RAW264.7小鼠巨噬細(xì)胞protocol

1、RAW264.7細(xì)胞株的相關(guān)信息 ATCC: 美國(guó)模式培養(yǎng)物集存庫(kù)(American type culture collection)的簡(jiǎn)寫收到冷凍管細(xì)胞的處理方式1. 收到細(xì)胞株包裹時(shí)，請(qǐng)檢查細(xì)胞株冷凍管是否有解凍情形， 若有請(qǐng)立即通知。細(xì)胞株請(qǐng)盡速開始培養(yǎng)，或立即冷凍保存(置于70，隔夜后，移到液氮)。 2. 收到T25 flask細(xì)胞的處理方式于寄送過(guò)程中，為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡，T25 flask 均加滿培養(yǎng)基。2.1.  檢查flask 外觀，并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象，若有任何問(wèn)題，不要打開蓋子，請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。2.2.

2、60; 將原封之T25 flask 靜置于37， 5% CO2 培養(yǎng)箱中，使細(xì)胞回溫至37，并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。2.3.  隔天后，于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基，(取出之培養(yǎng)基可以再使用)，僅留約5-10ml 培養(yǎng)基于flask 內(nèi)，依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中，或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤， 則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。RAW264.7細(xì)胞株的Cell Culture一、RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)的特點(diǎn)1、RAW264.7細(xì)胞一般為圓形或橢圓形，功能活躍時(shí)，可呈多突形。細(xì)胞核為圓形或橢圓形，染色較深。貼壁特別牢固。2、RAW264.7具有很強(qiáng)的吞噬

3、能力，當(dāng)吞噬抗原后，細(xì)胞會(huì)釋放趨化因子，進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞伸出偽足，增強(qiáng)粘附攀爬能力。細(xì)胞吞噬抗原過(guò)多、培養(yǎng)環(huán)境惡劣都會(huì)促進(jìn)該細(xì)胞呈現(xiàn)梭形、長(zhǎng)梭形，鏡下會(huì)看到具有細(xì)長(zhǎng)偽足的小細(xì)胞被類似上皮的梭形大細(xì)胞取代。3、每次傳代都很難消化下來(lái)。用力過(guò)大則對(duì)細(xì)胞損傷較大，這種細(xì)胞傳代時(shí)接種密度要大，否則容易使巨噬細(xì)胞向終末細(xì)胞分化，細(xì)胞變成長(zhǎng)形，并且不能回復(fù)，這是培養(yǎng)這種細(xì)胞時(shí)最需要注意的問(wèn)題。4、對(duì)于RAW264.7細(xì)胞他的聲場(chǎng)時(shí)喜歡結(jié)伴。正常生長(zhǎng)狀態(tài)應(yīng)該是一小片一小片的生長(zhǎng)，片片之間不連接，等到長(zhǎng)到更多更密的時(shí)候會(huì)連成大片，并且會(huì)疊加成層。所以，要很好地控制好細(xì)胞的生長(zhǎng)速度，不要等到疊加成層的時(shí)候再傳代。

4、5、RAW264.7細(xì)胞傳代后貼壁時(shí)間較短，半小時(shí)就能貼很多，剛貼壁是細(xì)胞呈圓形，折光度很好，鏡下觀察如小珍珠狀一個(gè)個(gè)地散落于瓶底面。生長(zhǎng)一段時(shí)間后，部分細(xì)胞會(huì)變成類似四角形，伸出偽足之類的。這個(gè)時(shí)候就是提醒你注意傳代了，這部分細(xì)胞如再不傳代，很容易就老化掉。二、RAW264.7細(xì)胞傳代1) 將培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊的培養(yǎng)液棄掉， 然后用D-Hanks液洗兩次，(一定要洗干凈，以免影響胰酶的消化作用) 2) 加入0.25%胰酶-EDTA消化，25cm培養(yǎng)瓶加0.4ml， 37度消化5min，鏡下看到細(xì)胞變圓，間隙增大。（值得注意的是該細(xì)胞對(duì)機(jī)械損傷比較敏感）3)立即加含10%FCS的培養(yǎng)液終止消化，用細(xì)胞

5、刮刀輕刮，注意，這時(shí)候用吸管吹不下來(lái)，但是刮刀卻很容易刮下來(lái)，而且對(duì)細(xì)胞的損傷極小4)離心，棄上清，加新的培養(yǎng)液(10%FCS)，小心吹勻，分裝入新的培養(yǎng)瓶三、RAW264.7細(xì)胞凍存及復(fù)蘇（一）細(xì)胞凍存1. 配制凍存培養(yǎng)液；（通用的為培養(yǎng)基：血清：DMSO=7：2：1，但其中的血清可進(jìn)行調(diào)整，如上面的仁兄用的4：5：1，比例過(guò)高）2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞（凍存前一天換液），用胰蛋白酶把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)，懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞則直接將細(xì)胞移至15ml離心管中；3. 離心1000rpm，5min；4. 去除胰蛋白酶及舊的培養(yǎng)液，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液

6、中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml1×107/ml；5. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管11.5 ml（不超過(guò)凍存管容量的80%）；6. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作者；7. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1-2/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25以下時(shí)，可增至-5-10/min；到-100時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20冰箱2h ，然后放入-70冰箱中過(guò)夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。（具體操作為4°C 20min，-20°C30min，-70過(guò)夜，轉(zhuǎn)入液氮中）（二） 細(xì)胞復(fù)蘇1. 從液氮容器中取出凍存管，直接浸入37溫水中，并

7、不時(shí)搖動(dòng)令其盡快融化。（1min以內(nèi)溶解完畢，不能將口進(jìn)入水面下）2. 從37水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細(xì)胞懸液，加到離心管并滴加10倍以上培養(yǎng)液，混勻；3. 離心， 1000rpm，5min；4. 棄去上清液，加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，計(jì)數(shù)，調(diào)整細(xì)胞密度，接種培養(yǎng)瓶，37培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；(復(fù)蘇時(shí)細(xì)胞密度稍大，可提高復(fù)蘇效率)5. 次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)。（可更換一半培養(yǎng)液，避免跨度太大，影響細(xì)胞狀態(tài)）（三）接種四、RAW264.7細(xì)胞形態(tài)不好時(shí)的處理方法1.倒掉舊的培養(yǎng)基，加入3ml新的培養(yǎng)基（有無(wú)血清的都可）洗滌一次，用滴管吸走，然后再加入3ml的培養(yǎng)基，進(jìn)行預(yù)

8、吹打，控制吹打力度，輕輕地大概沿著瓶底過(guò)一遍，然后吸走。這時(shí)侯再開始正式的消化、吹打。 2.把吹打下來(lái)的細(xì)胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基，放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，按時(shí)間點(diǎn)觀察細(xì)胞貼壁情況。10分鐘觀察一次，20分鐘，30分鐘觀察一次。選擇一個(gè)時(shí)間點(diǎn)，已經(jīng)有部分細(xì)胞貼壁的情況下，重新置于潔凈臺(tái)，底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基，加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。3.如果一次效果還不理想，可重復(fù)多次。直到找到細(xì)胞完美形態(tài)。其中要注意，結(jié)合細(xì)胞喜歡的生長(zhǎng)情況。喜歡多一點(diǎn)數(shù)量長(zhǎng)得好的細(xì)胞就等貼壁細(xì)胞比較多點(diǎn)的時(shí)候再傳。反之亦然

9、。不明之處：培養(yǎng)之前，一切與細(xì)胞接觸的玻璃器皿和器具都要進(jìn)行過(guò)去熱源處理。（200-250烘烤4-6h）？RAW264.7細(xì)胞株Cell Culture的材料（一）儀器1. 凈化工作臺(tái)2. 離心機(jī)3. 恒溫水浴箱4. 冰箱（4、-20、-70）5. 倒置相差顯微鏡6. 培養(yǎng)箱7. 液氮冰箱（二）玻璃器皿1. 吸管（彎頭、直頭）2. 培養(yǎng)瓶3. 玻璃瓶（250ml、100ml）4. 廢液缸（三）塑料器皿1. 吸頭2. 槍頭3. 膠塞4. 移液管（10ml）5. 15ml離心管6. 凍存管（12ml）（四）其他物品1. 微量加樣槍2. 紅血球計(jì)數(shù)板3. 記號(hào)筆4. 醫(yī)用橡皮膏5. 移液槍

10、（五）試劑1. D-Hanks液2. 胎牛血清3. 培養(yǎng)液4. 雙抗（青霉素、鏈霉素）5. 胰蛋白酶（0.25%）6.7.4%NaHCO37. DMSO（分析純）或無(wú)色新鮮甘油附1. 胎牛血清品牌整理第一類，最高級(jí)別，是專門用于干細(xì)胞的特級(jí)胎牛血清1、Hyclone的特級(jí)胎牛血清目前，性能最好的血清，還是要說(shuō)說(shuō)Hyclone的特級(jí)胎牛血清，貨號(hào)是SH30070.03，它是Hyclone的“招牌菜”。Hyclone特級(jí)胎牛血清（Defined FBS），貨號(hào)SH30070，是世界上唯一經(jīng)過(guò)40納米過(guò)濾的頂級(jí)胎牛血清，極佳的促細(xì)胞生長(zhǎng)作用及產(chǎn)品穩(wěn)定性。內(nèi)毒素含量10EU/ml，血紅蛋白含量10mg

11、/dl。此血清可以廣泛用于各種細(xì)胞培養(yǎng)，包含任何干細(xì)胞系的培養(yǎng)。2、Gibco的特級(jí)胎牛血清稍次一點(diǎn)的是Gibco公司在美國(guó)原裝生產(chǎn)的特級(jí)胎牛血清，這款血清，貨號(hào)是16000-044，是100nm過(guò)濾3次，內(nèi)毒素和血紅蛋白含量都可以與Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培養(yǎng)大部分的干細(xì)胞系。同樣是美國(guó)來(lái)源，所以渠道特殊。3.TCB的特級(jí)胎牛血清TCB（Tissue Culture Biologicals）公司作為一家生物行業(yè)類的著名供應(yīng)商，成立于1978年，大部分血清的采集和加工都在加利福尼亞。每一批的原材料都經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選，所有的產(chǎn)品都在FDA認(rèn)證的cGMP車間進(jìn)行！4. B

12、ioind特優(yōu)級(jí)胎牛血清血源來(lái)自北美和澳大利亞BioInd公司的生產(chǎn)完全符合GMP的要求，并通過(guò)ISO9000:2001和ISO 13485:2003質(zhì)量認(rèn)證。以安全，穩(wěn)定，高效為原則的BioInd公司，所有的產(chǎn)品質(zhì)量均完全符合國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。Biological Industries主營(yíng)細(xì)胞培養(yǎng)類產(chǎn)品，BioInd工廠加工的胎牛血清均符合USDA標(biāo)準(zhǔn)及歐洲標(biāo)準(zhǔn)血清。根據(jù)美國(guó)農(nóng)業(yè)部標(biāo)準(zhǔn)，原始血清均采自未發(fā)生瘋牛病（BSE）和口蹄疫（FMD）疫情的國(guó)家。Biological Industries三步濾菌處理法，最后的過(guò)濾步驟為連續(xù)通過(guò)三個(gè)100納米的濾膜。血清生產(chǎn)的潔凈級(jí)別為100級(jí)。所有分裝工作臺(tái)都

13、通過(guò)高效微?？諝膺^(guò)濾器過(guò)濾，并保持正壓分裝環(huán)境要對(duì)總微粒、懸浮微粒數(shù)和壓力進(jìn)行監(jiān)控。分裝之后，終產(chǎn)品迅速-20度凍存，并隔離，直到所有的質(zhì)量控制檢測(cè)完成。第二類，優(yōu)等胎牛血清1.Hyclone的加拿大優(yōu)等胎牛血清性價(jià)比最高的是Hyclone加拿大優(yōu)等胎牛血清（CharacterizendFBS）SH30396.03 血清采自加拿大，由hyclone公司總部的員工采集加工，采集方法，加工過(guò)程，檢定標(biāo)準(zhǔn)與美國(guó)原產(chǎn)優(yōu)等胎牛血清完全一致，市場(chǎng)價(jià)格低于美國(guó)原產(chǎn)的。經(jīng)過(guò)3次100nm過(guò)濾，內(nèi)毒素含量25EU/ml，血紅蛋白含量25mg/dl2、Hyclone的南美優(yōu)級(jí)胎牛血清大體與加拿大的優(yōu)等血清是一樣的

14、，級(jí)別也非常相似，貨號(hào)是sv30087.02，該胎牛血清來(lái)源于南美洲，以封閉的心臟穿刺方式采集，產(chǎn)品經(jīng)3次100nm 過(guò)濾，經(jīng)嚴(yán)格檢測(cè)確保無(wú)支原體，細(xì)菌病毒檢測(cè)依據(jù)美國(guó)藥典（USP）和美國(guó)聯(lián)邦法規(guī)第九篇（9CFR），內(nèi)毒素含量10 EU/ml，血紅蛋白含量20 mg/dl，完全符合美國(guó) HyClone® 優(yōu)等胎牛血清的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。3、Gibco的澳大利亞胎牛血清情況和Hyclone的澳大利亞胎牛血清差不多，市場(chǎng)價(jià)也是3200元/500ml左右。這一級(jí)別的血清，也能用于干細(xì)胞培養(yǎng)，可是，不象特級(jí)胎牛血清那么優(yōu)秀。因?yàn)?，此胎牛血清屬于澳大利亞生產(chǎn)的，不在疫區(qū)，可以正常報(bào)關(guān)進(jìn)口，目前沒(méi)

15、有受到任何影響，所以，就目前而言，算是最好的胎牛血清了，有不少客戶都此血清來(lái)培養(yǎng)干細(xì)胞，效果還是比較不錯(cuò)。4、TCB的優(yōu)級(jí)胎牛血清情況和Hyclone的澳大利亞胎牛血清差不多，市場(chǎng)價(jià)也是2300元/500ml左右。這一級(jí)別的血清，也能用于干細(xì)胞培養(yǎng)，可是，不象特級(jí)胎牛血清那么優(yōu)秀。第三類，一般級(jí)別的進(jìn)口胎牛血清1、Hyclone的南美胎牛血清目前，市場(chǎng)上用的最多的Hyclone血清是南美胎牛血清(FBS)SV30087 ，此血清采自南美，在國(guó)內(nèi)（蘭州）過(guò)濾并測(cè)試檢驗(yàn)，經(jīng)三次100納米過(guò)濾，根據(jù)中國(guó)商標(biāo)法的規(guī)定標(biāo)貼中文標(biāo)簽，內(nèi)毒素含量10EU/ml,血紅蛋白含量20mg/d。此血清廣泛用于各種腫

16、瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，還沒(méi)有資料記載能夠用于干細(xì)胞，也聽說(shuō)有少數(shù)人用于干細(xì)胞培養(yǎng)的，不過(guò)，因?yàn)楸旧硌t素比較高，所以，最好不要用于干細(xì)胞，2、Gibco的南美胎牛血清這款血清，是Gibco針對(duì)Hyclone南美胎牛血清做的，價(jià)格比較貴，好像是1780元/500m。3、Gemini的胎牛血清4、TCB的胎牛血清5、PAA的胎牛血清6、JRH澳洲胎牛血清第四類，國(guó)產(chǎn)的各種系列胎牛血清國(guó)產(chǎn)的胎牛血清，國(guó)內(nèi)沒(méi)有嚴(yán)格意義的胎牛血清，胎牛血清本身是需要穿刺取血的，而國(guó)內(nèi)都是剖腹產(chǎn)出胎牛，8小時(shí)左右取血，然后，進(jìn)行過(guò)濾分裝。所以，國(guó)產(chǎn)的胎牛血清不是嚴(yán)格意義的胎牛血清。價(jià)格便宜但是遇到的問(wèn)題非常多。附2. Hyclo

17、ne液體培養(yǎng)基普通液體培養(yǎng)基列表描述貨號(hào)包裝儲(chǔ)存溫度BME培養(yǎng)基(Basal Medium Eagle)EBSS*，含L-谷氨酰胺。 SH30157.01500 ml2-8°C SH30157.021000 ml2-8°CDMEM培養(yǎng)基(Dulbeccos Modified Eagles Medium)高糖，含4.0 mM L-谷氨酰胺，不含丙酮酸鈉。 SH30022.01B500 ml2-8°C SH30022.FS6 x 500 ml2-8°C SH30022.02B1000 ml2-8°C SH30022.LS6 x 1000 ml2-8

18、°C高糖，不含L-谷氨酰胺與丙酮酸鈉。 SH30081.01500 ml2-8°C SH30081.FS6 x 500 ml2-8°C SH30081.021000 ml2-8°C SH30081.LS6 x 1000 ml2-8°C SH30081.0320 L袋裝2-8°C SH30081.0410 L袋裝2-8°C高糖，含4.0 mM L-谷氨酰胺、丙酮酸鈉。SH30243.01B500 ml2-8°CSH30243.FS6 x 500 ml2-8°CSH30243.021000 ml2-8

19、6;CSH30243.LS6 x 1000 ml2-8°CSH30243.0310 L袋裝2-8°CSH30243.0420 L袋裝2-8°C高糖，含L-谷氨酰胺、HEPES，不含丙酮酸鈉。SH30249.01500 ml2-8°CSH30249.021000 ml2-8°C高糖，不含鈣、鎂。SH30262.01500 ml2-8°CSH30262.021000 ml2-8°C高糖，含L-谷氨酰胺，不含酚紅與丙酮酸鈉。SH30284.01500 ml2-8°CSH30284.021000 ml2-8°C高

20、糖，含丙酮酸鈉，不含L-谷氨酰胺。SH30285.01500 ml2-8°CSH30285.FS6 x 500 ml2-8°CSH30285.021000 ml2-8°CSH30285.LS6 x 1000 ml2-8°CSH30285.0320 L袋裝2-8°CSH30285.0410 L袋裝2-8°C高糖，改良型，不含酚紅、丙酮酸鈉、L-谷氨酰胺。SH30585.01500 ml2-8°CSH30585.021000 ml2-8°C高糖，改良型，不含酚紅、L-谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。SH30604.01500 m

21、l2-8°CSH30604.021000 ml2-8°C高糖，含丙酮酸鈉，不含L-谷氨酰胺、甲硫氨酸、胱氨酸。SH30606.01500 ml2-8°CSH30606.021000 ml2-8°C高度改良，含丙酮酸鈉、25 mM HEPES，不含L-谷氨酰胺。SH30563.01500 ml2-8°CSH30563.021000 ml2-8°C高糖，含丙酮酸鈉，不含L-谷氨酰胺、磷酸鹽。SH30607.01500 ml2-8°C低糖，含4.0 mM L-谷氨酰胺、110 mg丙酮酸鈉。SH30021.01B500 ml2-8

22、°CSH30021.FS6 x 500 ml2-8°CSH30021.021000 ml2-8°C含2.50 mM L-谷氨酰胺、15 mM HEPES。SH30023.01B500 ml2-8°CSH30023.FS6 x 500 ml2-8°CSH30023.021000 ml2-8°C含HEPES，不含L-谷氨酰胺。SH30126.01500 ml2-8°CSH30126.FS6 x 500 ml2-8°CSH30126.021000 ml2-8°C含L-谷氨酰胺、HEPES、丙酮酸鈉。SH3026

23、1.01500 ml2-8°CSH30261.021000 ml2-8°C含L-谷氨酰胺，不含HEPES。SH30271.01500 ml2-8°CSH30271.FS6 x 500 ml2-8°CSH30271.021000 ml2-8°C含L-谷氨酰胺，不含HEPES、酚紅。SH30272.01500 ml2-8°CSH30272.021000 ml2-8°CHam"s培養(yǎng)基 (Hams Nutrient Mixture)F10培養(yǎng)基，含L-谷氨酰胺。SH30025.01500 ml2-8°CSH30

24、025.021000 ml2-8°CF12培養(yǎng)基，含1.00 mM L-谷氨酰胺。, 1XSH30026.01B500 ml2-8°CSH30026.FS6 x 500 ml2-8°CSH30026.021000 ml2-8°CF12培養(yǎng)基, Kaighn"s改良型。SH30526.01500 ml2-8°CSH30526.021000 ml2-8°C昆蟲培養(yǎng)基 (Insect Media)Grace"s無(wú)添加劑培養(yǎng)基SH30610.01500 ml2-8°CSH30610.021000 ml2-8

25、76;CTNM-FH培養(yǎng)基SH30280.02500 ml2-8°CSH30280.031000 ml2-8°CIMDM培養(yǎng)基 (Iscove"s Modified Dulbecco"s Medium)含L-谷氨酰胺、HEPES，不含-硫代甘油。SH30228.01B500 ml2-8°CSH30228.FS6 x 500 ml2-8°CSH30228.021000 ml2-8°C不含L-谷氨酰胺。SH30259.01500 ml2-8°CSH30259.021000 ml2-8°CLeibovitz培養(yǎng)

26、基 (Leibovitz Medium)L-15培養(yǎng)基，含2.05 mM L-谷氨酰胺。SH30525.01500 ml2-8°CSH30525.021000 ml2-8°CM199培養(yǎng)基 (Medium 199)EBSS*，含L-谷氨酰胺。SH30253.01B500 ml2-8°CSH30253.FS6 x 500 ml2-8°CSH30253.021000 ml2-8°CHBSS*，含L-谷氨酰胺。SH30233.01100 ml2-8°CSH30233.02500 ml2-8°CHBSS*，含L-谷氨酰胺、L-氨基酸

27、。SH30330.01500 ml2-8°CSH30330.021000 ml2-8°CMcCoy"s 5A培養(yǎng)基 (McCoy"s 5A Medium)含L-谷氨酰胺。SH30200.01500 ml2-8°CSH30200.FS6 x 500 ml2-8°CSH30200.021000 ml2-8°C含L-谷氨酰胺，不含酚紅。SH30270.01500 ml2-8°CSH30270.021000 ml2-8°C含L-谷氨酰胺、HEPES。SH30602.01500 ml2-8°CSH3060

28、2.021000 ml2-8°CSH30602.03100 ml2-8°CMEM 培養(yǎng)基（Minimum Essential Medium）EBSS*，含2.0 mM L-谷氨酰胺。SH30024.01B500 ml2-8°CSH30024.FS6 x 500 ml2-8°CSH30024.021000 ml2-8°CSH30024.LS6 x 1000 ml2-8°CEBSS*，含L-谷氨酰胺，用于懸浮培養(yǎng)。SH30235.01500 ml2-8°CSH30235.021000 ml2-8°CEBSS*，不含L-

29、谷氨酰胺。SH30244.01500 ml2-8°CSH30244.FS6 x 500 ml2-8°CSH30244.021000 ml2-8°CSH30244.LS6 x 1000 ml2-8°C改良型，含L-谷氨酰胺、核糖核苷及脫氧核糖核苷。SH30265.01B500 ml2-8°CSH30265.021000 ml2-8°CSH30265.FS6 x 500 ml2-8°C改良型，不含L-谷氨酰胺、核糖核苷及脫氧核糖核苷。SH30568.01500 ml2-8°CSH30568.FS6 x 500 ml2-8°CSH30568.021000 ml2-8°CRichter"s改良型，不含酚紅。SH30600.01500 ml2-8°CSH30600.02 1000 ml2-8°CRichter"s改良型，含L-谷氨酰胺、酚紅。SH3060