血液質(zhì)量控制檢查方法

1、血液質(zhì)量控制檢查方法F.1 外觀F.1.1檢查方法：于光線明亮處目視檢查F.2 標(biāo)簽F.2.1檢查方法：于光線明亮處目視檢查F.3容量F.3.1 檢查方法F.3.1.1 稱量血袋重量F.3.1.2計(jì)算公式血液容量（mL）血袋質(zhì)量（g）空袋質(zhì)量（g）血液密度（g /mL）注：如果適用，還應(yīng)減去抗凝劑容量。F.4 無(wú)菌試驗(yàn)F.4.1檢測(cè)方法無(wú)菌試驗(yàn)方法遵從中華人民共和國(guó)藥典（2015年版）三部“無(wú)菌檢查法”要求。使用細(xì)菌培養(yǎng)儀進(jìn)行無(wú)菌試驗(yàn)應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明書(shū)。F.4.2注意事項(xiàng)留取血液樣本前，應(yīng)當(dāng)將血袋中的血液充分混勻，混勻時(shí)動(dòng)作應(yīng)輕柔，不能產(chǎn)生泡沫，也不能使其溶血。F.5 Hb測(cè)定檢測(cè)方法見(jiàn)全國(guó)

2、臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第4版）“血紅蛋白測(cè)定”。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.6 游離Hb測(cè)定檢測(cè)方法參照全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第4版）“血漿游離 紅蛋白測(cè)定”。F.7 血細(xì)胞比容檢測(cè)方法見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程（第4版）“紅細(xì)胞比容”。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.8儲(chǔ)存期末溶血率F.8.1檢測(cè)方法在血液儲(chǔ)存期的最后一周內(nèi)取樣，按F.5、F.6和F.7測(cè)定總血紅蛋白、上清游離血紅蛋白、血細(xì)胞比容。F.8.2計(jì)算公式溶血率（%）100%（1 血細(xì)胞比容） 血漿或上清液游離血紅 蛋白濃度總血紅蛋白濃度F.9白細(xì)胞殘留量F.9.1檢測(cè)方法用留取的去白細(xì)胞血液標(biāo)本進(jìn)行殘余白

3、細(xì)胞檢測(cè)。材料：大容量Nageotte血細(xì)胞計(jì)數(shù)盤(pán)、顯微鏡、結(jié)晶紫染色 液。結(jié)晶紫染色液配制儲(chǔ)存液配制：250mg結(jié)晶紫溶于250ml的50%醋酸溶液中 室溫放置可保存6個(gè)月 使用液配制：1份儲(chǔ)存液加9份3%的醋酸溶液，最終濃度為：結(jié)晶紫0.01mg%（ W/V），醋酸7.7% （V/V ）。然后使用0.22過(guò)濾器過(guò)濾。計(jì)數(shù)方法：50卩l(xiāng)血液標(biāo)本加入450卩l(xiāng)使用液中，充分混勻。 在Nageotte計(jì)數(shù)池中加入上述混合液，將計(jì)數(shù)池置于帶蓋潮濕容器中，于室溫放置 1015分鐘。在200倍顯微鏡下對(duì) 計(jì)數(shù)池中兩個(gè)計(jì)數(shù)區(qū)（每區(qū)有20個(gè)長(zhǎng)方形格）的白細(xì)胞計(jì)數(shù)，40行相當(dāng)于50卩l(xiāng)。計(jì)算：I（1區(qū)門(mén)細(xì)胞

4、計(jì)數(shù)值£區(qū)口細(xì)胞計(jì)數(shù)值）X 10I細(xì)腕數(shù)加1十、Nageotte計(jì)數(shù)盤(pán)|憂囚岷方格2|口氓方格公式中：10為稀釋倍數(shù)，50卩l(xiāng)為計(jì)數(shù)池2個(gè)區(qū)的容積每袋中殘余白細(xì)胞數(shù)按下列公式計(jì)算：殘余白細(xì)胞數(shù)/袋 =白細(xì)胞數(shù)/ml X去白細(xì)胞血液容量（ml） /袋或使用其它經(jīng)驗(yàn)證可使用的方法。F.10 紅細(xì)胞計(jì)數(shù) 檢測(cè)方法見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 （第 4 版）“紅細(xì)胞計(jì) 數(shù)”。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.11 血小板計(jì)數(shù) 檢測(cè)方法見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 （第 4 版）“血小板計(jì) 數(shù)”。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.12 血漿蛋白測(cè)定 檢測(cè)方法見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程

5、（第 4 版）“血清總蛋 白的測(cè)定”。F.13 上清液蛋白含量 檢測(cè)方法參照全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 （第 4 版）“腦脊液 總蛋白測(cè)定”。F.14 pH 測(cè)定F.14.1 測(cè)定方法測(cè)定方法見(jiàn)中華人民共和國(guó)藥典（2015年版）三部附錄“ pH 值測(cè)定法”。F.14.2 注意事項(xiàng)使用國(guó)家計(jì)量部門(mén)檢定合格的 pH 儀。樣品從血袋中移出后 應(yīng)立即進(jìn)行檢測(cè)，以防標(biāo)本在空氣中暴露時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而CO2逸出，導(dǎo)致 pH 測(cè)定值比實(shí)際值偏高。F.15 凝血因子忸活性測(cè)定 測(cè)定方法見(jiàn)現(xiàn)行有效的全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 “凝血因 子忸的活性測(cè)定（一期法）”。使用血凝儀測(cè)定時(shí)參照廠家使 用說(shuō)明書(shū)。F.16 纖維蛋白原測(cè)定 測(cè)定

6、方法見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 （第 4 版）“血漿纖維蛋 白原含量測(cè)定”。使用血凝儀測(cè)定應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明書(shū)。 根據(jù) 冷沉淀的容量計(jì)算出每袋纖維蛋白原含量。F.17 甘油殘留量F.17.1 過(guò)碘酸鈉法原理：根據(jù)過(guò)碘酸鈉能氧化有機(jī)化合物中的羥基、胺基，使 甘油氧化成酸和醛，以溴甲酚紫作指示劑；并用氫氧化鈉進(jìn) 行滴定。從消耗氫氧化鈉的毫升數(shù)，即可算出樣品中所含甘 油的量。試劑： 1 6. 5%鎢酸鈉溶液：稱取 16.5 克鎢酸鈉，用蒸餾水溶 解，再加蒸餾水稀釋至 1 00ml 。0.5mol/L H 2SO4:吸30ml濃硫酸緩緩注入水中， 冷卻至室溫， 加水稀釋至 1000ml 。0.1mol/L

7、 NaOH :配制方法見(jiàn) 中華人民共和國(guó)藥典 （ 2015 年 版）二部 附錄 “滴定液”0 . 1 %溴甲酚紫溶液: 0.1g 溴甲酚紫溶入 20ml0.02mol/L NaOH 溶液中，再加入蒸餾水稀釋至 100mL 。14%過(guò)碘酸鈉：14g過(guò)碘酸鈉先加入少量蒸餾水中溶解，加 入2mL濃硫酸使其完全溶解，用蒸餾水稀釋至 100mL。 操作方法：按下表操作步驟制備血濾液血濾液制備試劑mL備注測(cè)定樣品15.0蒸餾水75.016.5% Na2WO46.00.5mol/LH2SO47.5用力振搖，進(jìn)行過(guò)濾注：試驗(yàn)操作時(shí)應(yīng)在三角燒瓶中進(jìn)行分析測(cè)定的步驟如下表：試劑空白（mL）樣品（mL）備注過(guò)濾后的

8、上清液15蒸餾水100.0100.00.1%溴甲酚紫溶液2滴0.1mol/L NaOH 溶液滴定至藍(lán)14%過(guò)碘酸鈉10.010.0色38 C恒溫0.1%溴甲酚紫溶液0.1mol/L NaOH 溶液15分鐘2滴滴定至藍(lán)色計(jì)算:103515甘油含量（g/ml） NaOHml數(shù)（樣品 空白）0.0921 滴疋NaOH濃度 血濾液口|數(shù)0.10.1mol/L NaOH 溶液相當(dāng)于 0.00921g甘油F.17.2滲透壓測(cè)定法正常血清的滲克分子濃度為 289mmol（289mOsm），甘油含 量為1% （ 10g/L）時(shí)，其滲克分子濃度為420mmol（420mOsm），因此滲透壓測(cè)定法可作為一種檢測(cè)去

9、甘油紅 細(xì)胞甘油殘存量的參考方法，操作方法應(yīng)參照滲透壓儀器生 產(chǎn)廠家使用說(shuō)明書(shū)。F.17.3折射儀測(cè)定法使用折射儀是測(cè)定滲克分子濃度的一種篩選方法。折射儀讀 數(shù)到28 （如折射儀型號(hào)為10401，折射指數(shù)或比重V1.3384T.S.）與甘油水平不高于1%（ 90g/L ）相關(guān)。折射儀測(cè)定法可作為一種檢測(cè)甘油含量的參考方法。方法見(jiàn)生產(chǎn)廠 家使用說(shuō)明書(shū)。F.17.4 由于不同方法的準(zhǔn)確性和精密度存在差異，可根據(jù) 要求選擇以上相應(yīng)方法或其它方法（如：GPO-PAP二步法）。若采用商品化試劑盒，操作應(yīng)按試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。F.18 中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù) 檢測(cè)方法見(jiàn)全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程 （第 4版） “白細(xì)胞計(jì)

10、 數(shù)”。使用血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀測(cè)定的應(yīng)參照廠家使用說(shuō)明。F.19 亞甲藍(lán)殘留量F.19.1 測(cè)試樣品準(zhǔn)備取 3 mL Waters Oasis 小柱，置于真空萃取裝置上，用 6mL 甲 醇活化，加入 6mL 供試血漿，萃取亞甲藍(lán)； 用 30甲醇 6mL 清洗，隨后用含 1乙酸的甲醇溶液 2mL 洗脫，洗脫液離心（ 3500rpm/10 分鐘），取上清液作為樣品溶液。F.19.2 標(biāo)準(zhǔn)品的制備取亞甲藍(lán)粉末約38mg，精密稱定，置100mL量瓶中，用水 溶解并稀釋至刻度。精密量取50卩I置50mL容量瓶中，用血漿稀釋至刻度，配成最終濃度為約1.0卩moI/L的亞甲藍(lán)對(duì) 照血漿。檢測(cè)過(guò)濾前后樣品溶液時(shí)，必須用同樣的方法萃取 檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品。F.19.3 測(cè)定用含 1乙酸的甲醇溶液作試劑空白，在654nm±2nm 波