材料的血液相容性表征課件

1、前言前言血液相容性血液相容性 評價技術評價技術接觸活化接觸活化 補體激活補體激活凝血酶的產(chǎn)生凝血酶的產(chǎn)生 纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化 纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解 蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解 炎癥反應炎癥反應 血小板的激活血小板的激活 過去的十年里科技工作者對用于合成抗凝血生物材料的本體材料以及合成方法和途徑作了大量的研究,并取得了顯著的成果，即便如此,研究中也還存在諸如材料機械性能與抗凝血性能不能兼得之類的問題。為了更好的解決存在的問題,以期獲得完美的抗凝血生物材料,我們就需要對合成的材料進行全面的表征,通過表征結果反過來指導我們進行正確的實驗設計 三個水平上的反

2、應三個水平上的反應血小板血栓形成血小板血栓形成 凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)激活凝血系統(tǒng)、纖溶系統(tǒng)激活 免疫成份改變、血小板受體、免疫成份改變、血小板受體、ADF(二磷二磷酸腺苷酸腺苷)、前列環(huán)素釋放、前列環(huán)素釋放血液相容性血液相容性 評價技術評價技術接觸活化接觸活化 補體激活補體激活凝血酶的產(chǎn)生凝血酶的產(chǎn)生 纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化 纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解 蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解 炎癥反應炎癥反應 血小板的激活血小板的激活 材料與血液接觸后的凝血酶原時間材料與血液接觸后的凝血酶原時間(PTT) 活化部分凝血激酶時間活化部分凝血激酶時間(aPTT) 體外復鈣化時間

3、體外復鈣化時間(RTT) 血液相容性血液相容性 評價技術評價技術接觸活化接觸活化 補體激活補體激活凝血酶的產(chǎn)生凝血酶的產(chǎn)生 纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化 纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解 蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解 炎癥反應炎癥反應 血小板的激活血小板的激活 血小板受到刺激時會激活補體，而補體中血小板受到刺激時會激活補體，而補體中的蛋白成分即補體第三組分的蛋白成分即補體第三組分(C3)，補體第，補體第四組分四組分(C4)和補體第五組分和補體第五組分(C5)就會吸附就會吸附到異物表面，就會激活血小板，促進血小到異物表面，就會激活血小板，促進血小板的黏附和聚集，造成凝血板的黏

4、附和聚集，造成凝血 用用SDAPAGE凝膠電泳測定單個組分的含凝膠電泳測定單個組分的含量量 血液相容性血液相容性 評價技術評價技術接觸活化接觸活化 補體激活補體激活凝血酶的產(chǎn)生凝血酶的產(chǎn)生 纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化 纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解 蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解 炎癥反應炎癥反應 血小板的激活血小板的激活 正常的血液中不含凝血酶正常的血液中不含凝血酶(IIa)，當血液與異物接，當血液與異物接觸或者受到創(chuàng)傷時，血液里的凝血酶原觸或者受到創(chuàng)傷時，血液里的凝血酶原(II)在組織在組織凝血活酶凝血活酶xa的作用下就會生成凝血酶的作用下就會生成凝血酶 .它的含量它

5、的含量的增多會直接導致血液凝固速度加快的增多會直接導致血液凝固速度加快 . 酶免疫法酶免疫法(EIA) 凝血酶凝血酶(IIa) 酶聯(lián)免疫吸附實驗酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA) 凝血酶原片段凝血酶原片段和凝血酶抗凝血酶和凝血酶抗凝血酶 復合物復合物血液相容性血液相容性 評價技術評價技術接觸活化接觸活化 補體激活補體激活凝血酶的產(chǎn)生凝血酶的產(chǎn)生 纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化 纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解 蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解 炎癥反應炎癥反應 血小板的激活血小板的激活 血液凝固的最后步驟是纖維蛋白原血液凝固的最后步驟是纖維蛋白原(I)在凝在凝血酶血酶(IIa)的作用

6、下生成纖維蛋白凝塊的作用下生成纖維蛋白凝塊(Ia) 纖維蛋白記數(shù)器纖維蛋白記數(shù)器(fibrintimer) 對凝血酶時間的測定來判斷纖維蛋白原對凝血酶時間的測定來判斷纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化程度。和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化程度。血液相容性血液相容性 評價技術評價技術接觸活化接觸活化 補體激活補體激活凝血酶的產(chǎn)生凝血酶的產(chǎn)生 纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化 纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解 蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解 炎癥反應炎癥反應 血小板的激活血小板的激活 體內(nèi)的凝血過程和纖維蛋白溶解過程處于體內(nèi)的凝血過程和纖維蛋白溶解過程處于平衡狀態(tài)平衡狀態(tài) 測定凝血酶時間和毒蛇凝血酶時間

7、測定凝血酶時間和毒蛇凝血酶時間 纖維蛋白記數(shù)器纖維蛋白記數(shù)器 血液相容性血液相容性 評價技術評價技術接觸活化接觸活化 補體激活補體激活凝血酶的產(chǎn)生凝血酶的產(chǎn)生 纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化 纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解 蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解 炎癥反應炎癥反應 血小板的激活血小板的激活 蛋白質(zhì)的水解會導致血漿內(nèi)纖維蛋白纖維蛋白原降解產(chǎn)蛋白質(zhì)的水解會導致血漿內(nèi)纖維蛋白纖維蛋白原降解產(chǎn)物物(FDP)的增多，這些產(chǎn)物會占有血小板的纖維蛋白原黏的增多，這些產(chǎn)物會占有血小板的纖維蛋白原黏附點附點(GPIIbIIIa受體受體)使血小板表面使血小板表面GPIIbIlia受體不能

8、受體不能被正常利用，這將直接導致血小板參與凝血的功能的減退；被正常利用，這將直接導致血小板參與凝血的功能的減退；同時血小板同時血小板GPIIbIIIa受體被暴露于大量的激活劑中，中受體被暴露于大量的激活劑中，中性粒細胞活化釋放的彈性酶性粒細胞活化釋放的彈性酶(elastase)能直接水解能直接水解GPIIbIIIa受體，氧自由基使白細胞活化釋放的蛋白水解酶也受體，氧自由基使白細胞活化釋放的蛋白水解酶也能直接水解能直接水解GPIIbIIIa受體。因此，彈性酶釋放地越多，受體。因此，彈性酶釋放地越多，血小板可利用的受體越少，其被激活地可能也越小，因此，血小板可利用的受體越少，其被激活地可能也越小，

9、因此，可以通過測定彈性酶在血漿中的含量來間接判斷血小板是可以通過測定彈性酶在血漿中的含量來間接判斷血小板是否激活否激活 血液相容性血液相容性 評價技術評價技術接觸活化接觸活化 補體激活補體激活凝血酶的產(chǎn)生凝血酶的產(chǎn)生 纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化 纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解 蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解 炎癥反應炎癥反應 血小板的激活血小板的激活 正常的人體組織與器官同外界異物接觸時，正常的人體組織與器官同外界異物接觸時，會不同程度的發(fā)生炎癥反應會不同程度的發(fā)生炎癥反應 導致人體內(nèi)的導致人體內(nèi)的一些反映炎癥變化的因子在體液中含量的一些反映炎癥變化的因子在體液中含量的變

10、化，如白介素一變化，如白介素一1B(IL一一1B)和白介素一和白介素一6(IL一一6) 可用酶聯(lián)免疫吸附實驗可用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)測定。測定。血液相容性血液相容性 評價技術評價技術接觸活化接觸活化 補體激活補體激活凝血酶的產(chǎn)生凝血酶的產(chǎn)生 纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化纖維蛋白原和纖維蛋白間的轉(zhuǎn)化 纖維蛋白的溶解纖維蛋白的溶解 蛋白質(zhì)的水解蛋白質(zhì)的水解 炎癥反應炎癥反應 血小板的激活血小板的激活 判斷血小板是否發(fā)生激活可以通過觀察吸附判斷血小板是否發(fā)生激活可以通過觀察吸附在材料表面的血小板的保持在材料表面的血小板的保持(retention)、分散情、分散情況況(spreading)和測定血小板血栓球蛋白和測定血小板血栓球蛋白(-TG)，血小板第血小板第4因子因子(PF一一4)以及血小板受體抗拮劑以及血小板受體抗拮劑CD62(GMP一一140或或Pselection)和和CD63(糖蛋糖蛋白白53)的含量來判斷的含量來判斷 -TG、PF一一4、CD62及及CD63含量測定含量測定 酶免疫分析方法酶免疫分析方法(EIAs) 流式細胞術流式細胞術(Flow cytometric analysis) 從以上論述可看出對抗