氟蟲腈粉劑對棲北散白蟻ReticulitermessperatusKollbe的毒性傳遞性研究(藥械)

1、氟蟲腈粉劑對棲北散白蟻的毒性傳遞性研究馬延軍* 作者簡介： 馬延軍（1972- ），男，山東聊城市人，高級工程師，主要從事白蟻防治研究工作。 隋曉斐 崔巧利（青島市白蟻防治研究所 山東 青島 266012）摘要：目的 系統(tǒng)研究氟蟲腈粉劑對散白蟻的毒性傳遞性。 方法 采用NY/T 11532-2006測定強制接觸條件下的毒性傳遞性，采用模擬現(xiàn)場試驗測定選擇接觸條件下的毒性傳遞性。 結(jié)果 強制性接觸時，0.02%、0.06%、0.10%、0.25%、0.50%氟蟲腈粉劑的毒性傳遞級數(shù)分別為1、1、2、2、3；選擇性接觸時，噴粉處理白蟻的數(shù)量占群體的比例4%，且氟蟲腈粉劑濃度在0.10%0.50%之

2、間時，毒性能有效傳遞到2m外的個體。 結(jié)論 氟蟲腈具有一定的毒性傳遞性，強制性接觸時，濃度越高，毒性傳遞的級數(shù)越高；選擇性接觸時，氟蟲腈粉劑的最佳濃度在0.1%0.5%之間，且噴粉處理的白蟻數(shù)量不宜低于群體數(shù)量的4%?！娟P鍵詞】氟蟲腈；白蟻；毒性；傳遞性Study on toxicity transfer of fipronil in Reticulitermes speratus Kollbe coloniesMA Yan-jun,SUI Xiao-fei,CUI Qiao-li(Termite Control Institute of Qingdao,Qingdao,266012,Chin

3、a)Abstract：Objective To study the toxicity transfer of fipronil powder in termite (Reticulitermes) colonies. Methods The toxic transfer was determined under mandatory conditions according to NY/T 11532-2006. Simulate field test was employed to determine the toxicity transfer under selective contact

4、condition. Results Under the mandatory conditions, the toxicity transfer grade of 0.02%, 0.06%, 0.10%, 0.25% and 0.50% fipronil powder were respectively 1, 1, 2, 2 and 3. Under selective conditions, when the proportion of the termites treated with fipronil powder accounted for4% of the colonies at t

5、he fipronil concentrations between 0.1% and 0.5%, the toxicity could be effectively transferred to the colonies 2m in distance. Conclusion The toxicity of fipronil could be transferred in termite colonies.【Key words】fipronil; termite; Reticulitermes speratus; toxicity; transfer目前我國白蟻防治技術正處于轉(zhuǎn)型升級的關鍵時刻

6、，以安全環(huán)保的綜合治理手段代替高濃度高殘留的化學屏障法是不可逆轉(zhuǎn)的趨勢。在2006年啟動的 “中國白蟻防治氯丹和滅蟻靈替代示范項目”中，白蟻監(jiān)控技術被選為氯丹和滅蟻靈替代關鍵技術,其核心在于發(fā)現(xiàn)白蟻侵入監(jiān)控裝置后，通過投放餌劑或?qū)φT集到的白蟻進行噴粉處理，使毒性在群體中傳遞，從而以很少的用藥量達到較為理想的滅治效果。相對于餌劑而言，粉劑成本更低、操作更簡便、見效更快，但目前公認效果較好的粉劑比較少，其中氟蟲腈粉劑是目前國內(nèi)唯一通過藥效登記的粉劑類藥物，也是目前研究較多的藥物。氟蟲腈(fipronil)是一種廣譜高效的苯基吡唑類殺蟲劑，在白蟻防治中應用廣泛。近年來，很多從業(yè)者使用氟蟲腈粉劑來滅治

7、白蟻，對于其效果并沒有形成較為一致的結(jié)論。很多研究者1-5對白蟻的毒性傳遞性進行了室內(nèi)試驗，但這些試驗都是在強迫白蟻與中毒的白蟻接觸的情況下進行的，而在野外環(huán)境中，我們只能對引誘到的白蟻進行藥物處理，而無法強迫群體內(nèi)其他白蟻與這些中毒的白蟻發(fā)生接觸，因此，這些實驗結(jié)論可能不能正確反映野外環(huán)境中的真實情況。為了對氟蟲腈對散白蟻的毒性傳遞性進行較為系統(tǒng)的研究，在本文中，我們除了測定了強制接觸條件下不同濃度的氟蟲腈粉劑對白蟻的毒性傳遞性，還設計了模擬現(xiàn)場試驗，測定了選擇性接觸條件下氟蟲腈粉劑對白蟻的毒性傳遞性。我們用玻璃管將兩個玻璃缸鏈接起來，并在玻璃缸中放置餌料，供試白蟻通過覓食行為會在兩個玻璃缸

8、之間建立起活動通道，這就模擬了野外實驗中已經(jīng)建立起蟻路連接的兩套監(jiān)控裝置，隨后，通過對其中一個玻璃缸中特定數(shù)量的白蟻進行噴粉處理，觀察毒性在整個群體間的傳遞情況，分別測試了不同濃度的氟蟲腈粉劑的毒性傳遞效果和傳遞距離，還測試了噴粉處理的白蟻數(shù)量占群體的比例對毒性傳遞效果的影響。1. 材料與方法1.1 材料 棲北散白蟻（Reticulitermes speratus Kollbe）（取自青島市黃島區(qū)，在實驗室飼養(yǎng)一周后備用），0.5%氟蟲腈粉劑（南通功成精細化工有限公司），用輕質(zhì)碳酸鈣配制成有效含量分別為0.25%、0.1%、0.06%及0.02%的粉劑，培養(yǎng)皿（ 10cm），濾紙(9cm)，毛

9、刷，鑷子，恒溫恒濕箱，玻璃缸（10cm×10cm)，玻璃管（30cm,100cm,200cm）等。1.2 方法：1.2.1 散白蟻對氟蟲腈粉劑的毒性傳遞效果采用行業(yè)標準NY/T 11532-2006農(nóng)藥登記用白蟻防治劑 藥效試驗方法及評價 農(nóng)藥對白蟻的毒力傳遞.提供的方法。稱量15mg 0.5%氟蟲腈粉劑均勻地灑在培養(yǎng)皿的底部，投入工蟻100頭、兵蟻4頭，使供試白蟻均勻地粘上粉劑，然后將粘有粉劑的白蟻移至一清潔的底部鋪有濾紙的培養(yǎng)皿中。當工蟻擊倒和死亡的個體數(shù)達到投入的工蟻的數(shù)量的20%時，移出移動遲緩或被擊倒但未死亡的工蟻15頭，投入到另一培養(yǎng)皿中，該培養(yǎng)皿預先投入工蟻100頭，兵

10、蟻4頭，底部鋪有兩層濾紙，當被移入的培養(yǎng)皿中被擊倒的白蟻的數(shù)量達到總數(shù)的30%時，再移出移動遲緩或被擊倒但未死亡的工蟻15頭，投入到另一培養(yǎng)皿中，該培養(yǎng)皿預先投入工蟻100頭，兵蟻4頭，底部鋪有兩層濾紙，如此重復操作，按天記錄工蟻擊倒數(shù)和死亡數(shù)，兵蟻死亡率不作統(tǒng)計，毒力傳遞級數(shù)為被移入培養(yǎng)皿內(nèi)的工蟻平均死亡率90%的次數(shù)，當剩余的工蟻死亡率90%時，實驗結(jié)束。設空白對照實驗，重復3次，空白中工蟻死亡率超過10%時實驗應重新開始，實驗時，應在濾紙上滴加3-5滴去離子水，以后每24h再滴加一次。分別用0.25%、0.10%、0.06%、0.02%氟蟲腈粉劑進行上述實驗。1.2.2 氟蟲腈粉劑濃度及

11、傳遞距離對毒性傳遞效果的影響將兩個玻璃缸（A和B）用30cm長玻璃管連接，玻璃缸即玻璃缸底部均鋪上一層細砂（如圖1），并用蒸餾水充分潤濕。將500頭白蟻（工蟻比例97%）投入A缸中，并在B缸中放一片松木片作為餌料。待一定數(shù)量的白蟻通過玻璃管進入到B缸后，在A缸中也放入松木片。等待24h,讓白蟻在兩個玻璃缸中充分建立起活動通道后，即可進行實驗。在B缸中選取50頭工蟻，分別用0.02%、0.06%、0.10%、0.25%、0.50%氟蟲腈粉劑進行噴粉處理后（以白蟻身上均勻的沾上一薄層粉劑為標準），重新投入，觀察并記錄白蟻的活動、死亡情況。每個濃度做兩組重復，用輕質(zhì)碳酸鈣粉作為參照。將玻璃缸用100

12、cm玻璃管進行連接，重復上述實驗。將玻璃缸用200cm玻璃管進行連接，重復上述實驗。A區(qū)（未施藥區(qū)） C區(qū)（隔離區(qū)） B區(qū)（施藥區(qū)） 圖1：實驗裝置示意圖1.2.3：噴粉處理白蟻的個體占群體的比例對毒性傳遞效果的影響 將兩個玻璃缸（A和B）用100cm長玻璃管連接，玻璃缸即玻璃缸底部均鋪上一層細砂（如圖1），并用蒸餾水充分潤濕。將1g白蟻（工蟻比例97%）投入A缸中，并在B缸中放一片松木片作為餌料。待一定數(shù)量的白蟻通過玻璃管進入到B缸后，在A缸中也放入松木片。等待24h,讓白蟻在兩個玻璃缸中充分建立起活動通道后，即可進行實驗。分別在B缸中選取10、20、30、40、50頭工蟻（分別占群體總量的

13、比例為2%、4%、6%、8%、10%），用0.10%氟蟲腈粉劑進行噴粉處理后，重新投入，觀察并記錄白蟻的活動、死亡情況。每個濃度做兩組重復，用輕質(zhì)碳酸鈣粉作為參照。將玻璃缸用200cm玻璃管進行連接，重復上述實驗。 2 結(jié)果與討論2.1 強制接觸時氟蟲腈粉劑對白蟻的毒性傳遞性 在施藥1h后，0.5%氟蟲腈粉劑可擊倒100%的白蟻，部分白蟻存在抽搐現(xiàn)象，0.1%氟蟲腈粉劑可擊倒約50%的白蟻，少部分仍可以爬行，0.02%氟蟲腈粉劑僅能夠擊倒數(shù)頭白蟻，大部分可四處爬行。2.5h后，5個濃度級別中的供試白蟻全部被擊倒。這說明氟蟲腈粉劑濃度越高，對白蟻殺滅速度越快，但即使在較低濃度下（0.02%），氟

14、蟲腈粉劑依然可以在相對較短的時間內(nèi)（2.5h）將白蟻全部殺滅。表1：不同濃度氟蟲腈粉劑毒性傳遞試驗結(jié)果氟蟲腈粉劑濃度（%）毒性傳遞級數(shù)不同時間白蟻的累計死亡率（%）0.5h2.5h6h24h2d3d4d5d9d17d0.501030501002移入4093971003移入16588387911004移入281219500.251020411002移入185087941003移入02510250.10101130558093951002移入1523343950951003移入0038200.06103822374349601002移入1215203255830.02100223385777851

15、002移入0021330實驗觀察到氟蟲腈粉劑密度較高，15mg粉劑只能在供試白蟻身上粘上很薄的一層，第2級毒性傳遞實驗時，白蟻身上就已經(jīng)幾乎看不到粉劑，因此其他個體通過直接接觸到粉劑而中毒的可能性較低，可能中毒白蟻產(chǎn)生的分泌物或排泄物對其他個體也能產(chǎn)生毒性傳遞的作用。實驗觀察到當被擊倒的白蟻用于下一級試驗時，其尸體或多或少會被其他白蟻取食，從而可能會對取食的白蟻產(chǎn)生胃毒，導致白蟻死亡。綜合看來，有理由認為氟蟲腈粉劑的毒性傳遞是接觸毒性和胃毒共同作用的結(jié)果。隨著毒性傳遞的級別上升，接觸毒性傳遞可能越來越弱，而胃毒傳遞則可能逐漸占據(jù)主導地位。由表1可以看出，隨著毒性傳遞級數(shù)的提高，毒性傳遞速度明顯

16、減慢，以0.5%氟蟲腈粉劑為例，1d后即可將毒性傳遞到第2級，5d時可以將毒性傳遞到第3級，而在17d時毒性傳遞仍未達到第4級標準。在試驗進行到17d時，0.5%氟蟲腈粉劑毒性傳遞級數(shù)是3級，4級的死亡率為50%；0.25%、0.1%氟蟲腈粉劑毒性傳遞級數(shù)為2級，3級的死亡率分別為25%、20%；0.06%、0.02%氟蟲腈粉劑毒性傳遞級數(shù)為1級，2級的死亡率分別為50%、30%。這表明在強制接觸的情況下，氟蟲腈粉劑濃度越高，毒性傳遞的級數(shù)越高。2.2 選擇接觸時氟蟲腈粉劑對白蟻的毒性傳遞性 2.2.1 氟蟲腈粉劑對白蟻的擊倒速度 實驗觀察到，各組白蟻被不同濃度的氟蟲腈粉劑處理后，個體表現(xiàn)差異

17、較大，0.02%組的白蟻較活躍，個別的能夠持續(xù)爬行到1m外，隨著粉劑濃度升高，白蟻的活動能力迅速減弱，0.5%組的白蟻基本喪失活動能力，大部分都死在B區(qū)內(nèi)。但0.02%組被噴粉處理的白蟻全部被擊倒大約需要4h，而0.5%組全部被擊倒僅需要約1.5h。一般認為，被噴粉處理的個體活動能力越強，越有利于毒性傳遞7，從這方面來講，0.5%氟蟲腈粉劑擊倒速度過快，可能不利于毒性的傳遞。2.2.2 氟蟲腈粉劑對白蟻的驅(qū)避性 實驗觀察到，經(jīng)各濃度的氟蟲腈粉劑處理的白蟻，均未對其他白蟻顯示出明顯的驅(qū)避性，但是當B區(qū)內(nèi)白蟻出現(xiàn)大量死亡后，白蟻會很快轉(zhuǎn)移出B區(qū)，A區(qū)內(nèi)白蟻則明顯增多。有研究認為8，某個地點在短時間

18、內(nèi)大量死亡的白蟻很可能會對群體內(nèi)其他白蟻產(chǎn)生驅(qū)避性，本實驗觀察到這種現(xiàn)象的確存在，氟蟲腈粉劑濃度越高，這一現(xiàn)象就越明顯。表2 ：不同濃度的氟蟲腈粉劑對散白蟻的毒性傳遞效果氟蟲腈濃度(%)距離（cm）毒性傳遞效果0.02308d后供試白蟻全部死亡。0.06305d后供試白蟻全部死亡。0.10305-6d后供試白蟻全部死亡。0.25305-6d后供試白蟻全部死亡。0.50305-6d后供試白蟻全部死亡。0.0210011d后C區(qū)內(nèi)白蟻部分死亡，A區(qū)內(nèi)供試白蟻仍很活躍。0.061008d后供試白蟻全部死亡。0.101006d后供試白蟻全部死亡。0.251006d后供試白蟻全部死亡。0.501007-

19、11d后供試白蟻全部死亡。0.0220014d后C區(qū)內(nèi)白蟻部分死亡，A區(qū)內(nèi)供試白蟻仍很活躍。0.0620014d后C區(qū)內(nèi)白蟻部分死亡，A區(qū)內(nèi)供試白蟻仍很活躍。0.102009-13d后供試白蟻全部死亡。0.2520011d后供試白蟻全部死亡。0.502009-10d后供試白蟻全部死亡。注：A區(qū)為未施藥區(qū)，B區(qū)為施藥區(qū)，C區(qū)為隔離區(qū)。2.2.3 氟蟲腈粉劑濃度與毒性傳遞距離的關系 由表2可見，各濃度組的氟蟲腈粉劑均能有效地將毒性傳遞到30cm外的個體，0.02%氟蟲腈粉劑毒性不能有效傳遞給1m外的群體，0.02%、0.06%氟蟲腈粉劑毒性不能有效傳遞給2m外的群體，而0.1%、0.25%和0.5

20、%的粉劑毒性能有效地傳遞給2m外的群體，可見，氟蟲腈粉劑濃度低于0.1%時，有效傳遞距離較短，濃度在0.1%到0.5%之間時，毒性能有效傳遞到2m外。試驗發(fā)現(xiàn)，0.5%氟蟲腈粉劑毒性傳遞速度與噴粉時白蟻在各區(qū)域的分布有很大關系，各組平行試驗毒性傳遞速度相差很大，因此，氟蟲腈粉劑濃度過高可能并不利于毒性傳遞，最佳濃度可能在0.1%到0.5%之間。2.2.4 氟蟲腈粉劑毒性傳遞速度與距離的關系 由表2可見，毒性傳遞速度與距離有直接關系，0.10%氟蟲腈粉劑有效傳遞到30、100、200cm外個體的時間分別為5-6d、6d、9-13d, 0.25%氟蟲腈粉劑有效傳遞到30、100、200cm外個體的

21、時間分別為5-6d、6d、11d,0.50%氟蟲腈粉劑有效傳遞到30、100、200cm外個體的時間分別為5-6d、7-11d、9-10d。這表明毒性是由近及遠逐漸傳遞的，一般說來，與噴粉處的距離越遠，毒性傳遞所需要的時間越長，實驗結(jié)果表明，濃度0.10%的氟蟲腈粉劑的毒性一般能在兩周內(nèi)傳遞到2m外的群體，在野外，由于白蟻更為活躍，這一過程可能更快。 在野外實驗中，白蟻活動區(qū)域監(jiān)控裝置的間距通常為12米，因此，該模擬現(xiàn)場實驗的結(jié)論對于野外實驗有一定的參考價值。表3： 使用0.5%氟蟲腈粉劑處理不同比例個體時毒性傳遞效果處理個體比例(%)距離（cm）毒性傳遞效果2100810d后供試白蟻全部死亡

22、。410011d后供試白蟻全部死亡。610011d后供試白蟻全部死亡。81001013d后供試白蟻全部死亡。10100711d后供試白蟻全部死亡。220015d后C區(qū)內(nèi)白蟻部分死亡，A區(qū)內(nèi)供試白蟻仍很活躍。420013d后供試白蟻全部死亡。620010d后供試白蟻全部死亡。820014d后供試白蟻全部死亡。10200910d 后供試白蟻全部死亡。2.2.5 噴粉處理的白蟻占群體的比例對毒性傳遞距離的影響 由表3可見，使用0.50%和0.10%氟蟲腈粉劑，處理白蟻比例為2%時，毒性能傳遞到1m外的個體，但不能傳遞到2m外的個體，而處理白蟻比例4%時，毒性均能傳遞到2m外的個體，可見，噴粉處理的白

23、蟻數(shù)量占群體的比例不宜過低，當該比例低于2%時，毒性的傳遞距離較短，難以達到理想的滅治效果。表4： 使用0.1%氟蟲腈粉劑處理不同比例個體時毒性傳遞效果處理個體比例(%)距離（cm）毒性傳遞效果210011d后供試白蟻全部死亡。41009d后供試白蟻全部死亡。610011d后供試白蟻全部死亡。810011d后供試白蟻全部死亡。101006d后供試白蟻全部死亡。220016d后C區(qū)內(nèi)白蟻部分死亡，A區(qū)內(nèi)供試白蟻仍很活躍。420015d后供試白蟻全部死亡。62001415d后供試白蟻全部死亡。82001415d后供試白蟻全部死亡。10200913d 后供試白蟻全部死亡。2.2.5 噴粉處理的白蟻占

24、群體的比例對毒性傳遞速度的影響 由表4可見，使用0.5%氟蟲腈粉劑，處理個體比例分別為4%、6%、8%、10%時，毒性有效傳遞到1m外的時間分別為11d、11d、10-13d、7-11d，毒性能有效傳遞到2m外的時間分別為13d、10d、14d、9-10d；使用0.1%氟蟲腈粉劑，處理個體比例分別為4%、6%、8%、10%時，毒性有效傳遞到1m外的時間分別為9d、11d、11d、6d，毒性能有效傳遞到2m外的時間分別為15d、14-15d、14-15d、9-13d。噴粉處理的白蟻比例增高，毒性傳遞速度并未明顯加快，這表明，毒性傳遞的速度可能主要取決于第二級中毒的白蟻個體數(shù)量。3. 結(jié)論：氟蟲腈雖然是急性藥物，但仍有一定的毒性傳遞作用，其毒性傳遞可能是接觸毒性和胃毒共同作用的效果，毒性傳遞的級別越高，胃毒所起的作用可能越大。在強制接觸時，氟蟲腈粉劑的濃度越高，毒性傳遞的