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文檔簡介

1、.1.2檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質 1.實驗原理.3 斐林試劑斐林試劑蘇丹蘇丹橘黃色橘黃色紅色紅色磚紅色沉淀磚紅色沉淀紫色紫色蘇丹蘇丹 雙縮脲試劑雙縮脲試劑鑒定物質鑒定物質試劑試劑實驗現象實驗現象還原性糖還原性糖脂肪脂肪蛋白質蛋白質淀粉淀粉 碘液碘液 藍色藍色 生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質的鑒定l實驗原理實驗原理.4.5選材:含糖量較高的選材:含糖量較高的白色或近于白色的植物組織白色或近于白色的植物組織(排除色素對排除色素對顯色的干擾顯色的干擾),蘋果、梨最好,蘋果、梨最好 。 l實驗流程實驗流程(步驟

2、步驟)1.可溶性還原糖可溶性還原糖 制備組織樣液:制備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)過濾:(用單層紗布)取液:取液:(mL)顯色反應顯色反應 mL組織樣液剛配制的斐林試劑mL現象:現象: (用前混勻用前混勻)5065.C水浴水浴加熱加熱2min葡萄糖,果糖,葡萄糖,果糖,麥芽糖;麥芽糖;蔗糖為非還原蔗糖為非還原性糖性糖.6還原糖的檢測和觀察:還原糖的檢測和觀察:.7還原糖的檢測結果還原糖的檢測結果.8.92.脂肪的鑒定脂肪的鑒定 取材:花生種子(浸泡取材:花生種子(浸泡h),去皮,將子葉削成薄片),去皮,將子葉削成薄片 制片:制片:選取最薄的薄片

3、移至載玻片中央選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴加在薄片上滴加蘇丹蘇丹(或蘇丹或蘇丹) 染液染液2 3滴,滴,染色染色min滴加體積分數為滴加體積分數為50%的酒精的酒精溶液溶液12滴,洗滴,洗去浮色去浮色(多余的蘇丹多余的蘇丹 )吸去余液,滴吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片臨時裝片顯微觀察:顯微觀察: 先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察現象:現象:有被染成有被染成橘黃色橘黃色(或紅色或紅色)的脂肪微粒的脂肪微粒脂肪微粒脂肪微粒.10脂肪的檢測結果脂肪的檢測結果.11.123.蛋白質的鑒定蛋

4、白質的鑒定 選材與制備選材與制備組織樣液:組織樣液:黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)黃豆浸泡黃豆浸泡 去皮去皮切片切片研磨研磨過濾過濾濾液濾液 顯色反應顯色反應mL組織樣液雙縮脲試劑mL現象:現象:無色無色雙縮脲試劑滴紫色或紫紅色紫色或紫紅色(創(chuàng)設堿性條件創(chuàng)設堿性條件)(提供提供Cu2+).13蛋白質的檢測結果蛋白質的檢測結果.14.154.淀粉的鑒定淀粉的鑒定取材:馬鈴薯勻漿取材:馬鈴薯勻漿檢測:檢測:mL組織樣液碘液碘液2滴滴現象:現象: 搖勻后變成藍色搖勻后變成藍色.16問題探討問題探討:1、在做還原糖、蛋白質鑒定的實驗時,為什么要留出、在做還原糖、蛋白質

5、鑒定的實驗時,為什么要留出一部分樣液?一部分樣液?作對照作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加液只能加34滴而不能滴而不能過量?過量? 過量的雙縮脲試劑過量的雙縮脲試劑B B會與試劑會與試劑A A反應,使溶液呈藍色,反應,使溶液呈藍色,而掩蓋生成的紫色。而掩蓋生成的紫色。3、為什么斐林試劑要現配現用,不能放置太久?為什么斐林試劑要現配現用,不能放置太久? 時間太長,時間太長,Cu(OH)Cu(OH)2 2懸濁液就沉淀在試管底部而懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應。無法參與反應。l深化深化.174、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同

6、?新配制新配制的的Cu(OH)2溶液溶液在堿性在堿性環(huán)境下環(huán)境下的的Cu2+NaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.05g/mLNaOH濃度為濃度為0.1g/mLCuS04濃度為濃度為0.01g/mL先把先把NaOH溶液和溶液和CuSO4溶液溶液混合混合,而后而后立即使用立即使用。先先加入加入Na0H1mL,然,然后后再加再加CuS044滴,搖勻。滴,搖勻。(不能過量不能過量)水浴水浴加熱加熱不不需需要要.18知識結構.191、青蘋果汁遇碘液顯藍色,熟蘋果汁能與斐林試劑青蘋果汁遇碘液顯藍色,熟蘋果汁能與斐林試劑作用產生磚紅色沉淀,下列結論中最合理的是作用產生磚紅色沉淀,下列

7、結論中最合理的是 ( ) A青蘋果汁中有淀粉,不含還原糖青蘋果汁中有淀粉,不含還原糖 B熟蘋果汁中含還原糖,沒有淀粉熟蘋果汁中含還原糖,沒有淀粉 C蘋果轉熟時,大量淀粉水解成還原糖蘋果轉熟時,大量淀粉水解成還原糖 D蘋果轉熟時單糖聚合成淀粉蘋果轉熟時單糖聚合成淀粉 Cl例題例題.20、安徽阜陽劣質奶粉事件震驚全國,引起、安徽阜陽劣質奶粉事件震驚全國,引起世人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產品,世人注目。鑒定脫脂淡奶粉是否為偽劣產品,肯定不需要用到的化學試劑是肯定不需要用到的化學試劑是( ) A.斐林試劑斐林試劑 B. 紅墨水紅墨水C.雙縮脲試劑雙縮脲試劑 D.蘇丹蘇丹染液染液 Bl例題例題.213(2005.廣東廣東)生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質三種有機生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質三種有機物的鑒定實驗中,以下操作錯誤的是物的鑒定實驗中,以下操作錯誤的是( )A、可溶性還原糖的鑒定,可用酒精燈直接加熱產生磚紅、可溶性還原糖的鑒定,可用酒精燈直接加熱產

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