KAI1基因在人肺癌細(xì)胞株中表達(dá)水平及調(diào)控機(jī)制的研究＊PPT課件_第1頁(yè)
KAI1基因在人肺癌細(xì)胞株中表達(dá)水平及調(diào)控機(jī)制的研究＊PPT課件_第2頁(yè)
KAI1基因在人肺癌細(xì)胞株中表達(dá)水平及調(diào)控機(jī)制的研究＊PPT課件_第3頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、KAI1KAI1基因在人肺癌細(xì)胞株中表達(dá)水平基因在人肺癌細(xì)胞株中表達(dá)水平及調(diào)控機(jī)制的研究及調(diào)控機(jī)制的研究本研究受到國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目（本研究受到國(guó)家自然科學(xué)基金重點(diǎn)項(xiàng)目（N0.30430300）和天津市科技）和天津市科技支撐計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目（支撐計(jì)劃重點(diǎn)項(xiàng)目（No. 06YFSZSF05300）資助資助尤嘉琮1 趙穎2 陳 軍1 馬 力1 朱大興1 周清華 1 1、天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院天津市肺癌研究所 2、四川大學(xué)華西醫(yī)院腫瘤中心 一、研究不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株和正常一、研究不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株和正常人肺成纖維細(xì)胞株人肺成纖維細(xì)胞株MRC-5中中KAI1的的mRNA表達(dá)表達(dá)水平及

2、其差異水平及其差異二、研究不同轉(zhuǎn)移潛能的人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株中二、研究不同轉(zhuǎn)移潛能的人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株中KAI1的的mRNA表達(dá)水平，探討表達(dá)水平，探討KAI1與與nm23-H1在在調(diào)控肺癌轉(zhuǎn)移中的相互關(guān)系調(diào)控肺癌轉(zhuǎn)移中的相互關(guān)系三、研究甲基化抑制劑三、研究甲基化抑制劑5-雜氮脫氧胞苷雜氮脫氧胞苷(5-Aza-CdR)對(duì)肺癌細(xì)胞株對(duì)肺癌細(xì)胞株L9981、GLC-82和和NCI-H460中中KAI1的的mRNA表達(dá)水平和體外增殖能力的影響表達(dá)水平和體外增殖能力的影響 主要材料與方法主要材料與方法主要實(shí)驗(yàn)方法：主要實(shí)驗(yàn)方法： 實(shí)時(shí)熒光定量實(shí)時(shí)熒光定量PCR MTT法繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線法繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線

3、甲基化抑制劑：甲基化抑制劑： 實(shí) 驗(yàn) 結(jié) 果比較比較MRC-5與不同組織類型肺癌細(xì)胞株間與不同組織類型肺癌細(xì)胞株間KAI1基因基因mRNA表達(dá)水平表達(dá)水平1. MRC-5 , 正常人肺成纖維細(xì)胞株；2. L9981, 人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株；3. NL9980,人低轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染nm23-H1的L9981細(xì)胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌細(xì)胞株；9. NCI-H460，人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株；12. LTEP-2，肺腺癌細(xì)

4、胞株;13. YTMLC-90，肺鱗癌細(xì)胞株； P=0.0000.002不同細(xì)胞株間不同細(xì)胞株間KAI1基因表達(dá)水平比較的基因表達(dá)水平比較的P值表值表CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000N

5、L99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000

6、.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. MRC-5 , 正常人肺成纖維細(xì)胞株；2. L9981, 人高轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株；3. NL9980,人低轉(zhuǎn)移大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株；4. L9981-nm23-H1-pEGFP，穩(wěn)定轉(zhuǎn)染nm23-H1的L9981細(xì)胞株；5. A549，6. GLC-82，7. A2，8. SPCA-1，肺腺癌細(xì)胞株；9. NCI-H460，人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞株；10. SH-77，11. NCI-H446，人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株；12. LTEP-2，肺腺癌細(xì)胞株; 13. YTMLC-90，肺鱗癌細(xì)胞株； 在在L9981細(xì)胞中轉(zhuǎn)染

7、細(xì)胞中轉(zhuǎn)染nm23-H1可顯著上調(diào)可顯著上調(diào)KAI1的的mRNA表達(dá)水平表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.000

8、0.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -2

9、0.0121. L9981；2. NL9980；3. L9981-nm23-H1-pEGFP比較比較L9981細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間KAI1的的mRNA表達(dá)水平表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.

10、0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H

11、4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121.L9981；2. A549；3. GLC-82；4. A2；5. SPCA-1；6. NCI-H460；7. SH-77；8. NCI-H446；9. LTEP-2；10. YTMLC-90 比較比較NL9980與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間KAI1的的mRNA表達(dá)水平表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H4

12、60SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000

13、.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NL9980；2. L9981-nm23-H1-pEGFP；3. A549；4. GLC-82；5. A2；6. SPCA-1；7. NCI-H460；8. SH-77；9. NCI-H446；10.

14、 LTEP-2；11. YTMLC-90 比較比較A549A549細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達(dá)水平表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510

15、.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000

16、.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121.A549；2. GLC-82；3. A2；4. SPCA-1；5. NCI-H460；6. SH-77；7. NCI-H446；8. LTEP-2；9. YTMLC-90 比較比較GLC-82GLC-82細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達(dá)水平表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-7

17、7NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.

18、0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121.GLC-82；2. A2；3. SPCA-1；4. NCI-H460；5. SH-77；6. NCI-H446；7. LTEP-2；8. YTMLC-90 比較比較A2A2細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間細(xì)胞與

19、不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達(dá)水平表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.00

20、00.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -

21、20.0121. A2；2. SPCA-1；3. NCI-H460；4. SH-77；5. NCI-H446；6. LTEP-2；7.YTMLC-90比較比較SPCA-1SPCA-1細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達(dá)水平表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0

22、000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.

23、5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. SPCA-1；2. NCI-H460；3. SH-77；4. NCI-H446；5. LTEP-2；6.YTMLC-90比較比較NCI-H460NCI-H460細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間KAI1KAI1的表達(dá)水平的表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A

24、549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7

25、170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H460；2. SH-77；3. NCI-H446；4. LTEP-2；5.YTMLC-90比較比較SH-77SH-77細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺

26、癌細(xì)胞株間細(xì)胞與不同組織學(xué)類型的人肺癌細(xì)胞株間KAI1KAI1的的mRNAmRNA表達(dá)水平表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000

27、.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443NCI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.03

28、7LTEP- -20.0121. SH-77；2. NCI-H446；3. LTEP-2；4.YTMLC-90比較比較NCI-H446、 LTEP- -2和和YTMLC-90細(xì)胞株間細(xì)胞株間KAI1的的mRNA表達(dá)水平表達(dá)水平CelllinesCell lines L9981NL9980L9981-nm23-H1A549GLC-82A2SPCA-1NCI-H460SH-77NCI-H446LTEP- -2YTMLC-90MRC-50.0000.0020.0020.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0000.000L99810.0000.0000.0000.0

29、000.0020.0000.6510.0000.0000.0070.000NL99800.8920.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0080.0000.000L9981-nm23-H10.0000.0000.0000.0000.0000.0000.0120.0000.000A5490.7170.2110.1110.0000.0000.0050.0780.392GLC-820.3680.0540.0000.0000.0020.1550.227A20.0070.0010.0000.0000.5880.040SPCA-10.0000.0000.1670.0020.443N

30、CI-H4600.0000.0000.0020.000SH-770.0000.0000.000NCI-H4460.0000.037LTEP- -20.0121. NCI-H446；2. LTEP-2；3.YTMLC-905-Aza-CdR上調(diào)了上調(diào)了NCI-H460 和和L9981細(xì)胞中細(xì)胞中KAI1的的mRNA表達(dá)水平表達(dá)水平1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsNCI-H4605-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)NCI-H4600.0010.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.005NCI-H460NCI-H460和和L9981L9981細(xì)胞株對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組間細(xì)胞株對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組間KAI1KAI1基因表達(dá)水平比較的基因表達(dá)水平比較的P P值表值表1. Control ；2. 2mol/L 5-Aza-CdR ；3. 10mol/L 5-Aza-CdRGroupsL99815-Aza-CdR(2mol/L)5-Aza-CdR(10mol/L)L99810.0000.0005-Aza-CdR(2mol/L)0.016NCI-H460 ce

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