均勻, 若要避免此現象產生應改用水浴加熱。 此時試管底部不 要觸及燒杯底部,試管口不要朝向實驗者,以免溶液沸騰時沖出試管造成燙傷。5雙縮脲試劑并不是雙縮脲分子。所謂雙縮脲是由兩分子尿素經脫氨縮合而成的化合 物。該化合物在堿性溶液中能與 CuSO4反應產生紫色絡合物, 此反應稱雙縮脲反應。 蛋白質 分子中含有許多與雙縮脲結構相似的肽鍵, 因此也能起雙縮脲反應。 特別要提醒學生的是實 驗桌上兩瓶不同濃度的 CuS04溶液,避免拿錯。6蛋白質鑒定實驗
20、中,最好選用富含蛋白質的生物組織,植物材料常用的是大豆,動 物材料常用的是雞蛋。 其關鍵性步驟在于先加雙縮脲試劑 A (0.1g/mLNaOH 溶液)再加雙縮脲 試劑 B(0.01g/mLCuSO4 溶液 ) 。如果用雞蛋白稀釋液,則濃度不宜過大,以免實驗后粘住試 管壁,不易洗凈。7. 脂肪的鑒定實驗中,實驗材料最好選用富含脂肪的種子,其關鍵性步驟在于子葉要 削成理想薄片。 為了作好徒手切片, 種子浸泡的時間不宜過長。 也可改成刮取種子子葉泥制 作臨時裝片,易做,效果又好。8. 填表比較實驗 1 和 3:比較項目試劑及成分原理溶液濃度方法加熱與 否結果可溶還原 糖的鑒定斐林試劑NaOH和CuS
21、O4新配制的Cu(OH)2 溶液NaOH 濃 度 為 0.1g/mL , CuS04 的濃 度 為 0.05g mL先把 NaOH溶液 和 CuSO4溶液混 合,而后立即使 用。水浴加 熱磚紅 色沉 淀蛋白質的 鑒定雙縮脲試劑NaOH和CuSO4在堿性環(huán) 境下的Cu2+NaOH的濃度為 0.1g mL, CuS04的濃度 為 O.01g mL先加入 Na0H溶 液,然后再加 CuS04溶液。( 不能過量 )不需要溶液 呈紫 色9. 本實驗為驗證性實驗, 也用注意對照。 如在鑒定可溶性還原糖和蛋白質時, 鑒定之前 需留一部分樣液,以便與鑒定后樣液顏色變化作對比。5 / 11例1 用下列實驗材料做
22、特定實驗,從理論上講能否成功?說明依據的道理。(1)用韭菜葉片做可溶性還原糖的鑒定實驗;(2)用蓖麻種子做脂肪鑒定實驗;(3)用卵白做蛋白質鑒定實驗。 解析 此題是要求根據課本實驗原理進行拓展和應用,這也是近幾年高考的一個趨勢。韭菜在進行光合作用時并不能將光合作用的產物葡萄糖轉變成淀粉, 因此葉內含有大量的可 溶性還原糖,但是, 由于葉片中葉綠素含量較多, 綠色較深, 對于鑒定時的顏色反應起著掩 蓋作用, 導致實驗現象不明顯, 因此不宜用這些單子葉植物作此實驗材料; 后兩個實驗材料 從理論上說是可行的。答案: (1) 用韭菜葉片做還原糖實驗不能成功, 因為葉片內雖然含有大量可溶性還原糖, 但葉
23、片中葉綠素含量較多,顏色較深,對鑒定時的顏色反應起著遮蓋作用; (2) 若用蓖麻種 子做脂肪鑒定實驗, 從理論上說可以成功,因為該種子含較多的脂肪, 種子也比較大, 便于 進行徒手切片; (3) 由于卵白中含有大量的蛋白質,從理論上講做蛋白質鑒定實驗是會成功 的。六、趁熱打鐵(一)選擇題1將面團包在紗布中在清水中搓洗,鑒定黏留在紗布上的黏稠物質和洗出的白漿用的 試劑分別是( )A. 碘液、蘇丹溶液 B 雙縮脲試劑、碘液C. 亞甲基藍溶液、蘇丹 D 碘液、斐林試劑 2蛋白質的鑒定時,事先留出一些黃豆組織樣液的目的是( )A. 與反應后混合液的顏色做對比 B 失敗后重做一遍C. 鑒定可溶性還原糖用
24、 D. 留下次實驗用 3用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時,溶液的顏色變化過程為( )A. 淺藍色棕色磚紅色B無色淺藍色棕色C. 磚紅色淺藍色棕色D. 棕色綠色無色4在鑒定可溶性糖的實驗中,對試管中的溶液進行加熱時,操作不正確的是( )A. 將這支試管放進盛開水的大燒杯中 B 試管底部不要觸及燒杯底部C. 試管口不要朝向實驗者 D. 試管底部緊貼燒杯底部 5現有如下實驗材料:西瓜汁菜籽 豆?jié){草莓果實 花生仁 雞蛋清,6. 青蘋果汁遇碘液顯蘭色,熟蘋果汁能與斐林試劑作用產生磚紅色沉淀,這說明 ( )它們與斐林試劑作用呈磚紅色、驗材料分別為 ( )與蘇丹試劑作用呈橘黃色、 與雙縮脲試劑作用呈紫色的實A.
25、 、B 、C. 、D 、A. 青蘋果汁含有淀粉,不含有糖類 B 熟蘋果汁含有糖類,不含有淀粉C 蘋果成熟時,淀粉水解成單糖 D. 蘋果成熟時,單糖合成淀粉7. 下列關于生物組織中三大有機物的鑒定操作步驟,正確的是 ( )A. 用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑,可直接用于蛋白質的鑒定B 脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色脂肪滴C. 鑒定可溶性還原糖時,要加入斐林試劑甲液搖均后再加入乙液D. 用于鑒定蛋白質的雙縮脲試劑 A液與 B 液要混合均勻后, 再加入含樣品的試管中, 且必須現配現用6 / 11B 標本切得厚薄不均勻D 細準焦螺旋未調好制備生物組織樣液時加入少許石英砂,其目的是 防止糖被
26、破壞8某同學在顯微鏡下觀察被蘇丹染液染色后的花生種子子葉切片,當轉動細準焦螺 旋調焦距時,有一部分細胞看得很清楚,另一部分細胞較模糊,這是由于 ()A. 反光鏡沒調好C. 顯微鏡物鏡損壞9可溶性還原糖的鑒定中,無作用A. 研磨充分 B. 防止糖被破壞 C 防止反應 D.(產生磚紅色沉淀(10. 在過氧化氫酶溶液中加入雙縮脲試劑,其結果應是A. 產生氣泡 B. 溶液呈紫色 C. 溶液呈藍色 D.11. 雙縮脲試劑可以鑒定蛋白質是因為A. 蛋白質都有肽鍵B.蛋白質都有氨基酸C. 蛋白質都有羧基D.蛋白質都有氨基12. ( 多選) 下列物質用斐林試劑檢測時可能出現磚紅色沉淀的是A. 葡萄糖 B 果糖
27、 C 麥芽糖 D 淀粉13. ( 多選) 下列各組中前項為所鑒定的物質, 中項為所使用試劑, 后項為所產生的顏色。 正確的是 ( )A. 葡萄糖、斐林試劑、橘黃色B. 脂肪、蘇丹染液、磚紅色C. 蛋白質、雙縮脲試劑、紫色D. 淀粉、碘液、藍色二、非選擇題14做“生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定”實驗時,需根據實驗需要選 擇不同的實驗材料。請根據下表所列各種材料回答問題:各種可供實驗的材料梨黃桃胡蘿卜黃豆種子花生種子小麥種子(1) 其中適合于鑒定糖的是 ,理由是(2) 小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是因為 。但小麥種子中糖類化合物 含量很高,卻 不適合用來鑒定 ,這是因為
28、15在做“可溶性還原糖的鑒定”實驗時 :(1) 所用斐林試劑甲液的質量濃度為 g mL,乙液的質量濃度為 g/mL,如何用這兩種溶液配制斐林試劑 ( 簡要步(2) 斐林試劑甲液與乙液混合后產生 色沉淀,它與葡萄糖在加熱條件下發(fā)生化學反應,產生 色沉淀。(3) 請解釋為什么斐林試劑要現配現用,不能放置太久(4) 做此實驗時,試管直接用酒精燈加熱易破,其原因是 ,若要避免此現象產生應改用 。16用蘋果和黃豆做實驗材料時, 都需將其研磨碎, 在研磨時加入少量石英砂的作用是 ;在研磨后二者都需要對研磨液進行過濾,過濾的目的是除去 ,在過濾中為什么只用一層紗布,不用濾 紙? 。17(設計實驗,論證結論)
29、請根據下列材料和實驗原理,設計一個證明淀粉酶是蛋白7 / 11質的實驗。(1) 實驗器材:雞蛋、人的唾液、清水、 0.1g/mLNaOH溶液、 0.01g/mLCuSO4 溶液、小 燒杯、玻璃棒、試管和滴瓶。(2) 實驗原理: 雞蛋的蛋清主要成分是蛋白質, 在堿性條件下, 蛋白質與 CuSO4反應產 生紫色物質, 即雙縮脲反應。 如通過實驗再證明淀粉酶能發(fā)生雙縮脲反應, 即可證明淀粉酶 是蛋白質。(3) 實驗步驟: 第一步:制備蛋清液。取雞蛋一個,打破蛋殼(不破壞蛋黃) ,取少許蛋清注入小燒杯 中,加入 30mL清水,用玻璃棒攪拌均勻備用。第二步:第三步:(4) 實驗結果:(5) 結果分析:8
30、 / 11還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定 一、實驗成功的關鍵及注意事項1.實驗成功的關鍵在于實驗材料的選擇。(1) 可溶性還原糖的鑒定實驗中, 最理想的實驗材料是含糖量較高的生物組織(或器官 ),而且組織的顏色較淺,或近于白色的。經試驗比較,顏色反應的明顯程度依次為蘋果、梨、白色 甘藍葉、白蘿卜。(2)脂肪的鑒定實驗中,實驗材料最好選用富含脂肪的種子,且徒手切片要成功。(3)蛋白質的鑒定實驗,最好選用富含蛋白質的生物組織,植物材料常用的是大豆,動物材 料常用的是雞蛋。2.注意事項:(1) 斐林試劑很不穩(wěn)定,故應將組成斐林試劑的甲液 的 NaOH 溶液 和乙液 (0.05g/mL 的 CuSO溶液)
31、分別配制、 儲存,使用時,再臨時配制, 將 4 5滴乙液滴入 2mL 甲液中,配完后立即使用。(2)雙縮脲試劑的使用,應先加試劑 A(0.1g/mL 的 NaOH 溶液 ),造成堿性的反應環(huán)境,再加 試劑 B(0.01g/mL 的 CuSO溶液 ) 。(3) 在鑒定可溶性糖的實驗中,對試管中的溶液進行加熱時,試管底部不要觸及燒杯底部, 另外,試管口不要朝向實驗者,以免沸騰的溶液沖出試管,造成燙傷。(4) 在蛋白質的鑒定實驗中,若用蛋白質作實驗材料,必須稀釋,以免實驗后粘住試管,不 易洗刷。(5) 在鑒定脂肪的實驗中,若用花生種子作實驗材料,必須提前浸泡34 小時,浸泡時間短了,不容易切片,浸泡時間過長,則組織太軟,切下的薄片不易成形,染色時間不宜過長。二、實驗檢測(一)選擇題1.可用于鑒定生物組織中可溶性還原糖的試劑是( )A. 斐林試劑
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