pbs-緩沖液的配置(共5頁(yè))

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上1、0.01M 磷酸鹽緩沖液（PBS）配制方法稱(chēng)取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸餾水中，用HCl調(diào)節(jié)溶液的pH值至7.4，最后加蒸餾水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高壓下蒸氣滅菌（至少20分鐘），保存存于室溫或4冰箱中。需要注意的是，通常所說(shuō)的濃度0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而非Na 離子或K 離子的濃度，Na 離子和K 離子只是用來(lái)調(diào)節(jié)滲透壓的。如果是用于免疫組化的話，則需要在配置的時(shí)候分別加入100 u/ml青霉素和鏈霉素之后再調(diào)PH

2、、定容、滅菌消毒。 “PBS”緩沖液PH7.67.47.27.0H2ONaClNa2HPO4NaH2PO410008.52.20.110008.52.20.210008.52.20.31000 ml8.5 g2.2 g0.4 g2、磷酸鹽緩沖液（Phosphate Buffer, PB）試劑： NaH2PO4·2H2O    Na2HPO4·12H2O配制方法：配制時(shí)，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，兩者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸鹽緩沖液（PB），根據(jù)需要可配制不同濃度的PB和PBS。（1）0.

3、2mol/L的 Na2HPO4；稱(chēng)取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：稱(chēng)取NaHPO4.·12H2O 71.632g（或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.6g）加重蒸水至1000ml溶解。（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的 Na2HPO4·12H2O,充分混合即為0.2mol/L的PB（pH約為7.47

4、.5）。若pH偏高或偏低，可通過(guò)改變二者的比例來(lái)加以調(diào)整，室溫保存即可。0.2mol/L磷酸鹽緩沖液（pH5.78.0）pH  0.2mol/L NaH2PO4(ml)  0.2mol/L Na2HPO4(ml)5.7          93.5                      6.55.8          92.0     

5、                 8.05.9          90.0                    10.06.0          87.7                    12.36.1 

6、;         85.0                    15.06.2          81.5                    18.56.3          77.5         

7、           22.56.4          73.5                    26.56.5          68.5                    31.56.6      

8、0;   62.5                    37.56.7          56.5                    43.56.8          51.0               

9、;     49.06.9          45.0                    55.07.0          39.0                    61.07.1          33.0 

10、                   67.07.2          28.0                    72.07.3          23.0                    67.0

11、7.4          19.0                    81.07.5          16.0                    84.07.6          13.0       

12、;             87.07.7          10.5                    89.57.8            8.5                    91.57.9  

13、0;         7.0                    93.08.0            5.3                    94.7 3、0.1mol/L磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS)的配制方法一1、 首先配制0.2mol/L磷酸鹽緩沖液(PB)試劑：NaH2PO4

14、3;2H2O          Na2HPO4·12H2O配制方法：先配制0.2mol/L的NaH2PO4(A液)和0.2mol/L的Na2HPO4(B液)，兩者按一定比例混和即成0.2mol/L磷酸鹽緩沖液。A液：稱(chēng)取NaH2PO4·2H2O 31.2g，加雙蒸水充分溶解定容至1000ml；B液：稱(chēng)取Na2HPO4·12H2O 71.632g，加雙蒸水充分溶解定容至1000ml；2、 0.2mol/L磷酸鹽緩沖液(PB)的配制：A液為堿性，B液為酸性；取A液和B液在pH計(jì)的

15、監(jiān)測(cè)下按一定比例進(jìn)行混和，可得到所需的不同pH的0.2mol/L的PB。pH7.4所需A液和B液為19.0ml和81.0ml0.2mol/L磷酸鹽緩沖液（pH5.78.0）(PB)pH  0.2mol/L NaH2PO4(ml)  0.2mol/L Na2HPO4(ml)5.7          93.5                      6.55.8        &

16、#160; 92.0                      8.05.9          90.0                    10.06.0          87.7             

17、60;     12.36.1          85.0                    15.06.2          81.5                    18.56.3          77.5

18、0;                   22.56.4          73.5                    26.56.5          68.5                    31

19、.56.6          62.5                    37.56.7          56.5                    43.56.8          51.0     

20、60;             49.06.9          45.0                    55.07.0          39.0                    61.07.1    &

21、#160;     33.0                    67.07.2          28.0                    72.07.3          23.0            &#

22、160;       67.07.4          19.0                    81.07.5          16.0                    84.07.6         

23、13.0                    87.07.7          10.5                    89.57.8            8.5                &#

24、160;   91.57.9            7.0                    93.08.0            5.3                    94.7 3、 0.1mol/L磷酸鹽緩沖生理鹽水(PBS)：試劑：0.2mol/L P

25、B                   500ml           NaCl                    

26、     8.59.0g(約0.15mol/L)           雙蒸水                       加至1000ml配制方法：取0.2mol/L PB 500ml，加入300ml雙蒸水及NaCl 8.59.0g，充分?jǐn)嚢枞芙夂蠹尤腚p蒸水定容至1000ml。一般情況下，0.2mol/L PB的pH值稍微高些，稀釋成0.1mol/L PBS時(shí)，?？蛇_(dá)到要求的pH；若需調(diào)整pH，通常是調(diào)PB的pH。4、 參考： 朱