實(shí)驗(yàn)11__菊花組織培養(yǎng)試驗(yàn)

1、第四部分第四部分 淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù)淺嘗現(xiàn)代生物技術(shù) 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?1 1、進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)、進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng) 2 2、嘗試植物激素的應(yīng)用、嘗試植物激素的應(yīng)用 通過(guò)必修課的學(xué)習(xí)，我們已經(jīng)了解到大多 綠色開(kāi)花植物都是靠種子來(lái)繁殖的。那么，有 沒(méi)有不用種子來(lái)培育植物的方法呢？ 組織培養(yǎng)組織培養(yǎng) 營(yíng)養(yǎng)繁殖營(yíng)養(yǎng)繁殖 扦插扦插 嫁接嫁接 壓條壓條 無(wú)性繁殖無(wú)性繁殖 一、基礎(chǔ)知識(shí)分析一、基礎(chǔ)知識(shí)分析 （一）組織培養(yǎng)的生殖方式（一）組織培養(yǎng)的生殖方式 離體器官、 組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 根、芽 植物體 （二）植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程（二）植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程 知識(shí)要點(diǎn)知識(shí)要點(diǎn): : 1.

2、1.細(xì)胞分化的概念；細(xì)胞分化的概念； 2.2.離體植物細(xì)胞的脫分化和再分化。離體植物細(xì)胞的脫分化和再分化。 （三）影響植物組織培養(yǎng)的因素（三）影響植物組織培養(yǎng)的因素 影響植物組織培養(yǎng)的因素有培養(yǎng)基配制、影響植物組織培養(yǎng)的因素有培養(yǎng)基配制、 外植體的選取、消毒、接種、培養(yǎng)、移栽和外植體的選取、消毒、接種、培養(yǎng)、移栽和 栽培等。栽培等。 (1)(1)外植體選?。翰煌闹参锝M織外植體選?。翰煌闹参锝M織 同一植物的不同材料同一植物的不同材料 (2)(2)營(yíng)養(yǎng)營(yíng)養(yǎng) (3)(3)環(huán)境條件環(huán)境條件(pH(pH、溫度溫度、光照光照) ) (4)(4)植物激素植物激素 (5)(5)消毒消毒 （四）生長(zhǎng)素與細(xì)胞

3、分裂素使用配比對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響（四）生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素使用配比對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響 使用配比使用配比實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果 細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素濃度生長(zhǎng)素濃度誘導(dǎo)芽的生成誘導(dǎo)芽的生成 細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素= =生長(zhǎng)素濃度生長(zhǎng)素濃度愈傷組織繼續(xù)生長(zhǎng)而不分化愈傷組織繼續(xù)生長(zhǎng)而不分化 細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素 生長(zhǎng)素濃度生長(zhǎng)素濃度誘導(dǎo)根的生成誘導(dǎo)根的生成 制備制備MS固體固體 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 外植體消毒外植體消毒 接種接種 培培 養(yǎng)養(yǎng) 栽培栽培 移移 栽栽 二、實(shí)驗(yàn)操作二、實(shí)驗(yàn)操作 （一）制備（一）制備MSMS固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基 1 1、配制母液、配制母液 按照按照MS培養(yǎng)基成分表培養(yǎng)基成分表, 分別配制

4、培養(yǎng)基的母液。分別配制培養(yǎng)基的母液。 (1)(1)大量元素母液大量元素母液(10(10倍液倍液) ) 分別稱取分別稱取1010倍用量的各種大量無(wú)機(jī)鹽，依次溶解于大約倍用量的各種大量無(wú)機(jī)鹽，依次溶解于大約800ml800ml 熱的（熱的（60-8060-80）蒸餾水中。（一種成分完全溶解后再加入下一）蒸餾水中。（一種成分完全溶解后再加入下一 種，最后加水，定容至種，最后加水，定容至1000ml1000ml后裝入試劑瓶中，冰箱內(nèi)貯存?zhèn)浜笱b入試劑瓶中，冰箱內(nèi)貯存?zhèn)?用）。用）。 (2)(2)微量元素母液微量元素母液(100(100倍液倍液) ) (3)(3)鐵鹽母液（鐵鹽母液（100100倍液）倍液

5、） (4)(4)有機(jī)物質(zhì)母液有機(jī)物質(zhì)母液(100(100倍數(shù)倍數(shù)) ) (5)(5)生長(zhǎng)素母液生長(zhǎng)素母液 (6)(6)細(xì)胞分裂素母液細(xì)胞分裂素母液 注意注意: :配制培養(yǎng)基時(shí)，一定要注意調(diào)節(jié)配制培養(yǎng)基時(shí)，一定要注意調(diào)節(jié)pHpH。 MSMS培養(yǎng)基配制方法培養(yǎng)基配制方法 你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同微生物你能說(shuō)出各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同微生物 培養(yǎng)基的配方相比，培養(yǎng)基的配方相比，MSMS培養(yǎng)基的配方有哪些明培養(yǎng)基的配方有哪些明 顯的不同？顯的不同？ 微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無(wú)機(jī)鹽必需的無(wú)機(jī)鹽； 蔗糖提供蔗糖提供碳源碳源，同時(shí)能夠，同時(shí)能夠維

6、持細(xì)胞的滲透壓維持細(xì)胞的滲透壓；甘氨酸、維；甘氨酸、維 生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑 受到一定影響后所產(chǎn)生的受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營(yíng)養(yǎng)需求特殊營(yíng)養(yǎng)需求。 微生物培養(yǎng)基以微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，。與微生物的培養(yǎng)不同， MSMS培養(yǎng)基則需提供培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物 生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類(lèi)。生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類(lèi)。 (1) (1) 取取1000ml1000ml燒杯一只，加大量元素?zé)恢唬哟罅吭?010

7、倍母液倍母液 100ml100ml，微量元素，微量元素100100倍母液倍母液10ml10ml，鐵鹽，鐵鹽100100倍母液倍母液 10ml,10ml,有機(jī)物質(zhì)有機(jī)物質(zhì)100100倍母液倍母液10ml10ml。此外。此外, ,根據(jù)培養(yǎng)材料根據(jù)培養(yǎng)材料 和實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪€要附加一定量的和實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪€要附加一定量的生長(zhǎng)素生長(zhǎng)素, ,細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素及蔗及蔗 糖等糖等, ,然后加水至然后加水至1000ml,1000ml,待蔗糖充分溶解后用待蔗糖充分溶解后用 1mol/L 1mol/L 的的NaOHNaOH或或HClHCl調(diào)酸堿度為調(diào)酸堿度為pH5.8,pH5.8,最后加入最后加入 瓊脂粉瓊脂粉6.5g,

8、6.5g,如用瓊脂條如用瓊脂條, ,則要加則要加8g8g。 2.2.培養(yǎng)基配制與分裝：培養(yǎng)基配制與分裝： (2)(2)將盛有培養(yǎng)基的燒杯在電磁爐上，煮至瓊脂完全將盛有培養(yǎng)基的燒杯在電磁爐上，煮至瓊脂完全 融化，補(bǔ)加蒸餾水至融化，補(bǔ)加蒸餾水至1000ml1000ml。 將配制好的培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)用三角瓶中，每只將配制好的培養(yǎng)基分裝到培養(yǎng)用三角瓶中，每只 100ml100ml三角瓶約裝三角瓶約裝40ml40ml培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。 分裝時(shí)要避免把培養(yǎng)基倒在瓶口上，否則培養(yǎng)時(shí)容分裝時(shí)要避免把培養(yǎng)基倒在瓶口上，否則培養(yǎng)時(shí)容 易引起雜菌污染。易引起雜菌污染。 （1 1）把裝好的培養(yǎng)基的三角瓶放入高）把裝好的

9、培養(yǎng)基的三角瓶放入高 壓滅菌鍋中，蓋好鍋蓋。壓滅菌鍋中，蓋好鍋蓋。 （2 2）設(shè)置滅菌溫度參數(shù)為）設(shè)置滅菌溫度參數(shù)為121121， 20min20min，開(kāi)始滅菌。，開(kāi)始滅菌。 3 3、滅菌、滅菌 無(wú)菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關(guān)鍵無(wú)菌技術(shù)是植物組織培養(yǎng)能否獲得成功的關(guān)鍵 （二）外植體（離體組織）消毒（二）外植體（離體組織）消毒 注意：注意：對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)，一方面要考慮藥對(duì)培養(yǎng)材料進(jìn)行表面滅菌時(shí)，一方面要考慮藥 劑的消毒效果；另一方面還要考慮植物材料的耐受能力。劑的消毒效果；另一方面還要考慮植物材料的耐受能力。 不同藥劑、不同植物材料，甚至不同器官要區(qū)別對(duì)待。不同藥劑、不同植物

10、材料，甚至不同器官要區(qū)別對(duì)待。 1 1、7070酒精中浸泡酒精中浸泡10min10min，無(wú)菌水沖洗，無(wú)菌水沖洗 2 2、5%5%次氯酸鈉溶液中浸泡，無(wú)菌水沖洗次氯酸鈉溶液中浸泡，無(wú)菌水沖洗 3 3、用另一、用另一5%5%次氯酸鈉溶液浸泡次氯酸鈉溶液浸泡5min5min，無(wú)菌水沖洗，無(wú)菌水沖洗 4 4、超凈臺(tái)中用無(wú)菌水多次沖洗、超凈臺(tái)中用無(wú)菌水多次沖洗 （三）切段后接種（三）切段后接種 1 1、先用肥皂洗手，穿、先用肥皂洗手，穿 上工作服，戴上口罩和工上工作服，戴上口罩和工 作帽。作帽。 2 2、放入培養(yǎng)瓶和滅、放入培養(yǎng)瓶和滅 菌后的接種用具菌后的接種用具( (鑷子、鑷子、 解剖刀、接種針解剖

11、刀、接種針) )，把鑷，把鑷 子、解剖刀、接種針插入子、解剖刀、接種針插入 內(nèi)盛內(nèi)盛70%70%酒精的廣口瓶酒精的廣口瓶 中。中。 3 3、在酒精燈火焰旁，打、在酒精燈火焰旁，打 開(kāi)三角瓶，把花莖用無(wú)菌解開(kāi)三角瓶，把花莖用無(wú)菌解 剖刀切成幾段，每段至少有剖刀切成幾段，每段至少有 一張葉片一張葉片 4 4、切段插入培養(yǎng)基，誘、切段插入培養(yǎng)基，誘 導(dǎo)愈傷組織，蓋上封口膜。導(dǎo)愈傷組織，蓋上封口膜。 5 5、愈傷組織插入生芽培、愈傷組織插入生芽培 養(yǎng)基，蓋上封口膜。養(yǎng)基，蓋上封口膜。 6 6、用記號(hào)筆在瓶壁上寫(xiě)、用記號(hào)筆在瓶壁上寫(xiě) 明明培養(yǎng)材料培養(yǎng)材料、培養(yǎng)基代號(hào)培養(yǎng)基代號(hào)、 接種日期接種日期。 注意

12、事項(xiàng)注意事項(xiàng) 全部接種操作都是在無(wú)菌條件下進(jìn)行的，所以全部接種操作都是在無(wú)菌條件下進(jìn)行的，所以 要特別認(rèn)真仔細(xì)，以防雜菌污染。要特別認(rèn)真仔細(xì)，以防雜菌污染。 （四）培養(yǎng)（四）培養(yǎng) 接種后的錐形瓶最好放在無(wú)菌箱中培養(yǎng)。培接種后的錐形瓶最好放在無(wú)菌箱中培養(yǎng)。培 養(yǎng)期間應(yīng)定期消毒，溫度控制在養(yǎng)期間應(yīng)定期消毒，溫度控制在55， 并且每日照光并且每日照光4.54.5小時(shí)小時(shí) 。觀察記錄生長(zhǎng)情況，。觀察記錄生長(zhǎng)情況， 并照相存檔。并照相存檔。 2 2-3 3周后將生長(zhǎng)健壯的周后將生長(zhǎng)健壯的叢狀苗叢狀苗在無(wú)菌條件下在無(wú)菌條件下 一個(gè)個(gè)轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，在上述條件下繼續(xù)一個(gè)個(gè)轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基中，在上述條件下繼續(xù)

13、 培養(yǎng)培養(yǎng) （五）移栽（五）移栽 （六）栽培（六）栽培 生根后，將苗移生根后，將苗移 至消毒的草炭土或蛭至消毒的草炭土或蛭 石中，用玻璃罩或塑石中，用玻璃罩或塑 料布保持料布保持80%80%以上濕以上濕 度，度，2 2- -3 3天后打開(kāi)玻天后打開(kāi)玻 璃罩低濕度鍛煉璃罩低濕度鍛煉 轉(zhuǎn)移至土中培養(yǎng)轉(zhuǎn)移至土中培養(yǎng) （定植）（定植） 三、結(jié)果分析與評(píng)價(jià)三、結(jié)果分析與評(píng)價(jià) （一）對(duì)接種操作中污染情況的分析（一）對(duì)接種操作中污染情況的分析 接種接種3 34 d4 d后，在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng)后，在接種操作中被雜菌污染的培養(yǎng) 物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。請(qǐng)學(xué)生適時(shí)統(tǒng)計(jì)污染率，物會(huì)表現(xiàn)出被污染的現(xiàn)象。請(qǐng)學(xué)

14、生適時(shí)統(tǒng)計(jì)污染率， 分析接種操作是否符合無(wú)菌要求。分析接種操作是否符合無(wú)菌要求。 （二）是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化（二）是否完成了對(duì)植物組織的脫分化和再分化 觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，看看是否培養(yǎng)出了愈傷組織，記觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果，看看是否培養(yǎng)出了愈傷組織，記 錄多長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)出愈傷組織。統(tǒng)計(jì)更換培養(yǎng)基后愈傷錄多長(zhǎng)時(shí)間長(zhǎng)出愈傷組織。統(tǒng)計(jì)更換培養(yǎng)基后愈傷 組織進(jìn)一步分化成根和芽的比例和時(shí)間。組織進(jìn)一步分化成根和芽的比例和時(shí)間。 （三）是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄（三）是否進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)、對(duì)照與記錄 做好統(tǒng)計(jì)和對(duì)照，填好結(jié)果記錄表，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)做好統(tǒng)計(jì)和對(duì)照，填好結(jié)果記錄表，培養(yǎng)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué) 態(tài)度。從實(shí)驗(yàn)的第一步開(kāi)

15、始就要求做好實(shí)驗(yàn)記錄，實(shí)驗(yàn)態(tài)度。從實(shí)驗(yàn)的第一步開(kāi)始就要求做好實(shí)驗(yàn)記錄，實(shí)驗(yàn) 小組配制不同培養(yǎng)基，如誘導(dǎo)愈傷或直接分化叢芽的培小組配制不同培養(yǎng)基，如誘導(dǎo)愈傷或直接分化叢芽的培 養(yǎng)基，然后做不同配方的比較。養(yǎng)基，然后做不同配方的比較。 （四）生根苗的移栽是否合格（四）生根苗的移栽是否合格 生根苗移栽技術(shù)的生根苗移栽技術(shù)的關(guān)鍵關(guān)鍵是既要充分清洗根系表面是既要充分清洗根系表面 的培養(yǎng)基，又不能傷及根系。一般使用無(wú)土栽培的的培養(yǎng)基，又不能傷及根系。一般使用無(wú)土栽培的 辦法。培養(yǎng)基質(zhì)要提前消毒，可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴灑辦法。培養(yǎng)基質(zhì)要提前消毒，可以向培養(yǎng)基質(zhì)噴灑 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%5%的高錳酸鉀，并用塑料

16、薄膜覆蓋的高錳酸鉀，并用塑料薄膜覆蓋12 h12 h。 掀開(kāi)塑料薄膜后掀開(kāi)塑料薄膜后24 h24 h才能移栽。新移栽的組培苗要才能移栽。新移栽的組培苗要 在溫室過(guò)渡幾天，等壯苗后再定植大田或進(jìn)行盆栽。在溫室過(guò)渡幾天，等壯苗后再定植大田或進(jìn)行盆栽。 學(xué)生可以在課后統(tǒng)計(jì)自己移栽的成活率，看看移栽學(xué)生可以在課后統(tǒng)計(jì)自己移栽的成活率，看看移栽 是否合格。是否合格。 四、本課題知識(shí)小結(jié)四、本課題知識(shí)小結(jié) 菊花的組織培養(yǎng)菊花的組織培養(yǎng) 原理：細(xì)胞的全能性原理：細(xì)胞的全能性 條件條件 基礎(chǔ)基礎(chǔ) 概念概念 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 的基本過(guò)程：的基本過(guò)程： 環(huán)境因素環(huán)境因素（溫度、（溫度、PH、光照）、光照）

17、 外植體的選擇外植體的選擇 營(yíng)養(yǎng)因素營(yíng)養(yǎng)因素 植株植株根、芽根、芽 愈傷愈傷 組織組織 外植體外植體 影響植物組織影響植物組織 培養(yǎng)的因素培養(yǎng)的因素 植物激素配比植物激素配比 實(shí)驗(yàn)過(guò)程：實(shí)驗(yàn)過(guò)程：移栽移栽栽培栽培培養(yǎng)培養(yǎng)接種接種 外植體外植體 消毒消毒 制備制備 MS培培 養(yǎng)基養(yǎng)基 五、練習(xí)五、練習(xí) 植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對(duì)植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對(duì) 培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合 于某些微生物的生長(zhǎng)，如于某些微生物的生長(zhǎng)，如一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)一些細(xì)菌、真菌等的生長(zhǎng)。而培養(yǎng)。

18、而培養(yǎng) 物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄，因此要物一旦受到微生物的污染，就會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)前功盡棄，因此要 進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作。進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作。 外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件 之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化之一。生長(zhǎng)旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化 和再分化。和再分化。 在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，為什么要進(jìn)行一系列在植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，為什么要進(jìn)行一系列 的消毒，滅菌，并且要求無(wú)菌操作？的消毒，滅菌，并且要求無(wú)菌操作？ 在選取菊花莖段的時(shí)候，為什么要選取生長(zhǎng)旺盛的在選取菊花莖段的時(shí)候，為什么要選取生長(zhǎng)旺盛的

19、嫩枝？嫩枝？ 3 3、不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可以使用與本實(shí)驗(yàn)相、不同植物、不同組織的生根和生芽是否都可以使用與本實(shí)驗(yàn)相 同的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素濃度同的生長(zhǎng)素和細(xì)胞分裂素濃度 4 4、本實(shí)驗(yàn)用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，為、本實(shí)驗(yàn)用人工合成的激素，而不用植物中存在的天然激素，為 什么？什么？ 5 5、如果在自然界取植物樣本進(jìn)行組織培養(yǎng)，你認(rèn)為應(yīng)采取什么措、如果在自然界取植物樣本進(jìn)行組織培養(yǎng)，你認(rèn)為應(yīng)采取什么措 施保證樣本不被污染？施保證樣本不被污染？ 任何植物物種或品種都不可貿(mào)然使用與本實(shí)驗(yàn)相同的生長(zhǎng)素任何植物物種或品種都不可貿(mào)然使用與本實(shí)驗(yàn)相同的生長(zhǎng)素 和細(xì)胞分裂

20、素濃度和細(xì)胞分裂素濃度，必須要套索使用如何合成激素和何種激，必須要套索使用如何合成激素和何種激 素濃度才可以。學(xué)習(xí)者可以參考已有文獻(xiàn)上成熟的經(jīng)驗(yàn)，也素濃度才可以。學(xué)習(xí)者可以參考已有文獻(xiàn)上成熟的經(jīng)驗(yàn)，也 可以自己探索可以自己探索 植物中存在的天然激素有相應(yīng)的使之分解的酶植物中存在的天然激素有相應(yīng)的使之分解的酶，這樣，天，這樣，天 然激素在植物體內(nèi)作用和然激素在植物體內(nèi)作用和存在的時(shí)間就較短存在的時(shí)間就較短，而，而人工合成人工合成 的激素在植物中沒(méi)有相應(yīng)使之分解的酶的激素在植物中沒(méi)有相應(yīng)使之分解的酶，所以作用和存在，所以作用和存在 時(shí)間長(zhǎng)，作用效果也更明顯。時(shí)間長(zhǎng)，作用效果也更明顯。 （1 1）操

21、作環(huán)境潔凈（）操作環(huán)境潔凈（2 2）植物樣本潔凈（）植物樣本潔凈（3 3）操作過(guò)程無(wú)菌）操作過(guò)程無(wú)菌 因?yàn)槲廴疚锏膩?lái)源是操作過(guò)程中和植物本身帶來(lái)的，主要是因?yàn)槲廴疚锏膩?lái)源是操作過(guò)程中和植物本身帶來(lái)的，主要是 微生物的污染，要采用各種措施防止微生物污染，具體做法微生物的污染，要采用各種措施防止微生物污染，具體做法 和操作在微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)介紹。除認(rèn)真消毒除菌外，和操作在微生物培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中已經(jīng)介紹。除認(rèn)真消毒除菌外， 操作敏捷迅速，也可以降低污染率操作敏捷迅速，也可以降低污染率 6 6右圖為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖。右圖為植物體細(xì)胞雜交過(guò)程示意圖。 據(jù)圖回答：據(jù)圖回答： （1 1）步驟是）步驟是 ，最，最 常用的方法是常用的方法是 。 （2 2）步驟一般常用的化學(xué)試劑）步驟一般常用的化學(xué)試劑 是是 ，目的是，目的是 。 (3)(3)在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植在利用雜種細(xì)胞培育成為雜種植 株的過(guò)程中，運(yùn)用的技術(shù)手段株的過(guò)程中，運(yùn)用的技術(shù)手段 是是 ，其中步驟相當(dāng)于，其中步驟相當(dāng)于 ，步驟相當(dāng)于，步驟相當(dāng)于 。 （4 4）植物體細(xì)胞雜交的目的是獲得新）植物體細(xì)胞雜交的目的是