常用固定液的配制

1、常用固定液的配制1. 福爾馬林-醋酸-酒精固定液（FAA）50%或 70%酒精90ml + 冰醋酸 5ml + 福爾馬林（37%40%甲醛 ）5ml可用作固定植物的一般組織,但不適用于單細(xì)胞及絲狀藻類,也不適宜作細(xì)胞學(xué)研究。幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精，可防止材料收縮。若材料堅(jiān)硬，可略減冰醋酸，略增福爾馬林。若材料易收縮，可稍增加冰醋酸。久置時(shí)另加入5ml 甘油以防蒸發(fā)和材料變硬。此液又可作保存液。固定時(shí)間最多10h。如果用在植物胚胎的材料上，改用下面的配方，效果較好：50%酒精89ml + 冰醋酸 6ml + 福爾馬林5ml2. 福爾馬林-丙酸-酒精固定液（FPA）福爾馬林5ml +

2、丙酸 5ml + 70% 酒精 90ml固定一般的植物組織，通常固定824h,可長(zhǎng)久保存。3. 酒精-醋酸-氯仿固定液（卡諾固定液，Carnoy fixative ）配方I :純酒精3份+乙酸1份配方II :純酒精 6份+乙酸1份+氯仿3份配方出：甲醇6份+乙酸1份+氯仿3份適用于植物組織和細(xì)胞學(xué)材料，為研究細(xì)胞分裂和染色體的優(yōu)良固定液。固定時(shí)間不宜過(guò)久。4. 酒精-福爾馬林固定液福爾馬林26（ 610） ml + 70% 酒精 100ml固定植物一般組織，尤其適用于萌發(fā)的花粉管的固定。通常固定24h,亦可長(zhǎng)久保存。5. 酒精-福爾馬林-甘油固定液95%酒精 150ml + 5% 福爾馬林10

3、0ml + 甘油 50ml此液也可長(zhǎng)期儲(chǔ)存材料。6. 鉻酸-醋酸固定液根據(jù)固定對(duì)象的不同，可分為強(qiáng)、中、弱3 種配方：（1）弱液配方：10%鉻酸2.5ml + 10% 醋酸 5ml +蒸餾水 92.5ml（2）中液配方：10%鉻酸7ml + 10% 醋酸10ml +蒸餾水 83ml（ 3）強(qiáng)液配方：10%鉻酸 10ml + 10%醋酸 30ml + 蒸餾水 60ml弱液配方用在固定較柔軟的材料，如藻類、苔蘚和蕨類的原葉體等。固定時(shí)間較短，一般為數(shù)小時(shí)，最長(zhǎng)可固定 1224h,但藻類和蕨類的原葉體可縮短到幾分鐘至1h。中液配方用于固定根尖、莖尖、未成熟子房和胚珠等。為了易于滲透，可在此液中加入2

4、%的麥芽糖或尿素。固定時(shí)間1224h。強(qiáng)液配方用于固定木質(zhì)根、莖、成熟子房等。為了易于滲透，可在此液中加入2%的麥芽糖或尿素。固定時(shí)間1224h或更長(zhǎng)。7. 銘酸-醋酸-福爾馬林混合液這3種藥品混合在一起所配成的各種固定液，通常稱納瓦申固定液（ Nawashin fixative）,簡(jiǎn)稱Craf。配方見(jiàn)下表：常備液納瓦申原液（ml）納瓦申固定液（ml）桑弗利斯液（ml）InmWV甲液1%銘酸40404010%需酸1581013銘酸1520206070冰醋酸108蒸儲(chǔ)水75454040322079乙液福爾馬林40101010203064蒸儲(chǔ)水60909080807036甲、乙兩液均為貯備液，使用

5、之前才將二者混合。適用于組織學(xué)和細(xì)胞學(xué)的研究材料。柔嫩而含水多的材料，可選用I或n固定，堅(jiān)韌而成熟的材料，可用高濃度的IV或V,一般材料多用出。制作染色體和有絲分裂的紡錘體標(biāo)本時(shí)，常用桑弗利斯固定液。I、n、出、w、V固定液的固定時(shí)間為1248h,桑弗利斯液固定時(shí)間為 46h。8. 銘酸-鉞酸-醋酸固定液（Flemming fixative ）強(qiáng)液：10%銘酸水溶液3.1ml + 2%鉞酸的銘酸（2%）水溶液12ml + 10%醋酸水溶液30ml +蒸儲(chǔ)水11.9ml中液：10%需酸水溶液 0.33ml + 2%鉞酸的銘酸（2%）水溶液0.62ml + 10%醋酸水溶液3ml +蒸儲(chǔ)水6.27

6、ml弱液：10%銘酸水溶液1.5ml + 2%鉞酸的銘酸（2%）水溶液5ml + 10%醋酸水溶液1ml +蒸儲(chǔ)水96.5ml此固定液需現(xiàn)用現(xiàn)配。固定 2348h?？捎糜诟鞣N植物組織的固定。9. Lichent 固定液1%銘酸水溶液15ml +冰醋酸5ml +福爾馬林80ml此固定液適用于固定絲狀藻類和真菌1 . 番紅水溶液 番紅0.1g溶入蒸儲(chǔ)水，定溶至100ml。用前過(guò)濾。2 . 番紅乙醇溶液番紅1g溶入50% （或95%）酒精，定溶至100ml。用前過(guò)濾。3 . 固綠染液固綠 0.1g 溶入95%酒精，定溶至100ml。4 . 碘 -碘化鉀染液碘化鉀溶入100ml蒸儲(chǔ)水，再加入1g碘，溶

7、解后即可使用。5 .蘇丹出（或IV）染液將0.1g蘇丹山或IV溶解在 50ml丙酮中，再加入 70%酒精50ml o6 .改良苯酚品紅染液原液A:將3g堿性品紅溶入100ml 70%酒精，此液可長(zhǎng)期保存。原液B:將10mlA液加入到90ml 5%苯酚水溶液中。原液C:將55mlB液加入到6ml的冰醋酸和6ml的38%的甲醛中。染色液：取C液20ml,加45%冰醋酸80ml,充分混勻，再加入 1g山梨醇，放置14天后使用，可保存3 年。7 . 間苯三酚染液將 5g 間苯三酚溶入100ml 95% 酒精（若溶液呈黃色，即為失效）。8 . 中性紅染液將 0.1g 中性紅溶入100ml 蒸餾水，用時(shí)稀

8、釋10倍。9 . 釕紅染液將 510mg 釕紅溶入2550ml 蒸餾水，現(xiàn)用現(xiàn)配。10 .龍膽紫染液將 0.2g 龍膽紫溶入100ml 蒸餾水?，F(xiàn)常用結(jié)晶紫代替。必要時(shí)可將醫(yī)用紫藥水稀釋5 倍后代用。11 .鐵醋酸洋紅染液先將100ml 45% 醋酸水溶液置入200ml 的錐形瓶中煮沸，移去火苗，然后慢慢地分多次加入1g洋紅粉末（切記不可一次倒入）。待全部倒入后，再煮沸 12min ,并懸入一生銹的小鐵釘于染液中，過(guò)1min 后取出，使染色劑略含鐵質(zhì)，以增加染色性能。靜置12h 后過(guò)濾于棕色瓶中備用（置于避光處）。12 .蘇木精染液蘇木精的配方很多，常用的有如下3 種：配方I:蘇木精水溶液0.

9、5g 蘇木精溶入100ml 煮沸的蒸餾水中，靜置24h 后可使用。配方 n :代氏蘇木精（ Delafield ' s haematoxylin甲液：蘇木精1g + 無(wú)水酒精6ml乙液：硫酸鋁銨（銨礬）10g + 蒸餾水 100ml丙液：甘油25ml + 甲醇 25ml分別配制甲、乙兩液，將甲液一滴滴地加入乙液中，充分?jǐn)嚢韬螅湃霃V口瓶中用紗布蒙住瓶口，置于溫暖和光線充足處710 天，再加入丙液，混勻后靜置12 月，至顏色變?yōu)樯钭仙?，過(guò)濾備用，可長(zhǎng)期保存。配方出：愛(ài)氏蘇木精（ Ehrlich ' s haematoxy|in蘇木精 1g + 無(wú)水或 95%酒精 50ml +

10、蒸餾水 50ml + 甘油 50ml + 冰醋酸 5ml + 硫酸鋁鉀 （鉀磯）35g。配制時(shí)，先將蘇木精溶于酒精中，然后依次加入蒸儲(chǔ)水、甘油和冰醋酸，最后加入研細(xì)的鉀礬，邊加邊攪拌，直到瓶底出現(xiàn)鉀礬結(jié)晶為止?；旌虾笕芤侯伾实t色，放入廣口瓶中，用紗布封口，自然氧化12 月， 至顏色變?yōu)樯罴t色時(shí)即可過(guò)濾備用，可長(zhǎng)期保存。13 .席夫試劑（Schiff s reg） ent將 0.5g 堿性品紅溶入煮沸的蒸餾水，攪拌使其充分溶解。冷卻至50時(shí)，過(guò)濾于棕色細(xì)口瓶中，加入10ml1mol/L鹽酸。冷卻至 25c左右，加入 1g偏亞硫酸鉀或鈉（Na2s2O5或K2S2O5） ，振蕩使其溶解，密封瓶口

11、，置于黑暗低溫處過(guò)夜。次日檢查，若染色液透明無(wú)色或呈淡茶色，即可使用。若染色較深，可加入少量?jī)?yōu)質(zhì)活性炭（0.52g）,振蕩1min,置于4冰箱中過(guò)夜，過(guò)濾使用。此液配好后，應(yīng)塞緊瓶塞，外包黑紙，貯藏于冰箱中。14 .硫堇染液將 0.25g 硫堇粉末，溶于100ml 蒸餾水中，即可使用。使用此液時(shí)。需用微堿性自來(lái)水封片或用 1%NaHCO3 水溶液封片，能產(chǎn)生多色反應(yīng)。15 .亞甲基藍(lán)染液0.1g 亞甲基藍(lán)溶入100ml 蒸餾水即可。16 .詹納斯綠 B （Janus green B）染液5.18g 詹納斯綠溶入100ml 蒸餾水， 配成飽和水溶液。用時(shí)需稀釋，稀釋倍數(shù)應(yīng)視材料而異。17.蘇木精

12、-曙紅（HE）染液曙紅（Eosin） ，酸性染料，為最優(yōu)良的動(dòng)物細(xì)胞染料，與蘇木精配合使用（復(fù)染）對(duì)動(dòng)物組織進(jìn)行對(duì)比染色。蘇木精的染液的配方同上。曙紅有以下配制方法：配方I:曙紅 0.5g + 95%酒精100ml配方n：曙紅0.5g +蒸儲(chǔ)水100ml配方出：曙紅0.5g + 95%酒精25ml +蒸儲(chǔ)水75ml18蛋白膠亦稱梅氏蛋白的制作將雞蛋一個(gè)打破讓蛋清流入燒杯內(nèi)，用筷子充分條大雪花狀泡沫，然后將它用雙層紗布過(guò)濾到量筒中，經(jīng)數(shù)小時(shí)或一夜，過(guò)濾出透明的蛋白液，此時(shí)再加入等量的甘油，稍稍振搖使兩者混合，最后加入麝香草酚（thymol ） （ 1:100）做防腐作用，可保存幾個(gè)月到一年（4冰箱中） 。載玻片和蓋玻片的清洗方