南京工業(yè)大學(xué)2014年生物化學(xué)考前輔導(dǎo)班PPT

1、生物化學(xué)生物化學(xué)11.11.15生物與制藥工程學(xué)院生物與制藥工程學(xué)院content一、題型與分值一、題型與分值卷 面 分 析填空：填空：20302030空，空，10151015分；分；選擇：選擇：10151015題，題， 10151015分；分；名詞解釋與簡(jiǎn)答題：名詞解釋與簡(jiǎn)答題：40604060分；分； 9選選8（13選選12）計(jì)算：計(jì)算：1212題，題，10151015分；分；問(wèn)答題：?jiǎn)柎痤}：40504050分；分； 6選選5（5選選4）機(jī)會(huì)題比機(jī)會(huì)題比例很低！例很低！content二、反復(fù)考察的知識(shí)點(diǎn)二、反復(fù)考察的知識(shí)點(diǎn)樣 卷 分 析酶活計(jì)算酶活計(jì)算DNADNA復(fù)制、復(fù)制、RNARNA轉(zhuǎn)

2、錄、蛋白質(zhì)的生物合成轉(zhuǎn)錄、蛋白質(zhì)的生物合成生物氧化生物氧化代謝調(diào)節(jié)：酶活、酶量（操縱子）；激素代謝調(diào)節(jié)：酶活、酶量（操縱子）；激素糖、脂、蛋白、核酸代謝糖、脂、蛋白、核酸代謝名詞解釋?zhuān)夯瘜W(xué)滲透學(xué)說(shuō) （是目前最有說(shuō)服力的是目前最有說(shuō)服力的解釋氧化磷酸化作用機(jī)理解釋氧化磷酸化作用機(jī)理的學(xué)說(shuō)。）電子傳遞釋放出的自由能驅(qū)動(dòng)的學(xué)說(shuō)。）電子傳遞釋放出的自由能驅(qū)動(dòng)H H從線從線粒體基質(zhì)跨過(guò)內(nèi)膜進(jìn)入到粒體基質(zhì)跨過(guò)內(nèi)膜進(jìn)入到膜間隙（膜外）膜間隙（膜外），從，從而形成跨線粒體內(nèi)膜外高內(nèi)低的而形成跨線粒體內(nèi)膜外高內(nèi)低的H H電化學(xué)梯度。電化學(xué)梯度。當(dāng)當(dāng)H H通過(guò)通過(guò)FOF1-ATPFOF1-ATP合酶回流進(jìn)入線粒體

3、基質(zhì)時(shí)生合酶回流進(jìn)入線粒體基質(zhì)時(shí)生成成ATPATP問(wèn)答：以原核生物為例，闡述蛋白質(zhì)的生物合成過(guò)程。（10） 答：蛋白質(zhì)的合成亦稱(chēng)翻譯，可分為四個(gè)階段：答：蛋白質(zhì)的合成亦稱(chēng)翻譯，可分為四個(gè)階段： （一）氨基酸的活化（一）氨基酸的活化氨酰氨酰tRNA（2） （二）大腸桿菌中肽鏈合成的起始（二）大腸桿菌中肽鏈合成的起始 （3） mRNA上的上的SD序列可與小亞基上序列可與小亞基上16SrRNA的的3進(jìn)行堿進(jìn)行堿基配對(duì)，在起始因子的參與下先形成基配對(duì)，在起始因子的參與下先形成30S起始復(fù)合物起始復(fù)合物，再，再形成形成70S起始復(fù)合物起始復(fù)合物70S-mRNA-fMettRNAfMet。 （三）多肽鏈的

4、延長(zhǎng)（三）多肽鏈的延長(zhǎng)（3） 在多肽鏈上每增加一個(gè)氨基酸都需要經(jīng)過(guò)在多肽鏈上每增加一個(gè)氨基酸都需要經(jīng)過(guò)進(jìn)位，轉(zhuǎn)肽和進(jìn)位，轉(zhuǎn)肽和移位移位三個(gè)步驟。重復(fù)進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、移位，肽鏈沿三個(gè)步驟。重復(fù)進(jìn)位、轉(zhuǎn)肽、移位，肽鏈沿NC方方向延伸。向延伸。 （四）翻譯的終止及肽鏈的釋放（四）翻譯的終止及肽鏈的釋放 （2） 錦上添花：新生肽鏈的折疊與后加工錦上添花：新生肽鏈的折疊與后加工多細(xì)胞水平多細(xì)胞水平分子水平分子水平細(xì)胞水平細(xì)胞水平神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)激素調(diào)節(jié)激素調(diào)節(jié)酶調(diào)節(jié)酶調(diào)節(jié)蛋蛋白白質(zhì)質(zhì)脂脂水水糖糖核酸核酸無(wú)機(jī)鹽等無(wú)機(jī)鹽等主要知識(shí)點(diǎn)回顧前前 言言 酶和輔酶酶和輔酶 生物氧化生物氧化 糖化學(xué)及糖代謝糖化學(xué)

5、及糖代謝 脂化學(xué)及脂代謝、生物膜脂化學(xué)及脂代謝、生物膜 核酸及核酸代謝核酸及核酸代謝 蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)代謝蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)代謝 物質(zhì)代謝調(diào)節(jié)及激素的作用機(jī)制物質(zhì)代謝調(diào)節(jié)及激素的作用機(jī)制主要知識(shí)點(diǎn)回顧目目 錄錄主要知識(shí)點(diǎn)回顧一、酶與輔酶一、酶與輔酶酶的本質(zhì)、催化特點(diǎn)、分類(lèi)酶的本質(zhì)、催化特點(diǎn)、分類(lèi) 核酶、抗體酶、固定化酶、別構(gòu)酶核酶、抗體酶、固定化酶、別構(gòu)酶酶的組成、活性中心概念酶的組成、活性中心概念酶作用專(zhuān)一性假說(shuō)酶作用專(zhuān)一性假說(shuō)誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)誘導(dǎo)契合學(xué)說(shuō)酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué)酶反應(yīng)動(dòng)力學(xué) 米氏方程、轉(zhuǎn)換數(shù)（米氏方程、轉(zhuǎn)換數(shù)（Kcat）、酶活）、酶活 VmaxS V= Ks + S 抗體酶抗體酶80年代后期出現(xiàn)

6、的，本年代后期出現(xiàn)的，本質(zhì)是質(zhì)是免疫球蛋白免疫球蛋白。在易變區(qū)被。在易變區(qū)被賦予了賦予了酶催化性酶催化性。核酶是非蛋白酶。核酶是非蛋白酶。它是一類(lèi)特殊它是一類(lèi)特殊的的RNA。能夠催化。能夠催化RNA分子中的分子中的磷酸酯鍵的水解及其逆反應(yīng)。磷酸酯鍵的水解及其逆反應(yīng)。當(dāng)酶被底物飽和時(shí)，當(dāng)酶被底物飽和時(shí)，每一催化中每一催化中心心在在單位時(shí)間單位時(shí)間內(nèi)內(nèi)所能轉(zhuǎn)換底物分所能轉(zhuǎn)換底物分子的數(shù)量，即子的數(shù)量，即每摩爾酶活性中心每摩爾酶活性中心在單位時(shí)間內(nèi)轉(zhuǎn)換底物的摩爾數(shù)在單位時(shí)間內(nèi)轉(zhuǎn)換底物的摩爾數(shù)（/S） 。 分子活性分子活性寡聚蛋白寡聚蛋白（多個(gè)亞基）（多個(gè)亞基）1IU：在最適條件下，每：在最適條件下，

7、每分鐘內(nèi)催化分鐘內(nèi)催化1mol產(chǎn)物產(chǎn)物生成所需的酶量。生成所需的酶量。比活性（比活性（U/mg蛋白質(zhì)）蛋白質(zhì)）酶活力計(jì)算題 1010mlml唾液，稀釋唾液，稀釋2020倍，取倍，取1 1mlml測(cè)定淀粉酶活力，測(cè)測(cè)定淀粉酶活力，測(cè)知每知每5 5minmin水解淀粉產(chǎn)生水解淀粉產(chǎn)生2.52.5g g還原糖還原糖, ,測(cè)定其稀釋液測(cè)定其稀釋液中蛋白質(zhì)含量為中蛋白質(zhì)含量為1 1mg/ml,mg/ml,計(jì)算計(jì)算唾液中淀粉酶的總活唾液中淀粉酶的總活力，比活力，轉(zhuǎn)換數(shù)力，比活力，轉(zhuǎn)換數(shù)( (S S-1 -1 ) )。 酶活定義：在最適條件下每分鐘水解淀粉生成酶活定義：在最適條件下每分鐘水解淀粉生成1 1g

8、 g葡葡萄糖的酶量稱(chēng)為萄糖的酶量稱(chēng)為1 1個(gè)活力單位。個(gè)活力單位。 葡萄糖分子量葡萄糖分子量180,180,淀粉酶分子量淀粉酶分子量5000050000。主要知識(shí)點(diǎn)回顧一、酶與輔酶一、酶與輔酶酶的作用機(jī)制酶的作用機(jī)制 理解酸堿催化、共價(jià)催化等（理解酸堿催化、共價(jià)催化等（P391P391）酶的抑制作用酶的抑制作用 三種可逆抑制劑三種可逆抑制劑影響酶反應(yīng)的因素影響酶反應(yīng)的因素 溫度、溫度、pH、激活劑、激活劑高級(jí)高級(jí)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)活性活性中心中心解離解離EDTA半胱氨酸半胱氨酸金屬離子金屬離子酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué) 酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)(kinetics of enzyme-(kineti

9、cs of enzyme-catalyzed reactions)catalyzed reactions)是研究酶促反應(yīng)速度及是研究酶促反應(yīng)速度及其影響因素的科學(xué)。其影響因素的科學(xué)。 這些因素主要包括這些因素主要包括酶的濃度、底物的濃度、酶的濃度、底物的濃度、pHpH、溫度、抑制劑和激活劑等。溫度、抑制劑和激活劑等。 注意：速度指注意：速度指反應(yīng)的初速度反應(yīng)的初速度V0 ；研究某一因；研究某一因素對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響時(shí)，應(yīng)該素對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響時(shí)，應(yīng)該維持反應(yīng)中維持反應(yīng)中其它因素不變其它因素不變。 1 1）. . 米氏方程米氏方程V=Vmax SKm + SnK Km m 即為米氏常數(shù)，即為

10、米氏常數(shù)，nV Vmaxmax為最大反應(yīng)速度為最大反應(yīng)速度n當(dāng)反應(yīng)速度等于最大速度一當(dāng)反應(yīng)速度等于最大速度一半時(shí)半時(shí), ,即即V V =1/2 =1/2V Vmax,max,K Km =S m =S n上式表示上式表示, ,米氏常數(shù)是反應(yīng)米氏常數(shù)是反應(yīng)速度為最大值的一半時(shí)的底速度為最大值的一半時(shí)的底物濃度。物濃度。n因此因此, ,米氏常數(shù)的單位為米氏常數(shù)的單位為mol/Lmol/L。nKmKm值小，值小，1/1/Km大，大，親和力大。親和力大。底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響底物濃度對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響1/V-1/Km 0 1/S斜率斜率= Km/ Vmax1/Vmax雙倒數(shù)作圖法雙倒數(shù)作圖法 V

11、maxS V= Ks + S 酶的抑制 (機(jī)制)IISSSI II II IIISCompetitiveNon-competitiveUncompetitiveEE另一結(jié)合區(qū)抑制劑底物圖解抑制機(jī)理及說(shuō)明 只與自由的 E 結(jié)合，會(huì)與 S 競(jìng)爭(zhēng)；S可克服 的抑制。 可與自由的 E 或 ES 結(jié)合， S不能克服 的抑制。 只能與 ES 結(jié)合， S反而有利 的抑制。E + S ES E + P + E E + S ES E + P + + E + S E S E + S ES E + P + E S EISXVmax 不變；Km 變大Vmax 變?。籏m 不變Vmax 及 Km 均變小酶的活性部位酶的

12、活性部位 與酶的活性直接相關(guān)的區(qū)域?yàn)槊傅幕钚耘c酶的活性直接相關(guān)的區(qū)域?yàn)槊傅幕钚灾行?。是酶與底物中心。是酶與底物結(jié)合結(jié)合并發(fā)揮其并發(fā)揮其催化催化作作用的部位。用的部位。 結(jié)合酶的輔助因子是活性中心的重要組結(jié)合酶的輔助因子是活性中心的重要組成部分成部分。 活性中心的氨基酸殘基在一級(jí)結(jié)構(gòu)上可能相活性中心的氨基酸殘基在一級(jí)結(jié)構(gòu)上可能相距甚遠(yuǎn)，甚至位于不同肽鏈，通過(guò)折疊后而距甚遠(yuǎn)，甚至位于不同肽鏈，通過(guò)折疊后而在空間結(jié)構(gòu)上相互靠近。在空間結(jié)構(gòu)上相互靠近。酶活性的調(diào)節(jié)控制酶活性的調(diào)節(jié)控制一）別構(gòu)調(diào)節(jié)一）別構(gòu)調(diào)節(jié) 通過(guò)酶構(gòu)象的改變來(lái)調(diào)節(jié)酶活性的作用稱(chēng)為變構(gòu)調(diào)節(jié)。大部分別構(gòu)酶的動(dòng)力學(xué)曲線不符合米氏方程。給酶共

13、價(jià)結(jié)合一個(gè)基團(tuán)或者去掉一個(gè)基團(tuán)，從而改變其活給酶共價(jià)結(jié)合一個(gè)基團(tuán)或者去掉一個(gè)基團(tuán)，從而改變其活性的調(diào)節(jié)方式。常見(jiàn)磷酸化。性的調(diào)節(jié)方式。常見(jiàn)磷酸化。糖原磷酸化酶糖原磷酸化酶a 糖原磷酸化酶糖原磷酸化酶b二）共價(jià)調(diào)節(jié)二）共價(jià)調(diào)節(jié)Active relaxed formInactive tense form主要知識(shí)點(diǎn)回顧一、酶與輔酶一、酶與輔酶酶的調(diào)節(jié)作用酶的調(diào)節(jié)作用 酶活調(diào)節(jié)：酶原激活、可逆的共價(jià)修飾、別構(gòu)調(diào)節(jié)酶活調(diào)節(jié)：酶原激活、可逆的共價(jià)修飾、別構(gòu)調(diào)節(jié) 酶量調(diào)節(jié)酶量調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行轉(zhuǎn)錄水平進(jìn)行輔酶輔酶 水溶性維生素的活性形式及功能水溶性維生素的活性形式及功能P434P434傳遞CO2羧化酶生物素生

14、物素VH 癩皮病傳遞2H 脫氫酶NADCo、NADPCo）尼克酸、酰胺Vpp惡性貧血轉(zhuǎn)移H或R 變位酶VB12輔酶鈷胺素VB12脂溢性皮炎轉(zhuǎn)移氨基轉(zhuǎn)氨酶磷酸吡哆醛吡哆醛VB6傳 遞 乙 酰基脫氫酶、硫激酶COA泛酸VB5口角炎傳遞2H脫氫酶FMN、FAD核黃素VB2腳氣去掉CO2脫羧酶TPP硫胺素VB1 缺乏病作用酶輔酶結(jié)構(gòu)V傳遞CO2羧化酶生物素生物素VH 癩皮病傳遞2H 脫氫酶NADCo、NADPCo）尼克酸、酰胺Vpp惡性貧血轉(zhuǎn)移H或R 變位酶VB12輔酶鈷胺素VB12脂溢性皮炎轉(zhuǎn)移氨基轉(zhuǎn)氨酶磷酸吡哆醛吡哆醛VB6傳 遞 乙 酰基脫氫酶、硫激酶COA泛酸VB5口角炎傳遞2H脫氫酶FMN、

15、FAD核黃素VB2腳氣去掉CO2脫羧酶TPP硫胺素VB1 缺乏病作用酶輔酶結(jié)構(gòu)V 核酶：核酶：具有催化活性的具有催化活性的RNA。非蛋白酶，。非蛋白酶，識(shí)別特定識(shí)別特定RNA片段，進(jìn)行內(nèi)切，片段，進(jìn)行內(nèi)切，具有內(nèi)切，具有內(nèi)切，連接，聚合等核酸酶功能。連接，聚合等核酸酶功能。 如：如： 原生動(dòng)物四膜蟲(chóng)原生動(dòng)物四膜蟲(chóng)26SRNA的內(nèi)含子的內(nèi)含子L19 RNA可自行催化（可自行催化（no protein）。）。 核酸酶：核酸酶：即核酸水解酶，化學(xué)本質(zhì)為蛋白即核酸水解酶，化學(xué)本質(zhì)為蛋白質(zhì)，催化核酸的水解。質(zhì)，催化核酸的水解。核酶（核酶（ribozymeribozyme) )和核酸酶和核酸酶主要知識(shí)點(diǎn)回

16、顧二、生物氧化（氧化磷酸化）二、生物氧化（氧化磷酸化）1 1、概念、特點(diǎn)、概念、特點(diǎn) P114P1142 2、高能磷酸化合物類(lèi)型、高能磷酸化合物類(lèi)型磷氧鍵型化合物磷氧鍵型化合物 3-磷酸甘油酸磷酸、乙酰磷酸、磷酸甘油酸磷酸、乙酰磷酸、 ATP、磷酸烯醇、磷酸烯醇式丙酮酸、式丙酮酸、氮磷鍵型化合物氮磷鍵型化合物 磷酸肌酸、磷酸精氨酸磷酸肌酸、磷酸精氨酸硫酯鍵型化合物硫酯鍵型化合物 酰基輔酶?；o酶A A甲硫鍵型化合物甲硫鍵型化合物 S-S-腺苷甲硫氨酸腺苷甲硫氨酸RCOSCoACOO-CHNH3+CH2CH2S+H3CACH2CCH3CH3CHOHCONHCH2CH2CNHCH2CH2SHOOO

17、OHPOOHHONNNH2NNOPOOOHPOOOHCH2核苷酸衍生物核苷酸衍生物主要知識(shí)點(diǎn)回顧3 3、脫氫酶的輔酶：、脫氫酶的輔酶： NADNAD+ +、NADPNADP+ +、FADFAD、FMNFMNOCH2OPOPOCH2OHOHOOO-O-N+CON H2OOHOH(OPO3H2)NNN H2NNOC H2O P O P O C H2O HO HOOO-O-N+C O N H2OO HO H (O P O3H2)NNN H2NNCH3CH3NCCNHNNOOCH2CHCHCHCH2OPOOHOHOHOOHOCH2OHOHNNNH2NNFMN FADNAD+NADP+核苷酸衍生物核苷酸

18、衍生物主要知識(shí)點(diǎn)回顧二、生物氧化（氧化磷酸化）二、生物氧化（氧化磷酸化）4 4、電子傳遞鏈成員、排列順序、抑制劑、電子傳遞鏈成員、排列順序、抑制劑NADH-Q NADH-Q 還原酶還原酶琥珀酸琥珀酸-Q -Q 還原酶還原酶細(xì)胞色素還原酶細(xì)胞色素還原酶細(xì)胞色素氧化酶細(xì)胞色素氧化酶非蛋白電子載體非蛋白電子載體可溶性外周蛋白可溶性外周蛋白主要知識(shí)點(diǎn)回顧二、生物氧化（氧化磷酸化）二、生物氧化（氧化磷酸化）5 5、氧化磷酸化作用機(jī)制（、氧化磷酸化作用機(jī)制（化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)化學(xué)滲透學(xué)說(shuō)）、）、P/OP/O、解偶聯(lián)、解偶聯(lián)劑（劑（DNPDNP作用機(jī)制）作用機(jī)制）6 6、氧化磷酸化的調(diào)控、氧化磷酸化的調(diào)控 能荷能

19、荷7 7、底物水平磷酸化、底物水平磷酸化主要知識(shí)點(diǎn)回顧三、糖化學(xué)及糖代謝三、糖化學(xué)及糖代謝1 1、糖的概念、分類(lèi)、糖的概念、分類(lèi)2 2、重要的單糖及衍生物、重要的單糖及衍生物 單糖磷酸酯、糖苷（單糖磷酸酯、糖苷（0- 0-糖苷鍵、糖苷鍵、N-N-糖苷鍵）、氨基糖糖苷鍵）、氨基糖3 3、單糖的物理性質(zhì)、單糖的物理性質(zhì) 變旋現(xiàn)象變旋現(xiàn)象5 5、常見(jiàn)二糖、常見(jiàn)二糖 單糖單位、單糖單位、糖苷鍵類(lèi)型糖苷鍵類(lèi)型 還原糖鑒定還原糖鑒定4 4、單糖的化學(xué)性質(zhì)、單糖的化學(xué)性質(zhì) 成成顏色反應(yīng)顏色反應(yīng)糖原合成糖原合成糖代謝糖代謝糖異生糖異生主要知識(shí)點(diǎn)回顧TCA循環(huán)循環(huán)丙酮酸氧化脫羧丙酮酸氧化脫羧糖原分解糖原分解激酶

20、：激酶：能夠在能夠在ATP和任何一種底物之間起催化作用，轉(zhuǎn)移磷酸基團(tuán)的一類(lèi)酶。和任何一種底物之間起催化作用，轉(zhuǎn)移磷酸基團(tuán)的一類(lèi)酶。磷酸酶：磷酸酶：水解磷酸基團(tuán)的酶。水解磷酸基團(tuán)的酶。HMS途徑途徑生理意義生理意義（肝臟中（肝臟中6-P-G磷酸酶、肌肉中磷酸酶、肌肉中Cori循環(huán)）循環(huán)）（6-P-G脫氫酶）脫氫酶）（6-P-G）NADPH+H+，磷酸戊糖，磷酸戊糖異構(gòu)化異構(gòu)化基團(tuán)轉(zhuǎn)移基團(tuán)轉(zhuǎn)移供能供能（糖原合酶、糖原分糖原合酶、糖原分支酶、支酶、UDP-G焦磷酸焦磷酸化酶化酶）（糖原磷酸化酶、糖原轉(zhuǎn)移（糖原磷酸化酶、糖原轉(zhuǎn)移/脫支脫支酶、磷酸葡萄糖變位酶）酶、磷酸葡萄糖變位酶）有氧有氧EMP厭氧厭

21、氧乳酸發(fā)酵乳酸發(fā)酵乙醇發(fā)酵乙醇發(fā)酵（丙酮酸脫氫酶系（丙酮酸脫氫酶系/TPP）3NADH+H+、FADH2 、 GTPNADH+H+2ATP糖酵解糖酵解6-磷酸葡萄糖葡萄糖果糖6-磷酸果糖1，6-二磷酸果糖3-磷酸甘油醛磷酸二羥丙酮糖原1-磷酸葡萄糖ATPATP第一階段第一階段第二階段第二階段耗能耗能3-磷酸甘油酸磷酸3-磷酸甘油酸2-磷酸甘油酸磷酸烯醇式丙酮酸丙酮酸ATPATP產(chǎn)能產(chǎn)能NADH+H+酶促化學(xué)修飾對(duì)酶活性的調(diào)節(jié)酶促化學(xué)修飾對(duì)酶活性的調(diào)節(jié) 酶酶化學(xué)修飾類(lèi)型化學(xué)修飾類(lèi)型酶活性改變酶活性改變糖原磷酸化酶糖原磷酸化酶磷酸化酶磷酸化酶b激酶激酶糖原合成酶糖原合成酶丙酮酸脫羧酶丙酮酸脫羧酶磷

22、酸果糖激酶磷酸果糖激酶丙酮酸脫氫酶丙酮酸脫氫酶HMG-CoA還原酶還原酶HMG-CoA還原酶激酶還原酶激酶乙酰乙酰CoA羧化酶羧化酶脂肪細(xì)胞甘油三脂脂肪酶脂肪細(xì)胞甘油三脂脂肪酶黃嘌呤氧化酶黃嘌呤氧化酶磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化磷酸化磷酸化/脫磷酸化脫磷酸化-SH/-S-S-激活激活/抑制抑制激活激活/抑制抑制抑制抑制/激活激活抑制抑制/激活激活抑制抑制/

23、激活激活抑制抑制/激活激活抑制抑制/激活激活激活激活/抑制抑制抑制抑制/激活激活激活激活/抑制抑制脫氫酶脫氫酶/氧化酶氧化酶主要知識(shí)點(diǎn)回顧四、脂化學(xué)（生物膜）及脂代謝四、脂化學(xué)（生物膜）及脂代謝1 1、脂質(zhì)的概念、分類(lèi)及作用（、脂質(zhì)的概念、分類(lèi)及作用（貯存、結(jié)構(gòu)、活性脂質(zhì)貯存、結(jié)構(gòu)、活性脂質(zhì)） （脂質(zhì)體（脂質(zhì)體 P81P81）2 2、脂肪酸種類(lèi)、理化性質(zhì)、脂肪酸種類(lèi)、理化性質(zhì) 熔點(diǎn)（與烷烴鏈長(zhǎng)度成正比，熔點(diǎn)（與烷烴鏈長(zhǎng)度成正比，與不飽和程度成反比）、溶解度、成脂酰與不飽和程度成反比）、溶解度、成脂酰CoACoA、 乳化作用乳化作用3 3、三酰甘油的理化性質(zhì)、三酰甘油的理化性質(zhì) 皂化、酸值、碘值

24、皂化、酸值、碘值7 7、脂蛋白結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及功能、脂蛋白結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及功能5 5、萜（、萜（V VA A、V VD D、V VE E、V VK K，異戊二烯異戊二烯）和類(lèi)固醇（）和類(lèi)固醇（類(lèi)固醇激類(lèi)固醇激素，環(huán)戊烷多氫菲素，環(huán)戊烷多氫菲）6 6、膽固醇、膽汁酸、膽固醇、膽汁酸4 4、磷脂、磷脂 甘油磷脂、鞘磷脂母體化合物結(jié)構(gòu)式甘油磷脂、鞘磷脂母體化合物結(jié)構(gòu)式 典型化合物典型化合物: :腦磷脂、卵磷脂的結(jié)構(gòu)組成腦磷脂、卵磷脂的結(jié)構(gòu)組成？他汀類(lèi)藥物他汀類(lèi)藥物將食物中的將食物中的TG從小腸轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟從小腸轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇到轉(zhuǎn)運(yùn)膽固醇到肝外組織細(xì)胞肝外組織細(xì)胞轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性轉(zhuǎn)運(yùn)內(nèi)源性TG到到脂肪及肌肉組織脂肪

25、及肌肉組織將膽固醇從周?chē)鷮⒛懝檀紡闹車(chē)M織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟組織轉(zhuǎn)運(yùn)到肝臟主要知識(shí)點(diǎn)回顧四、生物膜四、生物膜1 1、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（、結(jié)構(gòu)特點(diǎn)（流體流體鑲嵌模型鑲嵌模型）、膜脂組成）、膜脂組成影響磷脂流影響磷脂流動(dòng)性的因素動(dòng)性的因素：所含的所含的FA不飽和程度、不飽和程度、鏈長(zhǎng)，膽固鏈長(zhǎng)，膽固醇、鞘磷酯醇、鞘磷酯的含量，膜的含量，膜蛋白及溫度，蛋白及溫度，pH等等。等等。 主要特征主要特征： 膜中的磷脂疏水尾相對(duì)，極性頭朝外，基本結(jié)構(gòu)是磷脂雙分膜中的磷脂疏水尾相對(duì)，極性頭朝外，基本結(jié)構(gòu)是磷脂雙分子層，有一定的子層，有一定的流動(dòng)性流動(dòng)性。 蛋白質(zhì)分子有的鑲嵌在膜脂中，有的貫穿磷脂雙層，蛋白質(zhì)分子有的鑲嵌在膜脂

26、中，有的貫穿磷脂雙層，膜膜PrPr可可側(cè)向運(yùn)動(dòng)，圍繞與膜平面垂直的軸旋轉(zhuǎn)，但不能翻滾側(cè)向運(yùn)動(dòng)，圍繞與膜平面垂直的軸旋轉(zhuǎn)，但不能翻滾。 膜膜PrPr與膜脂，膜與膜脂，膜PrPr與膜與膜PrPr等的相互作用限制了膜的流動(dòng)性。等的相互作用限制了膜的流動(dòng)性。 膜在化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)上的膜在化學(xué)組成及結(jié)構(gòu)上的不對(duì)稱(chēng)性不對(duì)稱(chēng)性，保證了，保證了膜功能膜功能（物質(zhì)運(yùn)（物質(zhì)運(yùn)輸，信息傳遞）輸，信息傳遞）的方向性的方向性。 糖類(lèi)多以糖蛋白，糖脂的形成結(jié)合在細(xì)胞表面糖類(lèi)多以糖蛋白，糖脂的形成結(jié)合在細(xì)胞表面天線，在天線，在接受信息與細(xì)胞識(shí)別接受信息與細(xì)胞識(shí)別上起重要作用。上起重要作用。 膜結(jié)構(gòu)膜結(jié)構(gòu)液態(tài)鑲嵌模型液態(tài)鑲嵌模

27、型（19721972，S.J.SingerS.J.Singer） 液態(tài)鑲嵌模型（液晶態(tài)鑲嵌模型液態(tài)鑲嵌模型（液晶態(tài)鑲嵌模型）膜是蛋白質(zhì)在粘滯的膜是蛋白質(zhì)在粘滯的流體狀脂質(zhì)雙層中所形成的鑲嵌物。流體狀脂質(zhì)雙層中所形成的鑲嵌物。側(cè)向擴(kuò)散側(cè)向擴(kuò)散/ /移動(dòng)、翻轉(zhuǎn)、全反移動(dòng)、翻轉(zhuǎn)、全反式式偏轉(zhuǎn)異構(gòu)化運(yùn)動(dòng)、圍繞與偏轉(zhuǎn)異構(gòu)化運(yùn)動(dòng)、圍繞與膜平面垂直的軸擺動(dòng)、旋轉(zhuǎn)膜平面垂直的軸擺動(dòng)、旋轉(zhuǎn)主要知識(shí)點(diǎn)回顧四、生物膜四、生物膜2 2、生物膜的主要功能、生物膜的主要功能 能量轉(zhuǎn)換、能量轉(zhuǎn)換、物質(zhì)運(yùn)輸、物質(zhì)運(yùn)輸、信息識(shí)別與傳遞信息識(shí)別與傳遞主動(dòng)運(yùn)輸主動(dòng)運(yùn)輸 Na+,K+-ATP酶（泵）酶（泵） 下下P47被動(dòng)運(yùn)輸被動(dòng)運(yùn)

28、輸糖和氨基酸的運(yùn)送糖和氨基酸的運(yùn)送磷酸烯醇式丙酮磷酸烯醇式丙酮酸轉(zhuǎn)磷酸化酶酸轉(zhuǎn)磷酸化酶系統(tǒng)（系統(tǒng)（PTSPTS）協(xié)同運(yùn)輸協(xié)同運(yùn)輸基團(tuán)轉(zhuǎn)運(yùn)基團(tuán)轉(zhuǎn)運(yùn)酮體的合成酮體的合成脂代謝脂代謝脂肪酸的合成脂肪酸的合成主要知識(shí)點(diǎn)回顧（軟）脂肪酸的氧化（軟）脂肪酸的氧化129ATP活化（胞漿），轉(zhuǎn)運(yùn)（活化（胞漿），轉(zhuǎn)運(yùn)（肉堿脂肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶酰轉(zhuǎn)移酶），），-氧化氧化（線粒體）（線粒體）甘油代謝甘油代謝 脂肪動(dòng)員脂肪動(dòng)員膽固醇的合成膽固醇的合成乙酰乙酰CoATCA羥甲基戊二酸單酰羥甲基戊二酸單酰CoA（HMG- CoA）酮體肝內(nèi)生成，肝外酮體肝內(nèi)生成，肝外利用（利用（硫解硫解/激酶）激酶）膽固醇代謝：膽固醇代謝：膽

29、汁酸、激素、膽汁酸、激素、VD3儲(chǔ)能儲(chǔ)能（膽鹽乳化、脂蛋白運(yùn)輸）（膽鹽乳化、脂蛋白運(yùn)輸）乙酰乙酸、乙酰乙酸、- -羥丁酸、羥丁酸、丙酮丙酮HMG-HMG-CoACoA裂解酶裂解酶HMG-HMG-CoACoA還原酶還原酶甘油三酯脂肪酶甘油三酯脂肪酶檸檬酸檸檬酸- -丙酮酸穿梭至胞漿丙酮酸穿梭至胞漿乙酰輔酶乙酰輔酶A A羧化酶羧化酶3-磷酸甘油磷酸甘油磷酸二羥磷酸二羥丙酮丙酮3-3-磷酸甘油酸磷酸甘油酸EMP單位碳原子單位碳原子產(chǎn)能效率高產(chǎn)能效率高主要知識(shí)點(diǎn)回顧五、核酸及核酸代謝五、核酸及核酸代謝1 1、核酸定義、核酸定義2 2、分類(lèi)、分類(lèi) DNA RNA DNA RNA （紫外吸收）（紫外吸收）

30、一級(jí)結(jié)構(gòu)一級(jí)結(jié)構(gòu)二級(jí)結(jié)構(gòu)二級(jí)結(jié)構(gòu) 雙螺旋雙螺旋 tRNAtRNA mRNA mRNA rRNArRNA PCR（變性、復(fù)性、雜交）（變性、復(fù)性、雜交）增色、減色效應(yīng)增色、減色效應(yīng)三級(jí)結(jié)構(gòu)三級(jí)結(jié)構(gòu)高級(jí)結(jié)構(gòu)高級(jí)結(jié)構(gòu) （蛋白復(fù)合物）（蛋白復(fù)合物）3 3、分離、提純、定量、分離、提純、定量 理解理解4 4、核苷酸序列測(cè)定、核苷酸序列測(cè)定 理解理解PCR（聚合酶鏈?zhǔn)剑ň酆厦告準(zhǔn)?反應(yīng)）反應(yīng)） 即聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)即聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)(Polymerase Chain Reaction)(Polymerase Chain Reaction)，是，是8080年代中期發(fā)展起來(lái)的年代中期發(fā)展起來(lái)的體外核酸擴(kuò)增技術(shù)體

31、外核酸擴(kuò)增技術(shù)。 PCRPCR技術(shù)的基本原理：技術(shù)的基本原理：PCRPCR由由變性變性-退火退火-延伸延伸三個(gè)基本反三個(gè)基本反應(yīng)步驟構(gòu)成：應(yīng)步驟構(gòu)成：模板模板DNADNA的變性的變性：加熱至：加熱至9393左右，模板左右，模板DNADNA雙雙鏈解離，成為單鏈；鏈解離，成為單鏈；單鏈單鏈DNADNA與引物的退火與引物的退火( (復(fù)性復(fù)性) )：溫度降至溫度降至5555左右，特異性的引物與模板左右，特異性的引物與模板DNADNA單鏈的單鏈的33末端結(jié)合；末端結(jié)合；引引物的延伸：物的延伸：DNADNA模板模板-引物結(jié)合物在引物結(jié)合物在TaqDNATaqDNA聚合酶的作用下，以聚合酶的作用下，以dNT

32、PdNTP為原料，合成一條新鏈；這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模為原料，合成一條新鏈；這種新鏈又可成為下次循環(huán)的模板，重復(fù)變性板，重復(fù)變性-退火退火-延伸三過(guò)程，就可獲得更多延伸三過(guò)程，就可獲得更多DNADNA。每完成。每完成一個(gè)循環(huán)需一個(gè)循環(huán)需2 24 4分鐘，分鐘， 2 23 3小時(shí)就能將目的基因擴(kuò)增放大幾百小時(shí)就能將目的基因擴(kuò)增放大幾百萬(wàn)倍。萬(wàn)倍。 PCR技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用：技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用：P596DNase I足跡試驗(yàn)足跡試驗(yàn) 蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)結(jié)合在結(jié)合在DNADNA片段上，能保護(hù)結(jié)合部位不被片段上，能保護(hù)結(jié)合部位不被DNaseDNase破壞，破壞，DNADNA分子經(jīng)酶切作用后遺留下該片段分子

33、經(jīng)酶切作用后遺留下該片段( (亦稱(chēng)亦稱(chēng)“足跡足跡”) )，進(jìn)而可，進(jìn)而可以確定它的序列。在電泳凝膠的放射性自顯影圖片上，相應(yīng)以確定它的序列。在電泳凝膠的放射性自顯影圖片上，相應(yīng)于蛋白質(zhì)結(jié)合的部位沒(méi)有放射性標(biāo)記條帶。于蛋白質(zhì)結(jié)合的部位沒(méi)有放射性標(biāo)記條帶。 DNaseDNase I I足跡試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)流程如下：足跡試驗(yàn)的實(shí)驗(yàn)流程如下：待檢雙鏈待檢雙鏈DNADNA分子分子用用3232P P作末端標(biāo)記，通常只標(biāo)記一端；作末端標(biāo)記，通常只標(biāo)記一端；蛋白質(zhì)與蛋白質(zhì)與DNADNA混合，等混合，等兩者結(jié)合后，加入適量的兩者結(jié)合后，加入適量的DNaseDNase I I，消化，消化DNADNA分子，控制酶的分子，

34、控制酶的用量，使之達(dá)到每個(gè)用量，使之達(dá)到每個(gè)DNADNA分子只發(fā)生一次磷酸二酯鍵斷裂，并分子只發(fā)生一次磷酸二酯鍵斷裂，并列設(shè)置未加蛋白質(zhì)的對(duì)照；列設(shè)置未加蛋白質(zhì)的對(duì)照；從從DNADNA上除去蛋白質(zhì)，將變性的上除去蛋白質(zhì)，將變性的DNADNA加樣在測(cè)序凝膠中作電泳和放射性自顯影，與對(duì)照組相比加樣在測(cè)序凝膠中作電泳和放射性自顯影，與對(duì)照組相比后解讀出足跡部位的核苷酸序列。后解讀出足跡部位的核苷酸序列。嘌呤元素來(lái)源嘌呤元素來(lái)源嘧啶元素來(lái)源嘧啶元素來(lái)源核酸代謝核酸代謝嘌呤核苷酸合成嘌呤核苷酸合成主要知識(shí)點(diǎn)回顧堿基降解堿基降解核蛋白經(jīng)胃酸、核酸酶、核苷酸核蛋白經(jīng)胃酸、核酸酶、核苷酸酶、核苷磷酸化酶成磷酸

35、戊糖和酶、核苷磷酸化酶成磷酸戊糖和堿基堿基嘧啶核苷酸合成嘧啶核苷酸合成NH3+CO2+H2O（黃嘌呤氧化酶）（黃嘌呤氧化酶） 痛風(fēng)痛風(fēng) 別嘌呤醇別嘌呤醇嘧啶嘧啶嘌呤嘌呤 尿酸尿酸從頭合成、從頭合成、補(bǔ)救途徑補(bǔ)救途徑PRPP脫氧核糖核苷酸合成脫氧核糖核苷酸合成P399 圖圖33-11DNA復(fù)制、復(fù)制、RNA生物合成生物合成主要知識(shí)點(diǎn)回顧5、DNA復(fù)制復(fù)制起始起始 - 延伸延伸 - 終止終止結(jié)果結(jié)果:半保留半保留端粒、端粒酶端粒、端粒酶（真核生物）（真核生物）（酶、輔助因子、全過(guò)程酶、輔助因子、全過(guò)程）DNA聚合酶聚合酶III過(guò)程過(guò)程:半不連續(xù)半不連續(xù)岡崎片段岡崎片段復(fù)制叉移動(dòng)方向復(fù)制叉移動(dòng)方向單

36、鏈結(jié)合蛋白單鏈結(jié)合蛋白R(shí)NA引物引物DNA連接酶連接酶DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶拓?fù)洚悩?gòu)酶DNA解旋酶解旋酶引物酶引物酶引發(fā)體引發(fā)體DNA聚合酶聚合酶I復(fù)制叉復(fù)制叉主要知識(shí)點(diǎn)回顧6、RNA生物合成生物合成起始起始 - 延伸延伸 - 終止終止轉(zhuǎn)錄泡轉(zhuǎn)錄泡識(shí)別部位識(shí)別部位 結(jié)合部位結(jié)合部位 RNARNA轉(zhuǎn)錄開(kāi)始轉(zhuǎn)錄開(kāi)始+1+1 （GTPGTP，ATP)ATP)（酶、輔助因子、全過(guò)程）（酶、輔助因子、全過(guò)程）逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶逆轉(zhuǎn)錄酶是一種多功能酶逆轉(zhuǎn)錄酶是一種多功能酶 以以RNARNA為模板合成互補(bǔ)的為模板合成互補(bǔ)的DNADNA鏈鏈，形，形成成RNARNADNADNA的雜合的雜合分子。分子。 具有具有Rnas

37、eRnase H H樣的活力，水解樣的活力，水解RNARNADNADNA的雜合分子中的的雜合分子中的RNARNA。 以新以新合成的單鏈合成的單鏈DNADNA為為模板，合成互模板，合成互補(bǔ)鏈，形成雙鏈補(bǔ)鏈，形成雙鏈DNADNA分子。分子。主要知識(shí)點(diǎn)回顧6、RNA生物合成生物合成轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加工轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的加工原核生物原核生物真核生物真核生物mRNAtRNArRNAmRNAtRNArRNA去除內(nèi)含子去除內(nèi)含子加帽又加尾加帽又加尾甲基化甲基化3-CCA-OH甲基化甲基化修飾修飾剪接、甲基剪接、甲基化修飾化修飾多數(shù)不多數(shù)不用加工用加工7 7、原核細(xì)胞基因表達(dá)的模型、原核細(xì)胞基因表達(dá)的模型操縱子學(xué)說(shuō)操縱子學(xué)

38、說(shuō) 主要知識(shí)點(diǎn)回顧誘導(dǎo)操縱子（乳糖操縱子）誘導(dǎo)操縱子（乳糖操縱子） 分解代謝分解代謝 阻遏操縱子（色氨酸操縱子）阻遏操縱子（色氨酸操縱子） 合成代謝合成代謝 組成：組成：?jiǎn)?dòng)子動(dòng)子、操操縱基因縱基因、結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu)基因 葡萄糖效應(yīng)葡萄糖效應(yīng)（降解物阻遏）（降解物阻遏）衰減作用衰減作用組成酶組成酶誘導(dǎo)酶誘導(dǎo)酶cAMP受體蛋白（受體蛋白（CRP）降解物基因活化蛋白（降解物基因活化蛋白（CAP）OR+cAMP作用于啟動(dòng)子，作用于啟動(dòng)子，促進(jìn)轉(zhuǎn)錄促進(jìn)轉(zhuǎn)錄葡萄糖分解代謝產(chǎn)物葡萄糖分解代謝產(chǎn)物抑制腺苷酸環(huán)化酶活抑制腺苷酸環(huán)化酶活性，性，cAMPcAMP減少，分解減少，分解代謝酶轉(zhuǎn)錄水平低。代謝酶轉(zhuǎn)錄水平低

39、。啟動(dòng)子啟動(dòng)子操縱基因操縱基因結(jié)構(gòu)基因結(jié)構(gòu)基因啟動(dòng)基因，轉(zhuǎn)錄調(diào)控的控啟動(dòng)基因，轉(zhuǎn)錄調(diào)控的控制部位，制部位，RNA聚合酶的結(jié)聚合酶的結(jié)合部位，是基因轉(zhuǎn)錄的起合部位，是基因轉(zhuǎn)錄的起點(diǎn)。點(diǎn)。主要知識(shí)點(diǎn)回顧原核細(xì)胞基因表達(dá)的模型原核細(xì)胞基因表達(dá)的模型操縱子學(xué)說(shuō)操縱子學(xué)說(shuō) 誘導(dǎo)操縱子（乳糖操縱子）誘導(dǎo)操縱子（乳糖操縱子） 分解代謝分解代謝 阻遏操縱子（色氨酸操縱子）阻遏操縱子（色氨酸操縱子） 合成代謝合成代謝 衰減作用衰減作用衰減子：一種位于結(jié)構(gòu)基因上游前導(dǎo)衰減子：一種位于結(jié)構(gòu)基因上游前導(dǎo)區(qū)的終止子。區(qū)的終止子。轉(zhuǎn)錄是否轉(zhuǎn)錄是否進(jìn)進(jìn)行行轉(zhuǎn)錄是否轉(zhuǎn)錄是否繼繼續(xù)續(xù)主要知識(shí)點(diǎn)回顧六、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)降解、氨基酸

40、分解六、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解1 1、蛋白質(zhì)的基本單位、蛋白質(zhì)的基本單位AA AA - -氨基酸結(jié)構(gòu)式氨基酸結(jié)構(gòu)式酸堿化學(xué)（酸堿化學(xué)（AAAAo o、PIPI）光學(xué)性質(zhì)光學(xué)性質(zhì)AA的分離的分離 分配層析分配層析 離子交換層析離子交換層析化學(xué)反應(yīng)化學(xué)反應(yīng)AAAA分類(lèi)（分類(lèi)（R R基極性特點(diǎn)基極性特點(diǎn)）芳香族氨基酸（芳香族氨基酸（280nm280nm）茚三酮顯色、茚三酮顯色、SangerSanger反應(yīng)、反應(yīng)、EdmanEdman反應(yīng)反應(yīng)主要知識(shí)點(diǎn)回顧六、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解六、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解2 2、蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)、蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)一級(jí)結(jié)構(gòu)：一級(jí)結(jié)構(gòu)：AAAA的

41、排列順序的排列順序 肽鍵肽鍵 一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定一級(jí)結(jié)構(gòu)測(cè)定二級(jí)結(jié)構(gòu)：借助氫鍵形成的規(guī)則結(jié)構(gòu)二級(jí)結(jié)構(gòu)：借助氫鍵形成的規(guī)則結(jié)構(gòu) 四種四種三級(jí)結(jié)構(gòu)：疏水作用三級(jí)結(jié)構(gòu)：疏水作用 空間折疊空間折疊 分子伴侶分子伴侶 功能單位功能單位四級(jí)結(jié)構(gòu)：疏水作用四級(jí)結(jié)構(gòu)：疏水作用 亞基間相互作用亞基間相互作用 別構(gòu)酶別構(gòu)酶X X射線衍射法射線衍射法結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系（肌紅蛋白、血紅蛋白）結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系（肌紅蛋白、血紅蛋白）蛋白質(zhì)的變性蛋白質(zhì)的變性本質(zhì)：本質(zhì)：蛋白質(zhì)分子中的次級(jí)鍵被破壞，引起天然構(gòu)蛋白質(zhì)分子中的次級(jí)鍵被破壞，引起天然構(gòu)象解體。象解體?，F(xiàn)象：現(xiàn)象：生物活性喪失，一些側(cè)鏈基團(tuán)暴露，溶解度生物活性喪失，一些側(cè)鏈

42、基團(tuán)暴露，溶解度降低形成沉淀，分子結(jié)構(gòu)松散，易被蛋白水解酶分降低形成沉淀，分子結(jié)構(gòu)松散，易被蛋白水解酶分解。解。變性劑：變性劑：尿素、鹽酸胍、尿素、鹽酸胍、SDS超二級(jí)結(jié)構(gòu)（基元或膜體）：超二級(jí)結(jié)構(gòu)（基元或膜體）：、 P220P220 結(jié)構(gòu)域：功能域，結(jié)構(gòu)域：功能域，三級(jí)結(jié)構(gòu)的局部折疊三級(jí)結(jié)構(gòu)的局部折疊區(qū)，相對(duì)獨(dú)立的緊密球?qū)嶓w。區(qū)，相對(duì)獨(dú)立的緊密球?qū)嶓w。P222P222亞基：四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)中每個(gè)球狀蛋亞基：四級(jí)結(jié)構(gòu)的蛋白質(zhì)中每個(gè)球狀蛋白質(zhì)稱(chēng)為亞基。白質(zhì)稱(chēng)為亞基。P242P242球狀蛋白折疊層次球狀蛋白折疊層次主要知識(shí)點(diǎn)回顧六、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解六、蛋白質(zhì)及蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解3

43、 3、蛋白質(zhì)的分離、純化、表征、蛋白質(zhì)的分離、純化、表征蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)蛋白質(zhì)的酸堿性質(zhì)純化方法純化方法分子大小分子大小溶解度溶解度電荷電荷選擇性吸附選擇性吸附親和層析親和層析凝膠過(guò)濾凝膠過(guò)濾SDS-PAGE 等電點(diǎn)沉淀等電點(diǎn)沉淀鹽溶、鹽析鹽溶、鹽析離子交換離子交換IEFIEFPAGEPAGE疏水層析疏水層析蛋白質(zhì)表蛋白質(zhì)表面疏水性面疏水性差別差別生物學(xué)生物學(xué)親和力親和力理解理解P315表表7-7電泳純電泳純含量測(cè)定方法：凱氏定氮（含量測(cè)定方法：凱氏定氮（16%）、雙縮脲法（肽鍵）、考馬斯亮藍(lán)法）、雙縮脲法（肽鍵）、考馬斯亮藍(lán)法主要知識(shí)點(diǎn)回顧六、蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解六、蛋白質(zhì)降解、氨基酸分解

44、4 4、蛋白質(zhì)的降解、蛋白質(zhì)的降解內(nèi)源性蛋白降解機(jī)制：內(nèi)源性蛋白降解機(jī)制：溶酶體、泛肽標(biāo)記溶酶體、泛肽標(biāo)記外源性蛋白消化外源性蛋白消化：胰蛋白酶：堿性氨基酸胰蛋白酶：堿性氨基酸糜蛋白酶：芳香族氨基酸糜蛋白酶：芳香族氨基酸（胰凝乳蛋白酶）（胰凝乳蛋白酶）羧肽酶：羧基末端肽（小肽）羧肽酶：羧基末端肽（小肽）氨肽酶：氨基末端肽（小肽）氨肽酶：氨基末端肽（小肽） 外源性外源性AAAA吸收吸收：依賴(lài)于依賴(lài)于NaNa+ +的主動(dòng)運(yùn)輸?shù)闹鲃?dòng)運(yùn)輸 - -谷氨酸?；h(huán)（谷氨酸?；h(huán)（GSHGSH）主要知識(shí)點(diǎn)回顧轉(zhuǎn)氨基作用轉(zhuǎn)氨基作用氧化脫氨氧化脫氨（L-L-谷氨酸脫氫酶）谷氨酸脫氫酶）聯(lián)合脫氨聯(lián)合脫氨（轉(zhuǎn)氨酶

45、與（轉(zhuǎn)氨酶與L L谷氨酸脫氫谷氨酸脫氫酶聯(lián)合脫氨、腺嘌呤核苷酸循環(huán)聯(lián)酶聯(lián)合脫氨、腺嘌呤核苷酸循環(huán)聯(lián)合脫氨）合脫氨）氨的運(yùn)輸：氨的運(yùn)輸：肌肉內(nèi)葡萄糖肌肉內(nèi)葡萄糖-丙氨酸丙氨酸循環(huán)循環(huán)（谷氨酸脫氫酶、谷氨酰胺合成酶）（谷氨酸脫氫酶、谷氨酰胺合成酶）谷谷氨酰胺氨酰胺關(guān)鍵酶：關(guān)鍵酶：氨甲酰磷酸合成酶氨甲酰磷酸合成酶與與TCA的聯(lián)系的聯(lián)系：精氨琥珀酸：精氨琥珀酸AA種類(lèi)：瓜、精、鳥(niǎo)、天冬氨酸等種類(lèi)：瓜、精、鳥(niǎo)、天冬氨酸等維生素作為輔酶的作用維生素作為輔酶的作用一碳單位一碳單位 FH4，S-腺苷甲硫氨酸腺苷甲硫氨酸5 5、AAAA的分解的分解蛋白質(zhì)的生物合成（原核生物）蛋白質(zhì)的生物合成（原核生物）主要知識(shí)

46、點(diǎn)回顧 AA的活化與搬運(yùn)的活化與搬運(yùn)氨基酰氨基酰tRNA的合成的合成 肽鏈合成的起始肽鏈合成的起始起始復(fù)合物的形成起始復(fù)合物的形成 四個(gè)階段四個(gè)階段 （70S-mRNA-fMet-tRNA） 肽鏈的延伸肽鏈的延伸包括包括進(jìn)位進(jìn)位,轉(zhuǎn)肽轉(zhuǎn)肽,移位移位. 肽鍵的終止肽鍵的終止終止終止codon 信號(hào)肽信號(hào)肽結(jié)構(gòu)及功能結(jié)構(gòu)及功能RNA種類(lèi)及作用種類(lèi)及作用蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)分子伴侶分子伴侶蛋白質(zhì)的后加工（一級(jí)、高級(jí)）蛋白質(zhì)的后加工（一級(jí)、高級(jí)）主要知識(shí)點(diǎn)回顧七、物質(zhì)代謝調(diào)節(jié)和激素的作用機(jī)制七、物質(zhì)代謝調(diào)節(jié)和激素的作用機(jī)制1、P540圖圖39-1 四大物質(zhì)代謝相互關(guān)系示意圖四大物質(zhì)代謝相互關(guān)系示意圖 乙酰輔酶

47、乙酰輔酶A A的來(lái)源與去路的來(lái)源與去路2、P543圖圖39-5 主要產(chǎn)能營(yíng)養(yǎng)物分解代謝的三個(gè)步驟主要產(chǎn)能營(yíng)養(yǎng)物分解代謝的三個(gè)步驟主要知識(shí)點(diǎn)回顧七、激素的作用機(jī)制七、激素的作用機(jī)制激素由細(xì)胞分泌出來(lái)，由體液運(yùn)往各靶器官和靶細(xì)胞激素由細(xì)胞分泌出來(lái)，由體液運(yùn)往各靶器官和靶細(xì)胞起作用。起作用。高等動(dòng)物的激素分三類(lèi)；含氮類(lèi)激素、類(lèi)固醇激素、高等動(dòng)物的激素分三類(lèi)；含氮類(lèi)激素、類(lèi)固醇激素、脂肪酸衍生物激素。脂肪酸衍生物激素。作用機(jī)制：作用機(jī)制： 含氮類(lèi)激素的作用機(jī)制含氮類(lèi)激素的作用機(jī)制第二信使學(xué)說(shuō)第二信使學(xué)說(shuō) 類(lèi)固醇激素的作用機(jī)制類(lèi)固醇激素的作用機(jī)制調(diào)節(jié)基因表達(dá)調(diào)節(jié)基因表達(dá)一、膜受體一、膜受體cAMPcAMP作用途徑作用途徑 二、鈣及肌醇三磷酸作用途徑二、鈣及肌醇三磷酸作用途徑 主要知識(shí)點(diǎn)回顧七、激素的作用機(jī)制七、激素的作用機(jī)制三、受體酪氨酸酶途徑三、受體酪氨酸酶途徑 主要知識(shí)點(diǎn)回顧八、基因工程和蛋白質(zhì)工程八、基因工程和蛋白質(zhì)工程P614-615 提要提要基因工程與蛋白質(zhì)工程基因工程與蛋白質(zhì)工程基因工程