微生物的生長與環(huán)境條件PPT精品文檔

1、1nPart 1 微生物的生長微生物的生長nPart 2 環(huán)境條件對微生物的影響環(huán)境條件對微生物的影響nPart 3 微生物的控制微生物的控制2概念概念n生長：細(xì)胞體積的增大；生長：細(xì)胞體積的增大；n繁殖：細(xì)胞數(shù)量的增加繁殖：細(xì)胞數(shù)量的增加單細(xì)胞微生物單細(xì)胞微生物 生長與繁殖難以區(qū)分，以群體數(shù)目的增加作為生長的標(biāo)志。多細(xì)胞絲狀微生物多細(xì)胞絲狀微生物 細(xì)胞物質(zhì)量的增加作為生長的標(biāo)志，通過形成孢子（有性與無性）使得個體數(shù)目的增加叫作繁殖3微生物生長的測定微生物生長的測定45n全數(shù)測定全數(shù)測定計數(shù)器法比濁法n活菌計數(shù)活菌計數(shù)稀釋平板法（膜過濾法）液體稀釋培養(yǎng)法細(xì)胞物質(zhì)量的測定（間接測定法）674.

2、Direct Microscopic CountCounting chamber of known volumeDilution Results13n干重法干重法n含氮量法含氮量法nDNA法法n生理指標(biāo)測定法生理指標(biāo)測定法14n把把一定微生物一定微生物接種到一接種到一定量的液體培養(yǎng)基定量的液體培養(yǎng)基中，在中，在一一定條件定條件下進(jìn)行下進(jìn)行一次性培養(yǎng)一次性培養(yǎng)，定時取樣測定活菌數(shù)，定時取樣測定活菌數(shù)，以活菌數(shù)的對數(shù)值為縱坐標(biāo)，以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)，以活菌數(shù)的對數(shù)值為縱坐標(biāo)，以培養(yǎng)時間為橫坐標(biāo)，就可以畫出一條有規(guī)律的曲線，這就是微生物的典就可以畫出一條有規(guī)律的曲線，這就是微生物的典型生長曲線（型生長

3、曲線（growth curvegrowth curve）。）。n一般把典型生長曲線劃分為一般把典型生長曲線劃分為適應(yīng)期適應(yīng)期、對數(shù)增長期對數(shù)增長期（指數(shù)期）（指數(shù)期）、穩(wěn)定期穩(wěn)定期和和衰亡期衰亡期等四個時期。等四個時期。n該生長曲線只適用于該生長曲線只適用于單細(xì)胞微生物單細(xì)胞微生物，包括細(xì)菌和酵，包括細(xì)菌和酵母菌。母菌。注：圖中隱藏鏈接16 適應(yīng)期的出現(xiàn)，可能是因?yàn)樵诮臃N到新鮮培養(yǎng)液的適應(yīng)期的出現(xiàn)，可能是因?yàn)樵诮臃N到新鮮培養(yǎng)液的細(xì)胞中，一時還缺乏分解或催化有關(guān)底物的酶，或是缺細(xì)胞中，一時還缺乏分解或催化有關(guān)底物的酶，或是缺乏充足的中間代謝物。乏充足的中間代謝物。該時期有幾個特點(diǎn)：該時期有幾個特

4、點(diǎn)：l生長繁殖的速度幾乎等于零。l細(xì)胞形態(tài)增大；l細(xì)胞內(nèi)RNA尤其是rRNA含量增高，原生質(zhì)呈嗜堿性。l合成代謝活躍，核糖體、酶類和ATP的合成加快，易產(chǎn)生誘導(dǎo)酶。l對外界不良條件反應(yīng)敏感。 適應(yīng)期（適應(yīng)期（adaptive phase）17影響適應(yīng)期長短的因素很多影響適應(yīng)期長短的因素很多n 菌種的菌齡菌種的菌齡 菌齡即“種子”(inoculum)的群體生長年齡，亦即它處在生長曲線上的哪一個階段。n 接種量接種量 接種量的大小明顯影響適應(yīng)期的長短。n 培養(yǎng)基成分培養(yǎng)基成分 18生產(chǎn)上生產(chǎn)上盡量縮短延滯期盡量縮短延滯期l 增加接種量增加接種量 l 適齡菌種（對數(shù)生長期）適齡菌種（對數(shù)生長期）l

5、用與培養(yǎng)菌種相同組成分的培養(yǎng)基用與培養(yǎng)菌種相同組成分的培養(yǎng)基19又稱為指數(shù)增長期（又稱為指數(shù)增長期（exponential phase），是指在生長），是指在生長曲線中，緊接著適應(yīng)期的一個細(xì)胞以幾何級數(shù)速度分裂曲線中，緊接著適應(yīng)期的一個細(xì)胞以幾何級數(shù)速度分裂的一段時期。的一段時期。 對數(shù)增長期有以下幾個特點(diǎn)：對數(shù)增長期有以下幾個特點(diǎn)：l 生長繁殖的速度很生長繁殖的速度很快快，世代時間均勻一致；，世代時間均勻一致；l 酶系活躍，代謝旺盛。酶系活躍，代謝旺盛。l 菌細(xì)胞的形態(tài)特征均勻一致，最代表種的特征；菌細(xì)胞的形態(tài)特征均勻一致，最代表種的特征；l 此時期內(nèi)的微生物的生化特性均勻一致，并且典型。此

6、時期內(nèi)的微生物的生化特性均勻一致，并且典型。 對數(shù)增長期對數(shù)增長期 (logarithmic phase)x2x1t2t1培養(yǎng)時間Lg 細(xì)胞數(shù)/mlt2-t13.322(lgx2-lgx1)生長速率常數(shù)R=t2- t13.322(lgx2-lgx1)代時G=指數(shù)期生長的數(shù)學(xué)模型繁殖代數(shù) n=3.322(lgx2-lgx1)21 影響指數(shù)期的因素影響指數(shù)期的因素n菌種菌種n營養(yǎng)成分營養(yǎng)成分n營養(yǎng)物濃度營養(yǎng)物濃度n培養(yǎng)溫度培養(yǎng)溫度23n特點(diǎn)特點(diǎn)l 生長速率幾乎等于死亡速率，細(xì)胞濃度不增加。 l 基質(zhì)大量消耗，代謝物大量積累。 n生產(chǎn)上生產(chǎn)上盡量延長穩(wěn)定期穩(wěn)定期（穩(wěn)定期（stationary pha

7、se）24穩(wěn)定期到來的原因主要是：穩(wěn)定期到來的原因主要是：營養(yǎng)物尤其是生長限制因子的耗盡；營養(yǎng)物的比例失調(diào)，例如C/N比值不合適等；酸、醇、毒素或H2O2等有害代謝產(chǎn)物的累積；pH、氧化還原勢等物化條件越來越不適宜等等。 在穩(wěn)定期時，細(xì)胞開始貯存糖原、異染顆粒和脂肪等貯藏物；多數(shù)芽孢桿菌在這時開始形成芽孢；有的微生物在穩(wěn)定期時還開始合成抗生素等次生代謝產(chǎn)物。25n 特點(diǎn)特點(diǎn)l 死亡速率大于生長速率死亡速率大于生長速率 l 菌體開始自溶自溶 l 細(xì)胞形態(tài)多樣形態(tài)多樣，染色性改變n 生產(chǎn)上生產(chǎn)上 要掌握發(fā)酵時間 衰亡期（衰亡期（decline phase或或death phase）26 微生物的分

8、離與純培養(yǎng)微生物的分離與純培養(yǎng)微生物的分離微生物的分離稀釋平板法稀釋平板法劃線法劃線法單細(xì)胞分離法單細(xì)胞分離法選擇培養(yǎng)基分離法選擇培養(yǎng)基分離法 微生物的純培養(yǎng)微生物的純培養(yǎng)分批培養(yǎng)與連續(xù)培養(yǎng)分批培養(yǎng)與連續(xù)培養(yǎng)厭氧培養(yǎng)厭氧培養(yǎng)28n物理因素物理因素l 溫度l 水分活度l 氧氣和氧化還原電位l 輻射作用n化學(xué)因素化學(xué)因素l pH值l 可抑制或殺滅微生物的常見化學(xué)物n生物因素對微生物生長的影響生物因素對微生物生長的影響29最低溫度：微生物能生長的溫度低限最低溫度：微生物能生長的溫度低限最適溫度：微生物生長繁殖速度最快的溫度最適溫度：微生物生長繁殖速度最快的溫度 最高溫度：微生物能生長的溫度高限最高溫

9、度：微生物能生長的溫度高限溫度影響微生物生長的一般規(guī)律溫度影響微生物生長的一般規(guī)律30不同微生物類群適應(yīng)的溫度范圍不同微生物類群適應(yīng)的溫度范圍 微生物類群最低生長溫度最適生長溫度最高生長溫度嗜熱微生物嗜溫微生物冷育微生物嗜冷微生物4045515-55-555575304025301215609035473035152031 高溫和低溫對微生物的影響高溫和低溫對微生物的影響 1 1、高溫的影響、高溫的影響 n引起菌體蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的變性引起菌體蛋白質(zhì)等大分子物質(zhì)的變性n影響高溫效應(yīng)的因素影響高溫效應(yīng)的因素l 菌種與菌齡l 高溫延續(xù)的時間l 菌體所處介質(zhì)l 菌體密度322 2、低溫對微生物的影

10、響、低溫對微生物的影響降低酶活性。大多數(shù)微生物活動降低、休眠，甚至死亡。降低酶活性。大多數(shù)微生物活動降低、休眠，甚至死亡。少數(shù)能正長。少數(shù)能正長。 l細(xì)胞內(nèi)水分轉(zhuǎn)變?yōu)楸w,引起細(xì)胞明顯脫水,而不能存活。l細(xì)胞內(nèi)形成的冰晶對微生物細(xì)胞產(chǎn)生機(jī)械性的傷害。l 注意注意: : 微生物不同，反應(yīng)不同 冷凍速度不同，反應(yīng)不同冷凍和解凍交替，比一直冷凍更易死亡。 環(huán)境條件不同，反應(yīng)不同：pH低、水分多，死亡快；糖 、鹽、蛋白質(zhì)、脂肪含量高則死亡慢。33低溫用于食品保藏低溫用于食品保藏低溫保藏是食品貯藏中，品質(zhì)下降最低的一種貯藏方法。低溫保藏是食品貯藏中，品質(zhì)下降最低的一種貯藏方法。n寒冷溫度寒冷溫度：（：

11、（14-714-7） 嗜冷微生物能生長，但生長嗜冷微生物能生長，但生長比較慢比較慢 ，貯藏有效期比較短，貯藏果蔬食品。，貯藏有效期比較短，貯藏果蔬食品。n冷藏溫度冷藏溫度：（：（7-07-0）（常用）（常用4-84-8）嗜冷微生物能緩慢生長，多數(shù)病原菌不能生長嗜冷微生物能緩慢生長，多數(shù)病原菌不能生長 ，保藏，保藏有效期較短，貯藏食品：肉、禽蛋、乳品、果蔬等。有效期較短，貯藏食品：肉、禽蛋、乳品、果蔬等。n凍藏溫度凍藏溫度：低于：低于00（常用（常用-18-18）幾乎可以阻止所有微生物的生長，可進(jìn)行長期貯藏，但幾乎可以阻止所有微生物的生長，可進(jìn)行長期貯藏，但食品品質(zhì)。食品品質(zhì)。 34（一）水活度

12、的概念（一）水活度的概念n AW=P/PO 式中式中: P 一定溫度下基質(zhì)環(huán)境的水蒸汽壓一定溫度下基質(zhì)環(huán)境的水蒸汽壓 Po 相同溫度下純水的水蒸汽壓相同溫度下純水的水蒸汽壓 （二）適合在不同水活度下生長的微生物（二）適合在不同水活度下生長的微生物類型類型最低生長最低生長aW最適生長最適生長aW干生性微干生性微生物生物中生性微中生性微生物生物濕生性微濕生性微生物生物0.80以下以下0.800.900.900.950.980.981.001.0035微生物微生物最低Aw 值微生物微生物最低Aw 值一般細(xì)菌一般細(xì)菌090嗜鹽細(xì)菌嗜鹽細(xì)菌075一般酵母菌一般酵母菌088干生性霉菌干生性霉菌065一般霉

13、菌一般霉菌080耐滲透壓酵母菌耐滲透壓酵母菌060一些微生物主要類群的最低水分活度一些微生物主要類群的最低水分活度(AW)(AW)36氧氣對微生物生長的影響氧氣對微生物生長的影響n 需氧微生物（需氧微生物（aerobe） 絕大多數(shù)絲狀真菌、放線菌和部分細(xì)菌屬于這個類型。絕大多數(shù)絲狀真菌、放線菌和部分細(xì)菌屬于這個類型。n 厭氧微生物（厭氧微生物（anaerobe） 主要是一些細(xì)菌屬于這一類群，如梭狀芽孢桿菌屬（主要是一些細(xì)菌屬于這一類群，如梭狀芽孢桿菌屬（Clostridium）、）、產(chǎn)甲烷桿菌屬（產(chǎn)甲烷桿菌屬（Matharobacterium）等。）等。n 兼性厭氧微生物（兼性厭氧微生物（fa

14、cultative aerobe） 絕大多數(shù)酵母菌和部分細(xì)菌屬于這種類型。絕大多數(shù)酵母菌和部分細(xì)菌屬于這種類型。n 微量需氧微生物（微量需氧微生物（microaerophilic） 只有少數(shù)細(xì)菌屬于此類型，如擬桿菌屬（只有少數(shù)細(xì)菌屬于此類型，如擬桿菌屬（Bacteriodes）中的個別種。）中的個別種。n 耐氧性厭氧微生物（耐氧性厭氧微生物（aerotolerant anaerobe） 主要是一些乳酸菌屬于該呼吸類型。主要是一些乳酸菌屬于該呼吸類型。3738厭氧菌有氧毒害的機(jī)理厭氧菌有氧毒害的機(jī)理39 260nm波長是生物核酸的最大吸收波波長是生物核酸的最大吸收波長，殺菌力最強(qiáng)長，殺菌力最強(qiáng)光

15、復(fù)活作用：可見光激活微生物的光復(fù)活光復(fù)活作用：可見光激活微生物的光復(fù)活酶并修復(fù)酶并修復(fù)DNA輻射損傷的現(xiàn)象輻射損傷的現(xiàn)象紫外燈：實(shí)驗(yàn)室常用紫外燈：實(shí)驗(yàn)室常用4060W無臭氧燈無臭氧燈 紫外輻射紫外輻射40 電離輻射電離輻射 種類：種類：X X射線、射線、射線、高能電子束射線、高能電子束 單位：單位：居里（輻射源強(qiáng)度）居里（輻射源強(qiáng)度） 倫琴（輻射源強(qiáng)度）倫琴（輻射源強(qiáng)度） 拉德（吸收劑量：拉德（吸收劑量：100100爾格爾格/g/g）目前的法定表示單位：目前的法定表示單位： GyGy或或KGyKGy 1Gy =100 1Gy =100 radsrads411 1、總體說，、總體說，M M生長生

16、長2 2pHpH9 9, ,少數(shù)例外少數(shù)例外. .絕大多數(shù)在絕大多數(shù)在5-95-92 2、每種、每種M,M,有自己的生長有自己的生長pHpH三基點(diǎn)三基點(diǎn): :最低、最適和最高最低、最適和最高pHpH值。值。 大腸桿菌: 最低pH4.3,最適pH6.0-8.0,最高pH9.5。42根據(jù)微生物生長的最適pH值，將微生物分為：n嗜堿微生物：嗜堿微生物：硝化細(xì)菌、尿素分解菌、多數(shù)放線菌n耐堿微生物：耐堿微生物：許多鏈霉菌n中性微生物：中性微生物：絕大多數(shù)細(xì)菌，一部分真菌n嗜酸微生物：嗜酸微生物：硫桿菌屬n耐酸微生物：耐酸微生物：乳酸桿菌、醋酸桿菌 43 pH pH的影響機(jī)制的影響機(jī)制n 改變膜電位，影

17、響膜的功能改變膜電位，影響膜的功能n 影響酶的功能影響酶的功能n 影響基質(zhì)中各類物質(zhì)的性質(zhì)影響基質(zhì)中各類物質(zhì)的性質(zhì)44培養(yǎng)基培養(yǎng)基pHpH變化的原因及調(diào)節(jié)變化的原因及調(diào)節(jié) 原因原因: : 1. 1.大多數(shù)大多數(shù)M M使培養(yǎng)基使培養(yǎng)基pHpH下降下降. .如乳酸菌分解如乳酸菌分解G G產(chǎn)生乳酸產(chǎn)生乳酸 2 2、有些、有些M M使培養(yǎng)基使培養(yǎng)基pHpH上升上升. .如尿素細(xì)菌水解尿素產(chǎn)生氨如尿素細(xì)菌水解尿素產(chǎn)生氨45pHpH調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)治標(biāo)治標(biāo)治本治本過酸時：過酸時：過堿時：過堿時：加加NaOHNaOH、Na2CO3Na2CO3等堿液中和等堿液中和過堿時：加過堿時：加H2SO4H2SO4、HClHCl

18、等酸液中和等酸液中和過酸時過酸時過堿時過堿時加適當(dāng)?shù)矗杭幽蛩?、加適當(dāng)?shù)矗杭幽蛩?、NaNO3NaNO3、NH4OHNH4OH或蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)提高通氣量提高通氣量加適當(dāng)碳源：加糖、乳酸、醋酸、加適當(dāng)碳源：加糖、乳酸、醋酸、檸檬酸或油脂等檸檬酸或油脂等降低通氣量降低通氣量46 生產(chǎn)中的應(yīng)用生產(chǎn)中的應(yīng)用 1、發(fā)酵食品：酸奶、酸菜等、發(fā)酵食品：酸奶、酸菜等 2、酸漬食品：如加入醋酸，增加食品風(fēng)味。、酸漬食品：如加入醋酸，增加食品風(fēng)味。 3、消毒防腐：如醋酸、消毒防腐：如醋酸,可殺死沙門氏菌可殺死沙門氏菌,大腸桿菌大腸桿菌等。等。 條件：對人體無毒害，不影響食品的風(fēng)味，加入條件：對人體無毒害，不影響食

19、品的風(fēng)味，加入食品后的含量應(yīng)不超過規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。食品后的含量應(yīng)不超過規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)。47 1 1、重金屬及鹽：、重金屬及鹽：Hg,Ag,CuHg,Ag,Cu等等 2 2、氧化劑：、氧化劑：過氧化氫、高錳酸鉀、次氯酸鹽、過氧化氫、高錳酸鉀、次氯酸鹽、鹵素等鹵素等 3 3、有機(jī)物：、有機(jī)物：酚、醇、醛、酸、表面活性劑等酚、醇、醛、酸、表面活性劑等 酚系數(shù)：酚系數(shù)：一定條件下致死全部供試菌的最高稀釋度與一定條件下致死全部供試菌的最高稀釋度與達(dá)到同樣效果的酚的最高稀釋度的比值達(dá)到同樣效果的酚的最高稀釋度的比值 常用殺菌劑常用殺菌劑: 苯酚、甲酚、乙醇、福爾馬林、新潔爾苯酚、甲酚、乙醇、福爾馬林、新潔爾滅滅

20、48 一、共生一、共生 兩種生物密切生活在一起，可形成特殊共兩種生物密切生活在一起，可形成特殊共生體的生存關(guān)系生體的生存關(guān)系 二、互生二、互生 一種生物的活動為另一種生物的活動創(chuàng)造一種生物的活動為另一種生物的活動創(chuàng)造有利條件的現(xiàn)象有利條件的現(xiàn)象49 三、拮抗三、拮抗一種生物的生命活動抑制或殺死另一種生一種生物的生命活動抑制或殺死另一種生物的現(xiàn)象物的現(xiàn)象 四、寄生四、寄生 一種生物生活在另一種生物體內(nèi)或體表，一種生物生活在另一種生物體內(nèi)或體表，吸取后者物質(zhì)作為營養(yǎng)物，且對后者有害吸取后者物質(zhì)作為營養(yǎng)物，且對后者有害無益的生存關(guān)系無益的生存關(guān)系 選擇培養(yǎng)基分離法1.dilute sample1 m

21、l9 ml10 100 1000 104 105 106 107牛肉膏培養(yǎng)基牛肉膏培養(yǎng)基土豆培養(yǎng)基土豆培養(yǎng)基高氏培養(yǎng)基高氏培養(yǎng)基1.dilute sample1 ml9 ml10 100 1000 104 105 106 107cell no/ml2. plate out 0.1 ml Inoculating an agar plate to obtain single coloniesMixed culturePure culture54555657 分批培養(yǎng)：分批培養(yǎng)：連續(xù)培養(yǎng)：連續(xù)培養(yǎng)：將新鮮培養(yǎng)基連續(xù)加入均勻攪拌的培養(yǎng)物中，保持細(xì)胞濃度、比生長速率、培養(yǎng)環(huán)境不隨時間變化，維持穩(wěn)定狀態(tài)的

22、培養(yǎng)過程。 59分批培養(yǎng)分批培養(yǎng)將微生物置于一定容積的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，最后一次收獲。將微生物置于一定容積的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，最后一次收獲。60 連續(xù)培養(yǎng)是在研究生長曲線的基礎(chǔ)上,當(dāng)微生物以單批培養(yǎng)的方式培養(yǎng)到指數(shù)期的后期時，一方面以一定速度連續(xù)流加新鮮培養(yǎng)基，并立即攪拌均勻，另一方面，利用溢流的方式，以同樣的流速不斷流出培養(yǎng)物。這樣，培養(yǎng)物就達(dá)到動態(tài)平衡，其中的微生物可長期保持在指數(shù)期的平衡生長狀態(tài)和穩(wěn)定的生長速率上。連續(xù)培養(yǎng)連續(xù)培養(yǎng)(continuous culture) 616263其優(yōu)點(diǎn)：其優(yōu)點(diǎn)：n 高效，它簡化了裝料、滅菌、出料、清洗發(fā)酵罐等許多單元操作，從而減少了非生產(chǎn)時間和提高了設(shè)備的利

23、用率；n 自控，便于利用各種儀表進(jìn)行自動控制；n 產(chǎn)品質(zhì)量較穩(wěn)定；n 節(jié)約了大量動力、人力、水和蒸汽，且使水、汽、電的負(fù)荷均勻合理。64連續(xù)培養(yǎng)方法連續(xù)培養(yǎng)方法 恒化器法恒化器法 恒濁器法恒濁器法65微生物控制的意義微生物控制的意義 l 防止疾病的發(fā)生和傳播防止疾病的發(fā)生和傳播n 防止食品和藥物等的微生物污染防止食品和藥物等的微生物污染n 防止微生物對原材料的破壞（腐敗和變質(zhì)）防止微生物對原材料的破壞（腐敗和變質(zhì)）66l 滅菌（滅菌（sterilization）l 殺滅所有的微生物，包括細(xì)菌的芽孢；n 消毒（消毒（disinfection）n 殺滅病原微生物；n 防腐（防腐（antisepti

24、c）n 抑制微生物的生長繁殖；l化學(xué)療劑（化學(xué)療劑（therapeutic agents）n 用來治療微生物感染的藥物，具有選擇毒性； 概概 念念 67n超聲波（超聲波（ultrasonic）n滲透壓（滲透壓（osmotic pressure） 控制微生物的物理方法控制微生物的物理方法 68n 細(xì)菌濾器細(xì)菌濾器材料為玻璃棉，陶瓷，石棉等。n 濾膜濾膜材料為醋酸纖維素，硝酸纖維素，聚砜；材料為醋酸纖維素，硝酸纖維素，聚砜；孔徑為孔徑為0.22微米，微米，0.45微米；微米；應(yīng)用應(yīng)用啤酒，飲料，藥物（對熱不穩(wěn)定的，如蛋白質(zhì)等）。啤酒，飲料，藥物（對熱不穩(wěn)定的，如蛋白質(zhì)等）。 697071微生物耐熱

25、性大小的幾種表示方法：微生物耐熱性大小的幾種表示方法： 熱力致死時間熱力致死時間：在特定的溫度及其它條件下，殺死一定數(shù)量的微生物所需要的時間 F值值：在一定的基質(zhì)中，溫度為121.1，加熱殺死一定數(shù)量微生物所需的時間 D 值值：利用一定溫度進(jìn)行加熱，活菌數(shù)減少一個對數(shù)周期（即90%活菌被殺死）所需的時間 Z值值：在加熱致死曲線中，時間降低一個對數(shù)周期（即縮短90%的加熱時間）所需要升高的溫度7273n多數(shù)細(xì)菌，酵母菌和霉菌的營養(yǎng)細(xì)胞和病毒多數(shù)細(xì)菌，酵母菌和霉菌的營養(yǎng)細(xì)胞和病毒在在50-65 ， 10 min可以致死。可以致死。n一般噬菌體一般噬菌體6580 致死。致死。n放線菌霉菌的孢子比營養(yǎng)

26、細(xì)胞抗熱性強(qiáng)，放線菌霉菌的孢子比營養(yǎng)細(xì)胞抗熱性強(qiáng)，7680 ，10min可以殺死可以殺死 。n細(xì)菌芽孢，在細(xì)菌芽孢，在100 下下20min才能致死。才能致死。n嗜熱脂肪芽孢桿菌可在嗜熱脂肪芽孢桿菌可在80 條件下失活，條件下失活，在在120 ，12min才能殺死。才能殺死。n同種微生物老齡菌比幼菌耐熱。同種微生物老齡菌比幼菌耐熱。74l焚燒焚燒金屬制品（鑷子，接種環(huán)等）。動物尸體，廢棄物。l 干熱滅菌干熱滅菌160/2h（oven）烤箱。適用于耐高溫物品。溫度下降至90100時方可開啟箱門，否則干烤物品會驟冷，破碎或可燃物燃燒。 干熱滅菌法干熱滅菌法75 濕熱滅菌比干熱滅菌效果好濕熱滅菌比干

27、熱滅菌效果好水蒸氣穿透力強(qiáng)水蒸氣穿透力強(qiáng)水蒸氣含熱潛能高水蒸氣含熱潛能高蛋白質(zhì)易凝固變性蛋白質(zhì)易凝固變性濕熱滅菌法濕熱滅菌法76n巴氏消毒法巴氏消毒法n煮沸法煮沸法n流通蒸汽滅菌法流通蒸汽滅菌法n間隙滅菌法間隙滅菌法n高壓蒸汽滅菌法高壓蒸汽滅菌法 （高溫對培養(yǎng)基的影響及其防止措施高溫對培養(yǎng)基的影響及其防止措施）77高溫對培養(yǎng)基的不利影響：高溫對培養(yǎng)基的不利影響： 形成沉淀物（有機(jī)沉淀物如多肽類，無機(jī)沉淀物如磷酸鹽）；破壞營養(yǎng)；提高色澤（褐變?nèi)绠a(chǎn)生氨基糖等）；改變培養(yǎng)基的pH值；降低培養(yǎng)基的濃度消除有害影響的措施消除有害影響的措施 采用特殊的加熱滅菌法 過濾除菌法 加入螯合劑78是用常壓蒸汽反復(fù)

28、幾次進(jìn)行滅菌的方法。是用常壓蒸汽反復(fù)幾次進(jìn)行滅菌的方法。 主要用于不宜高壓滅菌的培養(yǎng)基，不耐熱的藥物主要用于不宜高壓滅菌的培養(yǎng)基，不耐熱的藥物和營養(yǎng)物等和營養(yǎng)物等方法是將待滅菌物品置于蒸鍋內(nèi)加熱到沸騰維持方法是將待滅菌物品置于蒸鍋內(nèi)加熱到沸騰維持15-30min15-30min，殺死營養(yǎng)細(xì)胞，取出冷卻后在，殺死營養(yǎng)細(xì)胞，取出冷卻后在3737恒恒溫培養(yǎng)溫培養(yǎng)2424小時，使芽孢萌發(fā)，再用此法滅菌，反小時，使芽孢萌發(fā)，再用此法滅菌，反復(fù)三次，即可達(dá)到滅菌目的。復(fù)三次，即可達(dá)到滅菌目的。79n物品在水中煮沸物品在水中煮沸 15min，可殺死所有營，可殺死所有營養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢。養(yǎng)細(xì)胞和一部分芽孢。

29、n在水中加入的在水中加入的 a2CO3或或的碳酸效果更好。此法適合注射器和解的碳酸效果更好。此法適合注射器和解剖用具的消毒。剖用具的消毒。80是食品（牛奶）釀造（啤酒）工業(yè)中常用的方法。是食品（牛奶）釀造（啤酒）工業(yè)中常用的方法。具體做法具體做法優(yōu)點(diǎn)：即可殺死病原微生物。又不致?lián)p壞營養(yǎng)，優(yōu)點(diǎn)：即可殺死病原微生物。又不致?lián)p壞營養(yǎng)，可保留食品飲料原有用味?？杀Ａ羰称凤嬃显杏梦丁?1n低溫維持法（低溫維持法（LTH） 63/30minn高溫瞬時法（高溫瞬時法（HTST） 72/15s，82/3s。82n設(shè)備：設(shè)備：滅菌鍋滅菌鍋（autoclave）n滅菌條件滅菌條件113/115（8磅磅/10磅）

30、磅）2030min，適用于含糖，適用于含糖培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。121 （15磅）磅）2030min，一般耐高溫物品。，一般耐高溫物品。838485紫外線紫外線u原理原理細(xì)胞細(xì)胞DNA吸收能量，形成胸腺嘧啶二吸收能量，形成胸腺嘧啶二聚體，干擾聚體，干擾DNA復(fù)制和蛋白質(zhì)合成。復(fù)制和蛋白質(zhì)合成。u設(shè)備：紫外燈（設(shè)備：紫外燈（3040W）u適用于空間及物品表面的消毒適用于空間及物品表面的消毒u缺點(diǎn)：穿透力弱，不能透過玻璃，缺點(diǎn)：穿透力弱，不能透過玻璃，UV照射可照射可產(chǎn)生臭氧（有害）。產(chǎn)生臭氧（有害）。86u適用于整包裝滅菌（適用于整包裝滅菌（ Co 60）u優(yōu)點(diǎn)：穿透力強(qiáng)優(yōu)點(diǎn)：穿透力強(qiáng)電離輻射電離輻射

31、87u 破碎細(xì)胞破碎細(xì)胞 （eg：E.coli，有時與溶菌酶反復(fù)凍溶結(jié)合），有時與溶菌酶反復(fù)凍溶結(jié)合）u 超聲波清洗（細(xì)胞培養(yǎng)用玻璃器皿）超聲波清洗（細(xì)胞培養(yǎng)用玻璃器皿）88u 高滲引起細(xì)胞脫水產(chǎn)生質(zhì)壁分離。高滲引起細(xì)胞脫水產(chǎn)生質(zhì)壁分離。u 常用鹽腌，糖漬來保存食品。常用鹽腌，糖漬來保存食品。89 消毒劑消毒劑 可以抑制或殺滅微生物，但對人體也可能產(chǎn)生有害可以抑制或殺滅微生物，但對人體也可能產(chǎn)生有害作用的化學(xué)試劑作用的化學(xué)試劑.主要用于抑制或殺滅物體表面、器械、主要用于抑制或殺滅物體表面、器械、排泄物和環(huán)境中的微生物。排泄物和環(huán)境中的微生物。 防腐劑防腐劑 可以抑制或阻止微生物生長，但對人體或

32、動物體的毒可以抑制或阻止微生物生長，但對人體或動物體的毒性較低的化學(xué)藥劑性較低的化學(xué)藥劑.用于肌體表面，如皮膚、粘膜、用于肌體表面，如皮膚、粘膜、傷口等處防止感染，也有的用于食品、飲料藥品的防腐傷口等處防止感染，也有的用于食品、飲料藥品的防腐作用。作用。 但現(xiàn)時消毒劑和防腐劑間的界限已并不很嚴(yán)格但現(xiàn)時消毒劑和防腐劑間的界限已并不很嚴(yán)格.9091v使微生物蛋白質(zhì)凝固變性使微生物蛋白質(zhì)凝固變性,發(fā)生沉淀發(fā)生沉淀.如酒精等如酒精等.v破壞菌體的酶系統(tǒng)破壞菌體的酶系統(tǒng),影響菌體代謝影響菌體代謝.如過氧化氫等如過氧化氫等.v降低微生物表面張力降低微生物表面張力,增加細(xì)胞膜的通透性增加細(xì)胞膜的通透性,使細(xì)