對照品／標(biāo)準(zhǔn)品研究和使用過程中的一般原則頭孢菌素質(zhì)量控制

1、發(fā)布日期 20071112 欄目 化藥藥物評價化藥質(zhì)量控制 標(biāo)題 對照品標(biāo)準(zhǔn)品研究和使用過程中的一般原則頭孢菌素質(zhì)量控制（一） 作者 蔣煜 邢俊生 部門 正文內(nèi)容 審評三部蔣煜 邢俊生*邢俊生*山西省藥檢所摘要：本文擬對頭孢菌素對照品/標(biāo)準(zhǔn)品的應(yīng)用情況、研究、選擇，標(biāo)化等進(jìn)行分析，以使申請人在藥物研究過程中進(jìn)一步重視頭孢菌素對照品/標(biāo)準(zhǔn)品的研究，以及合理使用。一、概述國家藥品標(biāo)準(zhǔn)品、對照品系指國家藥品標(biāo)準(zhǔn)中用于鑒別、檢查、含量測定、雜質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，它是國家藥品標(biāo)準(zhǔn)不可分割的組成部分。藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不同于一般的藥品，是執(zhí)行國家藥品標(biāo)準(zhǔn)的實(shí)物對照，是量值傳遞的安全載體，是國家頒布的一種

2、計(jì)量標(biāo)準(zhǔn)品。藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)必須具備材料均勻、性能穩(wěn)定、量值準(zhǔn)確等條件，才能發(fā)揮其統(tǒng)一量值的作用。中華人民共和國藥品管理法規(guī)定：國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門的藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)標(biāo)定國家藥品標(biāo)準(zhǔn)品、對照品。根據(jù)抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)標(biāo)定方法和用途的不同，對抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可分為生物標(biāo)準(zhǔn)品（標(biāo)準(zhǔn)品）和化學(xué)對照品（對照品）。標(biāo)準(zhǔn)品系指用于生物檢定、抗生素或生化藥品中含量或效價測定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，按效價單位計(jì)，以國際標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行標(biāo)定；對照品除另有規(guī)定外，均按干燥品或無水物進(jìn)行計(jì)算后使用。在藥品檢驗(yàn)中，對照品/標(biāo)準(zhǔn)品是確定藥品真?zhèn)蝺?yōu)劣的對照，是控制藥品質(zhì)量必不可少的工具。二、對照品/標(biāo)準(zhǔn)品的選擇依據(jù)如上所述，藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)必須具備材

3、料均勻、性能穩(wěn)定、量值準(zhǔn)確等條件，才能發(fā)揮其統(tǒng)一量值的作用。因此，選擇對照品/標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)具有以下幾方面特點(diǎn)：1、參比物質(zhì)和測定物質(zhì)的同質(zhì)性，這種同質(zhì)主要關(guān)注二者在測定過程中具有相同結(jié)構(gòu)，而非普通意義上的同質(zhì)性，不一定要求對照品固態(tài)下的結(jié)構(gòu)與被測定物質(zhì)固態(tài)下結(jié)構(gòu)完全一致。例如：克拉維酸的對照品為克拉維酸鋰，實(shí)際被測物為克拉維酸鉀。2、物質(zhì)穩(wěn)定。由于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可溯源性是其基本要求，因此必須保證選擇的對照品/標(biāo)準(zhǔn)品具有物理化學(xué)穩(wěn)定性。例如：用頭孢唑林酸不用頭孢唑林鈉制備對照品。三、頭孢菌素對照品標(biāo)準(zhǔn)品的不同存在及使用形式：1、用途不同存在含量測定用、鑒別用、有關(guān)物質(zhì)檢測使用等對照品。例如：頭孢曲松鈉含量

4、以頭孢曲松計(jì)，采用的應(yīng)是頭孢曲松對照品，而紅外光譜集納入的均為相應(yīng)鈉鹽的圖譜。在進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證或者質(zhì)量研究時，需要注意根據(jù)不同用途選擇不同對照品。在書寫質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)相應(yīng)項(xiàng)目時也需注意，以免引起不必要的麻煩。2、存在形式不同存在不同酸根和鹽基的對照品。如：頭孢呋辛，具有頭孢呋辛、頭孢呋辛鈉和頭孢呋辛酯的對照品。一般而言，以鈉鹽或者其他鹽形式存在的頭孢菌素，基于穩(wěn)定的目的，多用酸根作為對照品，如鹽酸頭孢吡肟采用頭孢吡肟制備對照品；而酯類前體藥物多采用原藥制備對照品。如：頭孢呋辛酯即采用頭孢呋辛酯制備對照品。上述不同形式對照品的用途也分別不同，例如頭孢呋辛鈉原料藥和制劑含量測定時使用頭孢呋辛對照品，鑒別時

5、可使用頭孢呋辛鈉對照品。頭孢呋辛酯的對照品是頭孢呋辛酯。但是由于前體藥物本身多不具抗菌活性，需在體內(nèi)降解形成活性物質(zhì)后發(fā)揮抗菌作用，因此，其含量均為活性成分計(jì)算。如頭孢呋辛酯原料藥及其制劑的含量均按照頭孢呋辛計(jì)算，在計(jì)算或折算時需要注意。3、雜質(zhì)對照品。隨著對藥物研發(fā)質(zhì)量要求的不斷提高，特別是新的雜質(zhì)研究指導(dǎo)原則出臺以后，雜質(zhì)對照品在質(zhì)量研究過程中的作用越來越突出。目前國內(nèi)以及國外已經(jīng)能夠提供多種雜質(zhì)對照品。比如頭孢克洛-3異構(gòu)體等。又如USP提供的鹽酸頭孢吡肟系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用對照品，其說明書中注明了兩種已知雜質(zhì)異構(gòu)體和E異構(gòu)體色譜系統(tǒng)的相對保留時間等信息。四、對照品標(biāo)準(zhǔn)品的研究以及標(biāo)化雖然國

6、家規(guī)定只能由國務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門的藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)負(fù)責(zé)標(biāo)定國家藥品標(biāo)準(zhǔn)品、對照品。但在新藥研究過程中，常遇到的情況是國內(nèi)無法提供相應(yīng)的新藥標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，也無法從國外獲得或者購得量無法滿足新藥開發(fā)整個過程的需要，此時，選擇和標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)顯得極為必要。3.1 藥品工作標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的獲得候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)必須具有前述特性，一般選用供試原料的精制品。并且經(jīng)元素分析、IR、UV、MS及NMR 等光譜分析、X-射線衍射分析，熱分析等手段確定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，結(jié)晶以及含水情況。一般所選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的準(zhǔn)確度應(yīng)比被測儀器或檢測方法的準(zhǔn)確度高35倍。3.2 標(biāo)定項(xiàng)目的選擇可以參照各國藥典或同類品種的相關(guān)情況確定標(biāo)定的項(xiàng)目。一般包括如下項(xiàng)目

7、：確定水分含量，包括表面水和結(jié)晶水；確定殘留溶劑；確定無機(jī)雜質(zhì)總量；確定有關(guān)物質(zhì)；采用有效方法確定其純度，并用其他方法進(jìn)行驗(yàn)證。有時熔點(diǎn)是反應(yīng)候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)純度的重要指標(biāo)之一,也需標(biāo)定。確定標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度,需要重點(diǎn)強(qiáng)調(diào)的是含量標(biāo)定與含量測定的區(qū)別：含量標(biāo)定是按照規(guī)定的程度、根據(jù)量值傳遞理論獲得標(biāo)定對象的純度，并含有一合適的不確定度或準(zhǔn)確度。而含量測定為對待測物進(jìn)行測試以證明其符合或不符合規(guī)定的限度。3.3 標(biāo)定方法的選擇對于某些國內(nèi)外尚無公認(rèn)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)用于標(biāo)定工作用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時,應(yīng)自行建立原始基準(zhǔn)品,可選用根據(jù)候選標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)內(nèi)在熱力學(xué)性質(zhì)的分析方法,如相溶度法和熱分析法等；對于已有高一級標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

8、的新藥，則可以使用外標(biāo)比較法，如色譜法、比色法等，重點(diǎn)體現(xiàn)在其量值傳遞的概念。五、小結(jié)藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是用以確定產(chǎn)品或材料的量值，評價測量方法的準(zhǔn)確和標(biāo)定測量儀器測試質(zhì)量的實(shí)物標(biāo)準(zhǔn)。由于標(biāo)準(zhǔn)品對照品作為計(jì)量標(biāo)尺的用途特殊性，以及目前某些藥物標(biāo)準(zhǔn)品、對照品的不易得性，建議申請人在新藥的研發(fā)過程中進(jìn)一步重視對該部分內(nèi)容的研究。附件1、中檢所提供的頭孢菌素對照品：附件2、目前美國USP提供的頭孢菌素對照品參考文獻(xiàn)：1 姚尚辰，胡昌勤.中國藥典2005年版抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)概況，中國抗生素雜質(zhì),2005,30(12):7072 陳桂良,徐新元,依婷. 新藥開發(fā)研究過程中藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)定上海計(jì)量測試2002,

9、29(2)3 成雙紅,胡昌勤.中國藥典2000年版中抗生素標(biāo)準(zhǔn)品對照品介紹，中國藥事,2002,16(7) :4364 胡昌勤,成雙紅. 抗生素生物標(biāo)準(zhǔn)品的確定. 中國藥事,2001,15 (4) :263本品僅代表個人觀點(diǎn)，歡迎有興趣同仁進(jìn)行討論。發(fā)布日期 20071112 欄目 化藥藥物評價化藥質(zhì)量控制 標(biāo)題 對照品標(biāo)準(zhǔn)品在研究和使用過程中容易出現(xiàn)的問題頭孢菌素質(zhì)量控制（二） 作者 蔣煜 邢俊生 部門 正文內(nèi)容 審評三部蔣煜 邢俊生*邢俊生*山西省藥檢所摘要：前文分析并討論了對照品/標(biāo)準(zhǔn)品在頭孢菌素質(zhì)量研究過程中的重要意義。本文擬繼續(xù)對申請人在新藥以及仿制藥研究過程中，在該部分研究中容易出

10、現(xiàn)的問題作進(jìn)一步分析。以期引起申請人對該部分研究的重視，進(jìn)一步規(guī)范對照品/標(biāo)準(zhǔn)品的研究和使用。由于目前頭孢菌素多為半合成產(chǎn)物，下文所提多為對照品，不對標(biāo)準(zhǔn)品作詳細(xì)分析。一、新藥研發(fā)過程容易出現(xiàn)的問題1.1 來源渠道多，不同申請人提供的對照品來源和渠道不統(tǒng)一。目前，對于頭孢菌素以及其他抗生素，根據(jù)上市與否，多數(shù)申報品種可以分為以下三類：國外上市國內(nèi)尚未上市（注冊分類3.1）、在國內(nèi)已經(jīng)上市（注冊分類6），國內(nèi)上市改變劑型（注冊分類5）。由于國內(nèi)抗生素的臨床使用特點(diǎn)以及研發(fā)現(xiàn)狀，往往相當(dāng)多申請人申報同一個產(chǎn)品。對于注冊分類3的品種，由于較難獲得官方渠道的對照品，其來源渠道一般包括：1、自制對照品；

11、2、原料藥廠家精制提供；3、國外購進(jìn)；4、直接在原料藥基礎(chǔ)上提高質(zhì)量要求后進(jìn)行對照。比如鹽酸頭孢吡肟，多數(shù)申請人為自行合成對照品，少數(shù)申請人購買USP對照品以及鹽酸頭孢吡肟系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用對照品用于含量測定和有關(guān)物質(zhì)分析。這些自行合成以及外購對照品由于主藥含量、水分、殘留溶劑、雜質(zhì)，晶型等均不一致，可能導(dǎo)致其物理化學(xué)穩(wěn)定性各不相同，甚至有較大差別，缺乏溯源性以及傳遞性，在實(shí)際研究和評價過程中造成相當(dāng)困難。而且，由于某些對照品可獲得性差，以及申請人在標(biāo)化過程中可能出現(xiàn)不規(guī)范現(xiàn)象，導(dǎo)致監(jiān)管存在一定困難。1.2對照品的選擇對照品的選擇原則包括物質(zhì)穩(wěn)定性以及參比物質(zhì)和測定物質(zhì)的同質(zhì)性，正如前文所述：克

12、拉維酸的對照品為克拉維酸鋰，實(shí)際被測物為克拉維酸鉀。用阿莫西林三水合物制備阿莫西林對照品而不用一水合物或阿莫西林制備。但是目前申請人對對照品的選擇、制備和標(biāo)化重視程度尚不足，造成同一個品種可能具有不同成鹽形式、含不同結(jié)晶水，不同晶型的對照品。由于上述不同，某些晶型或者某些成鹽形式的藥物由于其不穩(wěn)定性而不適宜制備成為對照品，但仍然發(fā)現(xiàn)個別申請人選擇了不穩(wěn)定形式作為對照品。其次，在對照品選擇時應(yīng)該充分關(guān)注不同鹽基、酸根的不同用途。比如頭孢替坦二鈉，由于成鹽的緣故，頭孢替坦與頭孢替坦二鈉的紅外圖譜肯定存在不同。但是某些申請人仍采用頭孢替坦對照品進(jìn)行紅外鑒別。紅外鑒別是抗生素的常規(guī)鑒別方法，由于抗生素

13、常常具不同的晶型，因此在使用對照品進(jìn)行鑒別試驗(yàn)時，要考慮對照品和供試品的晶型是否一致，并注意是否與供試品生產(chǎn)工藝采用的精制方法一致。以避免在研究或者藥檢所復(fù)核時出現(xiàn)不一致現(xiàn)象。1.3對照品的制備、標(biāo)化和質(zhì)量要求抗生素對照品的制備和標(biāo)化有一套相當(dāng)嚴(yán)格的程序。但是對于某些難以獲得只能自行制備的對照品，目前的申報資料較少提供其選擇和標(biāo)化過程，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)也多在原料質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)上相應(yīng)提高。由于申報資料缺乏對制備、標(biāo)化的信息不夠充分，難以評價對照品的各項(xiàng)參數(shù)。相應(yīng)也難以對產(chǎn)品作更加準(zhǔn)確的評價。由于來源、選擇、制備和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的不同，造成目前在對照品質(zhì)量控制方面存在不統(tǒng)一現(xiàn)象。下表為摘錄某三家申請人制定頭孢唑蘭對照

14、品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)和含量項(xiàng)，可以看出，不同申請人對頭孢唑蘭對照品的質(zhì)量要求有較大差別：二、仿制藥研究中易出現(xiàn)問題仿制藥研究過程中主要涉及到對照品的使用和保存。由于對照品使用目的不同，常常存在不同形式，如頭孢孟多酯鈉，美國USP提供三種形式對照品：頭孢孟多鋰、頭孢孟多鈉以及頭孢孟多酯鈉三種形式的對照品，應(yīng)該根據(jù)不同檢測需要選擇不同的對照品。但在實(shí)際使用中發(fā)現(xiàn)部分申請人混雜使用，將含量測定用對照品用于鑒別，鑒別用對照品用于含量測定。由于對照品存在形式不同，在含量測定時其折算方法也有所差別。有的申請人在計(jì)算過程中容易忽視成鹽而造成誤差。例如XXX制藥有限公司申報的頭孢西丁鈉，進(jìn)行結(jié)構(gòu)確證時使用的是

15、USP國家標(biāo)準(zhǔn)品頭孢西丁，不含鈉鹽，造成二者紅外圖譜以及C元素分析數(shù)據(jù)之間存在較大差異。大多抗生素標(biāo)準(zhǔn)品使用前不需前處理，對照品的含量均以濕品計(jì)算，不需要扣除水份。個別申請人將對照品干燥后使用，不能準(zhǔn)確定量。需要注意所選的藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)穩(wěn)定性和數(shù)量應(yīng)滿足整個實(shí)驗(yàn)計(jì)劃的需要，已超過穩(wěn)定期的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)不能使用。另外,美國藥典的對照品沒有有效期，但美國藥典會每2月一期的藥典論壇隨時發(fā)布最新批號的對照品，而在美國藥典實(shí)驗(yàn)室內(nèi)，不斷地對留樣對照品進(jìn)行監(jiān)控，保證對照品的有效。三、其他對于多數(shù)國內(nèi)已經(jīng)上市的抗生素，國內(nèi)已經(jīng)能夠提供官方來源的對照品，甚至還能提供部分雜質(zhì)對照品。但少數(shù)品種仍無法得到官方來源的對照品

16、，比如頭孢尼西，頭孢孟多鈉、頭孢匹羅，鹽酸頭孢甲肟等。另外，部分國內(nèi)無法提供，國外能夠購買到的藥物對照品和雜質(zhì)對照品，尚缺少相關(guān)管理規(guī)范，要進(jìn)一步加強(qiáng)管理和提高要求。四、小結(jié)通過上述情況分析，可以看出目前在新藥和仿制藥研究過程中，在對照品選擇、研究、標(biāo)化、使用和保存過程中仍存在部分問題。作為藥品的研究原則是保證用藥的安全有效，而基準(zhǔn)物質(zhì)（對照品/標(biāo)準(zhǔn)品）是藥物定性和定量的標(biāo)尺，對其的研究是保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。另一方面，雖然我國抗生素的研究已經(jīng)取得較大進(jìn)展，但是部分抗生素的質(zhì)量離發(fā)達(dá)國家要求尚有一定距離。對照品在各環(huán)節(jié)的正確利用對于保證產(chǎn)品的安全有效顯得尤為重要，應(yīng)該對該部分研究引起高度重視

17、，也建議申請人進(jìn)一步加強(qiáng)對該部分的研究工作。附件：部分申請人提供的對照品的使用情況：參考文獻(xiàn)：1 姚尚辰，胡昌勤.中國藥典2005年版抗生素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)概況，中國抗生素雜質(zhì),2005,30(12):7072 陳桂良,徐新元,依婷. 新藥開發(fā)研究過程中藥品標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的標(biāo)定上海計(jì)量測試2002,29(2)3 成雙紅,胡昌勤.中國藥典2000年版中抗生素標(biāo)準(zhǔn)品對照品介紹，中國藥事,2002,16(7) :4364 胡昌勤,成雙紅. 抗生素生物標(biāo)準(zhǔn)品的確定. 中國藥事,2001,15 (4) :263本文僅代表個人觀點(diǎn)，歡迎有興趣同仁進(jìn)行討論。發(fā)布日期 20071121 欄目 化藥藥物評價化藥質(zhì)量控制 標(biāo)題

18、 頭孢菌素常用合成起始原料及其質(zhì)控頭孢菌素質(zhì)量控制（三） 作者 蔣煜 部門 正文內(nèi)容 審評三部 蔣煜摘要：頭孢抗菌素藥物是我國市場用量很大的一類抗生素，其質(zhì)量一直受人關(guān)注。該類抗生素的關(guān)鍵合成起始原料7-ACA，7-ADCA，以及由上述原料衍生得到的其他合成中間體，其質(zhì)量高低直接決定了終產(chǎn)物的質(zhì)量高低。本文對頭孢菌素的幾種主要合成起始原料的合成方法，使用途徑以及質(zhì)控方法進(jìn)行了分析，以期引起申請人對起始原料質(zhì)量控制的重視。關(guān)鍵詞：頭孢菌素 起始原料 質(zhì)量控制一、概述頭孢菌素由于其抗菌譜廣，抗菌活性強(qiáng)，療效好，副作用小，耐酸、耐堿、耐內(nèi)酰胺酶，致敏性等特點(diǎn)，在世界各國得到廣泛應(yīng)用。作為頭孢菌素的關(guān)

19、鍵起始原料，7-ACA，7ADCA以及其他一些中間體每年的用量相當(dāng)巨大。但是由于生產(chǎn)技術(shù)等原因，國產(chǎn)上述起始原料，中間體的生產(chǎn)工藝、收率，以及質(zhì)量較國外產(chǎn)品都有一定差距，可能進(jìn)一步影響了頭孢菌素質(zhì)量的提高。目前，在頭孢菌素的申報資料中，在起始原料部分常見以下一些問題而導(dǎo)致補(bǔ)充資料：1、采用7-ACA或者7-ADCA等起始原料，但不提供起始原料的質(zhì)控方法，或者質(zhì)控方法相當(dāng)簡單，僅對水分、含量以及pH值等進(jìn)行控制。2、對某些頭孢菌素，采用某些中間體經(jīng)一兩步反應(yīng)合成，但不提供中間體的合成方法，質(zhì)控方法，或者質(zhì)控方法中簡單，對光學(xué)純度、溶液顏色、殘留溶劑以及雜質(zhì)等重要項(xiàng)目不做控制，缺少熔點(diǎn)，比旋度等重

20、要理化常數(shù)；3、個別申報資料中的數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)數(shù)據(jù)不相符合。由于存在上述各種問題，本文擬對該類抗生素幾種重要起始原料以及中間體的質(zhì)控方法進(jìn)行分析，以期申請人在研究和整理申報資料時，進(jìn)一步關(guān)注起始原料的質(zhì)量及其對終產(chǎn)物質(zhì)量的影響，逐步改進(jìn)起始原料的生產(chǎn)工藝，提高對起始原料的質(zhì)量要求。二、7-氨基頭孢烷酸（7-ACA）1、概述圖一 7- ACA結(jié)構(gòu)式：該起始原料主要用于合成頭孢曲松鈉、頭孢地嗪鈉、頭孢唑南鈉、頭孢特侖酯、頭孢克羅、頭孢呋辛鈉等。國內(nèi)采用化學(xué)法生產(chǎn)7- ACA的廠家有山東魯抗集團(tuán)、哈藥集團(tuán)、石藥集團(tuán)、福州抗生素制藥廠、福州抗生素藥業(yè)股份有限公司等。采用C 鋅鹽以硅酯法(或亞胺醚法)，經(jīng)多

21、步反應(yīng)裂解為7-ACA，其收率在85%左右，含量為96%。若以無水CPC 游離酸轉(zhuǎn)化為鈉鹽為原料，裂解收率可達(dá)90%以上。同時采用酶法生產(chǎn)7-ACA 的，有石藥集團(tuán)。圖二 7- ACA主要的合成方法2、質(zhì)量控制7-ACA是頭孢菌素的主要起始原料，其結(jié)構(gòu)中存在多個手性中心，直接關(guān)系到終產(chǎn)品的光學(xué)純度、有關(guān)物質(zhì)含量以及殘留溶劑量。需要重視該起始原料的質(zhì)量控制。由7-ACA引入最終產(chǎn)物的雜質(zhì)類別可能包括合成雜質(zhì)、殘留溶劑、聚合物、異構(gòu)體，以及降解生成的其它有關(guān)物質(zhì)等等。我國目前多采用化學(xué)間接裂解法制備7-ACA，分為四個工段:酯化、氯化、醚化和水解、精制工段。該法轉(zhuǎn)化率相對較低，7-ACA結(jié)晶液中雜

22、質(zhì)多，容易對對其結(jié)晶過程產(chǎn)生不利影響，造成產(chǎn)品晶形不好，含量低，色級高，穩(wěn)定性差。另一方面，由于7-ACA分子內(nèi)含有比較活潑的-內(nèi)酰胺環(huán)和游離的伯氨基，穩(wěn)定性相對較差。在長途運(yùn)輸以及室溫放置時間較長時，內(nèi)酰胺環(huán)可能開環(huán)，并進(jìn)一步形成高分子聚合物。進(jìn)而可能在合成過程中引入終產(chǎn)物。有研究顯示，7-ACA的紫外吸收的大小直接影響終產(chǎn)物頭孢噻肟鈉的色澤, 在同等工藝條件下, 用保存時間較長7-ACA 原料所做的頭孢噻肟鈉色澤不符合中國藥典的要求。分析其原因可能是由于7-ACA貯存時間太長導(dǎo)致少數(shù)7-ACA分解開環(huán), 使7-ACA紫外吸收系數(shù)升高。由此可見，在該原料內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)中增加顏色項(xiàng)目的必要性。下表為

23、10家可提供7-ACA原料的企業(yè)分別制定的7-ACA內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。從中可以看出：1、在該起始原料生產(chǎn)過程中，主要可能產(chǎn)生的雜質(zhì)包括頭7-ACA、去乙酰7-ACA以及去乙酰氧基7-ACA；2、不同企業(yè)執(zhí)行的7-ACA內(nèi)控質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)差別較大，部分企業(yè)未對其關(guān)鍵的質(zhì)控項(xiàng)目如比旋度、溶液澄清度與顏色、有關(guān)物質(zhì)等進(jìn)行控制。在申報資料中，我們常常發(fā)現(xiàn)申請人申報頭孢菌素時，遞交的7-ACA內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)顯得相對比較簡單，多僅對含量和酸度等少數(shù)幾項(xiàng)進(jìn)行了質(zhì)控。而對其它關(guān)鍵質(zhì)控項(xiàng)目不做控制。7-ACA的質(zhì)量控制項(xiàng)目（廠家名稱略去）三、7-氨基-3-去乙酰氧基頭孢烷酸（7-ADCA）圖三 7- ADCA結(jié)構(gòu)式：該起始原料

24、為白色或微帶黃色的結(jié)晶粉末，在水、乙醇或丙酮中不溶，溶于強(qiáng)酸或強(qiáng)堿中，-內(nèi)酰胺環(huán)氨基上羧基pKa值為2.42.7，氨基pKa值為7.27.4之間。其分子式為C8H10N2O3S，分子量為214。采用該起始原料合成的頭孢菌素包括頭孢氨芐、頭孢羥氨芐、頭孢拉定、頭孢克羅、頭孢他美酯等。7-ADCA的常規(guī)合成方法包括：7-ACA 還原法、生物發(fā)酵法和青霉素 G 鉀鹽合成法三種。目前國外多采用酶法進(jìn)行裂解反應(yīng)。在合成7-ADCA過程中，在擴(kuò)環(huán)過程容易產(chǎn)生7-ADCA異構(gòu)體（圖二）。當(dāng)使用含該雜質(zhì)的7-ADCA為起始原料合成各種頭孢菌素時，對下游產(chǎn)品質(zhì)量出現(xiàn)明顯影響。如，頭孢氨芐以及頭孢羥氨芐分別為7-

25、ADCA與苯甘氨酸和7-ADCA與對羥基苯甘氨酸縮合而成，研究顯示二者可能含有的雜質(zhì)包括7-ADCA、7-ADCA異構(gòu)體，頭孢氨芐異構(gòu)體（或頭孢羥氨芐異構(gòu)體）。因此如果7-ADCA質(zhì)控水平較低可能導(dǎo)致終產(chǎn)物有關(guān)物質(zhì)不合格時，需要再次進(jìn)行重結(jié)晶。一方面增加了純化的難度，另一方面也降低了產(chǎn)率，增加生產(chǎn)成本。目前，國內(nèi)產(chǎn)7-ADCA與進(jìn)口品相比含量偏低，異構(gòu)體明顯較高。另外，晶型多為無定型粉末，在顏色、吸光度、溶解性和穩(wěn)定性方面與國外品存在一定差距。使由此合成的頭孢氨芐，頭孢拉定等頭孢菌素質(zhì)量受到影響。圖四 7-ADCA異構(gòu)化的可能機(jī)理1：7-ADCA3異構(gòu)體；2：7-ADCA2異構(gòu)體；3：頭孢氨芐

26、3異構(gòu)體；4：頭孢氨芐2異構(gòu)體圖五 頭孢氨芐可能含有的雜質(zhì)：頭孢氨芐及其起始原料7-ADCA中的2，3異構(gòu)體，可以通過ODS梯度洗脫系統(tǒng)較好分離（圖五）。色譜柱：Supelcosil C18 10m，2504.6mm i.d；流動相A：磷酸銨（0.02mol/L，pH為6.5）-甲醇（96:4）；流動相B：磷酸銨（0.02mol/L，pH為8.0）-甲醇-乙腈（72：20：8）；流速1ml/min，室溫測定。表二某進(jìn)口品的質(zhì)控指標(biāo)四、7-苯乙酰胺-3-氯甲基頭孢烷酸（GCLE） 圖五 GCLE結(jié)構(gòu)式GCLE是繼7-ACA、7-ADCA之后合成頭孢菌素的又一主要中間體。目前以7-ACA 為中間體制備的頭孢菌素有60%以上可以用GCLE來生產(chǎn)，如頭孢唑啉、頭孢孟多、頭孢替安、