任務(wù)十五測定食品加工和包裝中有害物質(zhì)含量

1、食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)1 任務(wù)十五 測定食品加工和包裝中有害物質(zhì) 含量 李京東 余奇飛 劉麗紅 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)2 v技能目標(biāo) 1會(huì)測定食品中三聚氰胺含量。 2會(huì)測定食品中蘇丹紅含量。 3會(huì)測定食品塑料、紙包裝及橡膠用品中滲出物含量。 v知識(shí)目標(biāo) 1明確食品中三聚氰胺的測定原理。 2明確食品蘇丹紅測定測定原理。 3明確食品包裝材料滲出物測定條件。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)3 項(xiàng)目一：測定食品中三聚氰胺 v一、案例 v二、選用國家標(biāo)準(zhǔn) GB/T22388-2008原料乳與乳制品中三聚氰胺檢測方法 高效液相色譜法。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)4 v三、測定方法 1樣品處理 v（1）液態(tài)奶、奶粉、酸奶等乳制品：精確

2、稱取樣品2.00g置于 50mL具塞塑料離心管，分別加15mL三氯乙酸溶液和5mL乙腈， 超聲提取10min，再振蕩提取10min后，大于4000r/min離心 10min，取上清液經(jīng)三氯乙酸溶液潤濕的濾紙過濾，用三氯乙酸 溶液定容至25mL，移取5mL濾液，加5mL水混勻用于待凈化液。 v（2）奶酪、奶油和巧克力等制品：精確稱取樣品2.00g置于研缽 中，加入試樣質(zhì)量46倍海砂研磨成粉狀，轉(zhuǎn)移至50mL具塞塑 料離心管中，同時(shí)用15mL三氯乙酸溶液數(shù)次清洗研缽，將清洗 液轉(zhuǎn)入離心管中，離心管中加入5mL乙腈，其余同上操作，制備 待凈化液。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)5 v2樣品凈化 將待凈化液轉(zhuǎn)移至

3、固相萃取柱中（固相萃取柱制備方法： 混合型陽離子交換固相萃取柱，基質(zhì)為苯磺酸化的聚苯 乙烯-二乙烯基苯高聚物，60mg，3mL，或相當(dāng)者。）使 用前依次用3mL 甲醇、5 mL水活化，抽至近干，用6mL 氨化甲醇溶液洗脫，流速不超過1mL/min，洗脫液于50 下用氮?dú)獯蹈桑瑲埩粑铮ㄏ喈?dāng)于0.4g樣品）用1mL流動(dòng)相 定容，渦旋混合1min，過0.2m微孔濾膜后，得凈化可測 定樣品。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)6 v3測定 （1）高效液相色譜參考條件 v色譜柱： C8柱，250 mm4.6 mm（i.d.），5m，或相當(dāng)者 C18柱，250 mm4.6 mm（i.d.），5m，或相當(dāng)者。 v流動(dòng)相：

4、C8柱，離子對(duì)試劑緩沖液-乙腈（85+15，體積比），混勻。 C18柱，離子對(duì)試劑緩沖液-乙腈（90+10，體積比），混勻。 v流速：1.0mL/min。 v柱溫：40。 v波長：240nm。 v進(jìn)樣量：20L。 （2）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 v用流動(dòng)相將三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液稀釋得濃度為0.8、2、20、40、 80g/mL的標(biāo)準(zhǔn)工作液，由低到高濃度進(jìn)樣檢測，做標(biāo)準(zhǔn)曲線。 （3）定量測定：將待測液按要求進(jìn)樣檢測。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)7 v4結(jié)果計(jì)算 式中 X試樣中三聚氰胺的含量，mg/kg； A樣液中三聚氰胺的峰面積； c標(biāo)準(zhǔn)溶液中三聚氰胺的濃度，g/mL； V樣液最終定容體積，mL； As標(biāo)準(zhǔn)溶液中三

5、聚氰胺的峰面積； m試樣的質(zhì)量，g； f稀釋倍數(shù)。 v5試劑 5%氨化甲醇溶液、乙腈、離子對(duì)試劑緩沖液、1%三氯乙酸、甲醇水溶液、 三聚氰胺標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、海砂、氮?dú)狻?v6儀器 高效液相色譜（HPLC）儀、分析天平、離心機(jī)、超聲波水浴、固相萃取裝 置、氮?dú)獯蹈蓛x、渦旋混合器、具塞塑料離心管、研缽。 1000 1000 mA VcA X S 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)8 v四、相關(guān)知識(shí) （一）食品中三聚氰胺測定高效液相色譜法原理 v試樣用三氯乙酸溶液-乙腈提取，經(jīng)陽離子交換固相萃取柱凈化后， 用高效液相色譜測定，外標(biāo)法定量。 v本法摘自GB/T22388-2008，適用于原料乳、乳制品以及含乳制 品中三聚

6、氰胺的定量測定。 （二）注意事項(xiàng) v1本試驗(yàn)中所用試劑除甲醇、乙腈、辛烷磺酸鈉為色譜純外， 其余均為分析純。 v2本試驗(yàn)用水為GB/T6682規(guī)定的一級(jí)水。 v3待測樣液中三聚氰胺的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)，超 過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進(jìn)樣分析。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)9 v五、測定食品中三聚氰胺的方法 乳及乳制品中三聚氰胺的國家標(biāo)準(zhǔn)檢測法高效液相色譜 法、液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法（LC-MS/MS），氣相色譜-質(zhì) 譜聯(lián)用法（GC-MS和GC-MS/MS）等，均適合于乳及乳 制品中三聚氰胺的定性確定。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)10 項(xiàng)目二：測定食品中蘇丹紅 v一、案例 v二、選用國家標(biāo)準(zhǔn) GB/T 19

7、6812005食品中蘇丹紅染料的檢測方法高 效液相色譜法。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)11 v三、測定方法 1樣品處理 v（1）粉狀樣品（如辣椒粉等）：準(zhǔn)確稱取樣品1.0005.000g于三角瓶 中，加入1030mL正己烷，超聲過濾5min，再用10mL正己烷洗滌殘?jiān)?數(shù)次，至洗出液無色，合并正己烷液，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至5mL以下， 慢慢加入氧化鋁層析柱中（氧化鋁層析柱制備方法，在層析柱管底部塞 入一薄層脫脂棉，干法裝入處理過的氧化鋁3cm高，輕敲實(shí)后加一薄層 脫脂棉，用10mL正己烷預(yù)淋洗，洗凈柱中雜質(zhì)后，備用），為保證層析 效果，在柱中保持正己烷液面為2mm左右時(shí)上樣，在層析過程保持柱的 濕潤，用

8、正己烷少量多次淋洗濃縮瓶，一并注入層析柱；控制氧化鋁表 層吸附的色素帶寬宜小于0.5cm，待樣液完全流出后，視樣品中含油類 雜質(zhì)的多少用1030mL正己烷洗柱，直至流出液無色，棄去全部正己 烷淋洗液，用含5%丙酮的正己烷液60mL洗脫，收集、濃縮后，用丙酮 轉(zhuǎn)移并定容至5mL，經(jīng)0.45m有機(jī)濾膜過濾后待測。 v（2）油狀樣品（如紅辣椒油、火鍋料、奶油等）：。 v（3）含水量較多樣品（如辣椒醬、番茄沙司等）：。 v（4）肉制品（如香腸等）：。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)12 v2樣品測定 （1）色譜條件 v色譜柱：Zorbax SB-C18 3.5m, 4.6mm150mm（或相當(dāng)型號(hào)色譜 柱）。 v

9、 流動(dòng)相：溶劑A（0.1%甲酸的水溶液:乙腈=85:15）；溶劑B（0.1%甲 酸的乙腈溶液:丙酮=80:20）。 v 流速：1mL/min。 v柱溫：30。 v檢測波長：蘇丹紅478nm ；蘇丹紅、蘇丹紅、蘇丹紅520nm， 于蘇丹紅出峰后切換。 v進(jìn)樣量：10L。 （3）標(biāo)準(zhǔn)曲線制作 （4）樣品測定，依色譜要求條件，進(jìn)樣操作，測得結(jié)果，代入公式 計(jì)算。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)13 v3結(jié)果計(jì)算 式中 R樣品中蘇丹紅含量，mg/kg； C由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出的樣液中蘇丹紅的濃度，g/mL； V樣液定容體積，mL； m樣品質(zhì)量，g。 v4試劑 乙腈、丙酮、甲酸、乙醚、正己烷、無水硫酸鈉、層析柱管（1cm

10、（內(nèi)徑） 5cm(高)的注射器管）、 層析用氧化鋁（中性100200目）、5%丙酮的 正己烷液、標(biāo)準(zhǔn)貯備液 v5儀器 高效液相色譜儀、分析天平、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、均質(zhì)機(jī)、離心機(jī)、0.45m 有機(jī) 濾膜。 m V CR 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)14 四、相關(guān)知識(shí) v（一）食品中蘇丹紅測定高效液相色譜法原理 v樣品經(jīng)溶劑提取、固相萃取凈化后，用反相高效液相色譜-紫外可 見光檢測器進(jìn)行色譜分析，采用外標(biāo)法定量。 v本法摘自GB/T19681-2005，適用于食品中蘇丹紅染料的檢測。 （二）注意事項(xiàng) v不同廠家和不同批號(hào)氧化鋁的活度有差異。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)15 項(xiàng)目三：測定食品包裝材料及容器有害物質(zhì) v一、案

11、例 v二、選用國家標(biāo)準(zhǔn) GB/T5009.60-2003食品包裝用聚乙烯、聚苯乙烯、聚丙 烯成型品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)16 v三、測定方法 1取樣方法 v每批按0.1%取試樣，小批時(shí)取樣不少于10只（以500mL容積/只計(jì)，少 于500mL/只時(shí)，試樣加倍取樣），樣品一半供檢測用，一半供仲裁用。 2浸泡條件 v（1）水：60，浸泡2h。 v（2）4%乙酸：60，浸泡2h。 v（3）65%乙醇：室溫，浸泡2h。 v（4）正己烷：室溫，浸泡2h。 v要求浸泡液按接觸面積每平方厘米加2mL，在容器中則加入浸泡液至 2/34/5容積為準(zhǔn)。浸泡溶劑的選擇以食品容器、包裝材料接觸的食品

12、 種類而定，中性食品時(shí)選用水作溶劑；酸性食品時(shí)選用4%乙酸作溶劑； 堿性食品時(shí)用碳酸氫鈉作溶劑；油脂食品時(shí)選用正己烷作溶劑；含酒精 食品用乙醇作溶劑 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)17 v3有機(jī)物含量測定高錳酸鉀消耗量 試樣浸泡液用高錳酸鉀滴定，其消耗量表示可溶出有機(jī)物的含量。 （1）測定方法 取100mL水，放入250mL錐形瓶中，加入5mL硫酸(1+2)、5mL高錳 酸鉀溶液，煮沸5min倒去，用水沖洗備用。 準(zhǔn)確吸取100mL水浸泡液于上述處理過的250mL錐形瓶中，加硫酸 5mL硫酸（1+2）及10.0mL0.01mol/L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液，再加2 粒玻璃珠，準(zhǔn)確煮沸5min后，趁熱加入10.

13、0mL0.01mol/L草酸標(biāo)準(zhǔn)滴 定溶液，再以高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)液滴定至微紅色，記錄高錳酸鉀溶液滴 定量。同時(shí)做空白試驗(yàn)。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)18 v（2）結(jié)果計(jì)算 式中 X試樣中高錳酸鉀消耗量，mg/L； V1試樣浸泡液滴定時(shí)消耗高錳酸鉀溶液的體積，mL； V2試樣空白滴定時(shí)消耗高錳酸鉀溶液的體積，mL； c高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的實(shí)際濃度，mol/L； 31.6與1.0mL的高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液相當(dāng)?shù)母咤i酸鉀質(zhì)量，mg。 v（3）試劑 硫酸（1+2）。 0.01mol/L高錳酸鉀標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液。 0.01mol/L草酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液。 100 10006 .31)( 21 CVV X 食品分析與檢驗(yàn)

14、技術(shù)19 v4殘?jiān)繙y定 將試樣用四種不同浸泡液模擬接觸水、酸、酒、油等不同性質(zhì)食品 后，浸泡液進(jìn)行蒸發(fā)所得殘?jiān)硎驹诓煌菀褐械母魑镔|(zhì)的溶出 量。 （1）測定方法 v取200mL浸泡液于預(yù)先恒量的50mL玻璃蒸發(fā)皿或小瓶濃縮器中，在水 浴上蒸干，于100士5干燥2h，在干燥器內(nèi)冷卻0.5h后稱量，再于100 士5干燥1h，在干燥器內(nèi)冷卻0.5h稱量，同時(shí)做空白試驗(yàn)。 （2）結(jié)果計(jì)算 v式中 vX試樣浸泡液（不同浸泡液）蒸發(fā)殘?jiān)?，mg/L； vm1試樣浸泡液蒸發(fā)殘?jiān)|(zhì)量，mg； vm2空白浸泡液的質(zhì)量，mg。 200 1000)( 21 mm X 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)20 v5重金屬含量 v

15、浸泡液中重金屬（以鉛計(jì)）與硫化鈉作用，在酸性溶液中形成黃 棕色硫化鉛，與標(biāo)準(zhǔn)比較不得更深，則表示重金屬含量符合標(biāo)準(zhǔn)。 （1）測定方法 v吸取20.0mL4%乙酸浸泡液于50mL比色管中，加水至刻度，另取 2mL鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液于50mL比色管，加20mL4%乙酸溶液，加水至 刻度混勻，兩比色管各加硫化鈉溶液2滴，混勻后，放置5min， 以白色為背景，從上方或側(cè)面觀察，試樣呈色不能比標(biāo)準(zhǔn)溶液更 深。 （2）結(jié)果表述 v呈色大于標(biāo)準(zhǔn)試樣，重金屬（以Pb計(jì)）報(bào)告值1。 （3）試劑 v硫化鈉溶液、鉛標(biāo)準(zhǔn)溶液、鉛標(biāo)準(zhǔn)使用液 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)21 v6脫色試驗(yàn) 取洗凈待測食具，用沾有冷餐油、65%乙醇的棉花

16、，在 接觸食品的部位小面積內(nèi)，用力擦拭100次，棉花不得染 有顏色。四種浸泡液亦不得染有顏色。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)22 v四、相關(guān)知識(shí) （一）包裝材料衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) （二）食品包裝的意義 v食品包裝是食品工業(yè)過程中的主要工程之一，是食品商品的 組成部分，它可以保護(hù)食品，使食品在離開工廠到消費(fèi)者手 中的流通過程中，防止生物性、化學(xué)性、物理性外來因素的 損害，保持食品本身穩(wěn)定質(zhì)量的功能，方便食品的食用。同 時(shí)，食品包裝又具有首先表現(xiàn)食品外觀，吸引消費(fèi)的形象的 效果，具有物質(zhì)成本以外的價(jià)值。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)23 項(xiàng)目四：測定橡膠制品中有害物質(zhì) v一、案例 v二、選用國家標(biāo)準(zhǔn) GB/T5009.64-2

17、003食品用橡膠墊片（圈）衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分 析方法。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)24 v三、測定方法 1取樣及處理 v以日產(chǎn)量作為一個(gè)批號(hào)，從每批中均勻取出500g，置于干燥清潔 玻璃瓶中，表明產(chǎn)品名稱、批號(hào)及取樣時(shí)間，半數(shù)用于化驗(yàn)，半 數(shù)用于備份仲裁。將試樣用洗滌劑清洗干凈，自來水沖洗，再用 水淋洗，晾干，備用。取橡膠墊片（圈）三片20g，如不足20g可 以多取。 2浸泡條件 v每克試樣加20mL浸泡液。 v（1）水：60，浸泡0.5h。 v（2）4%乙酸：60，浸泡0.5h。 v（3）20%乙醇：60，浸泡0.5h（瓶蓋墊片）。 v（4）正己烷：水浴加熱回流0.5h（罐頭墊圈）。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)2

18、5 v3殘?jiān)繙y定 v4有機(jī)物含量測定 v5鋅含量測定 鋅離子在酸性條件下與亞鐵氰化鉀作用生成亞鐵氰化鋅，產(chǎn)生渾濁， 與標(biāo)準(zhǔn)渾濁度比較定量，最低檢出限2.5mg/L。 （1）測定方法 v吸取2.0mL4%乙酸浸泡液，置于25mL比色管中，加水10mL。吸取鋅標(biāo) 準(zhǔn)使用液0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0mL，相當(dāng)于含有0.0、5.0、10.0、 20.0、30.0、40.0g鋅，分別置于25mL比色管中，各加2mL4%乙酸， 再各加水至10mL。 v于試樣及標(biāo)準(zhǔn)使用液中各加1mL鹽酸（1+1），10mL10%氯化銨， 0.1mL20%亞硫酸鈉溶液，搖勻，放置5min后，各加0.5

19、mL0.5%亞鐵氰 化鉀溶液，加水至刻度，混勻，放置5min后，目視比較渾濁度定量。 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)26 v（2）結(jié)果計(jì)算 式中 X試樣浸泡液中鋅含量，mg/L； m測定時(shí)所取試樣浸泡液中鋅的質(zhì)量，g； V測定時(shí)所取試樣浸泡液體積，mL。 v（3）試劑 0.5%亞鐵氰化鉀溶液。 20%亞硫酸鈉溶液，用時(shí)現(xiàn)配。 鹽酸（1+1）。 鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取0.1000g鋅，加4mL鹽酸（1+1），溶解后移入 1000mL容量瓶中，加水稀釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于100.0g鋅。 鋅標(biāo)準(zhǔn)使用液：吸取10.0mL鋅標(biāo)準(zhǔn)溶液，置于100mL容量瓶中，加水稀 釋至刻度，此溶液每毫升相當(dāng)于10.0g鋅。 1000 1000 V m X 食品分析與檢驗(yàn)技術(shù)27 v4重金屬含量 浸泡液中重金屬（以鉛計(jì)）與硫化鈉作用，在酸性溶液中形成黃棕 色硫化鉛，與標(biāo)準(zhǔn)比較不得更深，則表示重金屬含量符合標(biāo)準(zhǔn)。 （1）測定方法 v吸取20.00mL4%乙酸浸泡液于50mL比色管