不同施氮量對飼料稻糙米蛋白質(zhì)含量的影響及其機理

1、不同施氮量對飼料稻糙米蛋白質(zhì)含量的影響及其機理謝桂先，劉強，榮湘民，宋海星，彭建偉，朱紅梅湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)資源環(huán)境學(xué)院，湖南 長沙 410128摘要：采用田間小區(qū)試驗探討了“氮中量施肥法”（N，P2O5，K2O施用量為190，90，100 kg·hm-2）、“氮高量施肥法”（N，P2O5，K2O施用量為210，90，100 kg·hm-2）、“氮低量施肥法”（N，P2O5，K2O施用量為170，90，100 kg·hm-2）對飼料稻威優(yōu)198糙米蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響及其機理。結(jié)果表明，與氮高量施肥法和氮低量施肥法相比，氮中量施肥法能明顯促進(jìn)孕穗期、乳熟期水稻旗葉中硝酸

2、還原酶，乳熟期旗葉中蛋白水解酶活性，齊穗期旗葉谷氨酰胺合成酶以及齊穗期和乳熟期籽粒中谷氨酰胺合成酶活性，明顯促進(jìn)水稻對氮素營養(yǎng)的吸收與轉(zhuǎn)運，顯著提高糙米中蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)和蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)。氮中量施肥法處理糙米蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別比氮高量施肥法處理和氮低量施肥法處理提高了1.39%和17.93%，籽粒產(chǎn)量分別提高了12.02%和8.47%，糙米蛋白質(zhì)產(chǎn)量分別提高了12.54%和18.32%。研究表明，氮中量施肥法能滿足飼料稻高蛋白高產(chǎn)栽培的需要。關(guān)鍵詞：水稻；硝酸還原酶；谷氨酰胺合成酶；蛋白水解酶；蛋白質(zhì)中圖分類號：S157.4+1 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A 文章編號：1672-2175（2008）04-16

3、19-05湖南省是我國水稻（oryza sativa）生產(chǎn)大省，但早秈稻由于其品質(zhì)相對較差而銷售滯后，為解決湖南省早秈稻賣難和飼料原材料不足問題，青先國等于1992年提出了用高蛋白稻米（飼料稻）代替玉米作為原料生產(chǎn)飼料，并提出了三壯三高飼料稻施肥法1。飼料稻是指單產(chǎn)高（8250 kg·hm-2以上）、出糙率高（80%）、粗蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)高（12%）的水稻品種（組合），它生育期適宜抗性強。飼料稻主要的用途是作為飼料工業(yè)的原料，大量研究表明，糙米作為能量飼料替代玉米是完全可行的，而且飼料稻糙米作為飼糧的效果優(yōu)于普通玉米2。1998年湖南省種植代替玉米飼料原料的高蛋白質(zhì)飼料稻面積30萬hm2

4、以上，產(chǎn)量達(dá)288萬t，替代省內(nèi)玉米飼料原料的45%以上，在國家糧食豐產(chǎn)科技工程項目（2004BA520A01）和湖南省有關(guān)部門的大力支持下，湖南省飼料稻面積逐年增加。氮素影響作物各種生理代謝的正常進(jìn)行和代謝物的合理分配以及生長發(fā)育，也是水稻管理中需求量大而又較難控制的營養(yǎng)元素。近年來農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中大量使用氮肥引起的氮肥利用率低、資源浪費大、環(huán)境污染嚴(yán)重的現(xiàn)狀已經(jīng)引起了人們的普遍關(guān)注3，4。氮素營養(yǎng)對籽粒產(chǎn)量和蛋白質(zhì)的合成有顯著的影響，為了滿足飼料稻高蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)和高產(chǎn)的要求，在當(dāng)前的飼料稻生產(chǎn)中主要采用三壯三高施肥法，但施氮量較高，達(dá)225 kg·hm-2，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了水稻一般栽培的1

5、50180 kg·hm-2施氮量，且施肥方法也欠合理5，因此，降低氮肥施用量是飼料稻生產(chǎn)中急待解決的問題。過去對飼料稻糙米蛋白質(zhì)的研究多集中在對其最終質(zhì)量分?jǐn)?shù)的研究上1，6，而對施氮量尤其是低施氮條件下對稻米蛋白質(zhì)形成過程中關(guān)鍵酶的動態(tài)變化和蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)研究較少。本文探討了不同施氮量對飼料稻威優(yōu)198氮代謝關(guān)鍵酶（硝酸還原酶、谷氨酰胺合成酶、蛋白水解酶）活性、水稻植株和籽粒全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)及糙米蛋白質(zhì)產(chǎn)量的影響，以期為飼料稻在湖南甚至在整個華南地區(qū)減氮栽培提供科學(xué)依據(jù)。1 材料與方法1.1 供試材料供試水稻品種為飼料稻威優(yōu)198，試驗于2003年在湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)教學(xué)實驗場進(jìn)行，其水田土壤

6、基本理化狀為有機質(zhì)24.80 g·kg-1，全氮1.79 g·kg-1，堿解氮127.10 g·kg-1，全磷1.26 g·kg-1，速效磷6.32 g·kg-1，全鉀15.90 g·kg-1，速效鉀51.00 g·kg-1，緩效鉀413.80 g·kg-1。1.2 方法 試驗設(shè)計 試驗共設(shè)3種處理，即氮中量施肥法處理（N，P2O5，K2O施用量為190，90，100 kg·hm-2），氮高量施肥法處理 (N，P2O5，K2O施用量為210，90，100 kg·hm-2)，氮低量施肥法(N，P2

7、O5，K2O施用量為170，90，100 kg·hm-2)。重復(fù)3次，隨機區(qū)組排列，每小區(qū)面積20 m2。大田栽植密度為16.7 cm×20.0 cm，每穴2苗。試驗品種經(jīng)浸種后于6月22日播種，7月17日移栽，10月18日收獲。 水肥管理 秧田管理，采用“半旱育秧法”，秧苗2.1葉期施187.5 kg·hm-2半旱育壯秧劑（尿素碳酸二氫鉀氯化鉀鈣鎂磷肥=7.511.52.5），施后灌水于廂面。播種后以廂溝有水廂面濕潤為主，移栽前7 d淺水于廂面，且保持淺水至移栽；大田管理，施菜餅肥750 kg·hm-2作基肥，化肥的施用量按試驗設(shè)計方案進(jìn)行。氮肥采用尿

8、素，按基肥分蘗肥穗肥粒肥=3.642.732.730.91的比例施用；磷肥采用鈣鎂磷肥一次性作基肥施用；鉀肥用氯化鉀，60%作基肥，20%作分蘗肥，20%作孕穗肥；施分蘗肥同時施300 kg·hm-2的硅錳肥。施肥后灌水，以水帶肥入泥。返青期保持淺水34 cm, 以后保持淺水與濕潤相間灌溉，促進(jìn)分蘗，達(dá)到所需有效苗數(shù)的90%開始曬田，此外，孕穗期和灌槳成熟期也以濕潤和淺水相間灌溉，以促進(jìn)后期根系活力。1.3 測定項目與方法 每小區(qū)隨機采取5株水稻，在分蘗期、孕穗期、齊穗期、乳熟期和黃熟期分別測定水稻旗葉硝酸還原酶和蛋白水解酶活性及全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)，在齊穗期、乳熟期和黃熟期分別測定水稻旗葉

9、和籽粒中谷氨酰胺合成酶活性以及齊穗期、乳熟期和黃熟期籽粒全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)，水稻收割后每小區(qū)測產(chǎn)，并測定糙米全氮和蛋白氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)。AB圖1 不同施氮量對飼料稻旗葉硝酸還原酶（A）和蛋白水解酶（B）活性的影響Fig. 1 Effects of different nitrogen fertilization rate on activities of nitrate reductase(A) and protease(B) in flag leaves of forage rice. 注：HN、MN、LN分別為氮高量施肥法處理、氮中量施肥法處理、氮低量施肥法處理，其施N水平分別為210，190，170

10、 kg·hm-2；同一生育期不同小寫字母表示差異達(dá)5%顯著水平，下同硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶的提取和活性測定參照現(xiàn)代植物生理學(xué)實驗指南7，蛋白水解酶的提取和活性測定參照食品化學(xué)試驗指導(dǎo)8。以1 h內(nèi)反應(yīng)生成10-3 mg NO2-所需要的酶量作為硝酸還原酶的1個酶活性單位，以1 h內(nèi)反應(yīng)生成10-3 mmol -谷氨?；u肟酸所需要的酶量作為氨酰胺合成酶的1個酶活性單位，以1 h內(nèi)反應(yīng)生成10-2 mg酪氨酸所需要的酶量作為蛋白水解酶的1個酶活性單位，酶活性的大小用1 g鮮樣中酶活性單位的數(shù)值來表示。全氮用濃H2SO4混合催化劑消化，凱氏定氮法測定，非蛋白氮用三氯乙酸沉淀，凱氏定氮

11、法測定；蛋白氮為全氮減去非蛋白氮的差值。2 結(jié)果與分析2.1 氮代謝關(guān)鍵酶活性 硝酸還原酶和蛋白水解酶活性從圖1A可以看出，各處理水稻旗葉硝酸還原酶活性在孕穗期、齊穗期和乳熟期差異較大。在孕穗期，氮中量施肥法處理水稻旗葉酶活性分別比氮高量施肥法、氮低量施肥法處理提高了4.70%、24.28%；乳熟期分別提高了12.40%、9.2%；齊穗期氮中量施肥法處理酶活性低于氮高量施肥法，但兩處理之間的差異不顯著，與氮低量施肥法處理之間的差異達(dá)顯著水平。從圖1B可以看出，各處理水稻旗葉蛋白水解酶活性在分蘗期和乳熟期差異最大。在分蘗期，氮中量施肥法酶活性分別比氮高量施肥法、氮低量施肥法處理提高了22.42%

12、、8.02%，乳熟期分別提高了5.44%，14.41%。 谷氨酰胺合成酶活性從圖2可以看出，各處理水稻旗葉和籽粒谷氨酰胺合成酶活性在齊穗期和乳熟期差異較大。在齊穗期，氮中量施肥法處理水稻旗葉酶活性分別比氮高量施肥法、氮低量施肥法處理提高了10.79%、52.11%；齊穗期和乳熟期氮中量施肥法處理水稻旗葉酶活性與氮高量施肥法處理之間差異不顯著，與氮低量施肥法處理之間的差異達(dá)顯著水平。在齊穗期，氮中量施肥法處理水稻籽粒酶活性分別比氮高量施肥法、氮低量施肥法處理提高了5.50%、14.60%；乳熟期酶活性分別提高了4.73%、16.26%。2.2 植株和籽粒全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)AB圖2 不同施氮量對飼料稻旗

13、葉（A）和籽粒（B）谷氨酰胺合成酶活性的影響Fig. 2 Effects of different nitrogen fertilization rate on activities of glutamine synthase in flag leaves(A) and in grains(B) of forage rice從圖3A可知，與氮低量施肥法相比，氮中量施肥法和氮高量施肥法顯著提高了分蘗期旗葉全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)，氮中量施肥法處理旗葉全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)比氮低量施肥法提高了17.44%，氮高量施肥法處理比氮低量施肥法處理提高了22.93%。在黃熟期，氮低量施肥法處理旗葉全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于其他施肥法

14、處理。從分蘗期到黃熟期，不同施肥法各處理旗葉全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的相對減少量大小依次為氮中量施肥法（23.03 g·kg-1）、氮高量施肥法（22.24 g·kg-1）、氮低量施肥法（14.01 g·kg-1）。從圖3B可知，由于氮低量施肥法處理后期旗葉向籽粒轉(zhuǎn)移氮的能力不強，從乳熟期到黃熟期，低氮量施肥法處理籽粒全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加量較氮中量施肥法、氮高量施肥法處理低。在黃熟期，氮中量施肥法、氮高量施肥法處理籽粒全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于氮低量施肥法處理，氮中量施肥法處理籽粒全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)比氮低量施肥法提高了8.74%，氮高量施肥法比氮低量施肥法提高了4.19%。2.3 糙米全氮

15、、蛋白氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)和蛋白質(zhì)產(chǎn)量AB圖3 不同施氮量對飼料稻旗葉（A）和籽粒（B）全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)的影響Fig.3 Effects of different nitrogen fertilization rate on concentrations of total nitrogen in flag leaves (A) and in rice grains (B) of forage rice表1 不同施氮量對飼料稻糙米全氮、蛋白氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)和蛋白質(zhì)產(chǎn)量的影響Table 1 Effects of different nitrogen fertilization rate on concentratio

16、ns of total nitrogen, protein nitrogen, and protein yield in brown rice of forage rice處理全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)/(g·kg-1)蛋白氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)/(g·kg-1)蛋白質(zhì)產(chǎn)量/(kg·hm-2)MN22.70±1.21 a21.90±1.08 a885.6±61.3 aHN22.40±0.96 a21.60±1.24 a786.9±40.5 bLN19.45±1.34 b18.57±0.79 b748.4

17、7;67.2 b氮中量施肥法和氮高量施肥法的處理，糙米全氮和蛋白氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)顯著高于氮低量施肥法處理（表1）。氮中量施肥法和氮高量施肥法處理的糙米全氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別比氮低量施肥法處理提高了3.25 g·kg-1和2.95 g·kg-1，相當(dāng)于分別提高了糙米粗蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)19.34 g·kg-1和17.55 g·kg-1。氮中量施肥法和氮高量施肥法處理糙米蛋白氮質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別比氮低量施肥法處理提高3.33 g·kg-1和3.03 g·kg-1，相當(dāng)于分別提高了糙米蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)20.81 g·kg-1和18.94 g·kg

18、-1。將糙米產(chǎn)量乘以糙米的蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)即得糙米蛋白質(zhì)產(chǎn)量。氮中量施肥法處理糙米蛋白質(zhì)產(chǎn)量分別比氮高量施肥法、氮低量施肥法處理提高了12.54%和18.32%。3 討論與結(jié)論盡管三壯三高施肥法能滿足飼料稻栽培的需要，但施氮量較高，達(dá)225 kg·hm-2，且分蘗肥60%、穗肥20%和粒肥20%欠合理的施肥方法已不適用節(jié)能減排農(nóng)業(yè)生產(chǎn)的需要。研究表明，按基肥分蘗肥穗肥粒肥=3.642.732.730.91的比例施用氮肥是最適合水稻高產(chǎn)高蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)的氮肥施用方法9，在本試驗中采用這種施氮模式，施氮量減少到190 kg·hm-2仍能滿足飼料稻生產(chǎn)的要求，這可能與增加基蘗肥和穗肥

19、施氮比率、減少粒肥施氮比率促進(jìn)了水稻氮素的吸收、轉(zhuǎn)運與累積有關(guān)9。硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶分別是催化硝態(tài)氮和氨態(tài)氮同化反應(yīng)的關(guān)鍵酶10，硝酸還原酶和谷氨酰胺合成酶活性提高有利于植物氨同化和氮素的轉(zhuǎn)化11，12。本研究結(jié)果表明，合適的氮肥用量和合理的施肥方法（氮中量施肥法）能提高飼料稻葉片中硝酸還原酶以及葉片和籽粒中谷氨酰胺合成酶活性，因此，氮中量施肥法處理水稻氮素吸收和同化效率較高，從而為籽粒蛋白質(zhì)的合成儲備了充足的氮源，最終提高了籽粒蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)。同時，氮肥的施用量對水稻葉片和籽粒谷氨酰胺合成酶活性影響較硝酸還原酶大，氮肥施用量過高和過低都會抑制谷氨酰胺合成酶活性。植物在成熟期轉(zhuǎn)向生殖期

20、最大的特征就是蛋白質(zhì)損失，這主要是由于貯藏的氮從葉片和其他組織再轉(zhuǎn)移，運送到繁殖器官如種子、果實中。早期的研究表明，葉片衰老期間，可動員和運出氮。在水稻生育前期，氮素主要積累在旗葉和莖鞘中，而在水稻生育后期，營養(yǎng)器官氮素的減少量可在一定程度上反映水稻葉、莖鞘中氮向籽粒轉(zhuǎn)運的能力。植物吸收、累積、運輸和再利用氮的能力是有差異的，氮素高效率品種其吸收、累積、運輸和再利用氮素的能力強。高蛋白品種花后期營養(yǎng)器官衰老過程中氮的再分配優(yōu)于低蛋白品種，這是形成籽粒高蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)的主要原因之一13。籽粒蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)高的水稻品種具有抽穗前在葉片和莖鞘中積累的蛋白質(zhì)高，抽穗后向穗部轉(zhuǎn)運速度快、數(shù)量大的特點。抽穗

21、前蛋白質(zhì)在葉片和莖鞘中的積累對于水稻籽粒蛋白質(zhì)的形成具有重要意義，因為籽粒形成時合成的蛋白質(zhì)一半以上來自抽穗前積累在葉片和莖鞘中的蛋白質(zhì)14。水稻上三葉葉片蛋白質(zhì)的降解與籽粒發(fā)育過程中蛋白質(zhì)的積累有關(guān)15。本研究結(jié)果表明，氮中量施肥法處理水稻在生殖生長期營養(yǎng)體中氮素的累積能力和在籽粒灌漿期營養(yǎng)體中氮素的再利用能力強于其他施肥法處理，說明氮中量施肥法在水稻營養(yǎng)生長期間能為籽粒蛋白質(zhì)的合成和積累提供充足的氮源，且累積的氮素在籽粒灌漿期的再利用能力強，從而提高籽粒和糙米中的蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)。有意思的是在本試驗結(jié)果中，氮中量施肥法糙米蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的提高量高于糙米粗蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)，說明氮中量施肥法促進(jìn)氨基

22、酸合成蛋白質(zhì)的能力也強于其他施肥法處理，其原因有待進(jìn)一步研究。小麥籽粒蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)與籽粒產(chǎn)量常呈負(fù)相關(guān)16，提高籽粒產(chǎn)量和蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)似乎是相互矛盾的，但又有研究證實，籽粒蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)的增加并不一定伴隨產(chǎn)量的下降，籽粒淀粉和蛋白質(zhì)積累可能是相互獨立的性狀，分別受不同的基因調(diào)控17。在合適的氮肥用量和合理的施肥方法（氮中量施肥法）作用下（表1），水稻產(chǎn)量和糙米蛋白質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)同時得到提高也支持了以上觀點，這說明要達(dá)到水稻高產(chǎn)高蛋白，除了加快選育高產(chǎn)高蛋白品種外，關(guān)鍵在于養(yǎng)分的合理搭配施用以及科學(xué)的施肥方法。參考文獻(xiàn)： 1 青先國. 高蛋白飼料稻研究與開發(fā)J. 科技導(dǎo)報, 2000, (3):

23、 41-43.Qing Xianguo. Research and development of the forage rice with high-protein contentJ. Science and Technology Review, 2000, (3): 41-43.2 沈維軍, 張石蕊, 范志勇, 等. 飼糧中糙米替代玉米的比例對飼料制粒性能的影響J. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報: 自然科學(xué)版, 2006, 32(2): 161-163. Shen Weijun, Zhang Shirui, Fan Zhiyong, et al. Effect of Replacing Corn wit

24、h Brown Rice Corn on the Performance of Pelletting in FeedJ. Journal of Hunan Agricultural University: Natural Sciences, 2006, 32(2): 161-163.3 楊勁峰, 韓曉日, 戰(zhàn)秀梅, 等. 不同施肥處理對棕壤N2O排放量的影響J. 生態(tài)環(huán)境，2007, 16(2): 560-563.Yang Jinfeng, Han Xiaori, Zhan Xiumei, et al. Effects of different fertilization on N2O emi

25、ssion in brown fieldJ. Ecology and Environment, 2007, 16(2): 560-563.4 王榮萍, 藍(lán)佩玲, 李淑儀, 等. 氮肥品種及施肥方式對小白菜產(chǎn)量與品質(zhì)的影響J. 生態(tài)環(huán)境, 2007, 16(3): 1040-1043.Wang Rongping, Lan Peiling, Li Shuyi, et al. Effects of different nitrogen fertilizers and fertilization patterns on yield and quality of Brassica chinensisJ.

26、 Ecology and Environment, 2007, 16(3): 1040-1043.5 朱紅梅, 劉強, 榮湘民, 等. 不同栽培方法對水稻產(chǎn)量及蛋白質(zhì)含量的影響J. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報: 自然科學(xué)版, 2004, 30(1): 4-8.Zhu Hongmei, Liu Qiang, Rong Xiangmin, et al. Effect of different cultivation method on yield and protein content of riceJ. Journal of Hunan Agricultural University: Natural S

27、ciences, 2004, 30(1): 4-8.6 唐啟源, 向遠(yuǎn)鴻, 劉過華, 等. 高蛋白飼料稻品種的篩選研究J. 湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報: 自然科學(xué)版, 2002, 28(4): 279-282.Tang Qiyuan, Xiang Yuanhong, LIU Guohua, et al. Screening study for high protein forage rice varietiesJ. Journal of Hunan Agricultural University: Natural Sciences, 2002, 28(4): 279-282.7 中國科學(xué)院上海植物生理研

28、究所. 現(xiàn)代植物生理學(xué)實驗指南M. 北京: 科學(xué)出版社, 1999: 152-158.Shanghai Institute of Plant Physiology, Chinese Academy of Sciences. Experimental Guidebook of modern plant physiology. Beijing: Science Press, 1999: 152-158.8 韓雅珊. 食品化學(xué)試驗指導(dǎo)M. 北京: 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 1995: 79-81.Han Yashan. Guidebook of food chemistry experimentM. B

29、eijing: China Agricultural University Press, 1995: 79-81.9 劉強, 羅澤民, 榮湘民, 等. 不同時期不同施氮量對糙米蛋白質(zhì)積累影響的初探J. 土壤學(xué)報, 2000,37(4): 529-535.Liu Qiang, Luo Zeming, Rong Xiangmin, et al. Preliminary studies on the effects of nitrogen application at different stages with different amounts on accumulation of protein

30、 in brown riceJ. Acta pedologica sinica, 2000, 37(4): 529-535. 10 于方明, 劉可慧, 榮湘民, 等. 生長調(diào)節(jié)劑對春玉米氮素代謝關(guān)鍵酶活性的影響J. 生態(tài)環(huán)境, 2007, 16(4): 1253-1256.Yu Fangming, Liu Kehui, Rong Xiangmin, et al. Effects of new plant regulators on key enzymes of nitrogen metabolism in spring maize J. Ecology and Environment, 200

31、7, 16(4): 1253-1256.11 劉強, 彭建偉, 榮湘民, 等. 不同濃度羧甲基殼聚糖對水稻氮代謝影響研究J. 植物營養(yǎng)與肥料學(xué)報, 2007, 13(4): 597-601.Liu Qiang, Peng Jianwei, Rong Xiangmin, et al. Effect of carboxymethyl chitosan on nitrogen metabolism of riceJ. Plant nutrition and fertilizer science, 2007, 13(4): 597-601. 12 BECKET T W, CARRAYOL E, HIR

32、EL B. Glutamine synthetase and glutamate dehydrogenase isoforms in maize leaves: localization, relative proportion and their role in ammonium assimilation or nitrogen transport J. Planta, 2000, 211: 800-806.13 田紀(jì)春, 張忠義, 梁作勤. 高蛋白和低蛋白小麥品種的氮素吸收和運轉(zhuǎn)分配差異的研究J. 作物學(xué)報, 1994, 20(1): 76-81.Tian Jichun, Zhang Zh

33、ongyi, Liang Zhouqin. Studies on the different of nitrogen absorption, transportation and distribution in high and low protein wheat cultivarsJ. Acta agronomica sinica, 1994, 20(1): 76-81.14 沈成國. 植物衰老生理與分子生物學(xué)M. 北京: 中國農(nóng)業(yè)出版社, 2001: 73-76.Shen Chengguo. The molecular mechanism of plant senescenceM. Bei

34、jing: Agriculture Press of China, 2001: 73-76.15 劉保國, 任昌福. 水稻籽粒蛋白質(zhì)積累特性的研究J. 西南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報, 1992, 14(1): 66-69.Liu Baoguo, Ren Changfu. Study on the characteristics of protein accumulation in rice grainsJ. Journal of Southwest Agricultural University, 1992, 14(1): 66-69.16 王月福, 于振文, 李尚霞, 等. 氮素營養(yǎng)水平對冬小麥氮代謝關(guān)

35、鍵酶活性變化和籽粒蛋白質(zhì)含量的影響J. 作物學(xué)報, 2002, 28(6): 743-748. Wang Yuefu, Yu Zhenwen, LI Shangxia, et al. Effect of nitrogen nutrition on the change of key enzyme activity during the nitrogen metabolism and kernel protein content in winter wheatJ. Acta Agronomica Sinca, 2002, 28(6): 743-748.17 蘇祖芳, 許乃霞, 孫成明, 等. 水

36、稻抽穗后株型指標(biāo)與產(chǎn)量形成關(guān)系的研究J. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué), 2003, 26(1): 115-120.Su Zhufang, Xu naixia, Sun Chengming, et al. Study on the relationship between rice plant type indices after heading stage and yield formationJ. Scientia Agricultura Sinca, 2003, 26(1): 115-120. Effects and mechanisms of different nitrogen fertilization rate on the protein concentrations of forage rice grains Xie Guixian, Liu Qiang, Rong Xiangmin, Song Haixing, Peng Jianwei, Zhu HongmeiCollege of Resource and Environment, Hunan Agricultural