細(xì)菌類(lèi)疫苗ppt課件

1、第九章 細(xì)菌類(lèi)疫苗第一節(jié) 概述1細(xì)菌類(lèi)疫苗o 定義：用細(xì)菌、支原體、螺旋體或其衍生物制成，進(jìn)入人體后使機(jī)體產(chǎn)生抵抗相應(yīng)細(xì)菌能力的生物制品細(xì)菌類(lèi)疫苗o 種類(lèi)：（1）減毒活疫苗（2）滅活疫苗（3）亞單位疫苗或成分疫苗2附表：目前用于人群的細(xì)菌性疫苗o 卡介苗o 百日咳疫苗o 腦膜炎球菌疫苗o 傷寒疫苗o 精制破傷風(fēng)疫苗（類(lèi)毒素）o 霍亂弧菌疫苗o 痢疾疫苗用法：i.d., s.c., d.s., i.m., p.o.3第二節(jié) 細(xì)菌滅活疫苗o 滅活疫苗的生產(chǎn)工藝與檢定1. 菌種檢定與制備1）菌種檢定：包括 培養(yǎng)特性、血清學(xué)特性、毒力試驗(yàn)、抗原性試驗(yàn)、免疫力試驗(yàn)2）菌種制備菌種啟開(kāi)：接種于適宜的培養(yǎng)基

2、上，371C一代培養(yǎng)；擴(kuò)量轉(zhuǎn)種：一代菌種的擴(kuò)量接種，于371C二代培養(yǎng)。42.生產(chǎn)方法（1）固體培養(yǎng)法（2）液體通氣培養(yǎng)法（大規(guī)模生產(chǎn)用）3.細(xì)菌采集（1）固體培養(yǎng)法采集時(shí)逐瓶檢查，污染雜菌者廢棄。（2）液體培養(yǎng)法采集時(shí)應(yīng)做純菌試驗(yàn)，確定無(wú)雜菌生長(zhǎng)。54.殺菌/脫毒 終濃度不超過(guò)1%的甲醛37或者28處理一定時(shí)間殺菌，之后還要進(jìn)行殺菌檢查，接種于合適培養(yǎng)基培養(yǎng)，應(yīng)無(wú)本菌生長(zhǎng)。5.原液檢定及保存（1）濃度測(cè)定（2）鏡檢（3）凝集試驗(yàn)（4）無(wú)菌試驗(yàn)（5）免疫力試驗(yàn)（6）保存66.配合稀釋及分裝 按要求稀釋?zhuān)蚺c其他疫苗成分按比例混合后加入吸附劑。7.成品檢定 按規(guī)程進(jìn)行7o 常用滅活細(xì)菌疫苗1.霍

3、亂疫苗（1）霍亂簡(jiǎn)介由霍亂弧菌引起的烈性腸道傳染病，霍亂弧菌在小腸分泌霍亂毒素（cholera toxin），引起腹瀉及其他癥狀。（2）抗原 鞭毛抗原：不耐熱，無(wú)分型意義，有免疫保護(hù)作用。 菌體抗原：主要成分為L(zhǎng)PS，耐熱，根據(jù)其抗原決定基 可分為 200多鐘血清型，O1和O139為流行血清型。8（3）目前最常用的霍亂疫苗口服霍亂滅活全菌體+重組霍亂毒素B亞單位重組霍亂毒素B亞單位（sBS）具有黏膜免疫佐劑特性，該疫苗安全有效且無(wú)明顯不良反應(yīng)，保護(hù)力持久。92.傷寒疫苗（1）概述由傷寒沙門(mén)桿菌引起的急性全身感染，患者出現(xiàn)高熱，胃腸炎，敗血癥等。含有三類(lèi)抗原:LPS，莢膜多糖，鞭毛抗原，耐藥性比

4、較嚴(yán)重。（2）生產(chǎn)工藝與檢定全菌體死疫苗分三種，按殺菌劑不同可分為丙酮滅活苗，加溫加酚滅活苗(收取的菌液經(jīng)56度加溫滅活1小時(shí)后，再加入酚（最終含量為0.5%)作為防腐劑），甲醛滅活苗（收取菌液加入甲醛（最終含量為1%，置于36度24小時(shí)滅活后進(jìn)一步加工。10菌株我國(guó)現(xiàn)用兩個(gè)菌株生產(chǎn)疫苗：國(guó)際通用Ty2株國(guó)內(nèi)代表株培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法采用馬丁瓊脂、肉湯瓊脂或其他經(jīng)批準(zhǔn)的培養(yǎng)基，主要采用固體培養(yǎng)法，也可進(jìn)行發(fā)酵生產(chǎn)接種后3537培養(yǎng)1824h。11成品檢定鑒別試驗(yàn)、外觀、化學(xué)檢定、無(wú)菌試驗(yàn)、異常毒性試驗(yàn)、菌形及純度檢查疫苗規(guī)格及有效期每安瓿瓶5ml，每人用劑量含傷寒菌61073108，28避光保存和

5、運(yùn)輸，有效期1.5年。12（3）傷寒Vi多糖疫苗早期乙酸處理Vi多糖，抗原性明顯降低，經(jīng)溴化-16-烷基-3-甲基氨處理Vi多糖，得到的非變性多糖可顯示較好的免疫原性，但是對(duì)2歲以下兒童無(wú)效，且多糖是T淋巴細(xì)胞非依賴(lài)性抗原，不具有加強(qiáng)免疫記憶的作用，蛋白質(zhì)-Vi多糖結(jié)合疫苗正在研制當(dāng)中。 13（4）傷寒Ty21a口服減毒活疫苗德國(guó)學(xué)者將野生型菌株Ty2經(jīng)化學(xué)突變劑亞硝基胍處理而獲得的突變株，在提供較高免疫保力的同時(shí)具有很高的安全性。143.百日咳疫苗1）概述由百日咳桿菌引起的急性呼吸道傳染病，主要侵犯嬰幼兒，全病程較長(zhǎng)，可持續(xù)幾個(gè)月，故名百日咳。百日咳菌可分四種相變：相菌毒力最強(qiáng)，有免疫原性；

6、相毒力消失，無(wú)免疫原性；、相菌介于、 之間。15162）百日咳死疫苗的生產(chǎn)工藝與檢定菌種生產(chǎn)用菌種采用百日咳相含1型、2型、和3型凝集原的菌株。培養(yǎng)方法固體培養(yǎng)采用半綜合碳瓊脂培養(yǎng)基，也可發(fā)酵生產(chǎn)。17原液檢定濃度測(cè)定、鏡檢、血清學(xué)試驗(yàn)、無(wú)菌試驗(yàn)、特異性毒性試驗(yàn)、效價(jià)測(cè)定。原液保存28，有效期3年配合稀釋及分裝按原液中具有1、2和3型菌株的配比混合，也可制成百白破三聯(lián)疫苗（百日咳、白喉、破傷風(fēng)）18第三節(jié) 細(xì)菌減毒活疫苗一、生產(chǎn)工藝與檢定1920二、常用細(xì)菌減毒活疫苗o 炭疽疫苗o 結(jié)核疫苗o 鼠疫疫苗211、炭疽疫苗1）概述：定義：由炭疽桿菌引起的人畜共患的一種急性傳染病。特點(diǎn)：潛伏期3-5

7、d。臨床表現(xiàn)為皮膚、肺部、腦膜和腸道等處的急性感染。臨床分型： 體表感染型 消化道感染型 呼吸道感染型22皮膚型炭疽23 2）炭疽菌的病原學(xué)革蘭氏陽(yáng)性，個(gè)體最大的桿菌之一，呈竹節(jié)狀，無(wú)鞭毛，在機(jī)體內(nèi)或特殊培養(yǎng)條件下能形成莢膜。營(yíng)養(yǎng)要求不嚴(yán)，需氧，最適溫度3437炭疽桿菌的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞抵抗力不強(qiáng)，芽孢抵抗力強(qiáng)，過(guò)氧乙酸、高錳酸鉀、和甲醛對(duì)芽孢的殺滅力較強(qiáng)。24抗原菌體抗原：多糖組分，耐熱性強(qiáng)。莢膜抗原：由質(zhì)粒決定，可以抵抗細(xì)胞的吞噬作用，引起感染，對(duì)動(dòng)物沒(méi)有免疫保護(hù)力，不能作為疫苗。毒素抗原：水腫因子（EF）；致死因子（LF）；保護(hù)性抗原（PA）；單獨(dú)組分無(wú)毒性，成對(duì)結(jié)合才能獲得毒素活性。253）炭

8、疽疫苗（1）目前人用炭疽疫苗減毒活疫苗鋁膠培養(yǎng)上清液疫苗（2）炭疽疫苗的生產(chǎn)工藝與檢定生產(chǎn)用菌株人、獸用的炭疽活疫苗生產(chǎn)均采用無(wú)莢膜具毒素（cap-tox+）菌株，我國(guó)采用的的A16R菌種均由藥品生物制品檢定所分發(fā)。26培養(yǎng)及收獲生產(chǎn)用培養(yǎng)基采用牛肉汁瓊脂或其他批準(zhǔn)培養(yǎng)基半成品配置及分裝用滅菌的50%甘油將原液稀釋成每ml含菌數(shù)4109成品檢定鑒別試驗(yàn)、外觀、純菌試驗(yàn)、特異性毒性試驗(yàn)活菌數(shù)測(cè)定、濃度測(cè)定、效力測(cè)定27疫苗規(guī)格及有效期安瓿瓶裝，10人份含菌2109， 28避光保存運(yùn)輸，有效期兩年。（3）目前人用炭疽疫苗的缺點(diǎn)毒力不穩(wěn)定采用劃痕接種，免疫效果不均一副反應(yīng)較大免疫保護(hù)力持續(xù)時(shí)間比較短

9、282、結(jié)核疫苗病原菌為結(jié)核桿菌，能引起人畜共患結(jié)核?。?）流行概況全世界約1/3人口感染；每年約1600萬(wàn)人患病，其中300多萬(wàn)人死于結(jié)核病。中國(guó)治療難題： 發(fā)現(xiàn)率低； 無(wú)法接受正規(guī)治療或沒(méi)錢(qián)治療； 耐藥性29（2）傳染與傳播方式主要由呼吸道傳染，少數(shù)由消化道和皮膚粘膜的損傷處侵入。傳播方式：飛沫傳染 痰液傳染 食物傳染 接觸傳染30（3）結(jié)核桿菌的潛伏和復(fù)燃結(jié)核桿菌類(lèi)脂質(zhì)等成分能對(duì)抗溶酶體中酶的破壞作用，使細(xì)菌在巨噬細(xì)胞內(nèi)繁殖，導(dǎo)致巨噬細(xì)胞裂解死亡，病狀擴(kuò)散至鄰近淋巴結(jié)，形成原發(fā)感染灶，當(dāng)機(jī)體抗感染力較強(qiáng)時(shí)，淋巴結(jié)病灶逐漸纖維化和鈣化，此時(shí)病灶內(nèi)的結(jié)核桿菌處于休眠期，并潛伏下來(lái)，幾年或十幾

10、年后，結(jié)合桿菌可以重新復(fù)燃，引起成年人肺結(jié)核。31（4）結(jié)合桿菌抗藥性伴隨著結(jié)核病回升的另外一個(gè)問(wèn)題是抗藥性的產(chǎn)生，多重抗藥性的發(fā)生率也越來(lái)越高，研制和開(kāi)發(fā)有效的結(jié)合新疫苗勢(shì)在必行。322）結(jié)核桿菌的病原學(xué)革蘭氏陽(yáng)性，含分枝酸，具有抗酸性，胞壁含大量脂質(zhì)，有較強(qiáng)的抵抗力滅菌方法具有免疫佐劑活性333）結(jié)核疫苗卡介苗的生產(chǎn)工藝與檢定卡介苗（BCG）是牛型結(jié)合桿菌經(jīng)培養(yǎng)后，收集菌體，加入穩(wěn)定劑凍干后制成的，用于預(yù)防結(jié)核病菌種卡介菌D2PB302菌株培養(yǎng)和收集生產(chǎn)用培養(yǎng)基采用蘇通馬鈴薯培養(yǎng)基、膽汁馬鈴薯培樣基或液體蘇通培養(yǎng)基，搜集菌膜壓干，低溫研磨，加入穩(wěn)定劑，制成原液。34半成品配置及凍干用特定的

11、保護(hù)劑稀釋成半成品，無(wú)菌分裝到安瓿瓶?jī)?nèi)成品檢定鑒別試驗(yàn)、外觀、溶解時(shí)間、水分、純菌試驗(yàn)、無(wú)有毒分枝桿菌試驗(yàn)、活菌計(jì)數(shù)、效力測(cè)定疫苗規(guī)格及有效期10人份含卡介菌0.40.6mg， 28避光保存運(yùn)輸，有效期一年。35（4）新型結(jié)核疫苗的研究方向以BCG為載體的基因工程結(jié)核疫苗營(yíng)養(yǎng)缺陷型結(jié)核減毒活疫苗（牛型/人型） 結(jié)核亞單位疫苗結(jié)核DNA疫苗363、鼠疫疫苗（1）概述：鼠疫是由鼠疫桿菌引起的自然疫源性烈性傳染病。主要以“鼠蚤人”為主要傳播方式。37（2）鼠疫桿菌的病原學(xué)鼠疫桿菌屬腸桿菌科，耶爾森氏菌屬。革蘭染色陰性短小桿菌。有莢膜，無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞?？乖兔庖咴?8（3）鼠疫疫苗的生產(chǎn)工藝與檢定菌種：采用