考研輔導(dǎo)-5教學(xué)提綱

1、精品文檔十、分光光度法考試內(nèi)容分光光度法概述、吸收定律、顯色反應(yīng)、分光光度計(jì)及測定方法考試要求1 了解分光光度法的基本原理。(1) 物質(zhì)對光的選擇性吸收光是一種電磁波，具有波粒二象性。物質(zhì)的顏色是由于物質(zhì)對不同波長的光具有選擇性吸收作用而產(chǎn)生的。當(dāng)一束光照射到某物質(zhì)或某溶液上時(shí)，只有入射光中光子的能量h 與被照射物質(zhì)粒子的基態(tài)和激發(fā)態(tài)之間的能級差E 相等的那部分波長的光， 才會被物質(zhì)或其溶液所吸收。不同的物質(zhì)微粒由于結(jié)構(gòu)不同而具有不同的量子化能級，其能級差也各不相同，因此物質(zhì)對光的吸收具有選擇性。單一波長的光稱為單色光，單色光只是一種理想的單色，絕對的單色光難以獲得，各種單色光之間也無嚴(yán)格的界

2、限。白光可以色散成單色光， 各種單色光也可以混合成白色， 而且兩種適當(dāng)顏色的單色光按一定強(qiáng)度比例混合也可得到白光，這兩種顏色的光稱為互補(bǔ)色光，圖中處于直線關(guān)系的兩種單色光均為互補(bǔ)色光。如果溶液對各種波長的光呈選擇性吸收，則溶液呈現(xiàn)透過光的顏色，亦即呈現(xiàn)被吸收光的互補(bǔ)色光的顏色。(2) 光吸收曲線將各種波長的單色光依次通過一定濃度的某一溶液，測定該溶液對各種單色光的吸收程度，以波長為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)作圖，可以得到一條曲線，該曲線稱為吸收光譜或光吸收曲線。光吸收程度最大處的波長叫最大吸收波長，用max 表示。對于光吸收曲線有以下規(guī)律：物質(zhì)的吸收曲線是一種特征曲線，不同物質(zhì)的吸收曲線的形狀不同

3、，max 也不同，這是分光光度法進(jìn)行定性分析的依據(jù)。相同物質(zhì)，不同濃度的溶液，其光吸收曲線的形狀不變，max 也不變，這是分光光度法進(jìn)行定量分析的依據(jù)。在最大吸收波長附近，測量的吸光度靈敏度最高，這一特征可作為定量分析選擇入射光波長的依據(jù)。2 掌握朗伯 - 比耳定律的原理、應(yīng)用及摩爾吸光系數(shù)，了解引起偏離朗伯-比耳定律的因素。(1)Lambert-Beer定律：當(dāng)一束平行單色光通過均勻無散射的真溶液時(shí)，溶液的吸光度與吸光物質(zhì)的濃度、液層厚度的乘積成正比。其數(shù)學(xué)表達(dá)式是精品文檔精品文檔A=abc式中： A 為吸光度； a 為吸光系數(shù) ( Lg 1 cm 1 )；b 為液層厚度 (cm) ； c

4、為吸光物質(zhì)的濃度 ( g L 1 )當(dāng)濃度用 mol L 1 表示時(shí)，則用摩爾吸光系數(shù)()表示，其單位是L mol 1 cm 1 。此時(shí) Lambert-Beer定律可表示為A= bc摩爾吸光系數(shù)在數(shù)值上等于濃度為1 molL 1 、液層厚度為1cm 溶液的吸光度。是吸光物質(zhì)在特定波長下的特征常數(shù)，它與入射光波長、溶液的性質(zhì)以及溫度等因素有關(guān)，而與溶液的濃度和液層厚度無關(guān)，故常用來衡量吸光物質(zhì)對光吸收的靈敏程度。(2) 透光度 T 指透過光的強(qiáng)度It 與入射光的強(qiáng)度I0 之比： T=I t/I 0(3)A=-lgT(4)Lambert-Beer定律的使用條件：入射光是單色光；待測溶液是真溶液；

5、物質(zhì)對光只產(chǎn)生吸收，不能發(fā)生散射、反射及光化學(xué)反應(yīng)。(5) 引起偏離 Lambert-Beer 定律的原因： Lambert-Beer 定律所描述的吸光度與待測物質(zhì)的濃度之間的關(guān)系應(yīng)該是一條通過坐標(biāo)原點(diǎn)的直線。但實(shí)際工作中，特別是濃度較高時(shí)，常出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線偏離線性的現(xiàn)象，這種現(xiàn)象稱為偏離Lambert-Beer定律。偏離 Lambert-Beer 定律的原因很多， 主要原因是儀器提供的單色光不純， 另外還有溶液本身的物理和化學(xué)因素所引起的，包括介質(zhì)不均勻，待測溶液濃度過高，溶質(zhì)的締合、解離、互變異構(gòu)及分解等。3 掌握顯色反應(yīng)的特點(diǎn)和顯色條件的選擇。在分光光度分析中， 將待測組份轉(zhuǎn)變?yōu)橛猩衔?/p>

6、的反應(yīng)稱為顯色反應(yīng)，與待測組分形成有色化合物的試劑稱為顯色劑。顯色反應(yīng)應(yīng)該符合以下要求：定量進(jìn)行；選擇性高；生成的有色物質(zhì)有一定的穩(wěn)定性；反應(yīng)的靈敏度高。顯色反應(yīng)能否完全滿足分光光度法的要求， 除了與顯色劑的性質(zhì)有主要關(guān)系外， 還與顯色反應(yīng)的條件有關(guān)， 包括顯色劑的用量、溶液的酸度、顯色反應(yīng)的時(shí)間和溫度。如果顯色反應(yīng)的條件選擇不當(dāng)，將會影響分析結(jié)果的準(zhǔn)確度。4 掌握分光光度法的應(yīng)用和測量條件的選擇。(1) 測量條件的選擇為了使測定結(jié)果有較高的靈敏度和準(zhǔn)確度，必須選擇合適的測量條件：入射光波長的選擇：選擇原則“吸收最大，干擾最小”；方法“繪制吸收曲線” 。吸光度范圍的選擇：通過調(diào)節(jié)溶液的濃度和比

7、色皿厚度，使測定的吸光度值在0.2 0.8 ，測定結(jié)果的相對誤差才小于4 ，才能滿足一般的測定要求，當(dāng)吸光度等于0.434 時(shí)測定結(jié)果的相對誤差最小。（T=1 ）參比溶液的選擇： 基于吸光度具有加和性， 可用適當(dāng)?shù)膮⒈热芤合蓴_。 其具體做法是， 使用參比溶液調(diào)節(jié)儀器的零點(diǎn)，消除由于溶劑、試劑及比色皿壁等對入射光的吸收和反射所造成的誤差。精品文檔精品文檔A. 如果樣品溶液、試劑、顯色劑均為無色時(shí)，可用配制溶液的溶劑（一般為蒸餾水或去離子水）作為參比溶液，稱為“溶劑空白”。B.如果樣品溶液中其他離子有色，而試劑、顯色劑無色時(shí)，應(yīng)采用不加顯色劑的樣品溶液作參比溶液，稱為“樣品空白”。C.如果樣品

8、溶液無色，而顯色劑和試劑有顏色時(shí)，以不加樣品的試劑及顯色劑的溶液作為參比溶液，稱為“試劑空白”。(2) 分光光度法的應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)曲線法實(shí)際操作中往往先配制一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，按一定條件顯色后，固定入射光波長和比色皿厚度。分別測出它們的吸光度A 值。以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度c 為橫坐標(biāo)，吸光度A 為縱坐標(biāo)，繪制A 與 C 的關(guān)系曲線，稱為標(biāo)準(zhǔn)曲線（又稱校準(zhǔn)曲線）。當(dāng)溶液對光的吸收符合朗伯一比耳定律時(shí)，此曲線為通過原點(diǎn)的一條直線。再將待測液在相同的條件下顯色，同樣的條件下測出其吸光度 A 值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上即可查出待測溶液的濃度。標(biāo)準(zhǔn)比較法：對單一組分進(jìn)行定量分析將濃度相近的標(biāo)準(zhǔn)溶液 cs 和未知溶液 c

9、x 在相同的條件下顯色、定容，然后在相同的測定條件下分別測定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度 A s 和未知溶液的吸光度 A x，Axbc xcx，由 cxAxcs 可求得待測物含量。AsbcscsAs示差法：對高含量組分進(jìn)行測定可見分光光度法一般只適用于低含量組分的測定。當(dāng)用于高含量組分的測定時(shí)，其吸光度超出了準(zhǔn)確測量的讀數(shù)范圍，因此會引起很大的誤差。若采用示差分光光度法則可以彌補(bǔ)這一不足。示差法與普通分光光度法的主要區(qū)別在于參比溶液的不同。普通分光光度法常用試劑空白作參比溶液，而示差法則是用比待測試液濃度稍低的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液。設(shè)參比標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為CS,待測試液的濃度為CX ,且 CS CX。根據(jù)朗伯

10、 - 比耳定律，用普通分光光度法分別單獨(dú)測定時(shí)有A SbcS , A XbcX兩式相減得AAA XA Sb(cxcs )b c當(dāng)用示差法測定時(shí)，由于使用已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液作參比溶液，并以此調(diào)零（吸光度為0 或透光率為100 ），所以儀器此時(shí)測得的吸光度A 實(shí)際上是試液與參比溶液的吸光度之差A(yù) 。由于A 與兩溶液的濃度差c 成正比，c cx cs , 所以試液濃度 CX 可以求出。這就是示差分光光度法的基本原理。多組分物質(zhì)的定量分析和配合物組成的測定。精品文檔精品文檔(b) 根據(jù)朗伯 - 比耳定律和吸光度具有加和性原理，在12XY和AXY 。并列出和 處分別測出混合組分的總吸光度 A12二元一次

11、方程組：A X1YA X1A Y1X1 bcXY1 bcYA X YA X2A Y 2X2 bc XY2 bc Y式中X 、Y1、 X2 、 Y2 可由已知濃度的X 和 Y 的標(biāo)準(zhǔn)溶液在 1 和2 處分別求得。解方程組即可求出混和組分中X 和 Y1的濃度 CX 和 CY。10-4 有一濃度為 1.0g mL 1的 Fe2+ 溶液，以鄰二氮菲顯色后， 用分光光度計(jì)測定， 比色皿厚度為2.0cm ，在波長 510nm處測得 A=0.38，計(jì)算該顯色反應(yīng)的吸光系數(shù)a 和摩爾吸光系數(shù)，其測定的靈敏度如何。解： (1) aA2.0cm0.383gL11.9 102 L g 1cm 1bc1.010(2)

12、A0.38311.1 104 L mol 1cm 1bc1.0 10 g L2.0cm155.85g mol由于 1.01045.010 4 ，測定的靈敏度為中等靈敏度。一般認(rèn)為， 10 4 屬低靈敏度， 10 4 5.0 ×10 4 屬中等靈敏度， 5.0 ×10 4 屬高靈敏度。在實(shí)際分析中，為了提高靈敏度常選擇值較大的有色化合物為待測物質(zhì)。17 兩份透光率分別為36.0 和 48.0 的同一物質(zhì)的溶液等體積混合后，混合溶液的透光率是多少？解：混合前兩溶液的吸光度分別是A 1 =-lgT 1 =-lg0.36=0.444A 2 =-lgT 2 =-lg0.48=0.31

13、9等體積混合后，根據(jù)吸光度的加和性，則A1A20.4440.3190.382A混= 2222精品文檔精品文檔T=10 -A =10 -0.382 =0.415=41.518. 取某含鐵試液 2.00mL 于 100mL 容量瓶中，加蒸餾水定容。從中吸取2.00mL 溶液經(jīng)顯色后定容至 50mL 。用 1.00cm比色皿測得該溶液的透光率為39.8 ，求該含鐵試液中鐵的含量（以gL 1 計(jì)） 已知：顯色配合物的摩爾吸光系數(shù)為1.10104 L mol 1 cm 1 ， M (Fe)55.85 g mol 1 解： A=-lgT=-lg0.398=0.400cA0.43.6410 5 mol L

14、1b 1.10 104 Lmol 1 cm 11.00cm3.64 10 5 mol L 15010 3 L 100mL55.85g mol 12mL2.54g L12.00 10 3 L19. 測土壤中全磷時(shí)，進(jìn)行下列實(shí)驗(yàn)：(1) 稱取 1.00g 土壤，經(jīng)硝化處理后定容為100mL 。然后吸取該液10.00mL ，在 50mL 容量瓶中顯色定容。(2) 標(biāo)準(zhǔn)磷的濃度為 10.0mg L 1 ，吸取 4.00mL 此標(biāo)準(zhǔn)溶液于 50mL 容量瓶中顯色定容。(3) 測得標(biāo)準(zhǔn)液的吸光度為 0.125 ，土壤試液的吸光度為 0.250 ，求土壤中磷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。解： c10.0mg L 14.00m

15、L0.800mg L 1s50mLAxcxAscscxcsAx0.800mgL 10.2501.60mg L 1As0.1251.60mg L 150mL100mLx1.00g10mL0.080021. 采用分光光度法可以測定小麥植株中可溶性糖，具體操作如下： 準(zhǔn)確稱取粉碎過篩的干樣品0.2000g置于 10mL 離心試管中，加入80 的乙醇 8.00mL ，充分?jǐn)嚢?。?0 水浴中浸提 30min，離心分離出上層清液，轉(zhuǎn)移到25.0mL 的容量瓶中，剩余物再用 80 乙醇浸潤，離心，將上層清液轉(zhuǎn)入容量瓶，最后用80 的乙醇定容。取2.00mL 提取液置于試管中，在 80 水浴中蒸干（蒸去乙醇

16、） ，再準(zhǔn)確加入 10.00mL水，振蕩使糖完全溶解在水中。取此液2.00mL于另一試管中，加入 5.00mL蒽酮的濃硫酸溶液，搖勻后置于沸水浴中顯色10min 。冷卻后用 1.00cm 的比色皿在 620nm 處測得吸光度為0.347 。若標(biāo)準(zhǔn)樣品的吸光系數(shù)為20.8 Lg 1cm 1 ，求可溶性糖的含量。精品文檔精品文檔解： cA0.3470.0167g L 1ab20.8L g 1cm 1 1.00cm0.0167gL 1 (2.005.00)mL10.00mL25.0mL2.00mL2.00mL0.2000g3.6510 9 稱取 0.1320g 分析純 (NH 4 )2 SO4，溶解

17、后定容至1L ，取 10.00mL該溶液，定容至 50.00mL ，測得其吸光度為0.350 ，另取試樣0.1000g ，經(jīng)處理后定容至100.0mL ，取 1.00mL 樣品溶液，顯色后定容至50.00mL ，在同一條件下測得吸光度為 0.382，求樣品中 NH 4 和 N 的質(zhì)量分?jǐn)?shù)。M ( NH 4)2SO4132.0g mol 1, M (N ) 14.01g mol1,M (NH4)18.04gmol 1解： c0.1320g10.00mL0.0264gL 1， cxcsAx0.0264g L 10.3820.0288 gL 1s1L50.00mLAs0.3500.0288g L 1

18、 218.04g mol 150mL100mL( NH4 )132.0 g mol 11mL39.40.1000g( N ) 39.4 14.01g mol 18.04g mol1130.6十一、電勢分析法考試內(nèi)容電勢分析法基本原理、離子選擇性電極考試要求1 了解電勢分析法的基本原理。電勢分析法是電化學(xué)中的一個重要分支，它是利用電極電勢和活（濃）度之間的關(guān)系來確定溶液中待測組分含量的分析方法。電勢分析法通常分直接電勢法和電勢滴定法。在電勢分析法中需要將指示電極與參比電極及試液一起組成工作電池，可用電池符號表示： (-)M|M n+ (試液 )參比電極 (+)2 理解參比電極和指示電極的含義。參

19、比電極是測量電池電動勢及計(jì)算電極電勢的基準(zhǔn)，因此要求它的電極電勢不受溶液組成或電流方向變化的影響，而且在測定過程中保持恒定，常用的參比電極有甘汞電極、銀- 氯化銀電極等；指示電極的電極電勢隨待測離子活度或濃度變化而改變， 并能反映待測離子的活度或濃度，理想的指示電極應(yīng)該能夠快速、穩(wěn)定地響應(yīng)待測離子，應(yīng)用比較廣泛的是離子選擇性電極。3 了解離子選擇性電極的測定方法。離子選擇性電極之所以能應(yīng)用于測定有關(guān)離子的活度，是因?yàn)槠淠る妱菖c待測離子活度之間的關(guān)系符合能斯特方程式，mK0.0592V lg a(M n ) (25 )，式中“ + ”表示響應(yīng)的是陽離子， “- ”則為陰離子。n將指示電極 (離子

20、選擇性電極 )與參比電極 (常用甘汞電極 )，共同浸入待測試液中構(gòu)成工作電池，測量該電池的電動勢，然后求得有關(guān)離子的活度 (或濃度 )，具體的測量方法有標(biāo)準(zhǔn)曲線法、標(biāo)準(zhǔn)加入法和直接比較法等。(1)pH的測定精品文檔精品文檔常用玻璃電極作為指示電極（極），甘汞電極作參比電極（+ 極），組成工作電池。所以電池公式為：甘汞玻璃K '( K0.059lg aH )K ' ( K0.059pH )K" 0.059pH式中 K”是常數(shù)，但其值未知，因此在實(shí)際測定待測溶液的pH 時(shí)，不可能從測量此時(shí)電動勢直接計(jì)算出pH, 而是用已知 pH 的標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液為基準(zhǔn)，比較由標(biāo)準(zhǔn)溶液參與組

21、成的工作電池的電動勢進(jìn)行校正求出。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)溶液s 的 pH 為 pH s，試樣溶液為pH x，兩溶液組成工作電池的電動勢分別是s 和x，則有：sK "s0.059pH s即xK "x0.059pH x如測量條件完全一致，K "s 與 K "x 相等，兩式相減，可得pH xpH sxs0.059上式中 pHs已知，測量出和的值即可得出 pH 。sxxpH 玻璃電極在使用前，必須在純水中浸泡24 小時(shí)，目的是使玻璃膜水化，產(chǎn)生膜電勢，降低不對稱電勢并使其穩(wěn)定；在測定未知溶液pH 前，必須用標(biāo)準(zhǔn)pH 緩沖溶液做定位操作，目的是消除不對稱電勢對測定的影響。(2)

22、直接電勢法測定離子濃度0.059電池電動勢與待測離子的活度符合奈斯特方程=K ±lga i ,實(shí)際測定要求得到待測離子的濃度，若在溶液中加入z總離子強(qiáng)度調(diào)節(jié)緩沖劑（ TISAB ），離子強(qiáng)度相同，則上式可改寫為 =K' ±0.059lg c i , TISAB 一般由濃度較大的z惰性強(qiáng)電解質(zhì)、適宜的配位劑及pH 緩沖溶液組成。它能維持試液和標(biāo)準(zhǔn)溶液恒定的離子強(qiáng)度，消除干擾離子并維持pH 在適宜范圍。標(biāo)準(zhǔn)曲線法：配制一系列已知準(zhǔn)確濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別加入 TISAB 后，測定相應(yīng)的電動勢，繪制 s -lg ci 標(biāo)準(zhǔn)曲線。在相同的實(shí)驗(yàn)條件下測定待測液的電動勢 x ，從

23、標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出 x對應(yīng)的 lg c x ,從而求得待測液中離子的含量。直接比較法：配制一濃度為c s 的標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入 TISAB ，測得其電動勢為 s,在同一條件下測得濃度為c x 的待測液的電動勢為x。0.059lg c xs=K ±0.059設(shè)x=K ±lg c szz精品文檔精品文檔( x0.059s ) /z則 c x = c s10標(biāo)準(zhǔn)加入法：先測體積為Vx ，濃度為 c x 的待測溶液的電動勢 x；再加入標(biāo)準(zhǔn)溶液，使被測溶液濃度增大c s,測電動勢為x+s 。由于兩溶液的離子強(qiáng)度相近，則0.059x=K +lg c xzx+s =K +0.059 lg( c

24、x + c s)z兩式相減，x+s x=0.059lg( c x +0.0590.059cxcszc s) lg c x=lgzzc x令=x+s x則：100.059 / z =c xcs =1+cscxc xcs= 100.059 / z 1c x = c s( 10 0.059 / z 1) 1cx同理，若電池公式為 =K' 0.059zlg c， 則： c x = c s ( 100 .059 / z 1) -1但此時(shí)0，所以，不管何種情況：c x = c s( 10 0.059 / z 1) -15影響電勢法測定離子濃度的準(zhǔn)確度的主要因素有：溫度、電動勢測量、干擾離子、溶液pH 、電極響應(yīng)時(shí)間。6離子選擇性電極有哪些類型？pH 玻璃電極屬哪一類？離子選擇性電極分原電極和敏化電極兩大類，其中原電極又分為晶體膜電極和非晶體膜電極兩類；敏化電極可分為酶電極、氣敏電極和