楊梅樹皮中黃酮類成分探究

1、楊梅樹皮中黃酮類成分探究作者：王定勇，劉恩桂，馮玉靜【摘要】目的對湖南產楊梅樹皮中黃酮類活性成分進行研究。方法用95%乙醇提取及各種柱色譜法分離，波譜 法鑒定結構。結果分離并鑒定了 6個化合物，其結構分別為 才斛皮素(quercetin, 1)、楊梅素(myricetin, 2)、異柳皮 昔(querceti n 30 b d glucoside, 3)、才斛皮昔(quercetin 30 a l rhamnoside,4 )、 楊梅昔(myricetrin, 5 )、楊梅素葡 萄糖昔(myricetin 30 b d glucoside, 6)o 結論 1, 4, 6為首次從楊梅屬中分離得到

2、；2為楊梅樹皮的主要化學成分, 該植物可作為楊梅素的資源植物加以開發(fā)利用?！娟P鍵詞】楊梅樹皮；黃酮；楊梅素abstractobjectiveto study the flavonoid cons tit uents of the bark of hunan myrica ruba methodsthe chemical constituents were separated and repeatedly purified by methods of chromatography, and their st rue tu res were elucida ted by uv, ir, ms an

3、d nmr. resultssix flavones were obtained and they were identified asquercetin， myricetin(2),quercetin-3-0- b -d-glucoside (3),quercetin-3-0-a -l-rhamnoside(4), myricetrin(5) and myricetin-3-0-b-d-glucoside (6) conclusionl,4,6 were isolated from the bark of hunan myrica ruba for the first time myrice

4、tin is the main constituent of the bark of hunan myrica ruba, and this plant can be utilized as plant sources of myricetin.key wordsbark of myrica ruba； flavonoids； myricetin楊梅 myrica ruba (lour.) sieb. et zucc.系楊梅科 楊梅屬植物。楊梅樹皮味苦、性溫，具有散淤止血、止痛之 功效，民間用于治療跌打損傷、骨折、痢疾、胃和十二指腸 潰瘍、牙痛等1。黃酮類化合物具有多種生物活性和較低 毒性2,

5、目前已成為國內外天然藥物研究的熱點之一。楊 梅素為一多務基黃酮類化合物，具有極強的抗自由基氧化和 紫外線吸收性能，安全性高，近幾年的研究發(fā)現天然楊梅素 具有降血糖3、酪氨酸酶抑制4、血小板活化因子拮抗 51肝臟保護等6作用，開發(fā)潛力大。為了開發(fā)湖南 楊梅植物中的黃酮類化合物和尋找富含楊梅素的資源植物， 我們對采自湖南省洞口縣的楊梅樹皮進行了化學成分的初 步研究。從該樹皮的乙醇提取物中共分離得到6個黃酮類化 合物，化學結構式(見圖1)?，F報道如下。1器材熔點用xrc-1顯微熔點儀(四川大學科儀廠制造)測 定，溫度計未校正；紅外光譜用nicolet prot e g e 460光 譜儀測定；紫外用

6、gbc cintra 20 uv spectrometer在甲 醇溶液中測定；核磁共振bruker am-400/600型核磁共振 儀測定，tms為內標；esims在hp-1100 lc/ ms上測定。 楊梅樹干的皮于2004 09采自湖南省洞口縣，由廣東藥學 院中藥學院曾令杰博士鑒定為楊梅myrica ruba (lour.) sieb. et zucc.的樹皮。硅膠均為青島海洋化工廠生產，聚 酰胺(100200目)為上海新量化工試劑有限公司產品。2方法與結果2. 1提取與分離取陰干的楊梅樹皮5 kg,粉碎后用 95%乙醇回流提取3次，2 h/次。減壓回收乙醇，濃縮得浸 膏。將浸膏用95%乙

7、醇溶解，加8倍量水沉淀葉綠素，離心 除去葉綠素后，回收乙醇混懸于水中，依次用石油瞇、氯仿、 正丁醇萃取。氯仿部分反復硅膠(200300目)柱色譜，石 油瞇-丙酮體系梯度洗脫，甲醇重結晶純化，得到化合物1 (418 mg)、2 (2186 mg) o正丁醇部分經硅膠(200300目) 柱色譜，以氯仿-甲醇系統梯度洗脫及聚酰胺(100200目) 柱色譜，甲醇-水系統梯度洗脫，甲醇重結晶純化，得到化 合物 3 (235 mg), 4 (284 mg), 5 (783 mg), 6 (153 mg)。2.2結構鑒定2. 2. 1化合物1黃色粉末(meoh) , mp 303304.0 °c,

8、三氯化鐵反 應綠色，三氯化鋁反應亮黃色，molish反應陰性。uv (meoh) x max nm： 258, 300, 369o ir v max (kbr) cm-1: 3 332, 1 668, 1 620, 1 568, 1 401, 1 283, 1 146, 1 020, 940, 830； 720, 703, 634 o esims m/z： 325.0 m + na + (positive), 301 m-h (negative)o 1hnmr (dms0-d6): 5 12. 55 (1h, s, 0h-5), 10. 91 (1h, br. s, oh-7), 9. 63

9、(1h, br. s, oh-3), 9. 40 (2h, br. s, oh-3，4，)，7.70 (1h, d, j=2. 0 hz, h-2, ), 7. 62 (1h, dd, j=9. 0, 2.0 hz, h6，), 6. 93 (1h, d, j=9. 0 hz, h-5，), 6. 40 (1h, d, j=l. 9 hz, h-8), 6.21 (1h, d, j=1.9 hz, h-6)。13cnmr 見表 1?；?合物1的數據與文獻7報道的桝皮素數據基本一致。2. 2.2化合物2棕黃色針晶(meoh), mp 323.0325.0 °c,溶于甲 醇、乙醇、丙酮、

10、醋酸乙酯，微溶于水，難溶于氯仿、石油 瞇。uv (meoh)入 max nm： 254, 301, 374。ir v max (kbr) cm-1： 3 350, 1 659, 1 609, 1 544, 1 515, 1 447, 1 317, 1 242, 1 204, 1 163, 1 113, 1 094, 1 026, 937, 832, 792, 766, 725, 707, 645。esi-ms m/z： 319.3 m + h +(positive), 317.1 m-h- (negative) 1hnmr (dms0-d6): 5 12. 51 (1h, s, oh-5) ,

11、 7. 25 (2h, s, h-2 ,6, ), 6. 37 (1h, d, j=2. 0 hz, h-6), 6. 18 (1h, d, j=2. 0 hz, h- 8) 13cnmr見表lo以上數據與文獻8報道的楊梅素光譜數 據基本一致。2. 2.3化合物3黃色顆粒狀結晶(meoh), mp 221223 9, tlc紫外 燈下(1%a1c13乙醇溶液)顯深黃色熒光，hc1-mg粉反應呈 紅色，molish反應呈陽性，薄層酸水解檢測有葡萄糖。uv (meoh)入 nwmm： 258, 358。esi-msm/z： 465.2 m+h + (positive), 487 m+na + (p

12、ositive) , 463. 3mh-(negative)o 1hnmr (dms0d6): 5 12.63 (1h, s, oh-5), 7. 76 (1h, d, j=2. 2 hz, h2，), 7. 60 (1h, dd, j=2. 2, 8.5, h6，), 6.91 (1h, d, j二8.5 hz, h-5，), 6.41 (1h, d, j=2. 1 hz, h-8), 6. 26 (1h, d, j=2. 1 hz, h6), 5. 28 (1h, d, j=7. 6 hz, h1”)，3.233.89 (6h, m, h-2 “6”)。 13cnmr見表lo以上數據與文獻

13、9報道的異桝皮昔即桝 皮素-3-0- b -d-葡萄糖昔光譜數據一致。2. 2.4化合物4黃色顆粒狀結晶(meoh), mp 183-185.0 °c, tlc紫 外燈下(1%a1c13乙醇溶液)顯深黃色熒光，hcl-mg粉反應呈紅色，molish反應呈陽性，薄層酸水解檢測有鼠李糖。uv (meoh) a, maxnm : 255, 300, 368。ir v max (kbr) cm-1: 3 420, 2 910, 1 646, 1 610, 1 450, 1 080, 972 , 915, 849,720, 639o esims m/z： 449.2 m+h + (positi

14、ve), 447.0m-h (negative) o 1hnmr(dms0d6): 6 12. 60 (1h, s,0h-5), 10.91 (1h, s, 0h-7),(1h, s, oh-3, ), 7.29 (1h,(1h, dd, j=l. 2,8. 7 hz, h6,9. 77 (1h, s, oh-4，), 9. 34d, j=1.2 hz, h-2)，7.22),6. 85 (1h, br. s, h5 ),6. 39 (1h, d, j二 1. 5 hz, h-8), 6. 18 (1h, d, j二 1. 5 hz, h6), 5.21 (1h, br. s, h_l”),

15、3 464. 95 (4h, m, h-2” , 5”),0. 85 (3h, d, j=5. 7 hz, h-6”)。13cnmr 見表 1。以上數據與文獻10報道的彳斛皮素昔即彳斛皮素-3-0-a-l-鼠李糖 昔光譜數據一致。2. 2.5化合物5黃白色片狀結晶(meoh), mp 182.0184.0 °c, tlc 紫外燈下(1%a1c13乙醇溶液)顯深黃色熒光，hcl-mg粉反 應呈紅色，molish反應呈陽性，薄層酸水解檢測有鼠李糖。uv (meoh)入maxnm： 258, 304, 364o ir v max (kbr) cm-1: 3 400, 2 930, 1 65

16、6, 1 606, 1 454, 1 346, 1 291, 1 200, 1 165, 1 074, 1 058, 1 040, 1 021, 969, 917, 858, 716,641o esims m/z： 465. 3 m+h + (positive), 463. 1 m-h(negative)o 1hnmr (dms0-d6): 6 12.69 (1h, s, 0h_5),6. 89 (2h, s, h2，6，)，6.37 (1h, d, j二2.0 hz, h_6),6. 20 (1h, d, j二20hz, h-8), 5. 20 (1h, br. s,3. 78 (1h, b

17、r. s, h2”)，3.99 (1h, br. s, h5”)，3. 55 (1h, dd, j二9.4, 2.9 hz, h-3”), 3. 16 (1h, t, j二9. 4 hz, h-4”)，0. 84 (3h, d, j=6. 2 hz, h-6”)。13cnmr 見表 lo 以上數據與文獻11 報道的楊梅昔光譜數據基本一致。2. 2.6化合物6黃色顆粒狀結晶(meoh), mp 220223 °c, tlc紫外 燈下(1%a1c13乙醇溶液)顯深黃色熒光，hcl-mg粉反應呈 紅色，molish反應呈陽性，薄層酸水解檢測有葡萄糖。uv (meoh) x maxnm :

18、252, 366。ir v max (kbr) cm-1: 3 500, 2 908, 1 640, 1 608, 1 449, 1 082, 968, 912, 850, 716, 645 o esims m/z： 481. 3 m+h + (positive), 479.2 m-h(negative)o 1hnmr (dmsod6): 5 12.65 (1h, s, 0h-5),6.87 (2h, s, h-2 , 6，)，6.34 (1h, d, j=2. 0 hz, h_6), 6. 18 (1h, d, j=2. 0 hz, h_8), 5.24 (1h, d, j二7. 6 hz,

19、h_l”), 3. 25-3. 86 (6h, m, h_2 “6”)。13cnmr 見表 lo根據以上信息，推斷該化合物的結構為楊梅素-3-0- b -d-葡萄糖昔。表1化合物16的13cnmr數據（略）3討論楊梅樹皮的化學成分前人已有報道，至今已從楊梅樹皮中分離得到黃酮類、單寧類、三菇類和環(huán)狀二芳基庚烷類等 化合物12。黃酮類化合物是楊梅樹皮中含量最大的一類 天然產物，高達10%以上。近年來，黃酮類化合物的廣泛藥 理作用受到人們的極大關注，成為當前天然產物研究的熱點 之一。本實驗采用有機溶劑提取、柱色譜分離以及現代波譜 技術鑒定等方法，對楊梅樹皮中黃酮類化學成分進行了系統 的研究，發(fā)現了

20、6種黃酮類化合物，其中楊梅昔的含量最高。 這些研究結果將為人們合理開發(fā)利用楊梅植物資源提供一 定的科學依據?！緟⒖嘉墨I】1 江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典(上冊)m.上海: 上?？茖W技術出版社，2000： 1042.2 徐任生.天然產物化學m 北京：科學出版 社，1993： 588.3 ong kc, khoo h. e. effects of myricetin on glycemia and glycogen metabolism in diabetic ratsj .life sciences, 2000, 67 (14)： 1695.4 劉德育，雷煥強.楊梅黃素及蛇葡萄素對酪氨 酸酶的抑制作用j 生物化學雜志，1996, 12 (5)： 618.5 臧寶霞，金鳴，吳偉，等.楊梅素對血小板活 化因子拮抗的作用j.藥學學報,2003, 38 (11)： 831.6 鐘正賢，陳學芬，周桂芬，等.廣西藤茶中楊 梅樹皮素的保肝作用研究j 中藥藥理與臨床，