32拉曼光譜學(xué)習(xí)課程

1、拉曼散射效應(yīng)的進(jìn)展：拉曼散射效應(yīng)是印度物理學(xué)家拉曼（）于1928年首次發(fā)現(xiàn)的，本人也因此榮獲1930年的諾貝爾物理學(xué)獎(jiǎng)。 19281940年，受到廣泛的重視，曾是研究分子結(jié)構(gòu)的主要手段。這是因?yàn)榭梢?jiàn)光分光技術(shù)和照相感光技術(shù)已經(jīng)發(fā)展起來(lái)的緣故；19401960年，拉曼光譜的地位一落千丈。主要是因?yàn)槔?yīng)太弱（約為入射光強(qiáng)的10-6），并要求被測(cè)樣品的體積必須足夠大、無(wú)色、無(wú)塵埃、無(wú)熒光等等。所以到40年代中期，紅外技術(shù)的進(jìn)步和商品化更使拉曼光譜的應(yīng)用一度衰落；1960年以后，激光技術(shù)的發(fā)展使拉曼技術(shù)得以復(fù)興。由于激光束的高亮度、方向性和偏振性等優(yōu)點(diǎn)，成為拉曼光譜的理想光源。隨探測(cè)技術(shù)的改進(jìn)和對(duì)

2、被測(cè)樣品要求的降低，目前在物理、化學(xué)、醫(yī)藥、工業(yè)等各個(gè)領(lǐng)域拉曼光譜得到了廣泛的應(yīng)用，越來(lái)越受研究者的重視。第1頁(yè)/共56頁(yè)第一頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。吳大猷吳大猷先生 1935年在北大完成了第一篇關(guān)于拉曼散射的論文四氯乙烯拉曼線的退極化(中國(guó)化學(xué)學(xué)會(huì)會(huì)志第四卷) ，也是該領(lǐng)域國(guó)內(nèi)的第一篇論文。 1939年他在西南聯(lián)大完成了專(zhuān)著多原子分子的振動(dòng)譜和結(jié)構(gòu)，是自拉曼獲諾貝爾獎(jiǎng)以來(lái)，第一部全面總結(jié)分子拉曼光譜研究成果的經(jīng)典著作。第2頁(yè)/共56頁(yè)第二頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。黃昆黃昆先生 1954年在英國(guó)出版與波恩合著的名著晶格動(dòng)力學(xué)理論，成為聲子物理和拉曼散射的經(jīng)典理論著作。1988

3、建立起超晶格拉曼散射理論2002年獲國(guó)家科技獎(jiǎng)。第3頁(yè)/共56頁(yè)第三頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。第4頁(yè)/共56頁(yè)第四頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。樣品池透過(guò)光不變?nèi)鹄⑸洳蛔兝⑸渥冊(cè)龃鬁p小第5頁(yè)/共56頁(yè)第五頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。激光拉曼光譜-基本原理光的瑞利散射 一個(gè)頻率為0的單色光，當(dāng)它不能被照射的物體吸收時(shí)，大部分光將沿入射光束通過(guò)樣品，約1/1051/106有強(qiáng)度的光被散射到各個(gè)方向。并在與入射方向垂直的方向，可以觀察到這種散射。瑞利散射為光與樣品分子間的彈性碰撞，光子的能量或頻率不變，只改變了光子運(yùn)動(dòng)的方向。散射光的強(qiáng)度與散射方向有關(guān)，且與入射頻率的四次方成

4、正比。第6頁(yè)/共56頁(yè)第六頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。拉曼效應(yīng) 拉曼效應(yīng)為光子與樣品中分子的非彈性碰撞，即光子與分子相互作用中有能量的交換。入射光子的能量為h0，當(dāng)與分子碰撞后，可能出現(xiàn)兩種情況：第一種是分子處于基態(tài)振動(dòng)能級(jí)，與光子碰撞后，分子從入射光子獲取確定的能量h1達(dá)到較高的能級(jí)。則散射光子的能量變?yōu)閔（01）= h，頻率降低至01。形成能量為h（01）、頻率為01的譜線。另一種是分子處于激發(fā)態(tài)振動(dòng)能級(jí)，與光子碰撞后，分子躍遷回基態(tài)而將從確定的能量h1傳給光子。則散射光子的能量變?yōu)閔（01）= h，頻率增加至01。形成能量為h（01）、頻率為01的譜線。兩種情況，散射光子的頻率發(fā)生

5、變化了，減小或增加了，稱(chēng)為拉曼位移。第7頁(yè)/共56頁(yè)第七頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。Stokes線與反Stokes線將負(fù)拉曼位移，即01稱(chēng)為Stokes線（斯托克斯線）。將正拉曼位移，即01稱(chēng)為反Stokes線（反斯托克斯線）。 正負(fù)拉曼位移線的躍遷幾率是相等的，但由于反斯托克斯線起源于受激振動(dòng)能級(jí)，處于這種能級(jí)的粒子數(shù)很少，因此反斯托克斯線的強(qiáng)度小，而斯托克斯線強(qiáng)度較大，在拉曼光譜分析中主要應(yīng)用的譜線。第8頁(yè)/共56頁(yè)第八頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。激光拉曼光譜基本原理principle of Raman spectroscopyRayleigh散射： 彈性碰撞；無(wú)能量交換，僅改

6、變方向；Raman散射： 非彈性碰撞；方向改變且有能量交換；Rayleigh散射Raman散射E0基態(tài)， E1振動(dòng)激發(fā)態(tài)； E0 + h 0 ， E1 + h 0 激發(fā)虛態(tài)；獲得能量后，躍遷到激發(fā)虛態(tài).（1928年印度物理學(xué)家Raman C V 發(fā)現(xiàn)；1960年快速發(fā)展） h E0E1V=1V=0h 0h 0h 0h 0 + E1 + h 0E0 + h 0h( 0 - )激發(fā)虛態(tài)第9頁(yè)/共56頁(yè)第九頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分?；驹?Raman Raman散射散射Raman散射的兩種躍遷能量差： E=h( 0 - )產(chǎn)生stokes線；強(qiáng)；基態(tài)分子多； E=h( 0 + )產(chǎn)生反st

7、okes線；弱；Raman位移：Raman散射光與入射光頻率差；ANTI-STOKES 0 - RayleighSTOKES 0 + 0h( 0 + )E0E1V=1V=0E1 + h 0E2 + h 0 h h 0h( 0 - )第10頁(yè)/共56頁(yè)第十頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。CCl4的拉曼光譜 Stocks linesanti-Stockes linesRayleigh scattering/cm-1第11頁(yè)/共56頁(yè)第十一頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。2、產(chǎn)生拉曼位移的條件 拉曼散射不要求有偶極矩的變化，卻要求有極化率的變化，與紅外光譜不同，也正是利用它們之間的差別，兩種光譜

8、可以互為補(bǔ)充。 分子在靜電場(chǎng)E中所產(chǎn)生的誘導(dǎo)偶極矩P與分子的極化率之間有關(guān)系：P=E 第12頁(yè)/共56頁(yè)第十二頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。Raman位移位移 對(duì)不同物質(zhì)： 不同； 對(duì)同一物質(zhì)： 與入射光頻率無(wú)關(guān)；表征分子振-轉(zhuǎn)能級(jí)的特征物理量；定性與結(jié)構(gòu)分析的依據(jù)； Raman散射的產(chǎn)生：光電場(chǎng)E中，分子產(chǎn)生誘導(dǎo)偶極距 = E （ 分子極化率）第13頁(yè)/共56頁(yè)第十三頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。3.3.紅外活性和拉曼活性振動(dòng)紅外活性和拉曼活性振動(dòng)紅外活性振動(dòng) 永久偶極矩；極性基團(tuán)； 瞬間偶極矩；非對(duì)稱(chēng)分子；紅外活性振動(dòng)伴有偶極矩變化的振動(dòng)可以產(chǎn)生紅外吸收譜帶. .拉曼活性振動(dòng) 誘導(dǎo)

9、偶極矩 = E 非極性基團(tuán)，對(duì)稱(chēng)分子；拉曼活性振動(dòng)伴隨有極化率變化的振動(dòng)。 對(duì)稱(chēng)分子： 對(duì)稱(chēng)振動(dòng)拉曼活性。 不對(duì)稱(chēng)振動(dòng)紅外活性 第14頁(yè)/共56頁(yè)第十四頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。4. 4. 紅外與拉曼譜圖對(duì)比紅外與拉曼譜圖對(duì)比紅外光譜：基團(tuán)；拉曼光譜：分子骨架測(cè)定；第15頁(yè)/共56頁(yè)第十五頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。紅外與拉曼譜圖對(duì)比第16頁(yè)/共56頁(yè)第十六頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。 對(duì)稱(chēng)中心分子CO2，CS2等， 選律不相容。 無(wú)對(duì)稱(chēng)中心分子（例如SO2等），三種振動(dòng)既是紅外活性振動(dòng)，又是拉曼活性振動(dòng)。5.5.選律選律SCSSCSSCS 1 2 3 4拉曼活性紅外活性紅

10、外活性拉曼光譜源于極化率變化紅外光譜源于偶極矩變化第17頁(yè)/共56頁(yè)第十七頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。 例：線形分子CO2 ，有四個(gè)（ 3N-5 ）簡(jiǎn)正振動(dòng)模。每個(gè)振動(dòng)過(guò)程中極化率和偶極矩的變化示于下圖。第18頁(yè)/共56頁(yè)第十八頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。第19頁(yè)/共56頁(yè)第十九頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。第20頁(yè)/共56頁(yè)第二十頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。第21頁(yè)/共56頁(yè)第二十一頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。例：非線形分子SO2 ，有三個(gè)（ 3N-6 ）簡(jiǎn)正振動(dòng)模。每個(gè)振動(dòng)過(guò)程中極化率和偶極矩的變化示于下圖。第22頁(yè)/共56頁(yè)第二十二頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十

11、一分。第23頁(yè)/共56頁(yè)第二十三頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。第24頁(yè)/共56頁(yè)第二十四頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。第25頁(yè)/共56頁(yè)第二十五頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分?；ゲ幌嗳菰砭哂袑?duì)稱(chēng)中心的分子：紅外活性的振動(dòng)模，拉曼非活性拉曼活性的振動(dòng)模，紅外非振動(dòng)紅外+拉曼全部振動(dòng)譜第26頁(yè)/共56頁(yè)第二十六頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。一般有： 同核雙原子分子： 紅外非活性 拉曼活性非極性晶體： 紅外非活性 拉曼活性 異核雙原子分子： 紅外活性 拉曼非活性 極性晶體： 紅外活性 拉曼具體分析第27頁(yè)/共56頁(yè)第二十七頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。SiO44-的振動(dòng)光譜 Si

12、O44-的理論振動(dòng)自由度為15-6=9個(gè)基本振動(dòng)數(shù)，但實(shí)際上由于能級(jí)的簡(jiǎn)并只有4個(gè)振動(dòng)，其中2個(gè)紅外活性的，4個(gè)都是拉曼活性的，可見(jiàn)在紅外光譜中檢測(cè)不到的譜線，可以在拉曼光譜中得到。 第28頁(yè)/共56頁(yè)第二十八頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。6.紅外光譜與Raman光譜比較 紅外光譜與拉曼光譜互稱(chēng)為姊妹譜。因此，可以相互補(bǔ)充。 相似之處： 激光拉曼光譜與紅外光譜一樣，都能提供分子振動(dòng)頻率的信息，對(duì)于一個(gè)給定的化學(xué)鍵，其紅外吸收頻率與拉曼位移相等，均代表第一振動(dòng)能級(jí)的能量。第29頁(yè)/共56頁(yè)第二十九頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。紅外光譜與Raman光譜比較 不同之處：a 紅外光譜的入射光及

13、檢測(cè)光都是紅外光，而拉曼光譜的入射光和散射光大多是可見(jiàn)光。拉曼效應(yīng)為散射過(guò)程，拉曼光譜為散射光譜，紅外光譜對(duì)應(yīng)的是與某一吸收頻率能量相等的（紅外）光子被分子吸收，因而紅外光譜是吸收光譜。b 機(jī)理不同：從分子結(jié)構(gòu)性質(zhì)變化的角度看，拉曼散射過(guò)程來(lái)源于分子的誘導(dǎo)偶極矩，與分子極化率的變化相關(guān)。通常非極性分子及基團(tuán)的振動(dòng)導(dǎo)致分子變形，引起極化率的變化，是拉曼活性的。紅外吸收過(guò)程與分子永久偶極矩的變化相關(guān)，一般極性分子及基團(tuán)的振動(dòng)引起永久偶極矩的變化，故通常是紅外活性的。c 制樣技術(shù)不同：紅外光譜制樣復(fù)雜，拉曼光譜勿需制樣，可直接測(cè)試水溶液。第30頁(yè)/共56頁(yè)第三十頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。紅外

14、光譜與Raman光譜比較 兩者間的聯(lián)系 可用經(jīng)驗(yàn)規(guī)則來(lái)判斷分子的紅外或拉曼活性：a 相互排斥規(guī)則：凡有對(duì)稱(chēng)中心的分子，若有拉曼活性，則紅外是非活性的；若紅外活性，則拉曼非活性。b 相互允許規(guī)則：凡無(wú)對(duì)稱(chēng)中心的分子，大多數(shù)的分子，紅外和拉曼都活性。c 相互禁止規(guī)則：少數(shù)分子的振動(dòng)，既非拉曼活性，又非紅外活性。 如：乙烯分子的扭曲振動(dòng)，在紅外和拉曼光譜中均觀察不到該振動(dòng)的譜帶。第31頁(yè)/共56頁(yè)第三十一頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。 紅外光譜圖中主要研究振動(dòng)中有偶極矩變化的化合物，因此，除了單原子分子和同核分子外，幾乎所有的化合物在紅外光區(qū)均有吸收。 第32頁(yè)/共56頁(yè)第三十二頁(yè)，編輯于星期五

15、：三點(diǎn) 五十一分。拉曼光譜與紅外光譜分析方法比較拉曼光譜與紅外光譜分析方法比較拉曼光譜拉曼光譜紅外光譜紅外光譜光譜范圍光譜范圍40-4000Cm-1光譜范圍光譜范圍400-4000Cm-1水可作為溶劑水可作為溶劑水不能作為溶劑水不能作為溶劑樣品可盛于玻璃瓶，毛細(xì)管等容器樣品可盛于玻璃瓶，毛細(xì)管等容器中直接測(cè)定中直接測(cè)定不能用玻璃容器測(cè)定不能用玻璃容器測(cè)定固體樣品可直接測(cè)定固體樣品可直接測(cè)定需要研磨制成需要研磨制成 KBR 壓片壓片第33頁(yè)/共56頁(yè)第三十三頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。第34頁(yè)/共56頁(yè)第三十四頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。二、拉曼光譜的應(yīng)用 applications

16、of Raman spectroscopy 由拉曼光譜可以獲得有機(jī)化合物的各種結(jié)構(gòu)信息：由拉曼光譜可以獲得有機(jī)化合物的各種結(jié)構(gòu)信息：2）紅外光譜中，由C N，C=S，S-H伸縮振動(dòng)產(chǎn)生的譜帶一般較弱或強(qiáng)度可變，而在拉曼光譜中則是強(qiáng)譜帶。3）環(huán)狀化合物的對(duì)稱(chēng)振動(dòng)常常是最強(qiáng)的拉曼譜帶。1）同種分子的非極性鍵S-S，C=C，N=N，CC產(chǎn)生強(qiáng)拉曼譜帶， 隨單鍵雙鍵三鍵譜帶強(qiáng)度增加。第35頁(yè)/共56頁(yè)第三十五頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。4）在拉曼光譜中，X=Y=Z，C=N=C，O=C=O-這類(lèi)鍵的對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)是強(qiáng)譜帶，這類(lèi)鍵的反對(duì)稱(chēng)伸縮振動(dòng)是弱譜帶。紅外光譜與此相反。5）C-C伸縮振動(dòng)在拉曼光譜

17、中是強(qiáng)譜帶。6）醇和烷烴的拉曼光譜是相似的：I. C-O鍵與C-C鍵的力常數(shù)或鍵的強(qiáng)度沒(méi)有很大差別。II. 羥基和甲基的質(zhì)量?jī)H相差2單位。 III.與C-H和N-H譜帶比較，O-H拉曼譜帶較弱。第36頁(yè)/共56頁(yè)第三十六頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。2941，2927cm-1 ASCH22854cm-1 SCH21029cm-1 （C-C）1444，1267 cm-1 CH2第37頁(yè)/共56頁(yè)第三十七頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。3060cm-1 r-H)1600,1587cm-1 c=c)苯環(huán)787 cm-1 環(huán)變形1000cm-1 c-o-c第38頁(yè)/共56頁(yè)第三十八頁(yè)，編輯于星期

18、五：三點(diǎn) 五十一分。 多數(shù)的吸收光譜中，只具有二個(gè)基本參數(shù)； (頻率和強(qiáng)度) 在激光拉曼光譜中還有一個(gè)重要的參數(shù)即退偏振比。 (也可稱(chēng)為去偏振度) 由于激光是線偏振光，而大多數(shù)的有機(jī)分子是各向異性的，在不同方向上的分子被入射光電場(chǎng)極化程度是不同的。 在激光拉曼光譜中，完全自由取向的分子所散射的光也可能是偏振的，因此一般在拉曼光譜中用退偏振比(或稱(chēng)去偏振度)表征分子對(duì)稱(chēng)性振動(dòng)模式的高低。 第39頁(yè)/共56頁(yè)第三十九頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。I和I分別代表與激光電矢量平行和垂直的譜線的強(qiáng)度 的譜帶稱(chēng)為偏振譜帶，表示分子有較高的對(duì)稱(chēng)振動(dòng)模式 。 的譜帶稱(chēng)為退偏振譜帶，表示分子對(duì)稱(chēng)振動(dòng)模式較低

19、。/II3443第40頁(yè)/共56頁(yè)第四十頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。單色儀光電倍增管高壓電源光子計(jì)數(shù)器驅(qū)動(dòng)電路計(jì)算機(jī)顯示器樣品激光器凹面鏡第41頁(yè)/共56頁(yè)第四十一頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。 激光拉曼光譜儀的基本組成有激光光源，樣品室，單色器，檢測(cè)記錄系統(tǒng)和計(jì)算機(jī)五大部分。 拉曼光譜儀中最常用的是HeNe氣體激光器。 其輸出激光波長(zhǎng)為6328埃，功率在100mW以下。 儀器組成第42頁(yè)/共56頁(yè)第四十二頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。樣品的放置方法 為了提高散射強(qiáng)度，樣品的放置方式非常重要。 氣體的樣品可采用內(nèi)腔方式，即把樣品放在激光器的共振腔內(nèi)。 液體和固體樣品是放在激光器的

20、外面。 第43頁(yè)/共56頁(yè)第四十三頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。第44頁(yè)/共56頁(yè)第四十四頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。激光Raman光譜儀 laser Raman spectroscopy激光光源：He-Ne激光器，波長(zhǎng)632.8nm； Ar激光器， 波長(zhǎng)514.5nm， 488.0nm； 散射強(qiáng)度1/4 單色器： 光柵，多單色器； 檢測(cè)器： 光電倍增管， 光子計(jì)數(shù)器；第45頁(yè)/共56頁(yè)第四十五頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。傅立葉變換-拉曼光譜儀FT-Raman spectroscopy光源：Nd-YAG釔鋁石榴石激光器（1.064m）；檢測(cè)器：高靈敏度的銦鎵砷探頭；特點(diǎn)：（1）

21、避免了熒光干擾；（2）精度高；（3）消除了瑞利譜線；（4）測(cè)量速度快。第46頁(yè)/共56頁(yè)第四十六頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。儀器使用中的注意事項(xiàng)1.保證使用環(huán)境：具備暗室條件；無(wú)強(qiáng)震動(dòng) 源、無(wú)強(qiáng)電磁干擾；不可受陽(yáng)光直射。2.光學(xué)器件表面有灰塵，不允許接觸擦拭， 可用氣球小心吹掉。3.實(shí)驗(yàn)結(jié)束，首先取出樣品，關(guān)斷電源。4.注意激光器電源開(kāi)、關(guān)機(jī)的順序正好相反。第47頁(yè)/共56頁(yè)第四十七頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。第48頁(yè)/共56頁(yè)第四十八頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。四、拉曼散射光譜的優(yōu)缺點(diǎn) (1)拉曼光譜是一個(gè)散射過(guò)程，因而任何尺寸、形狀、透明度的樣品，只要能被激光照射到，就可

22、直接用來(lái)測(cè)量。由于激光束的直徑較小，且可進(jìn)一步聚焦，因而極微量樣品都可測(cè)量。 (2)水是極性很強(qiáng)的分子，因而其紅外吸收非常強(qiáng)烈。但水的拉曼散射卻極微弱，因而水溶液樣品可直接進(jìn)行測(cè)量，這對(duì)生物大分子的研究非常有利。此外，玻璃的拉曼散射也較弱。 (3)對(duì)于聚合物及其他分子，拉曼散射的選擇定則的限制較小，因而可得到更為豐富的譜帶。 SS，CC，C=C，N=N等紅外較弱的官能團(tuán)，在拉曼光譜中信號(hào)較為強(qiáng)烈。 拉曼光譜研究高分子樣品的最大缺點(diǎn)是熒光散射 。 第49頁(yè)/共56頁(yè)第四十九頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。 在拉曼光譜測(cè)試中，往往會(huì)遇到熒光的干擾，由于拉曼散射光極弱，所以一旦樣品或雜質(zhì)產(chǎn)生熒光，拉曼光譜就會(huì)被熒光所淹沒(méi)。通常熒光來(lái)自樣品中的雜質(zhì)，但有的樣品本身也可發(fā)生螢光，常用抑制或消除螢光的方法有以下幾種: 發(fā)光（熒光）的抑制和消除發(fā)光（熒光）的抑制和消除第50頁(yè)/共56頁(yè)第五十頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。 有時(shí)在樣品中加入少量熒光淬滅劑，如硝基苯，KBr, AgI等 ，可以有效地淬滅熒光干擾。（1）純化樣品（2）強(qiáng)激光長(zhǎng)時(shí)間照射樣品（3）加熒光淬滅劑第51頁(yè)/共56頁(yè)第五十一頁(yè)，編輯于星期五：三點(diǎn) 五十一分。（4）利用脈沖激光光源