款冬花配方顆粒制備工藝優(yōu)化及質(zhì)量控制

1、款冬花配方顆粒制備工藝優(yōu)化及質(zhì)量控制 作者：劉可越，湯自豪，劉海軍，張鐵軍，曲偉紅 【摘要】 目的優(yōu)化款冬花配方顆粒的制備工藝，建立指標成分蘆丁的含量測定方法。方法以正交實驗法對款冬花配方水提工藝的影響因素進行考察，優(yōu)選工藝條件; 用hplc法測定蘆丁含量，檢測波長為360 nm ，流動相為甲醇-0.1磷酸水溶液（5050）。結果優(yōu)選提取工藝為:10倍量水，回流提取3次，1.5 h/次。蘆丁提取率為85. 53%，出膏率為25.95%;蘆丁在112.5 g(r=0.999 8)范圍內(nèi)呈良好線性關系。平均回收率為99.07%（n=5）。 結論款冬花配方顆粒的制備工藝穩(wěn)定、可行；評價指標可靠、合理

2、。 【關鍵詞】 款冬花； 配方顆粒； 蘆??； 質(zhì)量控制 chinaabstract:objectiveto optimize the extraction process for the preparation of tussilago farfara formula granules and to establish an hplc method for the determination of rutin in the samples.methodsthe optimum water extraction process was selected by the orthogonal des

3、ign and the content of rutin in formula granules was analyzed by hplc method. the hplc assay was performed by using meoh-0.1% phosphoric acid (5050) . the detection wavelength was set at 360 nm. resultsthe optimum extraction conditions were to reflux for 3 times with 10 folds of water and each time

4、for 1.5 h. the extraction rate of ratin was 85. 53%, and the dried extraction yield was 25.95%. the peak area had a good linearity with the concentration of rutin and the linear range was 112.5 g(r=0.999 8).the average recovery was 99.07%（n=5）.conclusionthe preparation process of tussilago farfara f

5、ormula granules is stable and feasible. the hplc method for quality control is accurate and suitable. key words:tussilago farfara; formula granules; rutin; quality control 款冬花為菊科款冬屬tussilago l.植物款冬的干燥花蕾。2005版中國藥典將款冬花收載為常用中藥，具潤肺下氣、止咳化痰之功效?，F(xiàn)代臨床上主要用于新久咳嗽，喘咳痰多等癥1。在中醫(yī)臨床處方及中成藥中用量較大，為歷版藥典所收載。中藥配方顆粒是近年來對傳統(tǒng)中

6、藥飲片應用形式的突破，以其生產(chǎn)自動化、工藝條件恒定、人為因素影響少等優(yōu)勢2，既滿足了臨床辨證論治，隨證加減的需要，又具有免煎易服、質(zhì)量穩(wěn)定可控等優(yōu)點，因此逐步得到廣泛的應用3。筆者將款冬花制成配方顆粒劑型，優(yōu)化其提取工藝，并以高效液相色譜（hplc）法對顆粒中蘆丁的含量進行了測定，為產(chǎn)品質(zhì)控提供參考，使款冬花藥材資源得以更好地開發(fā)利用。 1 儀器和試藥 高效液相色譜儀，包括sp8800高效液相泵，sepetra focus紫外檢測器，威瑪龍色譜數(shù)據(jù)工作站，甲醇、磷酸為分析純等。超聲儀（autosience儀器有限公司）?？疃ㄋ幉馁徲谔旖蝻嬈瑥S，經(jīng)天津藥物研究院中藥現(xiàn)代研究部張鐵軍研究員鑒定為

7、菊科植物款冬花 tussilago farfara l的干燥花蕾。蘆丁標準品（天津市藥品檢驗所），試劑均為分析純（天津康科德科技有限公司）。 2 方法與結果 2.1 款冬花提取工藝 2.1.1 正交設計通過預實驗得知影響提取的主要因素為時間（a）、加水倍量（b）和提取次數(shù)（c），為進一步優(yōu)選各因素最佳工藝水平，設計正交實驗，以蘆丁提取率和出膏率為指標，采用l9（34）正交表優(yōu)選水提款冬花的最佳提取工藝條件。因素水平設計見表1。表1 正交試驗因素水平（略） 2.1.2 實驗方法及結果稱取20 g款冬花藥材共9份，采用l9(34)正交表安排實驗，測定出膏率及蘆丁提取率，并充分考慮二者關系及對真實結

8、果的影響，利用提取率與出膏率之和作為綜合加權評分4，得出綜合評分。具體實驗結果見表2。為了進一步確定各因素對結果的影響大小，對實驗結果進行了方差分析。結果如表3所示。表2 正交實驗結果（略）表3 方差分析（略） 從上述結果分析可以看出，則3因素的影響大小依次為cba, c具有顯著性。從省時降耗及生產(chǎn)實際出發(fā)，在保證提取充分的前提下，綜合分析各個因素對蘆丁的提取率和出膏率的影響，擬定最佳工藝為10倍水量，煎3次，1.5 h/次。 2.1.3 水提正交實驗的驗證按照確定的優(yōu)選工藝重復驗證3次，測得平均提取率為85.53%，平均出膏率為25.95%，證明優(yōu)選工藝數(shù)據(jù)可靠。 2.2 款冬花配方顆粒的制

9、備取1 500 g款冬花藥材，按正交實驗所定最佳工藝條件提取，合并濾液，濃縮。按照理論干膏和輔料比11加入淀粉，用75%乙醇適量制成軟材，制粒干燥，即得款冬花配方顆粒成品。 2.3 蘆丁含量測定 2.3.1 對照品溶液的制備精密稱取蘆丁對照品適量，加流動相制成每毫升含0.10 mg的溶液，分別精密吸取1，2.5, 5, 7.5,10,12.5 ml 置于100 ml量瓶加流動相稀釋至刻度，備用。 2.3.2 供試品溶液的制備精密稱取款冬花配方顆粒約0.2 g，置量瓶中，加甲醇50 ml，超聲30 min，濾過，放冷，轉(zhuǎn)移至100 ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，作為供試品溶液。 2.3.

10、3 線性關系考察精密吸取上述蘆丁對照品溶液10 l，進樣，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為色譜柱填充劑；以甲醇：0.1磷酸水溶液（5050）為流動相；檢測波長為360 nm；理論板數(shù)按蘆丁峰計算應不低于4 000。記錄峰面積。以峰面積為縱坐標，蘆丁進樣量為橫坐標繪制標準曲線，得線性回歸方程為：y=391 982x + 19 143,r0.999 8，表明蘆丁在112.5 g與峰面積具有良好的線性關系。 2.3.4 精密度實驗分別精密吸取上述供試品溶液10 l，按上述色譜條件進行測定蘆丁的峰面積，計算得rsd=0.52（n6）。 2.3.5 穩(wěn)定性實驗精密稱取款冬花配方顆粒約0.5 g，按“2.3.2”

11、項方法制備供試品溶液。精密吸取上述供試品溶液10 l，分別在0,2,4,8,12，24 h進樣，按上述色譜條件進行測定蘆丁的峰面積，計算得rsd=1.34（n6）。結果表明，樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。 2.3.6 重復性實驗精密稱取同一批次樣品6份，分別按“2.3.2”項下方法制備供試品溶液。分別精密吸取上述供試品溶液10 l，按上述色譜條件進行測定蘆丁含量，計算得rsd=0.95（n6）。 2.3.7 加樣回收率實驗取款冬花配方顆粒約0.5 g，精密稱定。精密加入3.0 mg的蘆丁對照品，按“2.3.2”項下方法制備供試品溶液進行測定。結果平均回收率為99.07（n=5）。見表4。表4 加樣回收

12、實驗結果（略） 2.3.8 蘆丁的含量測定取款冬花配方顆粒約0.5 g，精密稱定，按“2.3.2”項下方法制備供試品溶液，照上述色譜條件測定，平均含量為0.909 5。 3 結論 本實驗對款冬花配方顆粒的制備工藝進行了研究。通過正交實驗法，確定最佳提取條件，并為其制定了簡便適用的的質(zhì)量控制方法。通過對顆粒的各項檢查，結果均符合中國藥典2005年版關于顆粒檢查項下規(guī)定。所制得的顆粒工藝合理，指標成分明確，質(zhì)量穩(wěn)定可控。 關于指標成分的選定：款冬花中蘆丁含量較高，蘆丁又是治療咳喘癥的重要藥物，所以選用蘆丁作為款冬花配方顆粒的指標成分。hplc法測定款冬花中蘆丁的含量，方法準確，重復性好，安全穩(wěn)定，不需要復雜的儀器設備,可用于款冬花配方顆粒的質(zhì)量控制。并且本實驗采取兩項指標綜合加權評分的方法4,5確定最佳工藝，更為合理。 配方顆粒作為飲片劑型的發(fā)展和補充，大多以水作為其提取溶劑，款冬花中的蘆丁成分易溶于熱水，故將其制成配方顆粒，既保證了傳統(tǒng)中藥的特點，又提高了質(zhì)量保證，值得臨床推廣和應用。 【參考文獻】 1國家藥典委員會.中國藥典，部s.北京:化學工業(yè)出版社,2005:273. 2張寶國，王學禮，劉慶芳.中藥配方顆