阿司匹林原料含量測定及有關物質(zhì)檢查

1、阿司匹林原料及腸溶片冇關物質(zhì)和含雖:測定方法比較（中國藥典（2005）和中國藥典（2010）, 要求結合人家藥物分析實驗和課木知識及藥典內(nèi)容進行比較，說明各方法的原理及比較方法 的優(yōu)缺點一、阿司匹林結構及理化性質(zhì)1. 結構cooh2. 理化性質(zhì)阿司匹林為固體，具有一定的熔點。在水中微溶或幾乎不溶，而能溶于乙 醇、乙瞇、三氯卬烷等冇機溶劑中，根據(jù)溶解行為的差異可作為供試品溶液 的配制或含量測定時滴定介質(zhì)選擇的依據(jù)。（1）酸性：阿司匹林的結構中具有竣基，pka=3.49水溶液顯酸性，并能與堿發(fā)生中和反應。（2）具侑酚耗基：阿同肚林結構中都具有潛在的酚拜基，可與鐵鹽試液作用顯色?？捎糜阼b別試驗。（3

2、）具有酯結構：阿司匹林結構屮具有酯結構，在堿性條件卜可水解產(chǎn)生酚疑基和竣酸鹽。阿司匹林原料藥的含量測定1、阿司匹林原料測定（2005版）:直接滴定法（2010年版阿司匹林原料測定與2005版的相同）阿司匹林的含量測定方法：取木品約0.4g,精密稱定，加中性乙醇（對酚瞅指示液顯中 性）20ml溶解后，加酚駄指示液3滴,用氫氧化鈉滴定液（0.1mol/l）滴定。每伽i氫氧 化鈉滴定液（0.1mol/l）相當于18.02mg的c9h8o41. 直接滴定法原理：阿司匹林中具竣基，在一定條件下與氧氧化鈉反應。測定阿司匹林含量的反應式如下：coohcoonapococha+naoh （| -ococh3+

3、h2o中國藥典（2005年版）阿司匹林的含量測定方法為：取本品約0.4g,精密稱定，加中性乙醇（對酚瞅指示液顯中性）20ml溶解后，加酚瞅指示液3 滴，用氫氧化鈉標準滴定溶液（o.lmol/l）滴定。1ml的氫氧化鈉標準滴定溶液（0.1mol/l）相當于18.02mg的阿司匹林（c9h8o4） o滴定度：1ml naoh 滴定液（0.1mol/l）三 0.1 mmolnaoh三0.1 mmol阿司匹林三0.1x180.16mg阿司匹林三18.02 mg阿司匹林含量測定結果計算公式為：v©供試品含量c%）=x100%wx1000式中v樣品消耗的氫氧化鈉滴定溶液的體積，ml；t滴定度，m

4、g / ml；f-氫氧化鈉滴定溶液的濃度校正因子；w_待測藥物的稱樣量，go原理：阿司匹林結構中有游離竣基，顯酸性，pka36。coohcoona(qpococh3+naohococh3+h2o優(yōu)點：簡便、快速。缺點：酯鍵水解干擾（不斷攪拌、快速滴定）；酸性雜質(zhì)干擾（如水楊酸（因本法缺乏專屬性，易受酯鍵水解產(chǎn)物水楊酸和醋酸干擾）注：適用范圍：不能用于含水楊過高或制劑分析，只能用于合格原料藥的含量測定。1、乙醇的作用：邙可司匹林在水中微溶，但易溶于乙醇）乙醇溶解阿司匹林；防止阿司匹林在水溶液中滴定過程易水解2、溶劑用中性乙醇的原因：乙醇對酚醯指示劑顯酸性，可消耗naoh而使結果偏 高，故在使用前

5、需用氮氧化鈉屮和至對酚瞅指示劑顯屮性。（中性乙醇：對指示劑（酚酥） 而言為中性，可消除滴定誤差）3、滴定應在不斷振蕩下稍快進行，以防止局部濃度過大，致使阿司匹林酯水解4、溫度在0-40°c對測定結果無顯著影響。5、指示劑（酚駄）：阿司匹林與氫氧化鈉形成強堿弱酸鹽，堿性區(qū)顯色，ph8.22、水解后剩余滴定法原理：阿司匹林中酯結構，在堿性溶液屮易于水解，加入過量標準堿滴 定液，加熱使酯水解，剩余堿用酸冋滴。2naoh2naoh ： h2so4 ch3coonaa na?so44 2h2olmol naoh三 mol阿司匹林lmol h2so4= 2 mol naoh方法:取本品1.5g,

6、精密稱定加氫氧化鈉滴（0.5mol/l） 50.0ml,混合, 緩緩煮沸l(wèi)omin,放冷，加酚駄指示液，用硫酸滴定液（0.25mol/l）滴定剩 余的氫氧化鈉。并將滴定結果用空口試驗校止。每lml氫氧化鈉滴定液（0.5mol/l）相當于45.04mg的阿司匹林實驗組：稱量 > （過量定量）naoh滴定"剩余）“羅日硫酸滴定（消耗體積v）空白組：（過量定量）naoht硫酸滴定液滴定（消耗體積v。）平均片重（呂） 標不量（g）x 100%naoh 滴定度(t) =0.5x180.16 x l/2=45.04(mg/ml)（vft_v）xtxf供試品含量（幻二wx1000（v:樣品測

7、定吋消耗硫酸滴定液體積（ml） vo：空白試驗吋消耗硫酸滴定液的體積（ml） t:滴定度w：供試品稱樣量（g） f:硫酸滴定液濃度校正因子冃滴定液實際濃度/滴定液規(guī)定濃度）優(yōu)點：消除了酯鍵水解的干擾缺點：酸性雜質(zhì)干擾注：進行空白校正（不加樣品或等量溶劑）的原因：消除c02的干擾。（堿液在受熱時 易吸收c02,牛成碳酸鹽，當用酸冋滴時，算滴定液消耗的體積會偏小，使測定結果偏 小，故需空白校正。）阿司匹林有關物質(zhì)檢查阿司匹林的合成工藝：coonaonacooh(ch3co) 2o+ ch3cooh1、阿司匹林屮的“有關物質(zhì)”系指除“游離水楊酸”外的合成原料藥苯酚及其他合成副產(chǎn) 物，如醋酸苯酯、水楊

8、酸苯酯、水楊酸水楊酸、水楊酸酊、乙酰水楊酸苯酯、等雜質(zhì)。(chico)/)水楊（u水楊般乙就水楊酰水楊酸oh 人（：（）（川 q(chjcohooh水楊酸苯酯乙酰水楊酸苯酯ohohocochj6is酸苯苗(ch)co)/)typ水楊酸if在2005版藥肌當中，并沒有單獨列出有關物質(zhì)的檢查力法，只通過檢查原料藥的澄清度從而 間接的來檢査有關物質(zhì)的限量。溶液的澄清度檢杏碳酸鈉試液屮不溶物。不溶物雜質(zhì)有未完全反應的酚類，或水楊酸精制 時由于溫度過高，產(chǎn)生脫竣副反應的苯酚，以及合成工藝過程小由副反應牛成的醋酸苯酯、 水楊酸苯酯和乙酰水楊酸苯酚等。這些雜質(zhì)均不溶于碳酸鈉試液，i佃阿司匹林可溶解。利用 溶

9、解行為的差異，由一定量阿司匹林在碳酸鈉試液中溶解應澄清來加以控制。原理根據(jù)oh水楊酸苯酣 水楊酸苯酯乙rtl水場酸苯酯這止匕雜質(zhì)與阿司1兀林的酸性強弱，利用它們在碳酸鈉溶液屮的溶解度旁異，規(guī)定一定最樣品在碳 酸鈉溶液中應澄清。方法取木品0.50g,加溫熱至約45°c的遞酸蝕試液10ml溶解后，溶液應澄清。而2010版藥典當中不僅檢查了藥物的澄明度，還利用了 hplc進一步 的量化了朵質(zhì)的限量。色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以乙睛四氫咲喃冰醋 酸水(20： 5： 5： 70)為流動相a,乙脂為流動相b,按下表進行線性梯度洗脫；檢測波 長為276nmo阿司匹林峰

10、的保留時間約為8分鐘，理論板數(shù)按阿司匹林峰計算不低于5000, 阿司匹林峰與水楊酸峰分離度應符合要求。時間(分鐘)流動相a (%)流動相b (%)0.0100 060.02080測定法取該品約o.lg,精密稱定，置10ml最瓶中，加1%冰醋酸甲醉溶液適最，振搖 使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，即得供試品溶液；精密量取供試品溶液lml, g 200ml量瓶 中，用1%冰酰酸甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得對照溶液；精密量取對照溶液10ml,置 100ml ®瓶中，用1%冰醋酸卬醇溶液稀釋至刻度，搖勻，即得靈敏度試驗溶液。分別精密 量取供試品溶液、對照溶液、靈敏度試驗溶液及水楊酸檢杳項下的水楊

11、酸對照品溶液各10卩1, 注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖屮如顯雜質(zhì)峰，除小于靈敏度試驗溶液屮 阿司匹林主峰面積的單個雜質(zhì)峰、溶劑峰及水楊酸峰不計外，其余各雜質(zhì)峰面積的和不得大 于對照溶液主峰峰面積（0.5%） o方法hplc梯度洗脫，主成分自身對照法（0.5%） 色譜柱：ods流動相:a：乙膳四氫咲喃冰醋酸冰（20:5:5:70）b：乙睛檢測波長：276nni原料藥：供試品溶液：001g/nil對照溶液：005mg/mla：阿司匹林供試品（10mg/ml）： b： 0.5°o自身對照（5opg ml）；c： 0.05%自身對照（靈敏度試驗d：水楊酸對照（lopg/ml）

12、； e：空白1：阿司匹林；2：水楊酸；3：乙酰水楊醸水楊酸有關物質(zhì)：除水楊酸峰外，其他各朵質(zhì)峰而積的和不得大于對照溶液主峰而積（0.5%） 2005年在有關物質(zhì)檢查時未使用hplc很人可能是因為當時hplc不夠普及，而使用澄明度 發(fā)檢查是簡單快捷且便宜的方法，但該方法只檢查了無竣基雜質(zhì)如苯酚、醋酸苯酯、水楊酸 苯酯，而水楊酸水楊酸、水楊酸阡等含竣酸的雜質(zhì)并不能檢查到，而由于每個人的眼睛對 澄清的鑒別界限不同，作為定性檢查靈敏度也是不夠的；而hplc的使用則增加了選擇性和 靈敏度，但同時也增加了成本和實驗耍求。附：高效液相色譜的優(yōu)點是：檢測的分辨率和靈敏度高，分析速度快，重復性好，定最精度 高，應用范圍廣。適用于分析高沸點、大分子、強極性、熱穩(wěn)定性差的化合物。其缺點是: 價格昂貴，要川各種填料柱，容量小，分析牛物人分子和無機離子困難，流動相消耗大且有 毒性的居多。三、總結通過上述分析發(fā)現(xiàn)，阿司匹林原料藥與其片劑的檢驗方法是不同的，比如