細(xì)菌一般染色方法課件

1、細(xì)菌一般染色方法課件 常用的細(xì)菌染色方法 革蘭染色 抗酸染色 細(xì)菌基本形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察 細(xì)菌一般染色方法課件 細(xì)菌一般染色方法課件 細(xì)菌染色意義 由于細(xì)菌個(gè)體微小，基本上無色透明， 故將其用適當(dāng)染料染色觀察，方能顯示 它的形態(tài)、大小、構(gòu)造及染色特性等， 在細(xì)菌鑒別上有重要意義。 革蘭染色是細(xì)菌學(xué)中使用最廣泛的一種 染色方法，籍此染色法，可將所有細(xì)菌 區(qū)分為兩大類。 細(xì)菌一般染色方法課件 細(xì)菌染色方法及原理 常采用美藍(lán)，結(jié)晶紫等堿性染料進(jìn)行染色。 多數(shù)染料都是中性有機(jī)鹽。據(jù)著色基的不同 可分為以下類型： 堿性染料（basic dye）帶正電染料。其陽離子 部分為發(fā)色基團(tuán)，可與細(xì)胞中帶負(fù)電的組分結(jié)合。

2、 酸性染料（Acid dye）帶負(fù)電染料。其陰離子 部分為發(fā)色基團(tuán)，可與細(xì)胞中帶正電的組分結(jié)合。 細(xì)菌一般染色方法課件 革蘭染色原理 細(xì)菌的等電點(diǎn)較低，約在pH 25之間， 故在中性、堿性或弱堿性溶液中，菌體 蛋白質(zhì)電離后帶負(fù)電荷，易與帶正電荷 的堿性染料如龍膽紫及堿性復(fù)紅等結(jié)合， 使細(xì)菌被染成紫色或紅色。 細(xì)菌一般染色方法課件 一、細(xì)菌染色標(biāo)本片的制備一、細(xì)菌染色標(biāo)本片的制備 細(xì)菌染色檢查，首先要進(jìn)行細(xì)菌標(biāo)本制 備。制備細(xì)菌標(biāo)本一般包括涂片、干燥、 固定三步。 細(xì)菌一般染色方法課件 固定的目的和方法 使細(xì)菌的細(xì)胞凝固，使菌體與玻片粘得 更牢固 可改變菌體對染料的通透性 加熱固定可殺死細(xì)菌，比

3、較安全 固定的方法將制成的標(biāo)本勻速通過火焰 三次 細(xì)菌一般染色方法課件 革革蘭蘭染色染色 染色： 初染初染（結(jié)晶紫）（結(jié)晶紫） 媒染媒染 （碘液） 脫色脫色（酒精）（酒精） 復(fù)染復(fù)染（復(fù)紅）（復(fù)紅） 濾紙吸干 油鏡鏡檢 safranin Crystal violet 細(xì)菌一般染色方法課件 染色步驟染色步驟 染 乙醇脫色 復(fù)紅復(fù)染 （） （） （） （） 分鐘水洗 分鐘水洗 秒水洗 秒水洗吸干 細(xì)菌一般染色方法課件 Germ is stained violet or red 細(xì)菌一般染色方法課件 結(jié)晶紫初染分鐘 水洗 細(xì)菌一般染色方法課件 碘液媒染分鐘 水洗 細(xì)菌一般染色方法課件 酒精脫色秒 水

4、洗 細(xì)菌一般染色方法課件 復(fù)紅復(fù)染秒 水洗 細(xì)菌一般染色方法課件 濾紙吸干 油鏡鏡檢 細(xì)菌一般染色方法課件 抗酸染色法(acid-fast stain) 分枝桿菌屬的細(xì)菌（包括結(jié)核分枝桿菌、 麻風(fēng)分枝桿菌等）為抗酸性細(xì)菌，一般染 色法不易著色，須用抗酸染色法。 注意事項(xiàng) 涂片要略厚 加溫染色或延長染色時(shí)間，加溫時(shí)隨時(shí)補(bǔ)加 染色液 分枝桿菌呈紅色(+) 其他細(xì)菌和背景為藍(lán)色(-)。 細(xì)菌一般染色方法課件 操作過程 取痰液 涂片（略厚）干燥固定 石炭酸復(fù)紅加溫染色810分鐘后 用3%的鹽酸酒精脫色約12分鐘， 脫色時(shí)輕搖玻片，直到涂片顏色脫去為止 水洗后，用堿性美藍(lán)復(fù)染1分鐘水洗， 印干 鏡檢 細(xì)菌一般染色方法課件 形態(tài)：形態(tài)： 細(xì)長，略彎曲的桿菌，多聚集成團(tuán)。無鞭毛,芽胞。 染色性：染色性： 不易著色，抗酸染色陽性。菌體呈紅色，背景中其他物質(zhì) 藍(lán)色。 結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis) 細(xì)菌一般染色方法課件 細(xì)菌基本形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察 基本形態(tài) 球菌 桿菌 弧菌 特殊結(jié)構(gòu) 芽孢 枯草桿菌，破傷風(fēng)梭菌 莢膜 肺炎球菌 鞭毛 變形桿菌 葡萄球菌葡萄球菌 鏈球菌鏈球菌 肺炎球菌肺炎球菌 腦膜炎球菌 革蘭陽性革蘭陽性 革蘭陰性革蘭陰性 細(xì)菌一般染色方法課件 細(xì)菌一般染色方法課件 細(xì)菌一般染色方法課件 肺炎（雙）球菌肺