中藥化學(xué) 第六章 黃酮類化合物

1、第六章第六章 黃酮類化合物黃酮類化合物 概概 述述1黃酮的含義：黃酮的含義： （1）經(jīng)典含義是指以2-苯基色原酮衍生的一類化合物的總稱，由于該類化合物大多呈淡黃色或黃色，且分子中多具酮基，因此稱為黃酮。 （2）現(xiàn)代含義是泛指二個苯環(huán)（A環(huán)和B環(huán)）通過三個碳原子相互連接而成的一系列化合物的總稱，即具有C6-C3-C6結(jié)構(gòu)的一類化合物的總稱。2 黃酮的生物活性黃酮的生物活性 第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類 分類依據(jù)：分類依據(jù)： 1、3-位羥基取代與否 2、三碳鏈?zhǔn)欠駱?gòu)成環(huán) 3、三碳鏈的氧化程度 4、B-環(huán)連接位置(2、3-位) 氧化型 還原型 第一節(jié)第一節(jié) 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類黃酮黃酮醇異黃酮

2、查耳酮黃烷3-醇類花色素類橙酮類二氫黃酮二氫黃酮醇二氫異黃酮二氫查耳酮黃烷3、4-二醇類汕酮高異黃酮類OOABC1234567823465 芹菜素（5，7，4-三OH黃酮） 木犀草素（5，7，3，4-四OH黃酮） 黃芩素(5，6，7-三OH黃酮)23OO橙皮苷（5，7，3 - 三OH，4-OCH3二氫黃酮） 甘草苷（甘草素-7-O-glu苷） 甘草素（7，4 二OH二氫黃酮） 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類黃酮黃酮二氫黃二氫黃酮酮 n黃酮醇黃酮醇23OOOH 山柰酚（5，7，4-三OH黃酮醇） 槲皮素（5，7，3，4-四OH黃酮醇） 楊梅素（5，7，3，4，5-五OH黃酮醇） 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類23O

3、OOH 二氫黃酮醇二氫黃酮醇二氫槲皮素（5，7，3，4-四OH二氫黃酮醇） 二氫桑色素（5，7，2，4-四OH二氫黃酮醇）23OO 大豆素（大豆素（7，4-二二OHOH異黃酮異黃酮） 大豆苷（大豆素大豆苷（大豆素-7-O-glc苷）苷） 葛根素（葛根素（7，4-二二OHOH，8-8- glc異黃酮異黃酮苷）苷）23OO紫檀素紫檀素魚藤酮魚藤酮 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類二氫異黃二氫異黃酮酮異黃酮異黃酮2345623465OOHOOHOHOHOHOglc紅花苷紅花苷查耳酮查耳酮 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類OOHOOHOHOHOglc梨根苷梨根苷二氫查耳酮二氫查耳酮OOH3OOHOHOHOHHHOH （+）兒

4、茶素）兒茶素OOHOH34OOHOHOHOHOHOHOH 無色飛燕草素?zé)o色飛燕草素 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類黃烷黃烷-3，4-二醇二醇黃烷黃烷3-醇醇34OOCH256723456OOHOHOHOHOHOH+34OOH+ 飛燕草苷元 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類橙酮橙酮花色素花色素硫磺菊素（6，3，4-三OH橙酮）OOOHOHOHOHglcOO異芒果素 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類OO 高異黃高異黃酮酮雙苯吡酮雙苯吡酮OOHOOOHHHCH2OHHOCHOHOHOH3 木脂素黃酮木脂素黃酮（水飛薊素）（水飛薊素） 結(jié)構(gòu)和分類結(jié)構(gòu)和分類 第二節(jié)第二節(jié) 黃酮類化合物的理化性質(zhì)黃酮類化合物的理化性質(zhì)一性狀一性狀 形態(tài)：

5、多為結(jié)晶性固體，少數(shù)為無定形粉末。形態(tài)：多為結(jié)晶性固體，少數(shù)為無定形粉末。 顏色：多為黃色顏色：多為黃色交叉共軛體系（電子交叉共軛體系（電子轉(zhuǎn)移、重排，共軛增轉(zhuǎn)移、重排，共軛增強(qiáng)，產(chǎn)生顏色的基礎(chǔ)）強(qiáng)，產(chǎn)生顏色的基礎(chǔ)） 助色團(tuán)（給系統(tǒng)提供助色團(tuán)（給系統(tǒng)提供電子，使顏色加深，電子，使顏色加深，尤其尤其7，4-位，輔助位，輔助作用）作用） 黃酮（灰黃黃酮（灰黃黃色）黃色） 二氫黃酮二氫黃酮黃酮醇（灰黃黃酮醇（灰黃黃色）黃色） 二氫黃酮醇二氫黃酮醇查耳酮（黃查耳酮（黃橙橙黃色）黃色） 二氫查耳酮二氫查耳酮 二氫異黃酮二氫異黃酮 黃烷醇類黃烷醇類 異黃酮（無或微黃色）異黃酮（無或微黃色）花色素類（顏色隨

6、花色素類（顏色隨pH而改變而改變 紅色（紅色（pH 8.8.5）OOOOOO47+交叉共軛體系交叉共軛體系 旋光性旋光性 取決于取決于 不對稱碳原子的有無不對稱碳原子的有無 有有 無無 所有黃酮苷（糖）所有黃酮苷（糖） 游離黃酮游離黃酮 游離黃酮游離黃酮 黃酮黃酮 二氫黃酮二氫黃酮 黃酮醇黃酮醇 二氫黃酮醇二氫黃酮醇 異黃酮異黃酮 二氫異黃酮二氫異黃酮 查耳酮（二氫查耳酮（二氫 ） 黃烷醇類黃烷醇類 橙酮橙酮 花色素類等花色素類等 *OHOOOO2*OO二旋光性：二旋光性：三溶解性三溶解性: 符合苷的溶解性規(guī)律。但水符合苷的溶解性規(guī)律。但水溶性與結(jié)構(gòu)的平面性、取代基團(tuán)溶性與結(jié)構(gòu)的平面性、取代基

7、團(tuán)的種類和數(shù)目等有一定關(guān)系。的種類和數(shù)目等有一定關(guān)系。 黃酮類化合物的理化性質(zhì)黃酮類化合物的理化性質(zhì)（1）分子的立體結(jié)構(gòu) 平面型分子 非平面型分子 黃酮 二氫類（C-環(huán)半椅式結(jié)構(gòu)） 黃酮醇 異黃酮（羰基與B-環(huán)立體障礙） 查耳酮 交叉共軛 分子間排列不緊密，水分子易于進(jìn)入 水溶度小 水溶度大 黃酮類化合物的理化性質(zhì)黃酮類化合物的理化性質(zhì)2OOHRH R=OH 二氫黃酮醇R=H 二氫黃酮（2）取代基團(tuán)的性質(zhì)、數(shù)目、連接位置 引入羥基，數(shù)目多，7、4-位，水溶度較大。 羥基甲基化（-OCH3）, 水溶度降低。 黃酮類化合物的理化性質(zhì)黃酮類化合物的理化性質(zhì)（1）三糖苷 雙糖苷 單糖苷 苷元（2）3

8、- O - 糖苷 7 - O - 糖苷（平面性分子）（3）花色素(平面性分子,離子型) 非平面性分子 平面性分子2 .黃酮苷黃酮苷(親水性親水性) 四酸堿性四酸堿性1酸性 （1）來源：酚羥基（ 數(shù)目、位置） （2）酸性規(guī)律 a、7，4-OH酸性強(qiáng)于其他位置羥基的酸性（處于羰基對位，羰基的共軛誘導(dǎo)）。 b、5-OH酸性最弱（處于羰基鄰位，形成分子內(nèi)氫鍵）。 c、酚羥基數(shù)目越多，酸性越強(qiáng)。 7，4-OH 7或4-OH 其他位-OH 5-OH NaHCO3 + - - - Na2CO3 + + - - NaOH + + + + 應(yīng)用：應(yīng)用：pH梯度法分離梯度法分離OOH+Cl2.堿性：堿性： -吡喃

9、酮環(huán)吡喃酮環(huán)1-氧原子氧原子 微弱堿性（孤對電子，接受質(zhì)子）微弱堿性（孤對電子，接受質(zhì)子） 僅溶于強(qiáng)的、濃酸僅溶于強(qiáng)的、濃酸+水水 （濃硫酸）（濃硫酸） 烊烊 鹽（呈色）鹽（呈色） 應(yīng)用應(yīng)用 初步鑒別黃酮母核類型：黃酮、黃酮醇初步鑒別黃酮母核類型：黃酮、黃酮醇 黃黃橙色，并有熒光橙色，并有熒光 二氫黃酮二氫黃酮 橙紅（冷）、紫紅（熱）橙紅（冷）、紫紅（熱） 查耳酮查耳酮 橙紅橙紅洋紅洋紅 異黃酮（二氫）異黃酮（二氫） 黃色黃色 橙酮橙酮 紅紅洋紅洋紅五顯色反應(yīng)五顯色反應(yīng) 1還原顯色反應(yīng)還原顯色反應(yīng)反應(yīng)類型反應(yīng)類型 鑒別特征鑒別特征 鑒別意義鑒別意義 備注備注 鹽酸鹽酸-鎂粉鎂粉 黃酮、二氫黃酮

10、、黃酮、二氫黃酮、 紅紅紫紅紫紅 黃酮類特征性黃酮類特征性 假陽性假陽性 反應(yīng)反應(yīng) 黃酮醇、二氫黃酮醇黃酮醇、二氫黃酮醇 紅紅紫紅紫紅 鑒別反應(yīng)鑒別反應(yīng) （花色素）（花色素） （最常用）（最常用） 查耳酮、橙酮、查耳酮、橙酮、 （-） 兒茶素類、異黃酮兒茶素類、異黃酮 （-） 四氫硼鈉四氫硼鈉 二氫黃酮、二氫黃酮醇二氫黃酮、二氫黃酮醇 紅紅紫紅紫紅 二氫黃酮類特有二氫黃酮類特有 還原反應(yīng)還原反應(yīng) 其它黃酮類其它黃酮類 （-） 鈉汞齊反應(yīng)鈉汞齊反應(yīng) 黃酮、二氫黃酮黃酮、二氫黃酮 紅紅 異黃酮、二氫異黃酮異黃酮、二氫異黃酮 紅紅 黃酮醇類黃酮醇類 黃黃淡紅色淡紅色 二氫黃酮醇類二氫黃酮醇類 棕黃色

11、棕黃色反應(yīng)類型反應(yīng)類型 鑒別特征及鑒別意義鑒別特征及鑒別意義 備備 注注 鋯鹽 枸櫞酸 鋯鹽鋯鹽-枸櫞酸枸櫞酸 3-OH或或3，5 -二二OH 黃色 黃色不褪 PPC(ZrOCl2) 5-OH 黃色褪去 示 氨性氯化鍶(SrCl2) 鄰二酚羥基鄰二酚羥基 綠、棕乃至黑色沉淀 三氯化鐵(FeCl3) 酚羥基酚羥基 紫、藍(lán)、綠三氯化鋁 3-OH，4-C=O 黃色 （AlCl3） 5-OH，4-C=O 鮮黃色熒光 PPCTLC 鄰二酚羥基鄰二酚羥基 （4或7，4黃酮醇，天藍(lán)色熒光）3. 硼酸顯色反應(yīng)硼酸顯色反應(yīng) 硼酸硼酸 5 - 羥基，羥基，4 - 羰基黃酮羰基黃酮 黃色，綠色熒光（草酸液）黃色，綠

12、色熒光（草酸液） （H3BO3） 6-羥基，羥基，4 - 羰基查耳酮羰基查耳酮 黃色，無熒光（枸櫞酸）黃色，無熒光（枸櫞酸）4. 堿性試劑反應(yīng)堿性試劑反應(yīng)反應(yīng)類型反應(yīng)類型 鑒別特征及鑒別意義鑒別特征及鑒別意義 備備 注注氫氧化鈉溶液氫氧化鈉溶液 黃酮黃酮 黃黃 橙色橙色 查耳酮、橙酮查耳酮、橙酮 紅紅 紫紅紫紅 二氫黃酮二氫黃酮 黃黃橙色（冷）橙色（冷） 深紅深紅 紫紅紫紅 （較長時間或加熱）（較長時間或加熱） 母核類型鑒別母核類型鑒別 稀氫氧化鈉稀氫氧化鈉 鄰三酚羥基黃酮類鄰三酚羥基黃酮類 暗綠暗綠藍(lán)綠色纖維狀藍(lán)綠色纖維狀 鄰三酚羥基鄰三酚羥基氨蒸氣或碳酸鈉溶液氨蒸氣或碳酸鈉溶液 顏色變化顏

13、色變化 TLC、PPC五氯化銻五氯化銻 (SdCl5)： 查耳酮特征性顯色反應(yīng)查耳酮特征性顯色反應(yīng) (紅或紫紅色沉淀紅或紫紅色沉淀) 黃酮、二氫黃酮、黃酮醇類呈橙色。黃酮、二氫黃酮、黃酮醇類呈橙色。Gibb，s反應(yīng)：酚羥基對位活潑質(zhì)子的特征（藍(lán)反應(yīng)：酚羥基對位活潑質(zhì)子的特征（藍(lán) 或藍(lán)綠色）或藍(lán)綠色） 5與五氯化銻反應(yīng)與五氯化銻反應(yīng)6其他顯色反應(yīng)其他顯色反應(yīng) 一提取方法 溶劑法第三節(jié)第三節(jié) 黃酮類化合物的提取、分離黃酮類化合物的提取、分離溶劑法關(guān)鍵: 溶劑的選擇 溶劑選擇依據(jù): 黃酮類成分的存在狀態(tài) （游離、苷）及溶解性 提取方法選擇依據(jù): 溶劑的溶解性能 （煎煮法、滲漉法、回流法等） 溶劑 提

14、取原理 游離黃酮 黃酮苷 備 注 乙醇 溶解范圍廣 + + （甲醇） 苷、苷元均可溶 （9095%） ( 60%） 甲醇毒性大沸水 多糖苷易于水 + 成本低、安全,水溶性雜質(zhì)多 堿性水或 稀氫氧化鈉溶出能力強(qiáng) 堿性乙醇 酚羥基的酸性 + + 石灰水除雜質(zhì)效果好黃酮類化合物的提取黃酮類化合物的提?。ㄒ唬┤軇┹腿》ǎㄒ唬┤軇┹腿》?黃酮與雜質(zhì)黃酮與雜質(zhì) 分離依據(jù)：成分之間分離依據(jù)：成分之間 苷與苷元苷與苷元 之間的極性（分配系數(shù)之間的極性（分配系數(shù)K）差異）差異 苷元與苷元苷元與苷元 分離工藝：分離工藝： 原料的提取濃縮液（水溶液）原料的提取濃縮液（水溶液） 依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水飽和正

15、丁醇萃取依次以石油醚、乙醚、乙酸乙酯、水飽和正丁醇萃取 石油醚液石油醚液 乙醚液乙醚液 乙酸乙酯乙酸乙酯 水飽和正丁醇水飽和正丁醇 母液母液（脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)） 回收回收 回收回收 減壓回收減壓回收 （水溶性雜質(zhì)（水溶性雜質(zhì)) 苷元苷元 單糖苷單糖苷 多糖苷多糖苷 （二）（二）pH梯度萃取法梯度萃取法 分離依據(jù)：游離黃酮類化合物的酸性差異分離依據(jù)：游離黃酮類化合物的酸性差異 分離工藝：總游離黃酮的乙醚液分離工藝：總游離黃酮的乙醚液 依次以依次以5%NaHCO3 、5%Na2CO3、0.2 % NaOH、 4% NaOH萃取萃取 5%NaHCO3液液 5%Na2CO3液液 0.2 % N

16、aOH液液 4% NaOH液液 母液母液 酸化酸化 （脂溶性雜質(zhì)）（脂溶性雜質(zhì)）7，4-OH黃酮黃酮 7或或4-OH黃酮黃酮 一般一般-OH黃酮黃酮 5-OH黃酮黃酮（三）柱色譜法（三）柱色譜法 吸附原理 異黃酮、二氫黃酮（醇）、 氯仿-甲醇不同比例（105，活化） 高度甲基化或乙?；S酮（醇） 混合溶劑洗脫 （極性小）分配原理 多羥基黃酮醇或黃酮苷類 氯仿-甲醇-水 （加水失活或不活化） （極性大） （80 ：20 ：1）等比例1硅膠柱色譜硅膠柱色譜2氧化鋁柱色譜（少）氧化鋁柱色譜（少） 具有3-OH或5-OH 、4-羰基及鄰二酚羥基黃酮類化合物與鋁離子絡(luò)和而被牢固吸附，難于洗脫。2聚酰胺色

17、譜聚酰胺色譜吸附規(guī)律：與黃酮類化合物酚羥基的數(shù)目、位置及介質(zhì)有關(guān)。吸附規(guī)律：與黃酮類化合物酚羥基的數(shù)目、位置及介質(zhì)有關(guān)。（1）酚羥基數(shù)目越多，吸附能力越強(qiáng)。（2）酚羥基數(shù)目相同的情況下，酚羥基所處的位置有利于形成分子內(nèi)氫鍵，吸附能力減弱。 3-OH或5-OH黃酮的吸附力小于其他位置-OH黃酮； 鄰二酚羥基黃酮的吸附力弱于間位或?qū)ξ环恿u基黃酮（3）分子內(nèi)芳香化程度越高，吸附力越強(qiáng)。 查耳酮 二氫黃酮 黃酮醇 黃酮 二氫黃酮醇 異黃酮（4）與介質(zhì)的關(guān)系：吸附力 水（中） 甲醇、乙醇（濃度 由低到高） 堿性溶劑（氫鍵吸附）（氫鍵吸附）洗脫規(guī)律：與吸附規(guī)律正好相反，即吸附能力越強(qiáng)，越難洗脫洗脫規(guī)律：與

18、吸附規(guī)律正好相反，即吸附能力越強(qiáng)，越難洗脫 聚酰胺聚酰胺“雙重色譜雙重色譜”原理原理 正相色譜正相色譜 反相色譜反相色譜聚酰胺：極性固定相（極性酰胺基團(tuán)） 非極性固定相（非極性脂肪鏈）洗脫劑：有機(jī)溶劑（氯仿-甲醇，極性小） 含水溶劑（甲醇-水，極性大） 先洗脫：游離黃酮（苷元，極性?。?苷（極性大）（柱色譜分離） Rf值： 苷元 苷 苷元 雙糖苷 單糖苷 苷元 1-OH 2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黃酮 4 . 葡聚糖凝膠柱色譜葡聚糖凝膠柱色譜“雙重色譜雙重色譜”原理原理常用洗脫劑：常用洗脫劑： 堿水（堿水（0.1mol / L NH3.H2O） 鹽水（鹽水（0.5mol / L

19、NaCl） 醇或醇水不同比例。醇或醇水不同比例。 應(yīng)用：適用于各種黃酮類化合物的分離應(yīng)用：適用于各種黃酮類化合物的分離 原理：反相柱色譜（黃酮類化合物極性大）原理：反相柱色譜（黃酮類化合物極性大） 固定相：固定相：ODS 流動相：水流動相：水-乙晴，水與甲醇不同比例乙晴，水與甲醇不同比例6高效液相色譜法（高效液相色譜法（HPLC） 第四節(jié)黃酮類化合物的檢識第四節(jié)黃酮類化合物的檢識一理化檢識一理化檢識 1.顏色：多呈黃色 2.母核檢識：鹽酸-鎂粉反應(yīng)-黃酮、黃酮醇、二氫黃酮 二氫黃酮醇（+） 四氫硼鈉反應(yīng)-二氫黃酮（醇）類（+） 五氯化銻-查耳酮類（+） 3.取代基團(tuán)檢識：鋯鹽-枸櫞酸反應(yīng)-3-

20、OH（+） 5-OH（-） 黃酮鑒別 氨性氯化鍶反應(yīng)-鄰二酚羥基（+） （一）紙色譜（PPC） 原理：分配原理 適用范圍：游離黃酮（苷元）及黃酮苷的分離鑒別 雙相色譜雙相色譜 第I向 醇性展開劑 第II向 水性展開劑（BAW、TBA、水飽和正丁醇） （28%HAc、3%NaCl、1%HCl） 正相色譜正相色譜 反相色譜反相色譜固定相（水）極性 流動相 （ *有認(rèn)為是吸附原理）？Rf規(guī)律：極性小的化合物Rf大 極性大的化合物Rf大 苷元（以上） 單糖苷 雙糖苷（以下） 苷元中，平面型分子 非平面型分子 Rf規(guī)律與左邊相反 母核相同，2-OH 3-OH 4-OH 5- OH黃酮 苷元的分離鑒別 黃

21、酮苷及花色素類 PPC色譜1硅膠薄層色譜 極性較小的黃酮類化合物（黃酮苷元）2聚酰胺薄層色譜 可用于黃酮苷及游離黃酮的分離 鑒別，其色譜行為可參考聚酰胺柱色譜。3纖維素薄層色譜分配原理，其色譜行為可參考紙色譜。 （二）薄層色譜（二）薄層色譜（TLC） 各種色譜的檢識：各種色譜的檢識： 日光下觀察多數(shù)黃酮有黃色斑點(diǎn) 紫外光下觀察多數(shù)黃酮呈黃綠色熒光斑點(diǎn) 氨蒸氣熏多數(shù)黃酮有顏色變化 噴顯色劑（2%AlCl3甲醇液）多數(shù)黃酮黃色變深，熒光加強(qiáng)第五節(jié)第五節(jié) 黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)研究黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)研究一一. 紫外可見光譜在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)測定中的應(yīng)用紫外可見光譜在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)測定中的應(yīng)用 一般鑒定

22、程序：一般鑒定程序： 1、先測定在甲醇中的光譜。 2、再測定在加入各種診斷試劑后的紫外光譜。 3、如為苷類，則可水解或甲基化后再水解，并測定苷元或其衍生物的紫外光譜。 4、將以上各種光譜數(shù)據(jù)（或光譜圖）進(jìn)行對比分析，即可獲得有關(guān)結(jié)構(gòu)信息。 黃酮（醇）： 帶 II、帶I均強(qiáng)母核光譜特征 二氫黃酮類、異黃酮類：帶 II強(qiáng)、 帶I弱 母核的推斷母核的推斷 （甲醇） 查耳酮、橙酮：帶 II弱、帶I強(qiáng) 取代基：OH等，為助色團(tuán) 依紅移規(guī)律推斷取代基團(tuán)依紅移規(guī)律推斷取代基團(tuán) 甲醇鈉：強(qiáng)堿，所有酚羥基解離 醋酸鈉：堿性弱，酸性強(qiáng)的酚羥基解離 加入診斷試劑 醋酸鈉/硼酸：鄰二酚羥基絡(luò)和 相應(yīng)吸收峰紅移 三氯化

23、鋁：3-OH，4-羰基 5-OH，4-羰基 絡(luò)和 鄰二酚羥基OOROOROOR+黃酮類化合物在甲醇中紫外光譜特征黃酮類化合物在甲醇中紫外光譜特征 苯甲酰系統(tǒng)苯甲酰系統(tǒng) 桂皮酰系統(tǒng)桂皮酰系統(tǒng)（帶（帶II 220280nm） （帶（帶1 300400nm） 黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的交叉共軛體系黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的交叉共軛體系OOBOORAB 二氫黃酮（醇） 異黃酮（二氫） （由（由B環(huán)產(chǎn)生的桂皮酰系統(tǒng)不存在，帶環(huán)產(chǎn)生的桂皮酰系統(tǒng)不存在，帶I弱，帶弱，帶II強(qiáng)）強(qiáng)） 黃酮類化合物在甲醇中紫外光譜特征黃酮類化合物在甲醇中紫外光譜特征黃酮類化合物母核黃酮類化合物母核UV吸收特征吸收特征 母核類型母核類型 帶

24、帶II （nm） 帶帶I （nm） 備注備注黃酮 250280（強(qiáng)） 304350（強(qiáng)） 典型的交叉共軛系統(tǒng)黃酮醇（3-OH取代） 328357（強(qiáng)） 3-OH供電減弱，使黃酮黃酮醇（3-OH游離） 358385（強(qiáng)） 3-OH供電共軛，帶1紅移 異黃酮 245278（強(qiáng)） ( sh ) 桂皮酰系統(tǒng)破壞 二氫黃酮（醇） 270295（強(qiáng)） ( sh )查耳酮 220270（弱） 340390（強(qiáng)）橙酮 230270（弱） 370430（強(qiáng)） 花青素（苷） 270280 465560（可見區(qū)）（2）取代基團(tuán)對共軛吸收的影響n黃酮類核中引入-OH（酚羥基）等供電基團(tuán)，使共軛程度增強(qiáng)，相應(yīng)的吸收峰紅

25、移。 一般，A環(huán)引入 OH，帶II紅移，B環(huán)引入 OH帶I紅移。n羥基甲基化或苷化后，原酚羥基的供電能力下降，引起相應(yīng)的吸收峰紫移。 3-OH甲基化或苷化，帶I紫移， 5-OH（與羰基形成分子內(nèi)氫鍵）甲基化，帶I、帶II均紫移515nm， 4-OH甲基化，帶I紫移310nm。n羥基乙?；螅阴；奈娮饔?，使原來酚羥基對共軛系統(tǒng)的供電能力消失，對光譜的影響亦將完全消失。 黃酮黃酮 、黃酮醇加入診斷試劑后吸收峰（帶、黃酮醇加入診斷試劑后吸收峰（帶I、帶、帶II）的位移規(guī)律）的位移規(guī)律診斷試劑診斷試劑 位移規(guī)律位移規(guī)律 歸歸 屬屬 NaOMe 帶I紅移4060nm，強(qiáng)度不降 示有4-OH 帶I紅

26、移5060 nm，強(qiáng)度下降 示有3-OH、但無4-OHNaOAc 帶II紅移520nm 示有7-OH NaOAc / H3BO3 帶I紅移1230nm 示B環(huán)有鄰二酚羥基 帶II紅移510nm 示A環(huán)有鄰二酚羥基 （不包括5，6-鄰二酚羥基） 診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬AlCl3 及AlCl3/HCl AlCl3/HCl譜圖 = AlCl3譜圖 示無鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 AlCl3譜圖 示有鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜較AlCl3譜 帶I紫移3040 nm 示B環(huán)有鄰二酚羥基 若紫移20 nm 示B環(huán)有鄰三酚羥基 帶帶I紫移5065 nm 示A、B環(huán)均可能有鄰二酚羥基 AlC

27、l3/HCl譜圖 = MeOH譜圖 示無3-及/或5-OH無鄰二酚羥基 AlCl3/HCl譜圖 MeOH譜圖 示可能有3-及/或5-OH 帶帶I紅移3555 nm 示只有5-OH 無3-OH 僅紅移1720 nm 示除5-OH外，尚有6-含氧取代 紅移5060nm 示可能有3-OH及5-OH 異黃酮、二氫黃酮（醇）的吸收峰（帶異黃酮、二氫黃酮（醇）的吸收峰（帶II）位移規(guī)律）位移規(guī)律NaOAc 異黃酮 帶帶II紅移620nm 示有7-OH 二氫黃酮（醇） 帶帶II紅移3437nm 示有5，7-二OH 帶帶II紅移5158nm 示有7-二OHAlCl3/HCl AlCl3/HCl譜圖與甲醇中的譜

28、圖比較譜圖與甲醇中的譜圖比較 異黃酮異黃酮 帶帶II紅移紅移1014nm 示有示有5-OH 二氫黃酮（醇）二氫黃酮（醇） 帶帶II紅移紅移2026nm 示有示有5-OH 診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬查耳酮、橙酮的吸收峰（查耳酮、橙酮的吸收峰（ 帶帶I ）位移規(guī)律）位移規(guī)律 NaOMe 查耳酮 帶帶I紅移60100nm，強(qiáng)度增加 示有4-OH 帶帶I紅移60100nm，強(qiáng)度不增加 示有2-或4-OH 橙酮 帶帶I紅移7095nm， 示有或6-OH AlCl3 及AlCl3/HCl 查耳酮、橙酮 （ AlCl3較 AlCl3/HCl譜圖） 帶帶I 紅移4070nm 示有B-環(huán)鄰二酚羥基 查耳酮（ A

29、lCl3/HCl譜圖較MeOH譜圖） 帶帶I 紅移4060nm 示有2- OH診斷試劑 位移規(guī)律 歸 屬 二二1H-NMR譜在黃酮結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用譜在黃酮結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用n測定溶劑 ： CCl4 - 樣品需制備成三甲基硅醚化衍生物，不能顯示羥基質(zhì)子特征，目前已基本不被采用。 DMSO-d6 - 樣品（苷、苷元）不需制備成衍生物，可以顯示各酚羥基質(zhì)子特征。 A 環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子 B環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子 C環(huán)質(zhì)子環(huán)質(zhì)子 糖上質(zhì)子糖上質(zhì)子 取代基團(tuán)質(zhì)子取代基團(tuán)質(zhì)子 芳環(huán)質(zhì)子芳環(huán)質(zhì)子 芳環(huán)質(zhì)子芳環(huán)質(zhì)子 與類型有關(guān)與類型有關(guān) 端基質(zhì)子端基質(zhì)子 -OH、-CH3、 其它質(zhì)子其它質(zhì)子 -OCH3、-OCOCH3 黃酮類

30、化合物各質(zhì)子的信號特征（黃酮類化合物各質(zhì)子的信號特征（、峰形狀、峰形狀、J、峰面積）、峰面積）66 8ppm 8ppm，B-HB-H位于較低場位于較低場5-H5-H最大（羰基去屏蔽）最大（羰基去屏蔽）A-HA-H7.9 5-OH 12.40 (12.99) 7.9 5-OH 12.40 (12.99) B-H 7.9 7-OH 10.93 1H-NMR譜在黃酮結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用譜在黃酮結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用J鄰鄰 6 9Hz 3-OH J間間 2 3 Hz 4-OH (10.01)(10.01)J對對 0 1 Hz（不計）（不計） 3-OH (9.42)(9.42)峰形狀及峰形狀及J與取代有關(guān)與取代有

31、關(guān) -OCH33.5 3.5 4.10(3H s)4.10(3H s) 6-CH32.27(3H s) 8-CH32.45(3H s)2.45(3H s)A-環(huán)環(huán) B-環(huán)環(huán) -OCOCH3 (羥基乙酰化羥基乙?；?5，7-二二OH 4- 氧取代氧取代 糖上糖上2.10(3H s)2.10(3H s)7-OH取代取代 3，4- 氧取代氧取代 苷元苷元2.50(3H s)2.50(3H s) 3，4，5- 氧取代 gluglu H-1 位于低場 較大5.70ppm 依依、峰形（、峰形（d、dd）、）、J 苷元苷元-3-O-glu 左右（左右（1H.d.1H.d.） J J與構(gòu)型有關(guān)與構(gòu)型有關(guān)Jaa

32、=6Jaa=69Hz9Hz， Jae=2Jae=23 3A、B-環(huán)取代方式推斷環(huán)取代方式推斷 苷元苷元-5、7、4-O-glu 左右左右 rha C-CH3 0.8 0.8 1.20 ( d/m ) 1.20 ( d/m )黃酮黃酮 H-3 （1H，s）黃酮醇黃酮醇 C-環(huán)無質(zhì)子環(huán)無質(zhì)子異黃酮異黃酮 H-2 7.6 7.6 （1H，s）受受1-氧原子和氧原子和4-羰基吸電影羰基吸電影 響響,較大較大二氫黃酮二氫黃酮 H-2 中心中心5.2(1H,dd.Jaa =11.0Hz, Jae = 5.0Hz)5.2(1H,dd.Jaa =11.0Hz, Jae = 5.0Hz) 兩個兩個H-3 H-3

33、 中心偕中心偕 = =17.0Hz,17.0Hz, Jaa =11.0Hz) Jaa =11.0Hz)偕偕 = = 17.0Hz, Jae = 5.0Hz) 17.0Hz, Jae = 5.0Hz) 二氫黃酮醇二氫黃酮醇 H-2 5.0.0（1H，d. Jaa） H-3 4.3.3（1H，d. Jaa） 查耳酮查耳酮 H-a 6.7 a 6.7 反反=17.0Hz)=17.0Hz) H- 7.0 7.0 反反=17.0Hz)=17.0Hz) 橙酮橙酮 =CH 6.5 6.5 6.70.70（1H，s） 黃黃 酮酮 黃黃 酮酮 醇醇 異異 黃黃 酮酮 橙橙 酮酮OOHCOOOHCOOHC3223

34、OOCH324564567CC2332C23OOHHHOOHOHHOHH45626a二二 氫氫 黃黃 酮酮 二二 氫氫 黃黃 酮酮 醇醇 查查 耳耳 酮酮 1H-NMR譜在黃酮結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用譜在黃酮結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用OOOHOROOOHOHOHHABCOH5AOHOHA67857OR23564OROR23564OROROR235641BBBCH2OH B-H 6. 57. 9ppm, 位于較低場位于較低場 26-H 大大(2H,d. 8.0Hz) 35-H小小(2H,d. 8.0Hz) 2-H7.20(1H,d.2.0Hz)-H7.20(1H,d.2.0Hz) （1） （2） 5 7.1(d.

35、8.0Hz)7.1(d.8.0Hz)（1）A-H 6. 3 7. 1 ppm（一（一-OH供電）供電） 6-H7.9(dd.2.0;8.0Hz)-H7.9(dd.2.0;8.0Hz) 5-H 8. 0 (1H,d. J=8.0Hz) * 3、4-OR取代不同，取代不同， 6-H (1H,dd, J=8. 0;2. 0Hz) -2、6可能顛倒可能顛倒 8-H (1H,d, J=2. 0Hz) （2） A-H 5. 7 6. 9 ppm (二二-OH供電供電) 26-H 6.57.5 (2H,s) 6-H 較小較小 (1H,d. J=2. 5Hz) 或分別以雙峰（）或分別以雙峰（） 8-H 較大較

36、大 (1H,d. J=2. 5Hz) 出現(xiàn)出現(xiàn)取代基團(tuán)取代基團(tuán)三三13C-NMR譜在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用譜在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用 推斷黃酮類化合物的骨架類型推斷黃酮類化合物的骨架類型 （一）黃酮類化合物骨架類型的判斷（一）黃酮類化合物骨架類型的判斷 利用13C-NMR譜中黃酮類化合物的中央三個碳核信號的位置以及它們在偏共振去偶譜中的裂分情況 13C-NMR譜中黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的中央三碳核的信號特征譜中黃酮類化合物結(jié)構(gòu)中的中央三碳核的信號特征 C=O C-2（或（或C-） C-3（或（或C-a a） 歸屬歸屬 174.5184.0 (s) 160.5163.2 (s) 104.

37、7111.8 (d) 黃酮類黃酮類 149.8155.4 (d) 122.3125.9 (s) 異黃酮類異黃酮類 147.9 (s) 136.0 (s ) 黃酮醇類黃酮醇類 182.5182.7(s) 146.1147.7(s) 111.6111.9 (d) 橙酮類橙酮類 ( =CH- )188.0197.0 (s) 136.9145.4 (d) 116.6128.1(d) 查耳酮類查耳酮類 75.080.3 (d) 42.844.6 (t) 二氫黃酮類二氫黃酮類 82.7(d) 71.2 (d) 二氫黃酮醇類二氫黃酮醇類178.4163.2153.6133.7129.0126.3OO131.

38、8131.6125.2125.7124.0118.1107.6129.0126.3（二）黃酮類化合物取代圖式的確定（二）黃酮類化合物取代圖式的確定 利用黃酮類化合物中芳香碳原子 （A-環(huán)碳原子、B-環(huán)碳原子）的信號特征 確定取代基的取代圖式黃酮母核黃酮母核13C-NMR信號歸屬信號歸屬推斷取代基（推斷取代基（X）的連接位置）的連接位置 依取代基的位移效應(yīng)規(guī)律依取代基的位移效應(yīng)規(guī)律 ( B-環(huán)環(huán)) X Zi Zo Zm Zp -OCH3確定確定5，7-二二OH取代黃酮圖式取代黃酮圖式 依依5，7-二二OH黃酮中的黃酮中的C6和和C8信號特征信號特征 90100ppm范圍內(nèi)范圍內(nèi) C6 C8 確定

39、糖與苷元的連接位置確定糖與苷元的連接位置 依苷化位移規(guī)律依苷化位移規(guī)律 苷元（酚羥基）：苷元（酚羥基）： a a-C移向高場，移向高場，降低降低 鄰、對位鄰、對位-C-C移向低場，移向低場，增大增大 糖（酚苷）：糖（酚苷）： 端基碳原子端基碳原子四四MS在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用在黃酮類化合物結(jié)構(gòu)研究中的應(yīng)用M + . M + . 黃酮類化合物黃酮類化合物MS特征特征 測定分子量（測定分子量（M+） 取代基團(tuán)推斷（碎片離子峰）取代基團(tuán)推斷（碎片離子峰）苷元（極性?。┸赵O性?。?苷（極性大、難氣化、與熱不穩(wěn)定）苷（極性大、難氣化、與熱不穩(wěn)定） EI-MS（以前）：苷看不到（以前）：苷看不到,須制備成衍生物（須制備成衍生物（PM等）方能測得很弱的等）方能測得很弱的 方能測得很弱的苷元峰為基峰。方能測得很弱的苷元峰為基峰。 FD-MS、FAB-MS、ESI-MS（目前）：可測得分子離子峰（目前）：可測得分子離子峰 或準(zhǔn)分子離子峰或準(zhǔn)分子離子峰M+1、M+23等。等。EI-MS裂解規(guī)律裂解規(guī)律1分子離子峰為基峰分子離子峰為基峰 用于測定分子量。用于測定分子量