食品儀器分析-高效液相色譜參考答案

1、高效液相色譜 習 題一、填空題1.高效液相色譜分析是將流動相用高壓泵輸送，使壓力高達 5 MPa以上，并采用新型的 化學鍵合固定相 ，是分離效率很高的液相色譜法。2.高效液相色譜法的特點是 分離性能高 、 分析速度快 、 檢測器靈敏度高 、 應用范圍廣 。3.高效液相色譜法和氣相色譜法的共同之處是 分離功能 、 分析功能 、 在線分析 。4.高效液相色譜分析根據(jù)分離機理不同可分為四種類型，即 液固 色譜、 液液 色譜、 鍵合相 色譜、 凝膠 色譜。5.高效液相色譜中的液一液分配色譜采用的新型固定相叫 化學鍵合相 ，它是利用 化學 方法將固定液 官能團鍵合 在載體表面上的。6.通常把固定相極性大

2、于流動相極性的一類色譜稱為 正相 色譜。反之稱為 反相 色譜。7.高效液相色譜儀通常由 儲液器 、 輸液泵 、 梯度淋洗器 、 進樣器 、 色譜柱 、 檢測器 、 色譜工作站 七部分組成。8.高效液相色譜儀中使用最廣泛的檢測器為 紫外檢測器 ，另外還有 折光 檢測器、 熒光 檢測器等等。9.高效液相色譜主要用于 分析沸點高 的、 分子量大 的、 受熱易分解 的以及具有生理活性物質的分析。二、判斷題Ö、Ö、´、´、Ö、Ö、´、Ö、´、Ö、´、Ö、Ö、´、&#

3、214;、´、´、Ö、´、Ö、Ö、´、´、´、´、´、´、´、Ö、´ 1液一液色譜流動相與被分離物質相互作用，流動相極性的微小變化，都會使組分的保留值出現(xiàn)較大的改變。 （ Ö ）2利用離子交換劑作固定相的色譜法稱為離子交換色譜法。 （ ）3紫外吸收檢測器是離子交換色譜法通用型檢測器。 （× ）4檢測器性能好壞將對組分分離產(chǎn)生直接影響。 （ × ）5高效液相色譜適用于大分子，熱不穩(wěn)定及生物試樣的分析。 （Ö

4、）6高效液相色譜中通常采用調節(jié)分離溫度和流動相流速來改善分離效果。 （ × ）7鍵合固定相具有機械性能穩(wěn)定，可使用小粒度固定相和高柱壓來實現(xiàn)快速分離。（ ）8在液相色譜中為避免固定相的流失，流動相與固定相的極性差別越大越好。 （ × ）9正相分配色譜的流動相極性大于固定相極性。 （ × ）10反相分配色譜適于非極性化合物的分離。 （ ）11高效液相色譜法采用梯度洗脫，是為了改變被測組分的保留值，提高分離度（× ）12液相色譜柱一般采用不銹鋼柱、玻璃填充柱。 （ × ）13液相色譜固定相通常為粒度510m。 （ × ） 14示差折光檢測

5、器是屬于通用型檢測器，適于梯度淋洗色譜。 （ × ）15離子交換色譜主要選用有機物作流動相。 （ × ）16體積排阻色譜所用的溶劑應與凝膠相似，主要是防止溶劑吸附。 （ × ）17在液一液色譜中，為改善分離效果，可采用梯度洗脫。 （ ）18化學鍵合固定相具有良好的熱穩(wěn)定性，不易吸水，不易流失，可用梯度洗脫。（ × ）19液相色譜的流動相又稱為淋洗液，改變淋洗液的組成、極性可顯著改變組分分離效果。（ ）20液相色譜指的是流動相是液體，固定相也是液體的色譜。 （ × ）21高效液相色譜柱柱效高，能用液相色譜分析的樣品不用氣相色譜法分析。（ 

6、5; ）22在液相色譜中，流動相的流速變化對柱效影響不大。 （ × ）23正相鍵合色譜的固定相為非（弱）極性固定相，反相色譜的固定相為極性固定相。 （ × ）24某人用凝膠色譜分離易高聚物樣品，分離情況很差，他改變流動相的組成后，分離情況大為改進，這種說法對嗎？ （ × ）25在離子交換色譜中使用的固定相也屬于一種鍵合固定相。 （ ）三、選擇題1在液相色譜法中，按分離原理分類，液固色譜法屬于（ D ）。A、分配色譜法 B、排阻色譜法 C、離子交換色譜法 D、吸附色譜2. 在高效液相色譜流程中，試樣混合物在（ C ）中被分離。A、檢測器 B、記錄器 C、色譜柱 D、

7、進樣器3. 液相色譜流動相過濾必須使用何種粒徑的過濾膜？( B )A、0.5m B、0.45m C、0.6m D、0.55m4在液相色譜中，為了改變色譜柱的選擇性，可以進行如下哪些操作？( C )A、改變流動相的種類或柱子 B、改變固定相的種類或柱長C、改變固定相的種類和流動相的種類 D、改變填料的粒度和柱長5. 下列用于高效液相色譜的檢測器，（ D ）檢測器不能使用梯度洗脫。A、紫外檢測器 B、熒光檢測器C、蒸發(fā)光散射檢測器 D、示差折光檢測器6. 在高效液相色譜中，色譜柱的長度一般在（ A ）范圍內。A、1030cm B、2050m C、12m D、25m7. 在液相色譜中，某組分的保留值

8、大小實際反映了哪些部分的分子間作用力。（ C ）A、組分與流動相 B、組分與固定相C、組分與流動相和固定相 D、組分與組分8. 液相色譜中通用型檢測器是（ B ）。A、紫外吸收檢測器 B、示差折光檢測器C、熱導池檢測器 D、氫焰檢測器9. 在液相色譜法中，提高柱效最有效的途徑是（ D ）。A、提高柱溫 B、降低板高C、降低流動相流速 D、減小填料粒度10在液相色譜中，不會顯著影響分離效果的是（ B ）。A、改變固定相種類 B、改變流動相流速C、改變流動相配比 D、改變流動相種類11. 高效液相色譜儀與氣相色譜儀比較增加了（ D ）。A、恒溫箱 B、進樣裝置C、程序升溫 D、梯度淋洗裝置12.

9、在高效液相色譜儀中保證流動相以穩(wěn)定的速度流過色譜柱的部件是（ B ）。A、貯液器 B、輸液泵C、檢測器 D、溫控裝置13. 高效液相色譜分析用標準溶液的配制一般使用（ A ）。A、國標規(guī)定的一級、二級去離子水 B、國標規(guī)定的三級水C、不含有機物的蒸餾水 D、無鉛（無重金屬）水14. 高效液相色譜儀與普通紫外-可見分光光度計完全不同的部件是（ A ）。A、流通池 B、光源 C、分光系統(tǒng) D、檢測系統(tǒng)15. 高效液相色譜儀中高壓輸液系統(tǒng)不包括（ E ）。A、貯液器 B、高壓輸液泵 C、過濾器 D、梯度洗脫裝置 E、進樣器16. 在液相色譜中，為了獲得較高柱效能，常用的色譜柱是（ B ）。A、毛細管

10、柱 B、直形柱 C、U形柱 D、螺旋形柱 17. 在色譜法中，任何組分的分配系數(shù)都比1小的是（ D ）。A、離子交換色譜 B、氣固色譜 C、氣液色譜 D、空間排阻色譜18. 反相液液色譜適合于分離（ D ）。A、低沸點液體 B、高分子化合物 C、極性化合物 D、非極性化合物四、簡答題（略）1從分離原理、儀器構造及應用范圍上簡要比較氣相色譜及液相色譜的異同點。答：共同點：高效、高速、高選擇性，兼具分析和分離功能，均可在線分析。不同點：（1）流動相不同（2）固定相不同，GC粒度粗（100250um），HPLC采用化學鍵合固定相，粒度?。?-10um）（3）應用范圍不同（4）結構不同，HPLC有高壓

11、輸液泵，GC的檢測器更多。各有所長，互為補充。2在液相色譜中, 提高柱效的途徑有哪些?其中最有效的途徑是什么?答：液相色譜中提高柱效的途徑主要有： （1）提高柱內填料裝填的均勻性； （2）改進固定相： （3）粒度; 選擇薄殼形擔體; 選用低粘度的流動相; （4）適當提高柱溫 其中，減小粒度是最有效的途徑。. 3液相色譜有幾種類型? 它們的保留機理是什么？在這些類型的應用中，最適宜分離的物質是什么？答：液相色譜有以下幾種類型：液-液分配色譜；液-固吸附色譜；化學鍵合色譜；離子交換色譜；離子對色譜；空間排阻色譜等。液液分配色譜的保留機理是通過組分在固定相和流動相間的多次分配進行分離的。可以分離各種

12、無機、有機化合物。 液-固吸附色譜是通過組分在兩相間的多次吸附與解吸平衡實現(xiàn)分離的。最適宜分離的物質為中等相對分子質量的油溶性試樣，凡是能夠用薄層色譜分離的物質均可用此法分離?；瘜W鍵合色譜中由于鍵合基團不能全部覆蓋具有吸附能力的載體，所以同時遵循吸附和分配的機理，最適宜分離的物質為與液-液色譜相同。離子交換色譜是通過組分與固定相間親合力差別而實現(xiàn)分離的。各種離子及在溶液中能夠離解的物質均可實現(xiàn)分離，包括無機化合物、有機物及生物分子，如氨基酸、核酸及蛋白質等。空間排阻色譜是利用凝膠固定相的孔徑與被分離組分分子間的相對大小關系，而分離、分析的方法。最適宜分離的物質是：蛋白質等生物分子的分離、高聚物

13、等大分子分離（分子量大于2000）。4在液-液分配色譜中，為什么可分為正相色譜及反相色譜？答：采用正相及反相色譜的分類法，是為了選擇與固定相性能匹配的流動相，以降低固定液在流動相中的溶解度從而避免固定液的流失。當然，分離的對象也隨之發(fā)生改變。5何謂化學鍵合固定相？它有什么突出的優(yōu)點？答：利用化學反應將固定液的官能團鍵合在載體表面形成的固定相稱為化學鍵合固定相。 優(yōu)點：固定相表面沒有液坑,比一般液體固定相傳質快的多；無固定相流失，增加了色譜柱的穩(wěn)定性及壽命；可以鍵合不同的官能團，能靈活地改變選擇性，可應用與多種色譜類型及樣品的分析；有利于梯度洗提，也有利于配用靈敏的檢測器和餾分的收集。6何謂梯度洗脫？它與氣相色譜中的程序升溫有何異同之處？答：在一個分析周期內，按一定程序不斷改變流動相的組成或濃度配比，稱為梯度洗提，是改進液相色譜分離的重要手段。 梯度洗提與氣相色譜中的程序升溫類似，但是前者連續(xù)改變的是流動相的極性、pH或離子強度，而后者改變的溫度。程序升溫也是改進氣相色譜分離的重要手段。 7高效液相色譜進樣技術與氣相色譜進樣技術有何不同之處？答：在高效液相色譜中為了承受高壓，常采用進樣閥進樣的方式，定量準確、重復性好。在GC中通常采用注射器進樣，缺點是定量不準確。書是我們時代的生命別林斯基書籍是巨大的力量列寧書是人類進步的階梯高爾基書籍是人類知識的總統(tǒng)莎士比亞書籍是人類思想的寶庫