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1、學(xué)而不思而罔,死而不學(xué)則殆xx教育生物選修知識(shí)點(diǎn)一重點(diǎn)難點(diǎn)歸納、知識(shí)梳理1、幾種常用發(fā)酵菌種的對(duì)比菌種/項(xiàng)目酵母菌醋酸菌毛霉乳酸菌生物學(xué)類型真核生物原核生物真核生物原核生物代謝類型異養(yǎng)兼性厭氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)需氧異養(yǎng)厭氧繁殖方式適宜條件下出芽生殖二分裂生殖抱子生殖二分裂生殖生產(chǎn)應(yīng)用范圍釀酒釀醋制作腐乳制作泡菜發(fā)酵條件前期需氧,后期不需氧一直需氧一直需氧不需氧2、果酒、果醋、腐乳、泡菜制作中所用菌種及控制條件的對(duì)比制作內(nèi)容/對(duì)比項(xiàng)目果酒果醋腐乳泡菜所用菌種酵母菌醋酸菌主要是為霉乳酸菌控制條件O2的有無(wú)無(wú)氧有氧有氧無(wú)氧最適溫度18 c 25 C30 c 35 c15 c 18C常溫時(shí)間控制1012天7
2、8天腌制8天左右腌制10天左右其他條件封閉充氣口適時(shí)充氣控制鹽酒用量控制鹽水比例相關(guān)反應(yīng)式"切充jui、g r w圮.HO HfyC- -NUHdUCCEI*汕千足* 一 一 Hr Ori ui-lKa CC' I>< >1 <+ Hh A3、果酒、果醋、腐乳和泡菜制作過(guò)程的對(duì)比及亞硝酸鹽含量的檢測(cè)對(duì)比項(xiàng)目果酒和果醋制作腐乳的制作制作泡菜并檢測(cè)亞硝酸鹽含量制作原理果酒:無(wú)氧呼吸果醋:有氧呼吸多種微生物發(fā)酵泡菜制作:乳酸菌無(wú)氧呼吸亞硝酸鹽檢測(cè):在鹽酸酸化條件下,亞硝酸鹽與對(duì)氨基苯磺酸重氮化反應(yīng)后, 與N- 1-蔡基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色實(shí)驗(yàn)流程圖挑
3、選葡萄-沖洗-榨汁-酒精發(fā)酵-醋酸發(fā)酵JJ果酒果醋讓豆腐上長(zhǎng)也毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶-密封腌制困*4小1工一-亞姓 、沈祿、哮不 切分成條狀重片狀、加妹一罹水沖加廣一力H人明味一彩醉一成,彩 n.裝運(yùn)J I山亞硝核毋6M操作提示材料選擇與處理;防止發(fā)酵液被污染;控制好發(fā)酵條件??刂坪貌牧系挠昧浚环乐闺s菌污染。泡菜壇的選擇;腌制的條件;測(cè)定亞硝酸鹽含量的操作。專題2 課題1微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用、知識(shí)梳理1、消毒與滅菌的區(qū)分對(duì)比項(xiàng)目消毒滅菌條件使用較為溫和的理化方法使用強(qiáng)烈的理化因素結(jié)果殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物(不包括芽抱和抱子)殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽抱和抱子適用范圍實(shí)驗(yàn)
4、操作的空間、操作者的衣服和手微生物的培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等常用方法煮沸消毒法(如在100C,煮沸56 min)、巴氏消毒法(如在80C,煮15 min );使用酒灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌精、氯氣、石炭酸等化學(xué)藥劑進(jìn)行消毒4、微生物的純化培養(yǎng)方式包括培養(yǎng)基的制備和純化微生物兩個(gè)階段,純化(分離)微生物時(shí)常用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法。微生物培養(yǎng):水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源等平板劃線法:通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后,就可以得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的肉眼可見的子細(xì)胞群體,這就是菌落。稀釋涂布平板法:將菌液進(jìn)行一
5、系列梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌L纖維發(fā)牌亞合摩)一液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里,IIIif雄索電-陽(yáng).如二一篁的行身觸荀劭聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的-一一”菌落。:纖培索/江也北合物一一由現(xiàn)透明圈5、微生物的分離和計(jì)數(shù)方法(1) 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)(以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基)篩選菌株:利用選擇培養(yǎng)基篩選菌株。測(cè)定微生物數(shù)量的常用方法:統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目(不是活菌數(shù))和顯微鏡直接計(jì)數(shù)。土壤取樣一樣品的稀釋一微生物的培養(yǎng)與觀察。(2)分解纖維素的微生物的分離實(shí)驗(yàn)原理即:可根據(jù)是否產(chǎn)生透明圈來(lái)篩選纖維素分解
6、菌。流程:土壤取樣-選擇培養(yǎng)-梯度稀釋-涂布平板-挑選菌落。專題三 課題1 植物組織培養(yǎng)(參照選修三)專題三 課題2 月季的花藥培養(yǎng)材料的選?。哼x擇花藥時(shí)(一般選擇單核期),一般要通過(guò)鏡檢來(lái)確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時(shí)期的最常用的方法是 醋酸洋紅法。但是,某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色,需采用 焙花青-銘磯法,這種方法能將 花粉細(xì)胞核 染成藍(lán)黑色專題四 課題1果膠酶在果汁生產(chǎn)中的作用1、酶反應(yīng)速率(酶活力):?jiǎn)挝粫r(shí)間內(nèi),單位體積中反應(yīng)物的減少量或產(chǎn)物的增加量。2、影響酶活性的因素:溫度、PHI (探究溫度、PH對(duì)酶活性的影響實(shí)驗(yàn)參照作業(yè)),留意加酶抑制劑。專題四 課題2探討
7、加酶洗衣粉的洗劑效果一、實(shí)驗(yàn)原理1 .加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉,目前常用的酶制劑有四類:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶, 其中,應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是 堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。2 .堿性蛋白酶能將 血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成 可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污跡從衣物上脫落。脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶也能分別將大分子的脂肪、淀粉和纖維素水解為小分子物質(zhì),使洗衣 粉具有更好的去污能力。專題四 課題3 酵母細(xì)胞的固定化一、實(shí)驗(yàn)原理1.固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù),包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。一般來(lái)說(shuō),酶更適合采用 化學(xué)結(jié)合法和
8、物理吸附法固定 ,而細(xì)胞多采用包埋法固定 化。這是因?yàn)榧?xì)胞個(gè)大,而酶分子很??;個(gè)大的難以被吸附或結(jié)合,而個(gè)小的酶容易從包埋材料中漏出 。固定化酶優(yōu)點(diǎn):使酶既能與反應(yīng)物接觸,又能與產(chǎn)物分離,還可以被反復(fù)利用。固定化細(xì)胞優(yōu)點(diǎn):成本更低,操作更容易,可以催化一系列的化學(xué)反應(yīng)。專題五 課題5 DNA的粗提取與鑒定一、實(shí)驗(yàn)原理提取生物大分子的基本思路是 選用一定的物理或化學(xué)方法分離具有不同物理或化學(xué)性質(zhì)的生物大分 子。對(duì)于DNA勺粗提取而言,就是要利用 DNA與RNA蛋白質(zhì)和脂質(zhì)等在物理和化學(xué)性質(zhì)方面的差異,提 取DNA去除其他成分。1. DNA的溶解性DNAW蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度的NaCl溶液中
9、溶解度不同,利用這一特點(diǎn),選擇適當(dāng)?shù)柠}濃度就能使DNA分溶解,而使雜質(zhì)沉淀,或者相反,以達(dá)到分離目的。(0.14mol/L時(shí)溶解度最低)止匕外,DNA不溶于酒精溶液,但是細(xì)胞中的某些蛋白質(zhì)則溶于酒精。利用這一原理,可以將 DNA與蛋 白質(zhì)進(jìn)一步的分離。2. DNA寸酶、高溫和洗滌劑的耐受性蛋白酶能水解 蛋白質(zhì),但是對(duì)DNA沒有影響。大多數(shù)蛋白質(zhì)不能忍受6080oC的高溫,而DN3 80oC以上才會(huì)變性。洗滌劑能夠瓦解 細(xì)胞膜,但對(duì)DNAa有影響。3. DNA的鑒定原理在沸水浴條件下,DNA二苯胺會(huì)被染成藍(lán)色,因此二苯胺可以作為鑒定DNA勺試劑。二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1 .實(shí)驗(yàn)材料的選取定義凡是含有DNA
10、的生物材料都可以考慮,但是使用DN給量相對(duì)較高的生物組織,成功的可能性更大。2 .破碎細(xì)胞,獲取含 DNA的濾液動(dòng)物細(xì)胞的破碎對(duì)比容易,以雞血細(xì)胞為例,在雞血細(xì)胞液中加入一定量的蒸儲(chǔ)水,同時(shí)用玻璃棒攪拌,過(guò)濾后收集濾液即可。 如果實(shí)驗(yàn)材料是植物細(xì)胞,需要先用洗滌劑溶解細(xì)胞膜。例如,提取洋蔥的DNA時(shí),在切碎的洋蔥中加入一定的 洗滌劑和食鹽,進(jìn)行充分的攪拌和研磨,過(guò)濾后收集研磨液。注意事項(xiàng):為什么加入蒸儲(chǔ)水能使雞血細(xì)胞破裂?利用細(xì)胞吸水漲破的原理。加入洗滌劑和食鹽的作用分別是什么?洗滌劑是一些離子去污劑,能溶解細(xì)胞膜,有利于DNA的釋放;食鹽的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解。為什么反復(fù)地
11、溶解與析出 DNA能夠去除雜質(zhì)?用高鹽濃度的溶液溶解 DNA能除去在高鹽中不能溶解的雜質(zhì);用低鹽濃度使DNA析出,能除去溶解在低鹽溶液中的雜質(zhì)。因此,通過(guò)反復(fù)溶解與析出DNA就能夠除去與 DNA溶解度不同的多種雜質(zhì)。3 . DNA勺析出與鑒定原理將處理后的溶液過(guò)濾,加入與濾液體積 土基、冷卻的酒精溶液,靜置23min,溶液中會(huì)出現(xiàn) 白色絲 狀物,這就是粗提取的 DNA用玻璃棒沿一個(gè)方向攪拌,卷起絲狀物,并用濾紙吸取上面的水分。取兩支20ml的試管,各加入物質(zhì)的量濃度為 2mol/L的NaCl溶液5ml,將絲狀物放入其中一支試管中,用玻璃棒攪拌,使絲狀物溶解。然后,向兩支試管中各加入4ml的二苯
12、胺試劑?;旌暇鶆蚝螅瑢⒃嚬苤糜阱蜕屑訜?min,待試管冷卻后,對(duì)比兩支試管溶液顏色的變化,看看溶解有DNA的溶液是否變遁。四、注意事項(xiàng)1 .以血液為實(shí)驗(yàn)材料時(shí),每100ml血液中需要加入3g檸檬酸鈉防止血液凝固。2 .加入洗滌劑后,動(dòng)作要 輕緩、柔和,否則容易產(chǎn)生大量的泡沫,不利于后續(xù)步驟地操作。加入酒精和用玻璃棒攪拌時(shí),動(dòng)作要 輕緩,以免DN砌子的斷裂,導(dǎo)致DNA分子不能形成絮狀沉淀。3 .二苯胺試劑要 現(xiàn)配現(xiàn)用,否則會(huì)影響鑒定的效果。4 . DNA勺溶解度與NaCl溶液濃度的關(guān)系:當(dāng)NaCl溶液濃度低于 0.14mol/L時(shí),隨濃度的升高,DNA的溶解度降低;當(dāng) NaCl溶液濃度高于 0
13、.14mol/L時(shí),隨濃度升高,DNA勺溶解度升高專題四 課題6血紅蛋白的提取和分離一、實(shí)驗(yàn)原理蛋白質(zhì)的物化理性質(zhì):形狀、大小、電荷性質(zhì)和多少、溶解度、吸附性質(zhì)、親和力等千差萬(wàn)別,由此提取和分離各種蛋白質(zhì)。1 .凝膠色譜法(分配色譜法):(1)原理:分子量大的分子通過(guò)多孔凝膠顆粒的間隙,路程短,流動(dòng)快,先被洗脫出來(lái);分子量小的 分子穿過(guò)多孔凝膠顆粒內(nèi)部,路程長(zhǎng),流動(dòng)慢 。(2)凝膠材料:多孔性,多糖類化合物,如葡聚糖、瓊脂糖。(3)分離過(guò)程:混合物上柱-洗脫-大分子流動(dòng)快、小分子流動(dòng)慢-收集大分子-收集小分子洗脫:從色譜柱上端不斷注入緩沖液,促使蛋白質(zhì)分子的差速流動(dòng)。2 .緩沖溶液緩沖液作用:抵制外界酸、堿對(duì)溶液 pH的干擾而保持pH穩(wěn)定。3 .凝膠電泳法:(1)原理:不同蛋
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