選修現(xiàn)代生物科技專題PPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1第1頁(yè)/共54頁(yè)11、1.2DNA重組技術(shù)的基本重組技術(shù)的基本工具基因工程的基本操作程序工具基因工程的基本操作程序第2頁(yè)/共54頁(yè)第3頁(yè)/共54頁(yè)第4頁(yè)/共54頁(yè)第5頁(yè)/共54頁(yè)第6頁(yè)/共54頁(yè)DNA連接酶DNA聚合酶作用實(shí)質(zhì)都是催化兩個(gè)脫氧核苷酸之間形成磷酸二酯鍵是否需模板不需要需要連接DNA鏈雙鏈單鏈第7頁(yè)/共54頁(yè)DNA連接酶DNA聚合酶作用過(guò)程在兩個(gè)DNA片段之間形成磷酸二酯鍵將單個(gè)脫氧核苷酸加到已存在的核酸片段的3端的羥基上，形成磷酸二酯鍵作用結(jié)果將存在的DNA片段連接成重組DNA分子合成新的DNA分子第8頁(yè)/共54頁(yè)第9頁(yè)/共54頁(yè)第10頁(yè)/共54頁(yè)P(yáng)CR技術(shù)DNA復(fù)制相同

2、點(diǎn)原理DNA雙鏈復(fù)制(堿基互補(bǔ)配對(duì))原料四種游離的脫氧核苷酸條件模板、ATP、酶等第11頁(yè)/共54頁(yè)P(yáng)CR技術(shù)DNA復(fù)制不同點(diǎn)解旋方式DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化場(chǎng)所體外復(fù)制主要在細(xì)胞核內(nèi)酶熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(Taq酶)細(xì)胞內(nèi)含有的DNA聚合酶結(jié)果在短時(shí)間內(nèi)形成大量的DNA片段形成整個(gè)DNA分子第12頁(yè)/共54頁(yè)第13頁(yè)/共54頁(yè)第14頁(yè)/共54頁(yè)生物種類植物細(xì)胞動(dòng)物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射技術(shù)Ca2處理法受體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過(guò)程將目的基因插入到Ti質(zhì)粒的TDNA上農(nóng)桿菌導(dǎo)入植物細(xì)胞整合到受體細(xì)胞的DNA表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純?nèi)÷?受精卵)顯微注射

3、受精卵發(fā)育獲得具有新性狀的動(dòng)物Ca2處理細(xì)胞感受態(tài)細(xì)胞重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子第15頁(yè)/共54頁(yè)第16頁(yè)/共54頁(yè)第17頁(yè)/共54頁(yè)第18頁(yè)/共54頁(yè)第19頁(yè)/共54頁(yè)第20頁(yè)/共54頁(yè)(4)X第21頁(yè)/共54頁(yè)第22頁(yè)/共54頁(yè)第23頁(yè)/共54頁(yè)_(3)目的基因插入質(zhì)粒后，不能影響質(zhì)粒的_。第24頁(yè)/共54頁(yè)第25頁(yè)/共54頁(yè)第26頁(yè)/共54頁(yè)第27頁(yè)/共54頁(yè)B限制性核酸內(nèi)切酶和限制性核酸內(nèi)切酶和DNA連接酶是兩類連接酶是兩類常用的工具酶常用的工具酶C人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島人胰島素原基因在大腸桿菌中表達(dá)的胰島素原無(wú)生物活性素原無(wú)生物活性D載體上的抗

4、性基因有利于篩選含重組載體上的抗性基因有利于篩選含重組DNA的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)的細(xì)胞和促進(jìn)目的基因的表達(dá)第28頁(yè)/共54頁(yè)目的基因和載體連接，構(gòu)成基因表達(dá)載體；第29頁(yè)/共54頁(yè)進(jìn)等調(diào)控作用。【答案】D第30頁(yè)/共54頁(yè)第31頁(yè)/共54頁(yè)過(guò)程。【答案】D第32頁(yè)/共54頁(yè)第33頁(yè)/共54頁(yè)第34頁(yè)/共54頁(yè)第35頁(yè)/共54頁(yè)第36頁(yè)/共54頁(yè)基因堿基對(duì)的替換基因堿基對(duì)的替換(基因突變基因突變)(3)3460220(4)P+P-第37頁(yè)/共54頁(yè)第38頁(yè)/共54頁(yè)第39頁(yè)/共54頁(yè)的耐鹽性。第40頁(yè)/共54頁(yè)第41頁(yè)/共54頁(yè)導(dǎo)入外源基因的細(xì)胞需要利用植物組織培養(yǎng)導(dǎo)入外源基因的細(xì)胞需要利

5、用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將其培養(yǎng)為植株，過(guò)程為：取材、去分技術(shù)將其培養(yǎng)為植株，過(guò)程為：取材、去分化化(或脫分化或脫分化)形成愈傷組織、再分化形成試形成愈傷組織、再分化形成試管苗、移栽培育成完整植物體。轉(zhuǎn)基因是否管苗、移栽培育成完整植物體。轉(zhuǎn)基因是否成功，可測(cè)定是否有轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物產(chǎn)生，也可成功，可測(cè)定是否有轉(zhuǎn)基因產(chǎn)物產(chǎn)生，也可通過(guò)改變條件觀察植物性狀的變化來(lái)加以確通過(guò)改變條件觀察植物性狀的變化來(lái)加以確定。定。第42頁(yè)/共54頁(yè)第43頁(yè)/共54頁(yè)第44頁(yè)/共54頁(yè)圖圖1轉(zhuǎn)基因操作流程圖轉(zhuǎn)基因操作流程圖第45頁(yè)/共54頁(yè)第46頁(yè)/共54頁(yè)引物對(duì)AP1AACTGAAATGTAGCTATCP2TTAAGTCCATTACTCTAG引物對(duì)BS1GTCCGACTAGTGGCTGTGS2AGCTGGCGTTTAGCCTCG第47頁(yè)/共54頁(yè)限制酶AluEcoRPstSma切割位點(diǎn)AGCTGAATTCCTGCAGCCCGGGTCGACTTAAGG