銀杏葉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定

1、 銀杏葉的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定名稱： 銀杏葉 yinxingye拉丁名： Folium Ginkgo藥材來源 ： 本品為銀杏科植物銀杏Ginkgo biloba L.的干燥葉。植物形態(tài)： 銀杏，落葉喬木，高可達(dá)40m。枝有有長(zhǎng)枝與短枝，幼樹樹皮淡灰褐色，淺縱裂，老則灰褐色，深縱裂。葉在長(zhǎng)枝上螺旋狀散生，在短枝上3-5（-8）簇生；柄長(zhǎng)3-10cm；葉片扇形，淡綠色，無毛，有多數(shù)2叉狀并列的細(xì)脈，上緣寬5-8cm，淺波狀，有時(shí)中央淺裂或深裂。雌雄異株，花單性，稀同株；球花生于短枝頂端的鱗片狀葉的腋內(nèi)；雄球花成柔荑花序狀，下垂；雌球花有長(zhǎng)梗，梗端常分2叉，每叉頂生一盤狀珠座，每珠座生一胚珠，僅一個(gè)發(fā)育成

2、種子。種子核果狀，橢圓形至近球形，長(zhǎng)2.5-3.5cm，徑約2cm；外種皮肉質(zhì)，有白粉，熟時(shí)淡黃色或橙黃色；中種皮骨質(zhì)，白色，具2-3棱；內(nèi)種皮膜質(zhì)，胚乳豐富。花期3-4月，種子成熟期9-10月。產(chǎn)地： 主要分布在山東，江蘇，四川，河北，湖北，河南等地。全國(guó)最大的銀杏培育基地是山東省郯城縣。采制： 秋季葉尚綠時(shí)采收，及時(shí)干燥。以色黃綠者為佳。炮制： 取原藥材，除去雜質(zhì)。性狀： 本品多為不規(guī)則的碎片，完整者呈扇形。表面黃綠色或淺棕黃色，上緣呈不規(guī)則的波狀彎曲，有的中間凹入。有多數(shù)平行葉脈，細(xì)而密，光滑無毛，紙質(zhì)，易縱向撕裂。葉基楔形，有長(zhǎng)柄，長(zhǎng).。體輕。氣微，味微苦。檢查 ： 水分 &

3、#160; 照水分測(cè)定法（中國(guó)藥典2010年版一部附錄 H第一法）測(cè)定，不得過5.0%。重金屬 取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?中國(guó)藥典2010年版一部附錄 E)檢查，不得過百萬分之二十。 總灰分   不得過10.0（中國(guó)藥典2005年版一部附錄 K）。酸不溶灰分 不得超過2.0%（附錄 K）浸出物： 照醇溶性浸出物測(cè)定法項(xiàng)下的熱浸法（中國(guó)藥典2005年版一部附錄 A）測(cè)定，用稀乙醇作溶劑，不得少于25.0。（至少應(yīng)有10批樣品20個(gè)數(shù)據(jù)）化學(xué)成分： 銀杏內(nèi)酯A（ginkgolide A）、銀杏內(nèi)酯B（ginkgolide B）、銀杏內(nèi)酯C（ginkgolide C）、山萘酚

4、（kaempferol）、槲皮素（quercetin）、蘆?。╮utin）、異鼠李素（isorhamnetin）、山萘酚-3-鼠李糖甙（kaempferol-3-O-rhamnoside）、3，5，7，4-四羥基-二氫黃酮（3，5，7，4-tetrahydroxy-flavanone）、白果黃素（bilobetin）、銀杏黃素（ginkgetin）、異銀杏黃素（isoginkgetin）、西阿多黃素（sciadopitysin）、3，3-二甲氧基-4，4-二羥基-二苯乙烯（3，3dimethoxy-4，4-dihydroxy-stilbene）、-谷甾醇（sitosterol）和10，16-二

5、羥基-十六酸等。薄層色譜鑒別：銀杏萜類內(nèi)酯1.銀杏葉對(duì)照提取物溶液的制備 精密稱取銀杏葉對(duì)照提取物0. 15 g, 加水10 m ,l 置水浴中溫?zé)崾蛊淙苌? 加2%鹽酸溶液兩滴, 用醋酸乙酯振搖提取4次( 15, 10, 10, 10 m l) , 合并提取液, 用5%醋酸溶液20 m l洗滌, 分取醋酸鈉液, 再用醋酸乙酯10 m l洗滌, 合并醋酸乙酯液, 回收溶劑至干, 殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至5m l量瓶中, 加甲醇至刻度, 搖勻, 推薦精選濾過, 取續(xù)濾液, 即得。2. 對(duì)照品溶液的制備 分別精密稱取白果內(nèi)酯對(duì)照品、銀杏內(nèi)酯A對(duì)照品、銀杏內(nèi)酯B對(duì)照品、銀杏內(nèi)酯C 對(duì)照品適量, 精密稱

6、定, 加甲醇制成每毫升各含1, 1, 1, 0. 5 mg 的溶液, 作為對(duì)照品溶液。3. 對(duì)照品混合溶液的制備分別取白果內(nèi)酯對(duì)照品、銀杏內(nèi)酯A 對(duì)照品、銀杏內(nèi)酯B對(duì)照品、銀杏內(nèi)酯C 對(duì)照品適量, 精密稱定, 加甲醇制成每毫升各含1, 1, 1, 0. 5 mg 的混合溶液, 作為對(duì)照品混合溶液。4. 測(cè)定吸取銀杏葉對(duì)照提取物溶液、各對(duì)照品溶液和對(duì)照品混合溶液各15 􀀁 ,l 分別點(diǎn)于同一含4% 醋酸鈉的羧甲基纖維素鈉溶液為黏合劑的硅膠G 薄層板上, 以甲苯- 醋酸乙酯- 丙酮- 甲醇( 10 5 5 0. 6)為展開劑, 分別在10, 12, 14, 16, 19, 21,

7、24, 27, 30, 33, 35# 溫度下展開, 取出, 晾干, 用醋酸蒸氣熏15m in, 在140 160# 加熱30 m in, 放冷, 置紫外光燈( 365 nm )下檢視。結(jié)果見圖1。含量測(cè)定：總黃酮醇苷 照高效液相色譜法測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn):用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-.磷酸溶液（:）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為nm理論板數(shù)按槲皮素峰計(jì)算應(yīng)不低于對(duì)照品溶液掏制備:分別精密稱取經(jīng)五氧化二磷干燥過夜的槲皮素、山柰素、異鼠李素對(duì)照品, 各加甲醇制成每分別含.mg、.mg、.mg的溶液, 作為對(duì)照品溶液供試品溶液的制備:取本品中粉約（同時(shí)另取本品粉末測(cè)定水分）, 精密稱定,

8、置索氏提取器中, 加氯仿回流提取小時(shí), 棄去氯仿, 藥渣揮干, 加甲醇回流提取小時(shí), 提取液蒸干, 殘?jiān)蛹状见}酸溶液（:）混合液, 回流分鐘, 放冷, 轉(zhuǎn)移至量瓶中, 并加甲醇至刻度, 搖勻, 即得測(cè)定法:分別精密吸取上述三種對(duì)照品溶液與供試品溶液各, 注人液相色譜儀, 測(cè)定, 分別計(jì)算三種黃酮苷元的含量, 以下式換算成總黃酮醇苷的含量總黃酮醇苷含量（槲皮素含量十山柰素含量十異鼠李素含量）×.本品按干燥品計(jì)算, 含總黃酮醇苷不得少于. 萜類內(nèi)酯 照中國(guó)藥典2005版241頁高效液相色譜法測(cè)定性味與歸經(jīng)： 甘、苦、澀，平。歸心、肺經(jīng)。功能與主治： 斂肺，平喘，活血化瘀，止痛。用于肺虛

9、咳喘；冠心病，心絞痛，高脂血癥。用法與用量： 912g。注意： 有實(shí)邪者忌用。貯藏： 置通風(fēng)干燥處。參考文獻(xiàn)1. 韓立路 孫興力 龍紅萍 周金彩 HPLC法快速測(cè)定銀杏葉中銀杏總黃酮醇苷含量 <中國(guó)醫(yī)藥指南>   2009 年07卷12期 2. 池靜端 銀杏葉化學(xué)成分及其有效成分分析方法的研究 中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué) 中國(guó)國(guó)家數(shù)字圖書館 3余啟榮 晏利芝 譚湘湘 HPLC 法測(cè)定銀杏葉提取物中總黃酮醇苷的含量 首都師范大學(xué)學(xué)報(bào)( 自然科學(xué)版) 第30 卷􀀁 第2 期 2009 年4 月 4中華人民共和國(guó)國(guó)家藥典委員會(huì). 2005版中國(guó)藥典5中華人民共

10、和國(guó)國(guó)家藥典委員會(huì). 2010版中國(guó)藥典6. 卓菊 朱慶齡 石曉 銀杏葉與銀杏葉提取物及其片劑中萜類內(nèi)酯薄層色譜分析 時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥2007年第18卷第8期推薦精選葉類生藥的鑒定-銀杏葉一、 目的要求1 掌握銀杏葉的顯微鑒別特征2 掌握銀杏葉的理化鑒別方法3 熟悉銀杏葉的性狀及顯微鑒別要點(diǎn)二、 儀器和材料顯微鏡，載玻片，蓋玻片，刀片，酒精燈，木簽，鑷子，濾紙，紫外光燈水合氯醛，稀甘油，鎂粉，鹽酸，2%三氯化鋁乙醇溶液三、 實(shí)驗(yàn)內(nèi)容1. 銀杏葉粉末顯微特征的觀察（見圖3）(1) 管胞具有單列或數(shù)列具緣紋孔或網(wǎng)紋紋(2) 表皮組織碎片上可見沉陷的氣孔，表皮細(xì)胞壁微波狀(3) 含草酸鈣簇晶，纖維壁厚薄

11、不一并木質(zhì)化(4) 存在石細(xì)胞(5) 含棕色塊2. 銀杏葉橫切面組織構(gòu)造的觀察（見圖4）（1） 葉片橫切面厚度一致，上表皮細(xì)胞類圓形，外壁略呈乳頭狀突起，被較厚的角質(zhì)層；下表皮細(xì)胞排列整齊，類方形，外壁具角質(zhì)層，有時(shí)可見內(nèi)陷氣孔。（2） 上表皮內(nèi)具一層?xùn)艡诮M織，細(xì)胞呈短分叉狀，或不明顯，下為排列疏松的海綿組織，少數(shù)薄壁細(xì)胞含大型草酸鈣簇晶，偶可見方晶。（3） 呈兩面葉型.葉脈維管束大小相當(dāng),無主次之分, 近等距離分布于葉肉中，構(gòu)造相同.維管束鞘明顯,其周圍有草酸鈣簇晶分布（4） 木質(zhì)部靠近上表皮一側(cè)，韌皮部位于下方（5） 葉肉及韌皮部薄壁細(xì)胞中有的含單寧物質(zhì)。在兩維管束之間常存在一個(gè)大型離生分泌道，分泌道含棕色物質(zhì)。四、 銀杏葉的理化鑒別1取本品碎片10g，加水100ml，煮沸15分鐘，趁熱濾過，取濾液2ml，加鎂粉少量與鹽酸34滴，置水浴上加熱數(shù)分鐘，顯棕紅色。（檢查黃酮） 2取上項(xiàng)剩余的濾液適量，點(diǎn)于濾紙上，噴2%三氯化鋁乙醇溶液，干燥后，置紫外光燈（nm）下觀察, 可見黃綠色熒光。（檢查黃酮）推薦精選1. 銀杏葉對(duì)照提取物2. 混合溶液3. 白