2.2動物細胞融合與單克隆抗體的制備

1、 動物細胞融合與單克隆抗體 教案鄆城一中 楊雪瑞教學目標：舉例說出動物細胞融合與單克隆抗體的原理和應用。教學重點：單克隆抗體的制備和應用。教學難點：單克隆抗體的制備過程。教法：讀書指導法、比較歸納法、反饋校正法學法：自學讀書法、討論法、題組練習法教學過程：一、復習舊知識 導入新課今天我們學習動物細胞融合與單克隆抗體，我們現(xiàn)對相關的舊知識進行復習，同學們做一下學案上的復習題（1、抗體是由 細胞接受抗原刺激增殖分化產(chǎn)生的 細胞分泌的，具有 性，即一種抗體只能識別中和一種抗原。 2、常用誘導植物細胞融合的方法有物理方法和化學方法，物理方法包括 、振蕩、 等，化學方法一般是用 (簡稱 )作為誘導劑來誘

2、細胞融合。3、寫出植物體細胞雜交技術的流程圖）。（兩名學生板演復習題答案）我們看一下黑板上兩位同學的答案是否正確。同學們可以與課件上的正確答案對比一下（改正）。在各個過程中，從去壁到形成雜種細胞形成應用的是植物體細胞融合技術，復習了植物體細胞的融合后，我們再來看一下動物細胞的融合過程。二、講授新知識（一）、動物細胞融合：（課件顯示動物體細胞融合的過程）大家認真觀察這幅示意圖，與植物體細胞的雜交過程做一下比較?？匆幌聝烧叩脑?、過程和誘導方法是否相同。（約一分鐘后）（單獨提問）植物細胞融合的原理是什么？（膜具有流動性）與動物細胞融合的原理相同嗎？（相同）那動物細胞融合與植物細胞融合的過程和誘導方

3、法也相同嗎？有沒有不同點，（動物細胞融合和植物體細胞雜交的技術方法基本相同，但植物細胞雜交時需要先去細胞壁，不能用滅活的病毒作誘導劑，而動物細胞融合過程不需要去細胞壁，還可以用滅活的病毒作誘導劑。）能不能用未滅活的病毒作誘導劑？（不能）為什么？魏春英（因為不滅活的細胞會感染動物細胞，對其帶來損傷）通過舊知識的比較，我們很容易的理解了動物細胞融合，這樣我們就完成了本節(jié)課的第一個學習目標：理解動物細胞融合的原理和過程。（課件顯示教學目標）動物細胞融合技術已經(jīng)廣泛應用于細胞遺傳、細胞免疫、腫瘤和生物新品種培育等領域，但它最重要的應用就是制備單克隆抗體。下面我們要完成第二個學習目標（課件顯示）：舉例說

4、出單克隆抗體的制備和應用。（二）、請單克隆抗體：同學們在閱讀課本52頁的最后一自然段弄清兩個問題：1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么？2、B淋巴細胞有什么特點？（課件顯示問題）這兩個問題的答案在教材上找到了嗎？（單獨提問）（1、傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法是向動物體內(nèi)反復注射某種抗原，使動物產(chǎn)生抗體，然后從動物血清中分離所需抗體。這種生產(chǎn)抗體的方法產(chǎn)量和純度都很低，而且制備的抗體特異性差）同學們背下來了嗎？（沒有）如果考試時卷面上出現(xiàn)了這個問題，你寫出的答案能像教材上描述的一樣準確嗎？（不能）那我們現(xiàn)在就把教材上的敘述記下來吧！（12分鐘后）現(xiàn)在我們來檢測一下同學們是否記住了，同學們看課件上的填空，我們

5、一起來答（課件顯示本問題的填空）第二個思考題（單獨提問）（2、B淋巴細胞能產(chǎn)生抗體，但每一個B淋巴細胞只能分泌一種特異的抗體。）很好，正是由于B淋巴細胞的這個特點，所以要想獲得大量的單一抗體，必須用單個B淋巴細胞進行無性繁殖，也就是通過克隆形成細胞群，這些細胞是由同一個細胞無性繁殖得到的，有可能產(chǎn)生出化學性質(zhì)單一、特異性強的抗體，這就是單克隆抗體在體外培養(yǎng)的條件下，B淋巴細胞能無限增值嗎？（不能）那怎樣才能得到由單個B淋巴細胞無限增殖的得到的細胞群呢？（學生可能答不出來，可能答出一小部分）這就應用到動物細胞融合的知識，我們來看一下科學家米爾斯坦和柯勒是怎樣做的。大家結合課件所演示的問題（課件顯

6、示1.兩位科學家極富創(chuàng)造性的設想是什么？2.單克隆抗體制備的基本過程如何？） Xxx來回答第一個思考題（1.如果把一種B淋巴細胞與能在體外大量增殖的骨髓瘤細胞進行融合，所得的融合細胞既能大量增殖，又能產(chǎn)生足夠量的特定抗體。） 正是科學家先有了這個極富創(chuàng)造性的設想，然后經(jīng)過努力把它變成了現(xiàn)實。那么科學家是怎樣獲得的B淋巴細胞（對小鼠注射抗原，使其發(fā)生免疫反應，再從其體內(nèi)獲得B淋巴細胞.）如果把B淋巴細胞和骨髓瘤細胞放在一起，又有幾種融合方式？只考慮兩個細胞間的融合。（有B淋巴細胞間的融合，骨髓瘤細胞之間的融合以及。）這三種融合方式形成的雜交細胞中哪一種是我們所需要的？（B淋巴細胞和骨髓瘤細胞融合

7、形成的雜交細胞）我們把這種細胞叫做雜交瘤細胞。那么,雜交瘤細胞篩選出來？(先用選擇性培養(yǎng)基，只有雜交瘤細胞能在選擇培養(yǎng)基上生存)篩選出的雜交瘤細胞一定能產(chǎn)生抗體嗎？（不一定）這就需要我們檢測一下那個細胞能產(chǎn)生特異性抗體，并通過再一次的篩選把能產(chǎn)生單克隆抗體的細胞選出來。然后就可以對這種雜交瘤細胞進行克隆化培養(yǎng)了。)（單獨提問）科學家是如何利用雜交瘤細胞來生產(chǎn)抗體的？(第一種方法是：將雜交瘤細胞在體外大規(guī)模培養(yǎng)，從細胞培養(yǎng)夜中就能獲取大量的單克隆抗體；第二種方法是：把雜交瘤細胞注射到小鼠腹腔內(nèi)增殖，再從小鼠腹腔中提取單克隆抗體)完全正確，正是由于這兩位科學家的杰出貢獻，他們于1984年雙雙獲得諾

8、貝爾生理學或醫(yī)學獎。如果我們把單克隆抗體的制備與動物細胞融合過程比較一下可以發(fā)現(xiàn)，單克隆抗體的制備就是一種特殊動物細胞融合，區(qū)別就是進行融合的細胞之一，B淋巴細胞必須經(jīng)過抗原的處理，實際上，是漿細胞與骨髓瘤細胞的融合）下面，同學們合上教材試著在學案相應位置寫一下單克隆抗體的制備過程。（學生填寫學案，教師巡視檢查）下面，同學們看一下這幾位同學填寫的是否正確（實物投影幾位學生的學案）接下來，我們把這節(jié)課涉及到的幾個類似的生物技術列表比較一下。（課件顯示表格）（30秒后，兩名學生回答表格內(nèi)容）最后通過課件上的幾個問題總結一下單克隆抗體的制備這一重點內(nèi)容。（課件顯示幾道相關習題） 關于單克隆抗體的應用

9、，請大家閱讀教材5455頁，并填寫相應的學案。Xxx來說一下學案的答案。三、課堂小結 學習方法指導本節(jié)課我們在復習植物細胞融合的基礎上，通過比較很快就掌握了動物細胞的融合，又通過與動物細胞融合相比較使單克隆抗體的制備之一難點變得容易理解。也就是說，我們在學習是注意新舊知識的連接，注意比較歸納，就會有事半功倍的效果，希望同學們在平時自習時，也能用到這種學習方法。四、課堂定時訓練下面我們做一下學案上的題組聯(lián)系，鞏固一下本節(jié)內(nèi)容。（學生完成后核對答案，對個別問題做簡單講解）五、布置課后作業(yè)學案： 動物細胞融合與單克隆抗體 學案一、相關知識復習：1、抗體是由 細胞接受抗原刺激增殖分化產(chǎn)生的 細胞分泌的

10、，具有 性，即一種抗體只能識別中和一種抗原。 2、常用誘導植物細胞融合的方法有物理方法和化學方法，物理方法包括 、振蕩、 等，化學方法一般是用 (簡稱 )作為誘導劑來誘細胞融合。3、寫出植物體細胞雜交技術的流程圖。 二、知識點整理：、動物細胞融合1、概念：動物細胞融合也稱細胞雜交，是指兩個或多個動物細胞融合形成一個細胞的過程。2、結果：融合后的雜交細胞是具有原來兩個或多個細胞遺傳物質(zhì)的單核細胞。3、原理：膜的流動性。、單克隆抗體1、 閱讀教材52頁53頁一段，并思考：、第一個問題傳統(tǒng)的抗體生產(chǎn)方法及缺陷是什么？、B淋巴細胞有什么特點？2、單克隆抗體的制備給小鼠注射 從 中分離B淋巴細胞骨髓瘤細

11、胞滅活病毒誘導融合種細胞團選擇培養(yǎng)基瘤細胞克隆檢測雜交瘤細胞注入培養(yǎng)培養(yǎng)單克隆抗體培養(yǎng)3、單克隆抗體的應用、單克隆抗體的優(yōu)點： 強、 高、產(chǎn)量大。、應用:、作為診斷試劑：準確識別各種 物質(zhì)，并跟一定 發(fā)生 結合，具有 、 、 、 的優(yōu)點。 、用于治療疾病和運載藥物：主要用于治療 ,有單獨使用的，也有與 、 、 結合制成“生物導彈”。 三、題組練習：A組：必做1、動物細胞融合和植物體細胞雜交的比較中，正確的是 （ ）誘導融合的方法完全相同 所用的技術手段不相同 所采用的原理完全相同 都能形成雜種細胞A. B. C.D.2、動物細胞融合的目的中最重要的是 ( ) 3、單克隆抗體是由下列哪種細胞產(chǎn)生

12、的 （ ）A.B淋巴細胞 B.T淋巴細胞 C.骨髓瘤細胞 D.雜交瘤細胞4、關于單克隆抗體的說法，正確的是 （ ）免疫過的淋巴細胞產(chǎn)生新的抗體 單克隆抗體制備的過程中至少經(jīng)過兩次篩選 單一的抗原進入動物體內(nèi)后，從動物體內(nèi)提取的抗體化學性質(zhì)單一，特異性強，靈敏度高，可用于防病、治病等。A、 B、 C、 D、5、診斷和治療以及生命科學研究中具有廣泛的應用。下列關于單克隆抗體的敘述，錯誤的是 （ ） A特異性強、靈敏度高 B與抗癌藥物結合可制成“生物導彈” C體外培養(yǎng)B淋巴細胞可大量分泌單克隆抗體D由效應B細胞與骨髓瘤細胞融合而成的雜交瘤細胞分泌B組：選做6、單克隆抗體制備過程中，骨髓瘤細胞和B淋巴細胞誘導融合后，要用特定培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細胞。在這種培養(yǎng)基上不能存活、增殖的細胞是（ ）B淋巴細胞 小鼠骨髓瘤細胞 雜交瘤細胞B淋巴細胞自身融合細